甘肃棘豆生物碱抑制小鼠肝癌H22的生长及机理试验

甘肃棘豆(Oxytropis Kansuensis Bunge)是豆科棘豆属植物,其研究已历经百年,在积极探讨其防除和综合利用的同时,大量研究结果表明,其生物碱部位具有明显的抗肿瘤活性[1-3].本试验以荷H22肝癌肿瘤小鼠为模型,进一步研究证实其抗肿瘤活性;并在细胞学水平观察甘肃棘豆生物碱阻止H22细胞恶性表型及直接杀伤肿瘤细胞的作用,在分子生物学水平观察与恶性肿瘤发生发展过程密切相关的增殖细胞核抗原(PCNA)、突变型p53蛋白表达及生物碱的干预作用,为研究甘肃棘豆生物碱抑制肿瘤活性机理提供科学依据.     

葛根提取物抗肿瘤作用的试验研究

采用动物移植性瘤株EAC腹水瘤、S180肉瘤、H22肝癌等，进行了根提取物体外抗肿瘤作用的观察和对S180肉瘤、Lewis肺癌、H22肝癌体内抗肿瘤作用观察；同时对瘤细胞DNA合成及脾淋巴细胞转化的影响进行了研究。结果表明葛根撮以物对多种移植性瘤株有显著的细胞毒作用或抑制作用；对瘤细胞的体外作用强度与药物浓度有正相关、与作用时间关系不大；体内抑瘤作用与剂量无显著的正相关。本次试验还初步表明葛根提取物对瘤细胞DNA有抑制作用；小剂量能增强ConA促进脾淋巴细胞增殖作用，大剂量则抑制。     

茎直黄芪化学成分TLC定性与定量分析

为分析茎直黄芪化学成分和吲哚里西啶类生物碱,5kg茎直黄芪草粉经热回流提取,石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取,对各萃取部位化学成分,及氯仿部位和乙酸乙酯部位吲哚里西啶类生物碱进行薄层色谱法(TLC)定性分析,同时用薄层色谱扫描软件,对各成分进行扫描计算相对含量。结果显示,3个萃取部位分别检出13、15、15个显色斑点,其中SYM-12、SYM-10、SYM-6、LF-7、YSYZ-8、YSYZ-6等6种物质相对含量均在15%以上。吲哚里西啶类生物碱专项分析表明,茎直黄芪氯仿部位、乙酸乙酯部位至少含8种和6种吲哚里西啶类生物碱,其中LFSWJ-5、LFSWJ-6、LFSWJ-7、YSYZSWJ-3、YSYZSWJ-4和YSYZSWJ-5等相对含量均在15%以上,LFSWJ-3和YSYZSWJ-4Rf与苦马豆素标准品一致,相对含量分别为10.02%和15.67%。     

猪软骨多糖与H22鼠肝癌细胞共培养物对小鼠体液免疫保护作用的研究

本试验以猪软骨多糖与H22鼠肝癌细胞的共同培养物(PS&H22)为研究对象,探讨其对小鼠体液免疫的影响.结果表明:PS&H22组小鼠的生命延长率和存活率极显著高于模型组(P<0.01);免疫荧光检测结果显示PS&H22免疫小鼠血清可与H22细胞发生特异性结合,说明免疫小鼠体内存在抗H22细胞特异性抗体;ELISA检测表明PS&H22免疫小鼠抗体效价大于12800,进一步证明免疫小鼠血清中抗体含量高,且其抗肿瘤体液免疫得到增强.     

