鸣球虫病的免疫试验

鸣球虫病的免疫试验对笼养（基础试验）及散养（免疫试验）两组鸡分别进行。鸡球虫卵囊的强毒株；弱毒（保存一年左右的未成熟的卵囊）；早熟株的人工感染，试验免疫效果．结果，对２１日龄雏鸡的人工感染，各毒株无免疫效果。对０～７日龄的雏鸡进行了２次人工感染，投与...     

雏鸡对C．baileyi感染的年龄免疫研究

本文以１．２５×１０７Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ卵囊的剂量人工经口感染３～７５日龄雏鸡，通过Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ卵囊排出规律和临床发病情况的观察，研究了雏鸡对Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ感染的年龄免疫现象。结果表明，３～７５日龄雏鸡均能感染Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ；３～１０日龄雏鸡易感性高，感染后排出印囊的量大，排出印囊的时间长，持续到感染后第２０天；２０日龄以上的雏鸡随着年龄的增长，感染后排出卵囊的量逐渐减少，排出印囊的时间缩短，仅持续到感染后第１５天。５０日龄以下的雏鸡感染后排出卵囊的量明显地高于５０日龄以上的雏鸡，５０～７５日龄的雏鸡易感性很低，排出卵囊的量趋于恒定地极少量排出。从而揭示随着雏鸡年龄增长免疫系统发育逐步完善，感染后排出印囊的量逐渐减少、排出卵囊的时间缩短、对Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ的易感性逐渐降低的规律。首次实验证实Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ作为一种原发性病原主要侵害５０日龄以下的雏鸡，尤其是１０日龄以内的雏鸡易感性最高，发病和死亡主要见于１０日龄以内感染的雏鸡。     

8301多糖配合柔嫩艾美耳球虫诱导雏鸡保护性免疫的研究

本文观察了８３０１多糖对鸡柔嫩艾美耳球虫活卵囊免疫效力的影响。结果表明，８３０１多糖配合鸡柔嫩艾美耳球虫活印囊免疫雏鸡后７天，应用强毒攻击，雏鸡存活率为１００％，增重率为７１．０７％，抗球虫指数为１７０．５５。单用柔嫩艾美耳球虫活卵囊免疫的雏鸡存活卒、增重率及抗球虫指数分别为６６．７％、４６．２７％及１１４．９３。在明８３０１多糖能增强鸡球虫免疫的效力。     

鸡柔嫩艾美耳球虫广西株的分离与鉴定

目的建立一种简单、实用的单卵囊分离方法，并对一株广西柔嫩艾美耳球虫进行分离。方法采用电泳制胶槽来制作琼脂块进行球虫单卵囊的分离，单卵囊实验感染9只1日龄雏鸡，感染后收集粪便，用饱和盐水漂浮法进行卵囊检测。纯种卵囊经口感染10只1日龄雏鸡，观测卵囊寄生部位、最短孢子化时间，以及其潜在期和排卵高峰期。结果2只雏鸡粪便中检出卵囊，单卵囊感染成功率为22％。通过对其中一株球虫的研究，根据其卵囊的形状、大小、寄生部位、潜在期、卵囊最短孢子化时间、排卵高峰期等生物特征，鉴定该株球虫为柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）。结论本研究成功建立一种单卵囊分离技术，可作为球虫单卵囊分离的常规方法。     

天然大蒜精油对感染球虫蛋雏鸡免疫指标的影响

试验旨在研究饮水中添加天然大蒜精油对感染柔嫩艾美耳球虫蛋雏鸡免疫指标的影响。选择400只农大3号节粮蛋雏鸡,随机分为5组,每组4个重复,每个重复20只,即健康对照组（HC组）、感染组（IN组）以及天然大蒜精油低（L组）、中（M组）、高剂量组（H组）（分别在饮水中添加0.04、0.06、0.08 mL/L天然大蒜精油）。16日龄时,除健康对照组外,其他各组雏鸡口服柔嫩艾美尔球虫卵囊5×104个/只。攻毒期7 d,试验期23 d。结果显示,HC组蛋雏鸡末重、平均增重显著高于IN组、L组和H组（P<0.05）。IN组和L组卵囊值最高,均为40;HC组卵囊值最低为0。20日龄时,M组蛋雏鸡的胸腺指数、血清免疫球蛋白M (IgM)、免疫球蛋白G(IgG)含量显著高于其他组（P<0.05）。23日龄时,M组蛋雏鸡血清免疫球蛋白A (IgA)含量显著高于其他组（P<0.05）。研究表明,饮水中添加0.06 mL/L天然大蒜精油具有提高蛋雏鸡免疫机能的作用。     

