我国类NADC30猪蓝耳病的流行现状

自2012年以来,我国猪群中出现PRRSV的一种新亚型毒株,因其与美国PRRSV NADC30株具有较高的同源性,因此被称为类NADC30 PRRSV.目前类NADC30 PRRSV已在我国16个省份相继分离到,并且在近年来我国PRRSV中占据相当大的比例.类NADC30 PRRSV的出现,不仅增加了我国PRRSV流行毒株的复杂性,而且增加了猪蓝耳病防控的难度.     

蓝耳病病毒类NADC30 毒株的免疫保护与防控策略

类NADC-30毒株打破了我国长期以来由经典毒株和高致病性毒株所组成的蓝耳病病毒的二元世界,并逐渐演变成为优势毒株.在此新形势下,本文综合了两项商品化蓝耳病疫苗的效果评估试验,得出结论:当前的蓝耳病疫苗免疫对于缩短类NADC-30毒株感染的临床发病时间、 改善增重水平确实存在一定作用,但其提供的免疫保护并不完全,免疫场仍然存在暴发类NADC-30毒株的风险.故猪场在使用疫苗的同时,仍然需要做好猪场选址与布局、 生物安全、 淘汰敏感种猪和隔离驯化后备猪方面的工作,以阻止或者降低类NADC-30毒株的暴发风险.对于暴发场,通过阻止发病猪群的病毒血症、 阻断怀孕母猪的垂直传播以及发病猪只的水平传播,并结合封场,淘汰敏感母猪,可将猪场损失降到最低.中国蓝耳病的根本解决之道是在有条件的区域开展蓝耳病的净化,给蓝耳病病毒毒株做减法,让猪场毒株种类越来越少.     

鉴别PRRSV经典、高致病性和类NADC30毒株PCR方法的建立及初步应用

为了建立鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory virus,PRRSV)经典毒株、高致病性毒株与类NADC30毒株的快速检测方法,根据不同毒株的ORFla核苷酸序列,设计并合成PRRSV特异性引物.经过引物筛选以及对退火温度、引物浓度的优化,建立了应用1对引...     

猪繁殖与呼吸综合征 病毒类NADC30毒株的新近流行

猪繁殖与呼吸综合征是严重危害养猪生产的病毒性传染病.自20世纪90年代中期在我国发生和流行以来,已经20余载.据田间流行优势毒株的不同,可大致分为三个阶段:经典毒株流行阶段(1995—2006年)、 高致病性变异株流行阶段(2006—2013年)和新近的类NADC30毒株流行阶段(2013年至今).2013—2014年间与美国分离株NADC30亲缘性较高的一类PRRSV毒株开始在我国暴发流行,其具有与NADC30和MN184等谱系1(lineage 1)毒株相同的nsp2编码区缺失模式.致病性分析及疫苗保护试验结果表明,其致病性介于高致病性毒株与经典株之间,目前商用疫苗对其保护效果不佳.且类NADC30毒株易与其他PRRSV毒株发生重组,产生新的变异株.类NADC30毒株的广泛流行,以及相关重组毒株的叠现,进一步增加了PRRS疫病防控的难度.     

两株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)又称为"猪蓝耳病",是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的猪传染性疾病。本研究将采集到的2份疑似患有PRRS的流产胎儿的肺组织研磨后离心,取上清液接种猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)盲传3代。通过RT-PCR方法和间接免疫荧光方法,对组织样品及细胞培养物进行了鉴定和分型。结果显示本研究成功从2份样品中分离到了类NADC30,且该毒株可以在PAM细胞上增殖。该研究结果为研究类NADC30毒株的重组机制、致病情况及研制预防疫苗提供参考。     

