翡翠贻贝糖胺聚糖的制备及其生理活性初探

探讨了翡翠贻贝中提取糖胺聚糖的蛋白酶水解及乙醇沉淀等条件，所制备的翡翠贻贝糖胺聚糖含GAG72.1%，经动物实验，当剂量为80mg/kg体重时，对昆明小鼠移植性肿瘤S-180的抑瘤率可达52.4%，且有增强免疫力的活性。     

翡翠贻贝调味干制品的试制

翡翠贻贝经调味、腌制和干燥制得的调味干制品具有色香味俱佳，营养丰富的特点。试制品水分含量为２９．３％、蛋白质含量２８．８％、脂肪１１．７％、粗灰分２．６９％、水分活度为０．８１５。     

翡翠贻贝精粉的缓解疲劳功能

按<保健食品检验与评价技术规范>中的缓解疲劳功能检验方法对翡翠贻贝精粉的缓解疲劳功能进行了实验研究.小鼠按体重随机分组,以人体推荐量的10倍为一个剂量组(1.2 g/kg),另设二个剂量组(2.4g/kg、0.6 g/kg)和一个对照组,每组10只小鼠.检测各组小鼠负霞游泳时间、肝糖原、血清尿素氮(BUN)和血乳酸(用血乳酸曲线下面积值表示)等指标.研究结果显示:与对照组比较,翡翠贻贝精粉0.6 g/kg剂量组的小鼠负重游泳时间延长,肝糖原含量增高,且有显著性差异(P<0.05);翡翠贻贝精粉1.2 g/kg剂量组和2.4 g/kg剂量组的小鼠负重游泳时间延长,肝糖原含量增高,血清尿素氮降低,血乳酸曲线下面积值降低,且有显著性差异(P<0.05).因此翡翠贻贝精粉具有缓解疲劳功能,具有开发成保健食品的潜力.     

翡翠贻贝多糖的分离纯化及单糖组成

以翡翠贻贝(Perna viridis)内脏团为原料提取翡翠贻贝多糖PVPS(Perna viridis Pol ys acc haride),经DEAE-cellulose 52纤维素阴离子交换层析和Sephadex G-100分子筛层析后,得到2个不同组分PVPS-2A和PVPS-2B.用紫外光谱扫描(UV)和聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳分别对这2个组分进行纯度检测,傅里叶红外吸收光谱(FT-IR)和核磁共振波谱法(NMR)分析多糖的构型为α-吡喃糖.气质联用(GC-MS)分析单糖的组成和摩尔比,实验表明,PVPS-2A的单糖组成主要为木糖(30.77％)、甘露糖(1 1.40％)、葡萄糖(34.63％)和半乳糖(16.94％),PVPS-2B的单糖组成主要为木糖(24.55％)、甘露糖(14.44％)、葡萄糖(33.52％)和半乳糖(20.84％).     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性。采用正交实验方法,以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16（45）正交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGC80-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bcl-2表达的影响。结果表明：当料液比为1：4、pH为8.5、加酶量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5 h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1：4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温度为40℃、酶解时间为2 h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bcl-2的表达。紫贻贝酶解多肽具有抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的。     

水溶性石油烃组分对翡翠贻贝的毒性效应研究

在室内半静水的实验条件下,将翡翠贻贝(Perna viridis)分别暴露于0.005、0.010、0.050、0.100mg.L-1的0#柴油水溶液(WSF)中,在污染后1、3、7、15d取样,于15d后转入清洁海水中进行7d污染释放试验,在18、22d采样。测定内脏团和外套膜丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性。结果表明,高剂量组(0.100、0.050mg.L-1)暴污的翡翠贻贝内脏团和外套膜SOD活性和MDA含量变化比低剂量组(0.005mg.L-1)显著(P<0.01),整个暴露过程中呈现先抑制后诱导再抑制的波动变化趋势,无明显的剂量-时间-效应关系。WSF暴露初期,内脏团组织中GSH含量和GST活性反应灵敏且受到抑制,此后受到明显诱导而升高,在暴露第7d达到最大值并显著高于空白组(P<0.01)。外套膜各剂量组GSH含量和GST活性存在此消彼长的趋势,剂量-时间效应明显。污染解除后,4种生理指标均缓慢恢复至空白对照组水平。     

翡翠贻贝肾CYP4基因表达受多氯联苯影响的研究

[目的]了解多氯联苯(PCB)对翡翠贻贝肾中细胞色素P450第4亚族(CYP4)基因表达的影响。[方法]从野生翡翠贻贝cDNA中扩增得到了翡翠贻贝CYP4基因和β-actin基因的部分cDNA序列,并根据所得序列设计定量PCR引物,以β-actin为内参基因,以SYBRGreenI为荧光染料,利用荧光定量PCR对经PCB暴露处理后的翡翠贻贝肾中CYP4基因表达水平进行定量测定。[结果]PCB暴露处理对翡翠贻贝肾中CYP4基因的表达有明显的诱导作用,并且这种诱导作用对CYP4表达水平的影响与PCB暴露处理的时间以及浓度有相关性。[结论]该研究为CYP4基因作为生物大分子标记物在环境监测领域的应用提供了分子生物学水平的支持,同时为海水双壳类动物体内CYP4基因功能的研究提供了有益线索。     