rChIFN-γ对E-tenella卵囊免疫雏鸡肠道分泌型IgA^＋细胞数量的影响

本研究初步探讨了重组鸡-γ干扰素（rChIFN-γ）对柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）卵囊免疫接种鸡肠道粘膜sIgA＋细胞数量的影响。分另1l给7和14日龄雏鸡予以E．tenella孢子化卵囊免疫接种并同时肌注5000urChIFN-γ后,于21日龄用同源E．tenella攻虫。免疫组化检测结果表明rChIFN-γ加强免疫组在21日龄时十二指肠、空肠、盲肠和回肠的绒毛sIgA^＋细胞数量均高于免疫对照组,在28日龄时,均呈现显著性差异（仪=0．05）。结果表明rChIFN-γ可提高球虫卵囊免疫雏鸡肠道内的sIgA^＋细胞数量,增强粘膜免疫水平,具有明显的抗球虫免疫增强效果。     

3株鸡巨型艾美耳球虫抗原性分析

本研究对3株鸡巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)福建株、上海株和广东株进行免疫原性分析,其中广东株属于早熟株。将7日龄雏鸡分别免疫3株E.maxima孢子化卵囊,12 d后分别攻击相同剂量的同源及异源虫株孢子化卵囊,设不免疫攻虫对照组和不免疫不攻虫对照组,17d开始收集粪便直至无卵囊排出为止,每日计数卵囊,计算卵囊相对减少率。结果:雏鸡免疫后以同源虫株攻击,保护率均在98%以上,而雏鸡免疫后以异源虫株攻击,其交叉保护率在40.78%⁷2.37%之间。提示:E.maxima对同源虫株的保护率明显高于对异源虫株的保护率,说明各分离株间抗原性存在差异。     

免疫增强剂对鸡球虫体液免疫指标的影响

艾维茵雏鸡于7日龄和14日龄时分别以1000、5000个E.Tenella卵囊／只免疫两次,并于首免时注射卡介苗（BCG）或黄芪多糖（APS）1次,21日龄以5万和25万卵囊攻击。试验鸡于7、14、21日龄和28日龄采血,ELISA测定血清中IgG、IgM抗体的含量。结果表明：BCG具有促进球虫免疫鸡体液免疫应答的作用,而APS的作用效果不明显。     

8301多糖配合柔嫩艾美耳球虫免疫对鸡血浆cAMP和cGMP含量的影响

用放射免疫法测定了８３０１多糖配合鸡柔嫩艾美耳球虫活卵囊免疫后第１４、２８、４２及５６ｄ鸡血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量。结果表明，８３０１多糖配合柔嫩艾美耳球虫免疫后第１４～５６ｄ，鸡血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量维持在较高水平，至５６ｄ时与单一多糖免疫组、单一球虫活卵囊免疫组有显著差异（Ｐ＜０．０５），且ｃＧＭＰ含量与多糖免疫组亦有显著差异（Ｐ＜０．０５）。证明８３０１多糖配合鸡柔嫩艾美耳球虫活卵囊免疫对激发ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ升高以促进抗体生成和细胞免疫功能优于单纯活卵囊。     

堆型艾美耳球虫重组DNA质粒pcDNA3-3-1E的免疫原性

用E.acervulina重组质粒pcDNA3-3-1E免疫雏鸡,观察其对雏鸡细胞免疫和体液免疫功能的影响。将7日龄雏鸡随机分为4组,即空白对照组、pcDNA3.1空质粒组、重组质粒免疫组和卵囊免疫组,每组30只。pcDNA3-3-1E经肌肉注射途径免疫雏鸡,剂量为50μL/只（含质粒1g/L）。7日龄免疫1次,14日龄加强免疫1次。检测雏鸡血液T淋巴细胞增殖率,测定血清抗体水平。结果显示,与空质粒组和健康对照组相比,重组质粒组淋巴细胞的增殖能力明显增强（P〈0.05）,外周血中IgG的含量均显著升高（P〈0.05）,表明pcDNA3-3-1E裸质粒DNA能有效的提高雏鸡的细胞免疫和体液免疫水平。     