中药墓头回提限物抗肿瘤活性的实验研究

用中药墓顺中所含的皂甙，多糖，萜类等成份的４种提取物样品ＭＳ，ＪＰ，ＭＰ，ＭＴ，对和移植性肿瘤肝癌和艾氏癌鼠进行了体内抗肿瘤实验。结果表明，４种样品中Ｈｅｐ和ＥＣ均具一定的抑制作用，其中ＭＳ对Ｈｅｐ的作用较强，ＭＴ对ＥＣ的作用较强；小鼠胸腺和脾脏重量略有增加，表明具有提高小鼠非特异性免疫功能的作用。     

冰川棘豆化学成分系统预试及生物碱成分薄层色谱分析

本试验采用植物化学成分系统预试法、生物碱系统提取法和薄层色谱技术对冰川棘豆地上部分全草的化学成分,特别是生物碱成分进行了薄层色谱分析。结果表明冰川棘豆含有生物碱、氨基酸和蛋白质、有机酸、酚类和鞣质、多糖及甙类、皂甙、甾体、香豆素、萜类以及蒽醌类。不含挥发油、黄酮体、氰甙和脂肪族硝基化合物;5 000 g冰川棘豆干草粉经醇类溶剂提取得总浸膏312.0 g,再经酸化、碱化处理,收集碱水液依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分段萃取,分别得氯仿部分0.5 g,乙酸乙酯部分5.4 g,正丁醇部分52.0 g,初步表明冰川棘豆生物碱主要集中在正丁醇提取部分,以强极性生物碱为主;各部分生物碱提取物经薄层层析分析,结果表明氯仿部分至少有9种生物碱,乙酸乙酯部分至少有11种,正丁醇部分至少有4种。经与苦马豆素标准样品对照,证明三部分提取物均含有苦马豆素。     

中药墓头回提取物抗肿瘤活性的实验研究

用中药墓头回（ＭＴＨ）中所含的皂甙、多糖、萜类等成份的４种提取物样品ＭＳ、ＪＰ、ＭＰ、ＭＴ，对移植性肿瘤肝癌（Ｈｅｐ）和艾氏癌（ＥＣ）鼠进行了体内抗肿瘤实验。结果表明，４种样品对Ｈｅｐ和ＥＣ均具一定的抑制作用，其中ＭＳ对Ｈｅｐ的作用较强，ＭＴ对ＥＣ的作用较强；小鼠胸腺和脾脏重量略有增加，表明具有提高小鼠非特异性免疫功能的作用     

口蹄疫疫苗非抗原蛋白对146S抗原免疫效果的影响

为探究非抗原蛋白对口蹄疫病毒A型(FMDV-A) 146S抗原免疫效果的影响,本研究以小鼠和猪为试验动物,分别制备5组小鼠注射用样品:A组(3μg 146S抗原)、B组(3μg 146S抗原+25μg非抗原蛋白)、C组(3μg 146S抗原+50μg非抗原蛋白)、D组(3μg 146S抗原+100μg非抗原蛋白)及E组(空白对照,PBS);同时制备4组猪注射用样品:A组(18μg 146S抗原)、B组(18μg 146S抗原+400μg非抗原蛋白)、C(18μg 146S抗原+4 000μg非抗原蛋白)及D组(空白对照,PBS)。免疫接种试验动物后,通过淋巴细胞增殖试验及实时荧光定量PCR评价比较不同疫苗样品组小鼠产生的细胞免疫应答水平,同时通过液相阻断ELISA方法检测、评价各试验组动物(小鼠和猪)产生的体液免疫应答水平。小鼠试验结果显示,在免疫后3个检测时间点内,4个试验组中C组的平均抗体水平最高,平均抗体效价分别为4.13、5.83和5.50,而D组的抗体水平最低,平均抗体效价分别为3.46、5.16和4.46;C组细胞增殖能力及Th-1型细胞因子IL-6、IFN-β和TNF-αmRNA表达量均高于其他组。猪试验结果显示,A组和B组间平均抗体水平差异不显著(P>0.05),但A组和B组的平均抗体效价均极显著高于C组(P<0.01)。综合上述结果表明,一定范围内少量非抗原蛋白对FMDV-A 146S抗原的免疫效果没有影响,而高浓度的非抗原蛋白则抑制FMDV-A 146S抗原的免疫效果。     

