1,25-(OH)_2-D_3对抗菌肽表达调控的影响

通过外源途径调控机体内源性抗菌肽表达,以增强动物的防御能力和提高动物的生产性能是实现"健康养殖"的一条新型途径。生物体受病原微生物入侵后可由TLR介导内源性抗菌肽表达。结果表明:由PAMP诱发抗菌肽合成机制的模式有TLR-NF-κB和TLR-VDR 2大信号传导通路。TLR-VDR通路的基本过程是激活相应TLR→诱导Cyp27B1表达→产生1,25-(OH)2-D3→激活VDR→识别抗菌肽基因VDRE序列而调节抗菌肽表达。1,25-(OH)2-D3作为TLR-VDR通路的重要调节物质,可诱导抗菌肽在许多细胞中表达并与其他物质对抗菌肽表达起协同作用。     

1,25-( OH)2D3及LPS对2型糖尿病肾病尿毒症患者单核细胞维生素D受体表达的影响

目的 探讨1,25-(OH)2D3及TLR4配体(脂多糖,LPS)对2型糖尿病(T2DM)和糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)尿毒症患者血清干预的单核细胞维生素D受体(VDR)表达的影响,进一步探索1,25-( OH)2D3在T2DM和DN炎症性免疫反应中的作用.方法 分离研究对象(健康对照组、T2DM组和DN尿毒症组)外周血血清,孵育THP-1单核细胞,然后于含或不含10-7 mol/L的1,25-(OH)2D3培养液中培养48 h后,再用终浓度为1μg/ml的LPS干预24h,收集单核细胞和培养上清.采用RT-PCR检测VDR mRNA表达,Western blot、免疫荧光检测THP-1单核细胞内VDR蛋白表达.ELISA法检测细胞培养上清IL-6和IL-10浓度.结果 与正常对照组比较,在LPS的刺激下T2DM组和DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR mRNA水平下调[对照组(0.99±0.25);T2DM组(0.65±0.24);DN尿毒症组(0.62±0.27),P＜0.05];DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR蛋白表达比正常对照组和T2DM组显著下调[对照组(0.48 ±0.05);T2DM组(0.50±0.06);DN尿毒症组(0.20±0.01),P＜0.01],且LPS增强以上患者血清孵育的THP-1单核细胞炎症细胞因子IL-6的分泌[对照组(15.13±1.61);T2DM组(24.06 ±2.92);DN尿毒症组(70.77 ±5.48),P＜0.05];而1,25-(OH)2D3可部分阻断上述作用.结论 LPS能下调T2DM和DN尿毒症患者单核细胞VDR mRNA和蛋白的表达,引起促炎和抗炎细胞因子失调.1,25-(OH)2D3可部分逆转LPS的作用,对T2DM和DN尿毒症可能具有一定的保护作用.     

1,25(OH)_2D_3对体外诱导培养鸡胚破骨细胞的影响

为了研究1,25(OH)2D3对体外诱导培养鸡胚破骨细胞的作用,从18日龄鸡胚长骨(股骨和胫骨)分离骨髓细胞进行培养,在培养过程中分别添加10-7,10-8和10-9mol/L的1,25(OH)2D3。通过倒置显微镜观察其活体形态,对培养1,3,5,7 d的破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)鉴定,培养7 d后进行骨吸收陷窝和功能分析。结果显示,10-8mol/L组除第1天和其他各组差异不显著以外,第3,5,7天诱导所生成的破骨细胞的数量都显著高于10-7和10-9mol/L这2组(P0.05),极显著高于对照组(P0.01)。经扫描电镜观察,无论是吸收陷窝面积还是陷窝吸收程度,10-8mol/L组均显著高于其2组;对照组无明显陷窝。由此可知,1,25(OH)2D3能诱导鸡胚骨髓细胞形成破骨细胞,且浓度为10-8mol/L时效果最好,所诱导的破骨细胞活性较高。     