尼卡巴嗪对人工感染球虫后雏鸡免疫器官发育的影响

本试验研究尼卡巴嗪对人工感染球虫后雏鸡免疫器官发育的影响。将14日龄海兰褐公雏54只，随机分成3组，分别为不感染不给药对照组、感染不给药对照组、尼卡巴嗪组（感染给药组），除不感染对照组，于14日龄接种1.2×105个孢子化卵囊，试验到第9d结束。试验期间，观察雏鸡的精神，食欲，粪便情况并记录体重、胸腺、脾和法氏囊的变化。结果表明尼卡巴嗪可促进雏鸡胸腺和法氏囊迅速成熟，从而使雏鸡整体免疫机能加强。     

鸭隐孢子虫病调查及雏鸡感染试验

河南省郑州、尉氏、信阳三个地区２１个鸭场２３群共３４４００多只家鸭隐孢子虫感染情况调查结果：２３群家鸭共有１６群感染有隐孢子虫，群体感染率为６９．５７％；不同月龄的家鸭均有感染，１～８月龄鸭感染率（８７．５％）明显高于８月龄以上鸭的感染率（６０％）。所有阳性鸭群中粪便卵囊数均较少。所查卵囊均呈卵圆形、淡红色、卵囊壁单层、光滑无色。测得１００个卵囊大小为３．９～５．７×５．０～６．１（微米），平均为４．７６微米×５．７５微米，卵囊形状指数为１．０５４～１．４３９，平均为１．２２１。鸭源隐孢子虫卵囊感染１日龄海兰雏鸡后，潜隐期４天、显露期１３天。涂片检查发现喉头、气管、肺脏、十二指肠、法氏囊有大量虫体寄生     

柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达

从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增＆SAG10基因，与pGEM-TEasy载体连接后转化大肠杆菌（E．coli）DH5a，筛选阳性克隆，扩增不舍N端信号肽的编码序列，分别插入表达载体pET-32a（＋）和pMAL-c2X，转化至E．coliRosetta，以IPTG诱导表达。结果表明，pET-32a（＋）-EtSAGIO在E．coliRosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43％，融合蛋白分子质量约为47ku，以包涵体形式存在；而pMAL-c2x-EtSAG10在E．coli Rosetta中表达的重组蛋白为可溶性，表达产物约占菌体总蛋白的35％，融合蛋白分子质量约为69ku。以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg／只肌肉注射免疫雏鸡，攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数（OPG）、相对增重率和抗球虫指数（ACI）评价，免疫组相对盲肠卵囊产量为47．7％，抗球虫指数由86．79提高至152．13。提示，重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护。     

纯中草药散剂对鸡球虫病的疗效试验

250只海蓝灰雏鸡，饲养至15日龄，随机分为5组，分别为试验组（1％纯中药散剂组、0.5％纯中药散剂组、0.25％纯中药散剂组）、阳性对照组（只感染球虫卵囊不给药）及药物（三字球虫粉）对照组，每组50只。试验鸡全部经口感染鸡柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊，试验组及药物对照组连续给药5 d。在第8 d将鸡全部扑杀剖检。试验期间统计每组鸡的死亡率、增重率、粪便记分、病变记分、病变值、卵囊计数、卵囊比数、卵囊值、鸡抗球虫指数等指标。结果表明：0.5％～1％的纯中药散剂抗球虫指数在160～180之间，为中效抗球虫药。     

不同地理株柔嫩艾美耳球虫(E.tenela)杂交虫株(F2)的培育

将山东株(S)与吉林株(J)柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊通过单卵囊技术接种雏鸡,收获卵囊后提取基因组DNA,利用RAPD技术分析DNA,筛选出杂交株(F1),再用该F1代与黑龙江株(H)柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊单卵囊接种雏鸡,相同方法鉴别筛选,确定了1株为山东株、吉林株和黑龙江株三个地理株的杂交(F2)卵囊。该结果为深入研究球虫的免疫机制奠定了基拙。     

雏鸡DLV免疫后的排卵囊量分析及效果评估

雏鸡ＤＬＶ免疫后的排卵囊量分析及效果评估邹晖，苏华炜，吴兆敏（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所）本文采用麦氏计数法对免疫ＤＬＶ疫苗后的雏鸡群作排卵囊规律分析。并且观察免疫鸡群整个饲养过程中不表现明显的感染球虫症状，盲肠病变指数最高时只达到“”，小肠病...     