2016-2017年我国华北地区猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株分子遗传演化分析

为了解我国华北地区类NADC30流行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及遗传变异情况,本研究自2016~2017年采集华北四省市(北京、天津、山东及河北)部分猪场疑似PRRSV样品239份进行RT-PCR检测,对所有阳性样品的ORF5基因测序分析及部分阳性样品病毒分离,并选择1株基因缺失病毒TJjh1602株进行全基因的序列扩增及分析.结果显示:PRRSV检测总阳性率44.35%(106/239),遗传进化显示52.83%(56/106)的流行毒株与类NADC30相近且位于系谱1(lineage 1),其中32.14%(18/56)的类NADC30流行毒株具有相同特征性的氨基酸位点缺失;TJjh1602株全基因长度为15018 nt,与NADC30同源性为95.2%,除具有上述特征性氨基酸位点缺失外,无其他插入或缺失.研究结果推测PRRSV类NADC30毒株在我国华北地区广泛流行,同时已遗传演化成一类具有ORF5缺失分子标签的新型类NADC30毒株,提示需进一步加强对PRRSV新型缺失毒株的流行病学调查及相关致病力研究.     

我国近5年类NADC30 PRRSV毒株序列的重组及限制性片段长度多态性分析

为了解我国类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株的流行和遗传变异情况,本研究利用生物信息学软件对本实验室2016-2020年获得的64条类NADC30毒株序列进行分析。Nsp2氨基酸序列比对结果表明,64株毒株均表现出与NADC30毒株一致的131个不连续的氨基酸缺失。其中,9株在Nsp2区域除该缺失特征外,另含有额外的氨基酸缺失。基于全基因组遗传演化分析结果表明,61株分布在Sublineage 1.8(类NADC30),3株分布在Lineage 8(HP-PRRSV)。而基于ORF5序列的遗传演化分析结果则更分散,56株分布在SubLineage 1.8,5株分布在Lineage 8,2株分布在Lineage 5(类VR2332),1株分布在Sublineage 1.5(类NADC34)。经RFP4和Simplot生物学软件进行重组分析结果表明,64株毒株中可能有44株为重组毒株,共表现出5种重组模式,其中以NADC30提供骨架,HP-PRRSV提供重组片段为主要模式。重组热点分布在非结构蛋白区域5′UTR～1 500 nt(Nsp1)、5 374～8 177 nt...     

一例HP-PRRSV与NADC30-like毒株混合感染的实验室诊断

2022年10月中旬,湖南长沙某规模化猪场发生疑似猪繁殖障碍综合征疫情。为探究发病原因,采集病料样品进行细菌分离鉴定和常见病原荧光定量PCR（q PCR）鉴定。结果发现,病料样品中未分离得到细菌,q PCR检测结果显示组织病料为HP-PRRSV和NADC30-like毒株核酸阳性,其他病原核酸均为阴性。为进一步分析该猪场PRRSV流行株遗传变异情况,对PRRSV Nsp2基因序列进行逆转录PCR（RT-PCR）扩增、测序及分析。结果显示,HP-PRRSV株Nsp2基因序列与Hu N4-F112株（PRRSV弱毒疫苗株）同源性最高,类NADC30株Nsp2基因序列与已知NADC30株同源性最高。以上研究结果表明,该场疫情是HP-PRRSV和类NADC30株混合感染引起,其中HP-PRRSV可能为弱毒疫苗株。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30株感染的诊断与防控策略

2019年10月初,福建闽南地区某猪场出现疑似猪繁殖与呼吸综合征疫情,主要表现为25日龄断乳仔猪出现发热、采食量下降、扎堆、毛长、喘气等现象。为确定发病原因,将随机采集的血清样品165份送至国内某重点实验室进行猪瘟抗体、猪繁殖与呼吸综合征抗体和猪伪狂犬病野毒抗体检测,采集4份肺等病料对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒进行PCR检测,PCR产物送上海某公司进行基因测序。结果发现,送检的165份样品中,猪伪狂犬病gE抗体阳性率为0%、g B抗体阳性率为96.19%(101/105),猪瘟抗体阳性率为84.24%(139/165),猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率为92.73%(153/165);病原学检测结果显示,未检出猪瘟病毒、伪狂犬病病毒,但猪繁殖与呼吸综合征病毒的检出率达100%;测序结果表明,4个样品的PCR产物序列均与NADC30毒株的同源性高达92%～93%。结果提示,该场暴发PRRS是类NADC30毒株感染所致,可采取与类NADC30毒株同源性高的疫苗接种和提高生物安全防控水平等方式对该病进行科学防控。     

猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果探讨

将50只患普通型猪蓝耳病猪分成对照组和试验组,每组选定25只猪。试验组注射猪蓝耳病弱毒疫苗来治疗,对照组用口服补盐液和林可霉素来治疗。结果表明,对照组患病猪的治愈率为68.00%,试验组病猪治愈率则为88.00%,差异具有统计意义,说明可通过注射猪蓝耳病弱毒疫苗来预防猪蓝耳病,提高病猪成活率。     

猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病的疗效

目的:探究普通型猪蓝耳病应用猪蓝耳病弱毒疫苗注射治疗的效果,以便为临床工作提供指导.方法:选取2015年4月至2016年4月间120头普通型蓝耳病猪,按照体重差异分为三组,A组20头(低于30kg)、B组32头(30-50kg)、C组68头(高于50kg),三组均每日注射林可霉素的基础上给以蓝耳病弱毒疫苗注射一次,连续治疗10d为一个疗程,一个疗程后观察疗效.结果:A组(低于30kg)的总有效率为55.0%、B组(30-50kg)的总有效率为84.4%、C组(超过50kg)总有效率为91.2%.不同体重病猪治疗效果之间存在显著差异P<0.05.结论:猪蓝耳病弱毒疫苗注射在体重30kg以上病猪中治疗中具有较好应用效果,能够有效改善病猪临床症状,值得推广运用.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株的毒力评价

为了评估当前优势流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）NADC30-like毒株的毒力,试验利用经猪肺泡巨噬细胞分离的5个NADC30-like毒株接种6～7周龄健康易感猪,以进行毒力评价（A-E组）,并设立未攻毒阴性对照组（F组）。所有组攻毒后进行临床症状观察,并在第0、3、5、7、10、14和21天采集全血、咽拭子和肛拭子进行病毒载量检测。结果显示,除D组外其他攻毒组表现一过性体温升高,偶有到41℃,而D组在攻毒后第4～15天,该组试验猪平均体温均不低于40.5℃,体温显著高于其他攻毒组。病毒血症检测发现,除D组外,其他攻毒组在第3、5、7和10天均为核酸阳性,在第14天部分转为核酸阴性,但到第21天又转为阳性,而D组从攻毒到结束病毒血症始终为阳性。肛拭子和咽拭子病毒载量测定发现,除D组外,其他攻毒组在第3、5和7天均为核酸阳性,在第10、14和21天部分猪有时转为阴性,后又转为阳性;D组攻毒到结束肛拭子始终为阳性。从上述数据统计综合分析,结果表明D组所攻击的毒株毒力高于其他毒株,可引起3/5猪发病,且死亡一头,该毒株感染能产生PRRSV的典型临床症状,可初步用于NADC30-...     

用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果观察

目的:观察用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病的效果.方法:调查研究2012年5月~2015年3月期间发生的猪蓝耳病疫情,随机选取50头普通型猪蓝耳病猪进行研究观察,将其随机分为观察组25例和对照组25例.观察组采用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗,对照组则采用常规抗病毒治疗办法,对比两组的治疗效果.结果:观察组的治愈率高达92%,明显高于对照组的52%,对比差异显著(P<0.05),其中猪蓝耳病弱毒疫苗对于30kg以上病猪的效果更好.结论:用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果显著,建议推广普及.     