1,25(OH)2D3以双向方式影响猪前体脂肪细胞增殖分化的研究

1,25（OH）₂D₃是维生素D的主要活性形式,影响人和动物脂肪形成,为探究其在猪脂肪细胞增殖分化中的作用,试验从3~5日龄仔猪皮下脂肪组织分离培养前体脂肪细胞,并以浓度为0、0.1、1、10、100和1 000 nmol/L的1,25（OH）₂D₃分别处理,在培养的0、1、2、4、6、8和10 d采用MTT比色法检测细胞增殖活性;在诱导分化后0、1、2、4、6、8和10 d,以油红O染色提取法和实时荧光定量PCR检测细胞成脂分化及分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）和脂肪酸合成酶（FAS）表达。结果显示,0.1和1 nmol/L 1,25（OH）₂D₃显著促进猪前体脂肪细胞增殖（P<0.05）,而浓度为10~100 nmol/L时则抑制细胞增殖（P<0.05）;0.1和1 nmol/L 1,25（OH）₂D₃显著抑制猪前体脂肪细胞分化（P<0.05）,降低PPARγ和FAS mRNA表达水平（P<0.05）,但在浓度为10和100 nmol/L时,显著促进猪前体脂肪细胞分化（P<0.05）,上调PPARγ和FAS mRNA表达（P<0.05）;浓度达1 000 nmol/L时,可能对细胞有毒性作用。综合以上结果,低浓度1,25（OH）₂D₃促进猪前体脂肪细胞增殖,而通过下调PPARγ表达抑制分化;高浓度1,25（OH）₂D₃抑制猪前体脂肪细胞增殖,通过上调PPARγ表达促进分化。1,25（OH）₂D₃对猪前体脂肪细胞增殖和分化具有双向作用。     

1α，25-（OH）2D3影响体外培养OB增殖分化的钙离子通道机制

为研究1α,25-（OH）2D3影响体外培养成骨细胞（Osteoblasts,OB）增殖分化是否存在L-型钙离子通道机制。在体外培养SD大鼠0B基础上,添加不同浓度的1α,,25-（OH）2D。（0、10^-9、10、10^-7mol／I。）或和10mol／OB硝苯地平（NIF）作用24、48、72h。采用MTT法测定0B增殖率,PNPP法测定碱性磷酸酶（AI。P）活性。结果显示,1α,25-（OH）2D。卉13量依赖性地抑制oB增殖、促进ALP活性;10^-8mol／LNIF单独作用亦能抑制OB增殖、促进ALP活性;并且在培养早期（24、48h）能消除10mol／L 1α,25-（OH）2D3对OB增殖的抑制效应及对ALP活性的促进效应。结果表明,1α,,25-（0H）2D3能够抑制0B增殖、促进其分化;并且此过程涉及L-型钙离子通道机制。     

25-OH-D3、维生素D3与植酸酶组合对肉仔鸡养分利用的影响

本试验研究了25-OH-D3、维生素D3、植酸酶不同的水平组合对肉仔鸡养分利用的影响。试验分6个处理组,每个组的25-OH-D3、维生素D3和植酸酶的添加水平分别为:第1组(0μg/kg、2760IU/kg和0FTU/kg)、第2组(69μg/kg、0IU/kg和0FTU/kg)、第3组(69μg/kg、2760IU/kg和0FTU/kg)、第4组(0μg/kg、2760IU/kg和750FTU/kg)、第5组(69μg/kg、0IU/kg和750FTU/kg)、第6组(69μg/kg、2760IU/kg和750FTU/kg)。在生长试验的后期进行代谢试验,每组4只鸡(艾维茵肉仔鸡,♂),即4个重复。结果表明:肉仔鸡日粮中添加植酸酶能提高干物质、总能、粗蛋白、钙、总磷的利用率,25-OH-D3和维生素D3的添加效果相似,且超量添加对营养物质的利用并无好处,第4和5组是比较理想的组合。     

1,25(OH)2D3及VDR敲除对山羊附睾头上皮细胞β防御素家族表达的影响

旨在研究1,25(OH)₂D₃是否通过VDR途径调节山羊附睾头上皮细胞β防御素基因表达。本试验选取3只6月龄太行黑山羊,分别采集附睾头组织。采用差速贴壁法分离山羊附睾头上皮细胞,用细胞免疫荧光鉴定上皮细胞纯度。添加100 nmol·L^-1 1,25(OH)₂D₃处理附睾头上皮细胞以及筛选出敲除效率最高的pCas9/gRNA1质粒载体进行细胞转染,同时设置阴性对照组和空白对照组,每组3个重复孔。附睾头上皮细胞经1,25(OH)₂D₃处理以及VDR基因敲除后,分别用qRT-PCR检测VDR和17种β防御素基因的表达,用Western blot检测VDR蛋白和3种β防御素蛋白的表达。结果表明,1,25(OH)₂D₃能极显著提高VDR、gBD124、gBD126和gBD104a的mRNA和蛋白表达(P<0.01),同时极显著提高gBD104、gBD109tr1、gBD109tr2、gBD113...     