鸡柔嫩艾美耳球虫生殖细胞特异性蛋白的免疫保护效果评价

为探讨鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)生殖细胞特异性蛋白(HAP2)对球虫感染的免疫保护作用,将HAP2重组蛋白(rEtHAP2)加弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂免疫雏鸡后,用E. tenella孢子化卵囊感染雏鸡,以雏鸡增重效果、卵囊排出量、肠道病变记分、血清抗体水平、淋巴细胞转化水平,评估rEtHAP2的免疫保护作用,并设PBS免疫对照组、正常饲养对照组。结果显示:rEtHAP2免疫组雏鸡的平均体重、日增重、血清抗体水平、淋巴细胞转化水平,均显著高于PBS免疫对照组(P0.05);卵囊排出量,肠道病变记分则显著低于PBS免疫对照组(P0.05);抗球虫指数ACI值为176.18,保护效果良好。研究表明生殖细胞特异性蛋白HAP2对柔嫩艾美耳球虫感染具有良好的免疫保护作用,可成为柔嫩艾美耳球虫新型疫苗的候选抗原。     

从病理变化角度探讨黄艾美耳球虫活虫苗不同免疫程序的免疫保护性

用黄艾美耳球虫重复免疫２月龄新西兰品种无球虫兔，设计３种免疫程序：（１）均等中剂量，免疫３次，间隔１０ｄ，２０００个卵囊／只·次；（２）均等低剂量，免疫５次，间隔５ｄ，２００个卵囊／只·次；（３）加倍递增剂量免疫程序，免疫５次，间隔５ｄ，起始剂量为２００个卵囊／只·次。在３００００个孢子化卵囊攻虫后的１７ｄ，对所有实验动物各段肠道取样，用扫描电镜进行观察，结果发现，家兔各段肠道杯状细胞分泌旺盛，可见到大量的分泌物，粘液团块及由粘液所形成的假膜覆盖在肠粘膜表面。在肠粘膜表面见到较多的大肠杆菌。小肠肠绒毛萎缩、变短、有的胀肿，大肠肠粘膜表面的纵行皱折萎缩。相比而言，低剂量免疫的家兔小肠肠绒毛萎缩和大肠粘膜的纵行皱折萎缩均较严重，而且有较严重的卡他性肠炎。中剂量和加倍递增剂量免疫的家兔病变程度较接近。     

免疫增强剂促进鸡球细胞免疫的研究

艾维茵雏鸡分别于７日龄和１４日龄时以１０００、５０００个Ｅ．Ｔｅｎｅｌｌａ卵囊／只免疫２次,并于首免时注射卡介苗（ＢＣＧ）或黄芪多糖（ＡＰＳ）１次,２１日龄以５万和２５万卵囊攻击。试验鸡采血时间为７、１４、２１和２８日龄。细胞免疫测定指标为淋巴细胞转化水平、Ｅ－玫瑰花环形成率、血清溶菌酶含量。结果表明：ＢＣＧ和ＡＰＳ能显著提高球虫免疫鸡的淋巴细胞转化水平和Ｅ－玫瑰花环形成率：是鸡体单核－巨噬细胞系统的有效激活剂。     

柔嫩艾美耳球虫对禽流感疫苗的免疫增强作用研究

为了研究柔嫩艾美耳球虫对雏鸡免疫禽流感疫苗的免疫增强作用,试验将7日龄AA肉鸡随机分为4组,每组20只,1组试验鸡皮下注射柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,同时免疫禽流感H5亚型灭活疫苗;2组试验鸡皮下注射柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,同时免疫磷酸盐缓冲液;3组试验鸡皮下注射磷酸盐缓冲液,同时免疫禽流感H5亚型灭活疫苗;4组试验鸡皮下注射磷酸盐缓冲液,同时免疫磷酸盐缓冲液。在免疫后第7,14,21,28天,各组随机取5只鸡采血、称重,采集胸腺、脾脏、法氏囊,计算免疫器官指数,采用血凝抑制试验检测血清中禽流感抗体效价。结果表明:各组试验鸡的平均体重差异不明显,柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊与禽流感灭活疫苗共免疫不会影响试验鸡的日增重;柔嫩艾美耳球虫与禽流感疫苗联合免疫可以促进雏鸡免疫器官的生长发育,提高雏鸡免疫器官指数和禽流感抗体效价。说明柔嫩艾美耳球虫可以调节机体对疫苗的免疫反应,促进雏鸡的体液免疫应答。