口蹄疫疫苗非抗原蛋白对146S抗原免疫效果的影响

为探究非抗原蛋白对口蹄疫病毒A型(FMDV-A) 146S抗原免疫效果的影响,本研究以小鼠和猪为试验动物,分别制备5组小鼠注射用样品:A组(3μg 146S抗原)、B组(3μg 146S抗原+25μg非抗原蛋白)、C组(3μg 146S抗原+50μg非抗原蛋白)、D组(3μg 146S抗原+100μg非抗原蛋白)及E组(空白对照,PBS);同时制备4组猪注射用样品:A组(18μg 146S抗原)、B组(18μg 146S抗原+400μg非抗原蛋白)、C(18μg 146S抗原+4 000μg非抗原蛋白)及D组(空白对照,PBS)。免疫接种试验动物后,通过淋巴细胞增殖试验及实时荧光定量PCR评价比较不同疫苗样品组小鼠产生的细胞免疫应答水平,同时通过液相阻断ELISA方法检测、评价各试验组动物(小鼠和猪)产生的体液免疫应答水平。小鼠试验结果显示,在免疫后3个检测时间点内,4个试验组中C组的平均抗体水平最高,平均抗体效价分别为4.13、5.83和5.50,而D组的抗体水平最低,平均抗体效价分别为3.46、5.16和4.46;C组细胞增殖能力及Th-1型细胞因子IL-6、IFN-β和TNF-αmRNA表达量均高于其他组。猪试验结果显示,A组和B组间平均抗体水平差异不显著(P0.05),但A组和B组的平均抗体效价均极显著高于C组(P0.01)。综合上述结果表明,一定范围内少量非抗原蛋白对FMDV-A 146S抗原的免疫效果没有影响,而高浓度的非抗原蛋白则抑制FMDV-A 146S抗原的免疫效果。     

丹皮乙醇提取物的抗糖尿病活性研究

对牡丹皮乙醇提取物及各萃取相进行了糖尿病小鼠实验,检测其对血糖及SOD、MDA的影响。结果表明,水相的降糖效果最好,乙酸乙酯相的抗氧化能力最强。综合降糖与抗氧化能力,乙酸乙酯相的抗糖尿病活性最强。     

牛心朴子生物碱的镇痛抗炎作用试验

用热板法研究不同浓度的牛心朴子总碱对小鼠的镇痛作用,结果表明,50mg／kg体重的总碱对热板法所致小鼠的疼痛反应具有明显的抑制作用;以小鼠为实验动物,选用不同浓度的牛心朴子生物碱注射剂对其抗炎作用进行了研究。结果表明,牛心朴子生物碱的最小浓度在1．0mg／mL时,对二甲苯致小鼠的耳壳肿胀有明显的抑制作用,作用与浓度呈正相关。     

苦豆子生物碱抑菌抗炎作用研究

将苦豆子生物碱配制成不同的浓度,通过试管法测定其最小抑菌浓度;以小鼠为实验动物,选用0.3 mL不同浓度(0.5,1.0,1.5 mg/mL)的苦豆子生物碱注射剂研究苦豆子生物碱的抗炎作用。结果表明,苦豆子生物碱对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌、无乳链球菌、多杀性巴氏杆菌均有一定的抑制作用。1.0 mg/mL浓度对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀、小鼠棉球肉芽肿及小鼠CMC囊中的白细胞游出均有极显著的抑制作用(P<0.01),对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高有显著抑制作用(P<0.05);1.5 mg/mL浓度对上述4个实验的小鼠均有极显著抑制作用(P<0.01)。苦豆子生物碱具有抑菌作用,其注射剂具有抗炎作用,作用与浓度呈正相关性。     