杜仲叶多糖的制备及其体外活性

【目的】分离制备杜仲叶多糖,研究其体外抗氧化和抗肿瘤活性,为杜仲叶多元化开发利用提供依据。【方法】以杜仲叶为原料,采用水提醇沉法制备杜仲叶粗多糖,以DEAE-52纤维柱色谱法进行分离纯化。测定多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、ABTS自由基的清除作用;采用MTT法、LDH法和流式细胞术,检测多糖对乳腺癌MCF-7细胞生长抑制和细胞周期的影响。【结果】水提醇沉法制备的杜仲叶粗多糖经DEAE-52柱分离纯化后得到EFPs-1、EFPs-2共2个组分,其多糖质量分数分别为75.8%和84.3%。EFPs 2个组分对各自由基体系的清除能力均呈现良好的剂量依赖关系,其中EFPs-2的作用比EFPs-1强。EFPs-1对DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基和ABTS自由基的半数有效浓度（EC₅₀）分别为3.393,5.259,3.692和2.463 mg/mL,EFPs-2的EC₅₀值依次为2.379,2.893,2.516和2.066 mg/mL。EFPs 2个组分对MCF-7细胞均有一定的体外生长抑制作用,其半数抑制浓度（IC₅₀）分别是226.23 μg/mL（EFPs-1）和173.04 μg/mL（EFPs-2）,其中EFPs-2可使MCF-7细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期。【结论】杜仲叶多糖具有良好的体外抗氧化和抑瘤活性。     

盐度对翡翠贻贝受精卵孵化及幼虫和稚贝生长和存活的影响

在室内可控条件下,研究了不同盐度梯度(10、15、20、25、30、35、40、45)对翡翠贻贝Perna viridis受精卵孵化及幼虫和稚贝生长、存活的影响。结果表明:盐度为10、40时,贻贝受精卵不能发育至D形幼虫;盐度为15、30、35时,受精卵可以孵化,但D形幼虫畸形率较高;盐度为20²5时,受精卵的孵化率较高,畸形率较低,为适宜孵化盐度;幼虫阶段,盐度为2025时,受精卵的孵化率较高,畸形率较低,为适宜孵化盐度;幼虫阶段,盐度为20²5时存活率和变态率最高,盐度为10、45时幼虫无法完成变态,幼虫生存的适宜盐度为2025时存活率和变态率最高,盐度为10、45时幼虫无法完成变态,幼虫生存的适宜盐度为20³5;稚贝阶段,生长存活的适宜盐度为1535;稚贝阶段,生长存活的适宜盐度为15³5,盐度为2035,盐度为20²5时生长速度最快、存活率最高。研究表明,翡翠贻贝幼虫和稚贝对高盐度和低盐度均有很强的适应能力。     

盐度对翡翠贻贝受精卵孵化及幼虫和稚贝生长和存活的影响

在室内可控条件下,研究了不同盐度梯度(10、15、20、25、30、35、40、45)对翡翠贻贝Perna viridis受精卵孵化及幼虫和稚贝生长、存活的影响。结果表明:盐度为10、40时,贻贝受精卵不能发育至D形幼虫;盐度为15、30、35时,受精卵可以孵化,但D形幼虫畸形率较高;盐度为20~25时,受精卵的孵化率较高,畸形率较低,为适宜孵化盐度;幼虫阶段,盐度为20~25时存活率和变态率最高,盐度为10、45时幼虫无法完成变态,幼虫生存的适宜盐度为20~35;稚贝阶段,生长存活的适宜盐度为15~35,盐度为20~25时生长速度最快、存活率最高。研究表明,翡翠贻贝幼虫和稚贝对高盐度和低盐度均有很强的适应能力。     

北方沿海翡翠贻贝人工育苗技术研究

于2011、2012年,在大连对翡翠贻贝Perna viridis室内人工育苗技术进行了初步研究,成功培育出壳长为4.5～10.0 mm的稚贝6 500万个。比较了不同培育密度(5、10、15、20、30、50个/mL)和饵料种类(小球藻、湛江等鞭金藻和小球藻与湛江等鞭金藻的混合饵料)对翡翠贻贝幼虫生长的影响,并分析了在4种附着基(聚乙烯网片、波纹板、聚乙烯网衣、聚乙烯吊绳)和无附着基条件下的采苗效果。结果表明:随着培养密度的增大,幼虫生长速度下降,存活率减小,变态率降低,变态时间延迟;在室内幼虫培育期间,用小球藻与等鞭金藻的混合饵料比单一饵料的投喂效果理想,单一饵料投喂中等鞭金藻效果较好;在幼虫变态过程中,聚乙烯网片的采苗效果最理想,其次为波纹板,无附着基的采苗效果最差。     