饮水添加25-OH-D3对肉仔鸡生产性能的影响

随机设计，饮水添加不同剂量的25-OH—D3研究对肉仔鸡生产性能的影响。结果表明：①饮水添加18μg／kg25--OH—D3，可提高肉鸡采食量，提高肉鸡增重，明显降低料肉比，差异显著（P〈0．05）；②饮水添加18μg/kg25-OH-D3，各项屠宰指标均高于对照组且差异显著（P〈0．05）；③饮水添加18μg／kg 25-OH—D3，可获得最高经济效益。     

1，25-(OH)_2D_3对体外培养围产期奶牛外周血淋巴细胞转化率及γ-干扰素(IFN-γ)的影响

体外培养围产期奶牛外周血淋巴细胞,分别添加0、0.01、0.1、1、10和100nM的1,25(OH)_2D_3,研究1,25-(OH)_2D_3对奶牛外周血淋巴细胞免疫功能的影响。结果表明,1,25-(OH)_2D_3对淋巴细胞转化率没有影响,但可以通过抑制IFN-γ的分泌影响奶牛的细胞免疫功能。添加0.01～100nM的1,25-(OH)_2D_3对淋巴细胞的转化率没有显著影响,但剂量依赖性抑制了ConA和PWM诱导的淋巴细胞IFN-γ的产量。当1,25(OH)_2D_3浓度达到0.1nM、1nM时与对照组相比分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)抑制ConA诱导的淋巴细胞IFN-γ的产量。以PWM激活的细胞在培养48h、72h,1,25-(OH)_2D_3添加量在0.1～100nM范围均极显著抑制IFN-γ的产生(P<0.01)。添加0.01nM 1,25(OH)_2D_3对IFN-γ的抑制作用相对较小(P>0.05),在培养48h后并未表现出显著的抑制作用,但培养72h后也极显著的抑制了IFN-γ的产生(P<0.01)。     

1α，25-（OH）2D3影响体外培养OB增殖分化的钙离子通道机制

为研究1α,25-（OH）2D3影响体外培养成骨细胞（Osteoblasts,OB）增殖分化是否存在L-型钙离子通道机制。在体外培养SD大鼠0B基础上,添加不同浓度的1α,,25-（OH）2D。（0、10^-9、10、10^-7mol／I。）或和10mol／OB硝苯地平（NIF）作用24、48、72h。采用MTT法测定0B增殖率,PNPP法测定碱性磷酸酶（AI。P）活性。结果显示,1α,25-（OH）2D。卉13量依赖性地抑制oB增殖、促进ALP活性;10^-8mol／LNIF单独作用亦能抑制OB增殖、促进ALP活性;并且在培养早期（24、48h）能消除10mol／L 1α,25-（OH）2D3对OB增殖的抑制效应及对ALP活性的促进效应。结果表明,1α,,25-（0H）2D3能够抑制0B增殖、促进其分化;并且此过程涉及L-型钙离子通道机制。     

维生素D3骨外功能研究进展

维生素D3是畜禽所必需的营养素。越来越多的研究表明,维生素D3除具有经典的调节钙磷代谢和促进骨骼生长的作用外,还具有其它更为广泛的骨外生物学功能,如调节免疫、提高繁殖力、改善肉质、抗感染、抗肿瘤、防治疗自身免疫性疾病等。     

维生素D的免疫功能

维生素D是动物所必需的营养素,除对钙和骨代谢具有重要影响外,对免疫系统也有重要作用。1,25(OH)2维生素D3是维生素D的活性形式,1,25(OH)2维生素D3的生物学效应是由维生素D3受体(VDR)介导的。淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞等免疫细胞都有VDR的表达,这表明,维生素D对免疫系统功能有重要调节作用。     

1,25-二羟基维生素D_3及锌、锰复合物提高鸡蛋蛋黄维生素D_3含量研究

本试验旨在研究比较在蛋鸡日粮中添加1,25-二羟基维生素D_3、锌及锰复合物与普通维生素D_3对鸡蛋维生素D_3含量的影响。1,25-二羟基维生素D_3是维生素D_3的最活性形式,可直接驱动对钙、磷的吸收代谢及其他功能。在饲料中同时添加1,25-二羟基维生素D_3和维生素D_3,1,25二羟基维生素D_3直接发挥作用,可减少机体维生素D_3转化成1,25-二羟基维生素D_3的比例,从而向蛋黄转移更多维生素D_3。结果表明,试验组饲料添加1,25-二羟基维生素D_3后可明显提高鸡蛋蛋黄VD_3含量,提高幅度达53%。     