昆仑山小花棘豆生物碱提取及其对小鼠毒性试验

为进一步研究小花棘豆有毒成分提取方法及毒性作用,将昆仑山小花棘豆全草粉用不同浓度乙醇提取,以提取温度、超声时间和料液比等因素进行正交试验,考察对小花棘豆活性成分提取率的影响,并通过毒性试验对小花棘豆生物碱毒性进行评价。结果表明,提取温度、超声时间、料液比对小花棘豆生物碱提取率影响不显著。小花棘豆生物碱是其主要毒性成分,按1∶10浓度注射小花棘豆生物碱约3 mL可致小鼠死亡。     

小花棘豆生物碱对小白鼠血细胞的影响

采用全自动兽用血细胞分析仪检测小白鼠胃内灌服苦马豆素、黄花碱及这2种生物碱混合物后的血常规指标,以探讨小花棘豆生物碱对小白鼠血液学的影响。结果表明,苦马豆素组在低剂量时能提高血细胞的数量,在高剂量时能降低血细胞的数量,且差异明显。黄花碱组在低剂量时几乎不影响血细胞的数量,而在高剂量时也能够显著降低红细胞、白细胞、粒细胞、淋巴细胞的数量,但对血红蛋白含量的影响不显著。2种生物碱混合组在低剂量时随着试验时间的延长,血细胞数目逐渐增多;相反,高剂量时却又逐渐降低血细胞的数目。     

山茱萸不同提取物降血糖作用研究

以正常小鼠和四氧嘧啶糖尿病小鼠为动物模型,分别对山茱萸乙醚提取物、乙酸乙酯提取物和乙醇提取物的降血糖作用进行研究。结果表明,山茱萸3种提取物组与模型组比较,均可显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖水平(P0.01)。山茱萸3种提取物组间比较,乙酸乙酯提取物组的降血糖作用最明显(P0.05)。正常小鼠对照实验表明,山茱萸3种提取物对正常小鼠的血糖无明显影响(P0.05)。本试验筛选出山茱萸乙酸乙酯提取物为山茱萸的降血糖活性成分。     

炎消热清的镇痛作用及其机理研究

为了研究炎消热清(AEE)的镇痛作用及其可能的机制,采用热板法和扭体法考察AEE的镇痛效果,并观察热刺激下二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC)、氟哌啶醇(Hal)、L-色氨酸(L-Trp)、赛庚啶(CYP)等药物对AEE镇痛作用的影响,用紫外分光光度法测定了热刺激所致疼痛小鼠全脑中的前列腺素E2(PGE2)含量。结果表明,AEE可明显减少醋酸扭体试验中小鼠的扭体次数,降低热刺激小鼠疼痛反应;可显著降低热刺激所致疼痛小鼠全脑中PGE2的含量和二乙基二硫代氨基甲酸钠对痛觉的敏感度,与氟哌啶醇之间存在明显的协同效应,与L-色氨酸和赛庚啶之间拮抗效应显著。说明AEE具有明显的镇痛作用,镇痛机制可能与其降低小鼠全脑中的PGE2含量以及增加去甲肾上腺素(NE)的含量、阻断多巴胺(DA)受体有关。     

“乳炎宁”水提物的抗炎作用研究

【目的】探究“乳炎宁”水提物的抗炎作用,为其临床运用及进一步研究提供理论依据。【方法】采用二甲苯致耳廓肿胀试验、醋酸致腹腔毛细血管通透性试验、角叉菜胶致足肿胀试验、棉球致肉芽肿胀试验及小鼠血清细胞因子含量检测进行“乳炎宁”水提物抗炎作用研究。取60只健康昆明小鼠,雌雄各半,随机分为5组,即阴性对照组(生理盐水组)、阳性对照组(阿司匹林组)、“乳炎宁”水提物低(4 mg/g)、中(8 mg/g)、高(16 mg/g)剂量组,12只/组。各组小鼠每天固定时间灌胃,每天1次,连续10 d。后续按照不同试验具体操作,试验结束后分别测量各组小鼠耳廓重量、腹腔洗液D_{590 nm}值、足重量、棉球肉芽肿重量及血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)含量。【结果】二甲苯致耳廓肿胀试验结果表明,与阴性对照组相比,药物处理组均可极显著降低二甲苯导致的耳廓肿胀(P<0.01);与阳性对照组相比,“乳炎宁”水提物高剂量组耳廓重量差异不显著(P>0.05)。醋酸致腹腔毛细血管通透性试验结果表明,与阴性对照组相比,药物处理组对醋酸致腹腔毛细血管通透性升高均有...     