BDE209胁迫对翡翠贻贝（Perna viridis）SOD、MDA和GSH的影响

采用半静态实验方法,研究不同浓度BDE209(0.1、1、10mg·L-1)在胁迫1、3、7、15d和清洁海水中释放3、7d后,翡翠贻贝(Perna viridis)外套膜和内脏团超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量的变化规律。结果表明,BDE209胁迫后,翡翠贻贝2组织SOD活性先是受到明显的诱导作用,之后随胁迫时间延长被显著性抑制(P<0.01);BDE209对翡翠贻贝外套膜MDA含量的影响呈诱导-抑制反复变化,对内脏团MDA含量的影响表现为明显的诱导效应,其中胁迫第3d时的诱导率最高,为22.83%。翡翠贻贝外套膜GSH含量在BDE209胁迫初期就被显著诱导(P<0.01),随暴露时间延长诱导效应降低,在第15d时被显著性抑制(P<0.05);BDE209可诱导内脏团GSH含量显著性增加(P<0.05),但随暴露浓度增加GSH含量明显降低。清水恢复阶段,在清洁海水中恢复3d后,翡翠贻贝2组织MDA含量和GSH含量相对于对照组仍有显著性增加(P<0.05);而SOD活性总体在外套膜中受到抑制、内脏团中受到诱导,仅个别浓度组有所恢复。     

两种海洋贝类多糖的提取及其生物活性评价

[目的]提取翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖并评价其生物活性,为这两种贝类多糖的开发利用提供科学依据.[方法]采用酶解法提取翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖,并采用苯酚—硫酸比色法测定其多糖中的总糖含量;通过纸片扩散法、清除羟基自由基(·OH)试验和MTT法分别评价两种多糖的体外抑菌活性、抗氧化活性及抗猪蓝耳病毒(PRRSV)活性.[结果]翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖提取率分别为0.21％和0.14％,其多糖中的总糖含量分别为90.2％和90.1％.翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖对·OH均有一定的清除作用,且随多糖质量浓度的增加而逐渐增强;对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均无明显的抑制作用;对PRRSV均无明显的阻断、抑制及直接杀灭作用.[结论]翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖均具有一定的抗氧化活性,但不显示有意义的体外抑菌和抗PRRSV活性,可将其作为抗氧化剂资源予以研究.     

香榧扦插生根解剖学与生理相关酶活性

近年来香榧种植规模大幅度增加,但香榧多嫁接繁殖,生产周期长,而扦插繁殖在生产上尚未广泛应用。为解决香榧生产上苗木供应短缺的问题,深化香榧繁殖方面的研究,从解剖学与生根过程中相关酶活性变化开展研究,并且比较了标典3721扦插专用生根液和双吉尔6号生根粉(GGR6)对香榧扦插生根率的影响。结果表明,香榧一年生枝条内有厚壁组织但不连续,无潜伏根原基,根原基起源于愈伤组织;在扦插后约一个月能较快形成根原基,但是其发育并形成不定根突破愈伤组织所需时间较长。标典处理的香榧插穗生根率和愈伤率高于GGR6处理和对照。香榧插穗基部皮层的过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、吲哚乙酸氧化酶(IAAO)活性变化与插穗生根密切相关。扦插初期,POD、SOD活性上升,IAAO活性则下降;PPO活性先下降后上升。随着切口愈伤组织的形成和根原基的发生,POD、SOD活性逐渐下降,IAAO活性、PPO活性上升。扦插后期,POD和IAAO活性的上升促使不定根的伸长和生长,SOD活性又开始恢复,PPO活性趋于平缓。香榧扦插生根的诱导与生长过程中,这些酶活性的变化起着重要的作用。扦插初期各处理可溶性蛋白含量均呈上升趋...     

紫丁香多酚提取工艺优化及抗氧化活性的研究

以紫丁香为原料,对紫丁香多酚的提取及抗氧化活性进行了研究,得到最适提取工艺条件为:乙醇浓度55%、料液比1∶50、浸提温度70 ℃、浸提时间50 min,此工艺条件下紫丁香多酚的得率为(1.73±0.05)mg/g。采用生物活性追踪法研究发现紫丁香多酚中抗氧化活性最强组分的极性为弱极性,当这部分样液质量浓度为70 μg/mL时,总还原能力为0.64±0.01,DPPH自由基的清除能力为(79.44±0.67)%。研究发现经人工胃液处理后,紫丁香多酚抗氧化活性最强组分的抗氧化能力上升,而经人工肠液处理后其抗氧化能力下降。      

喜树内生真菌的分离及其抗肿瘤活性菌株的筛选

以中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)株作为模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对197株喜树内生真菌次生代谢产物进行体外抗肿瘤活性试验.结果发现,不同采集部位及不同地理环境分离出的菌株抗肿瘤活性有明显差异,其中以树皮中分离出的内生真菌具有抗肿瘤活性的比例最高.从采集的地理位置分析,由安徽黄山标本所分离的内生真菌抗肿瘤活性菌株比例高于其他2个采集地点.1株从黄山喜树果实上分离的菌株对CHO细胞的抑制率超过50%,初步鉴定为Rhizopycnis属真菌.