不同剂量25羟基维生素D3对断奶前犊牛血液生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响

为研究不同剂量25羟基维生素D₃[25(OH)VD₃]对断奶前犊牛血液水平、抗氧化能力和免疫功能的影响,选取18 头健康状况良好的新生荷斯坦犊牛,随机分成3 组,每组6 头进行为期56 天的饲养试验。分为对照组[不添加25(OH)VD₃]、低剂量组[25(OH)VD₃添加量6 000 IU/头·天]和高剂量组[25(OH)VD₃添加量12 000 IU/头·天]。结果表明,与对照组相比,随着25(OH)VD₃添加剂量增加,血浆生长激素、胰岛素样生长因子-1、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、总抗氧化能力以及免疫球蛋白G(IgG)含量显著增加(P<0.05),而丙二醛含量随剂量增加而存在降低趋势(P=0.079)。与对照组和低剂量组相比,高剂量组血浆免疫球蛋白A(IgA)含量有增加趋势(P=0.059)。综上所述,断奶前犊牛饲喂高剂量25(OH)VD₃有利于促进体内生长激素和胰岛素样生长因子-1分泌,可提高犊牛抗氧化能力,增强免疫功能。     

25羟基维生素D3和1α羟基维生素D3代替维生素D3对42～63日龄黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标和胫骨发育的影响

本试验旨在研究饲粮中添加25羟基维生素D3(25-OH-D3)和1α羟基维生素D3(1α-OH-D3)代替维生素D3对42～63日龄黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标、胫骨发育和养分消化率的影响。试验选用42日龄黄羽肉公鸡2 400只,随机分成8个处理,每个处理5个重复,每个重复60只鸡。处理1(正常钙磷饲粮对照组)的维生素D3、钙、磷含量分别为2 780 IU/kg、0.8%、0.55%;处理2(低钙磷饲粮对照组)～8的维生素D3、钙、磷含量分别为0 IU/kg、0.7%、0.45%;处理3～5中25-OH-D3的添加水平分别为50、70、90μg/kg,处理6～8中1α-OH-D3的添加水平分别为2.5、5.0、10.0μg/kg。试验期21 d。结果表明:1)与低钙磷饲粮对照组相比,除添加50μg/kg 25-OH-D3未使黄羽肉鸡平均日采食量(ADFI)有显著变化(P>0.05)外,添加不同水平的25-OH-D3或10.0μg/kg 1α-OH-D3均可显著提高黄羽肉鸡生长性能(P<0.05),添加70、90μg/kg 25-OH-D3或2.5、5.0、10.0μg/kg 1α-OH-D3均可显著提高钙表观消化率和真消化率(P<0.05),添加5.0、10.0μg/kg 1α-OH-D3可显著提高磷表观消化率和真消化率(P<0.05);添加50、70、90μg/kg 25-OH-D3或10.0μg/kg 1α-OH-D3均可显著提高血清磷含量和显著降低血清钙磷比(P<0.05),添加90μg/kg 25-OH-D3或10.0μg/kg 1α-OH-D3还可显著降低血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性(P<0.05),但各处理血清碱性磷酸酶(ALP)活性差异不显著(P>0.05);添加90μg/kg 25-OH-D3或10.0μg/kg 1α-OH-D3可显著提高胫骨粗灰分重、钙磷比、鲜重、脱脂重、脱脂重指数、长度、折断力和骨密度(P<0.05),但对胫骨粗灰分率、钙含量和鲜重指数均没有显著影响(P>0.05)。2)与正常钙磷饲粮对照组相比,添加70、90μg/kg 25-OH-D3或2.5、5.0、10.0μg/kg 1α-OH-D3均可显著提高钙表观消化率(P<0.05),添加10.0μg/kg 1α-OH-D3可显著提高磷表观消化率和真消化率(P<0.05);添加10.0μg/kg 1α-OH-D3或90μg/kg 25-OH-D3可显著提高血清磷含量和钙磷比(P<0.05),显著降低胫骨矿化度(P<0.05),但对生长性能、血清TRAP和ALP活性及除了矿化度和粗灰分重以外的所有胫骨发育指标均无显著影响(P>0.05)。结果提示,降低饲粮钙磷水平后,饲粮中添加25-OH-D3或1α-OH-D3能够有效代替维生素D3,可提高钙、磷消化率,对生长性能、胫骨发育有一定的改善趋势,其中90μg/kg 25-OH-D3和10.0μg/kg 1α-OH-D3获得的效果最佳。     