用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果观察

目的:探究猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病的效果.方法:选取60只病猪,随机分为实验组与对照组,猪血检验结果确诊为普通型猪蓝儿病,实验组31只,对照组29只.实验组应用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗,对照组在食物与水中添加口服补液盐,观察两组治疗效果.结果:实验组治愈率均在85％以上,对照组44.8％,实验组优于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果显著,不良反应少,值得采用.     

一株针对猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株GP5蛋白的单克隆抗体的制备及鉴定

为获得针对猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株GP5蛋白的单克隆抗体,采用表达纯化的PRRSV NADC30-like毒株的GP5蛋白按常规方法免疫小鼠,采用间接免疫荧光方法筛选出1株阳性杂交瘤细胞（命名为3E10）,经3次亚克隆后制备腹水并进行纯化鉴定。结果显示：该杂交瘤细胞连续传代20代后细胞上清液的IFA效价仍不低于1:40。纯化后的单克隆抗体腹水浓度为0.204 mg/mL,亚类鉴定为IgM,且未发现有中和活性。特异性检测显示3E10单克隆抗体能与2株PRRSV NADC30-like毒株发生荧光反应,而与4株高致病性PRRSV疫苗毒株、2株经典株PRRSV疫苗毒株以及CSFV、PCV2、BVDV及Marc-145细胞均无荧光反应,显示出较好的应用前景。     

湖南汨罗一例类NADC30-like和HP-PRRSV毒株混合感染致猪繁殖与呼吸综合征的诊断

为了查明湖南省汨罗县某猪场保育猪厌食、发烧、咳嗽、皮肤发绀导致其死亡的原因,试验采用临床症状观察、病理剖检、细菌的分离培养及RT-PCR检测等方法,结果发现送检病死保育猪发病是由猪繁殖与呼吸综合征类NADC30-like毒株和HP-PRRSV毒株混合感染所致,应采取相应的治疗及预防措施,防止该病的扩散.     

我国NADC30-like毒株流行现状 及猪繁殖与呼吸综合征防控策略再思考

猪繁殖与呼吸综合征病毒在我国流行已20余年,但其病原变异的复杂程度在进一步加大,流行程度也并未明显减弱,特别是2013年以来,NADC30-like毒株的出现导致了PRRS再次大范围的流行.需要特别注意的是,本次PRRS疫情的大范围流行是在高强度免疫弱毒疫苗的基础上发生的,这提醒有必要对PRRS的现行防控措施进行重新的梳理和反思.     

用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果观察

2010年5月以来,宜昌市普通型猪蓝耳病零星散发,通过对发病猪注射大剂量猪蓝耳病弱毒疫苗进行治疗,对30kg以上病猪的治愈率可达90.2％,收到良好效果.     

2006年夏江西蓝耳病流行毒株的分离及初步鉴定

2006年9月,江西省某猪场发生疫病,发病率为95%以上,死亡率高达70%。通过Marc-145细胞盲传,从该场病死猪脑和肺脏中分离到美洲型蓝耳病病毒,该蓝耳病分离毒株的ORF7核苷酸序列与其他6个发病猪场的蓝耳病病毒的同源性为99%以上,与美洲型蓝耳病标准毒株VR-2332的同源性为93.3%。根据流行病学调查、临床症状、病理变化和病原学检测结果,可以推断该场本次疫病的病原为美洲型蓝耳病病毒变异毒株,且与其他猪场流行的蓝耳病病毒应为同一流行毒株。     

猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病的效果分析

猪蓝耳病(普通型)为我国二类传染病,流行性高,容易侵害猪的呼吸系统,影响猪的繁殖功能,给猪养殖户带来严重的经济损失。猪蓝耳病弱毒疫苗可以治疗与预防该病的爆发,控制猪蓝耳病(普通型)疫情,保障养殖户的经济利益。论文将设定研究计划,分析研究过程,并得出相应的研究结果,最后根据数据对猪蓝耳病弱毒疫苗治疗的应用效果进行分析,旨在促进我国养殖业的科学发展。