广藿香对冰醋酸所致小鼠扭体疼痛模型的镇痛作用研究

旨在研究广藿香对冰醋酸所致小鼠扭体反应的抑制作用,确定广藿香的镇痛作用。将24只小鼠随机分为广藿香低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照组,采用灌胃给药方式,分别给予0.25、0.5、1.0g/（kg·BW）广藿香及生理盐水;给药后,各组小鼠灌胃20%冰醋酸溶液,观察并记录各组小鼠的体态变化以及扭体次数,并计算镇痛率。结果表明,给予20%冰醋酸溶液后,高剂量组小鼠的腹痛症状较轻,低剂量组小鼠的腹痛症状较为严重,抽搐明显;高剂量组小鼠的扭体次数极显著低于对照组（P〈0.01）,中、低剂量组小鼠的扭体次数显著低于对照组（P〈0.05）;高剂量组的镇痛百分率最高（36.73%）,低剂量组的镇痛百分率最低（14.45%）。广藿香对冰醋酸所致的小鼠扭体反应具有抑制作用,表现出良好的镇痛作用,且镇痛作用呈现一定的量效关系。     

新疆小花棘豆对大鼠亚急性毒性及解毒剂解毒效果观察

In order to understand the effect of Oxytropis glabra on the structure of liver tissue and observe the effect of antidote on the detoxification in mice,30 mice were randomly divided into 5 groups,the control group was fed with basal diet, group 1 was fed with basal diet supplemented with Oxytropis glabra,group 2 was gavaged alkaloid solution extracted from Oxytropis glabra,group 3 was fed with basal diet supplemented with Oxytropis glabra and injected antidote into intraperitoneal simultaneously,group 4 was gavaged alkaloid solution extracted from Oxytropis glabra and injected antidote into intraperitoneal simultaneously. The mice were fed in single cage,and the trial lasted for 21 days.The results showed that the different degree of hyperemia and hemorrhage were appeared in liver and kidney tissue of groups 1 and 2.Most of the liver cells in hepatic lobule were swelled and vacuoles degenerated.The organ coefficient analysis showed that there were significant differences （P＜0.05） or extremely significant differences （P＜0.01） between the detoxification groups and the poisoned groups.In couclusion,the antidote had a certain protective effect for liver tissue damage caused by Oxytropis glabra and its alkaloids.     

桑枝皮多糖对小鼠的免疫调节试验

多糖对生物体具有免疫调节作用,从桑枝皮中可以提取获得多糖物质。分别以300、600、900 mg/kg剂量的桑枝皮多糖给正常小鼠和免疫抑制小鼠灌胃,对照组给予等量的蒸馏水,每天给药1次,连续给药7 d后检测观察小鼠体内部分生理生化指标的变化,探究桑枝皮多糖对小鼠的免疫调节作用机制。结果显示:桑枝皮多糖可增强正常小鼠因2,4-二硝基氟苯(DNFB)引起的迟发性变态反应以及免疫器官的发育和脾脏淋巴细胞增殖能力,试验组小鼠的血清溶血素抗体积数、碳廓清能力、NK细胞活性、白介素-2(IL-2)的浓度均显著高于对照组(P<0.05);桑枝皮多糖对免疫抑制试验小鼠的免疫功能也有一定的提升作用,除巨噬细胞吞食能力外,其他检测指标均有显著改善。试验结果还表明桑枝皮多糖改善小鼠免疫功能的生理生化指标,具有一定的量效关系。