天然维生素D3代谢物有益于蛋鸡骨骼健康

钙储备充足是保证蛋鸡骨骼质量和蛋壳质量的关键。1,25(OH)_2D_3(生物活性维生素D_3代谢物)在钙稳态中起重要作用。琉球柳叶中的1,25(OH)_2D_3-糖苷是生物活性形式维生素D_3的独特来源,在肠道中分解后可被逐渐吸收并发挥作用。     

不同剂量25羟基维生素D3对断奶前犊牛生长性能、营养物质表观消化率、血浆代谢物及粪便菌群的影响

本试验旨在研究饲粮添加不同剂量25羟基维生素D₃[25(OH)VD₃]对断奶前犊牛生长性能、营养物质表观消化率、血浆代谢物及粪便菌群的影响。选取18头健康、体重[(40.68±1.20)kg]相近的新生荷斯坦犊牛,随机分为3个组,每组6头牛。对照组饲喂基础饲粮,不添加25(OH)VD₃;试验组每头犊牛每天分别在基础饲粮中添加6000(低剂量组)和12000 IU(高剂量组)的25(OH)VD₃。试验期56 d。结果表明:1)与对照组相比,低剂量组和高剂量组体重和平均日增重显著提高(P<0.05),高剂量组体高显著提高(P<0.05),低剂量组和高剂量组粪便评分显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,低剂量组和高剂量组干物质表观消化率显著提高(P<0.05),高剂量组中性洗涤纤维(P=0.05)和钙表观消化率(P<0.05)显著提高。3)与对照组相比,低剂量组和高剂量组血浆25(OH)VD₃和钙含量显著提高(P<0.05),高剂量组血浆磷含量显著提高(P<0.05)。4)与对照组相比,低剂量组和高剂量组血浆白细胞介素-2含量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,低剂量组和高剂量组粪便中毛螺菌科(Lachnospiraceae)和普雷沃式菌科(Prevotellaceae)相对丰度显著提高(P<0.05),粪便中鼠杆菌科(Muribaculaceae)、克里斯滕森菌科(Christensenellaceae)、螺旋体科(Spirochaetaceae)和未培养_细菌_o_柔膜菌纲_RF39(uncultured_bacterium_o_Mollicutes_RF39)相对丰度显著降低(P<0.05)。由此可见,饲粮添加25(OH)VD₃可以提高断奶前犊牛生长性能,促进营养物质消化吸收,降低炎症反应,改善粪便菌群,降低腹泻发生。     

乳牛口服大量β-胡萝卜素对维生素D3及钙磷代谢的影响

６头健康成年荷斯坦乳牛被随机均分为２组。试验组牛第１周每头口服β－胡萝卜素２３．０ｇ,以后每周每头口服１１．５ｇ,对照组不做任何处理。试验期共８周。结果表明,试验组乳牛血清钙及无机磷水平呈下降趋势;血清维生素Ｄ３活性代谢产物２５－ＯＨ－Ｄ３和１,２５－（ＯＨ）２－Ｄ３均呈现明显下降;至第５周末,血液β－胡萝卜素水平最高,２５－ＯＨ－Ｄ３水平下降非常明显。据此认为,乳牛对β－胡萝卜素的吸收存在一阈值,大剂量的β－胡萝卜素进入机体,可能直接干扰维生素Ｄ３的羟化,使其活性代谢产物呈下降趋势,但由于吸收阈值的存在,其对维生素Ｄ３和骨骼钙磷代谢的干扰作用可得到一定程度的减缓。     

饲粮添加25-羟基维生素D3对轮状病毒攻毒和未攻毒断奶仔猪血清和肠内容物抗体和细胞因子水平的影响

本试验旨在研究饲粮中添加25-羟基维生素D3(25-OH-D3)对轮状病毒攻毒和未攻毒断奶仔猪血清和肠内容物抗体和细胞因子水平的影响.选取48头28日龄断奶的平均体重为(7.35±0.75)kg的杜长大三元杂交仔猪,按体重随机分配到4个组,每组12个重复,每个重复1头猪,试验期21 d.C-、C+分别为未攻毒和攻毒对照...