灰毡毛忍冬工厂化快繁生产体系的建立及再生苗遗传稳定性的分子鉴定

 以灰毡毛忍冬（Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.）腋芽为材料,建立了一套适合工厂化 生产的离体再生技术体系。该体系包括腋芽诱导培养基MB + 1.0 mg · L^-1 6-BA + 0.2 mg · L^-1 NAA,继代 增殖培养基MB + 1.0 mg · L^-1 6-BA + 0.5 mg · L^-1 IAA 和MB + 1.5 mg · L^-1 6-BA + 0.8 mg · L-1 IAA 和生根 培养基1/2MB + 2.0 mg · L^-1 IBA + 0.2 mg · L^-1 IAA。分别从继代12、24、36 个月的再生植株中随机抽取8 株进行SRAP 分析其遗传的变化。在检出的147 条SRAP 条带中,继代12 个月的再生植株未发现变异, 继代24 个月的再生植株中有2 株发生变异,继代36 个月的再生植株中有4 株发生变异。结果表明,建 立的腋芽再生培养体系在一定继代周期内是稳定可靠的,适合灰毡毛忍冬的规模化生产。     

阿月浑子与黄连木的杂种果实发育及幼胚培养研究

 以阿月浑子与黄连木的杂种果实和杂种幼胚为试材,对果实生长发育规律及幼胚培养进行了研究,探讨了胚龄、培养基类型和6-BA浓度等对杂种胚培苗再生的影响。结果表明：（1）杂种果实的纵、横径生长呈“S”型曲线变化,果实鲜质量生长呈双“S”型曲线变化。（2）杂种胚的发育始于授粉后80 d,80 ~ 100 d是杂种胚败育的关键时期。（3）授粉后80 d的杂种幼胚难以成苗,授粉后100和120 d的杂种幼胚成苗率分别为37.04%和83.33%。（4）适宜杂种胚培苗增殖的培养基为：DKW + 2.0 mg · L^-1 6-BA + 0.05 g · L^-1 IBA + 0.3 g · L^-1 LH + 1.5 g · L^-1 PVP,增殖系数为3.47,苗高为3.32 cm。（5）适宜杂种胚培苗生根的培养基为：1/2WPM + 2.0 mg · L^-1 IBA + 0.05 mg · L^-1 NAA,生根率为80%。     

钙对水培大蒜光合特性和品质的影响

 在水培条件下,营养液设6个钙浓度（0、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 mmol · L^-1）,研究钙对大蒜光合特性、食用器官（蒜薹和鳞茎）钙含量及品质的影响。结果显示：蒜薹和鳞茎钙含量随营养液钙浓度的增加而增加;在钙浓度0 ~ 3.0 mmol · L^-1范围内,大蒜叶片色素含量、净光合速率（P_n）、蒸腾速率（E）及气孔导度（G_s）随钙浓度的升高而升高,而后则随钙浓度的升高而降低;蒜薹的鲜质量、直径及抽薹率和鳞茎的鲜质量及横径均随营养液钙浓度的升高而呈现先增大后减小的趋势,在3.0 mmol · L^-1钙浓度下最大;同时,蒜薹和鳞茎中大蒜素、可溶性糖、维生素C、游离氨基酸及可溶性蛋白含量的变化趋势也是先随钙浓度的升高而升高,而后随之下降,在3.0 mmol · L^-1钙浓度下达到最高值,比低钙浓度（1.0 mmol · L^-1）处理分别增加54.7%和72.1%、33.9%和33.9%、11.5%和5.2%、19.3%和21.5%、32.6%和29.6%。由此可见,水培条件下栽培大蒜的钙浓度以3.0 mmol · L^-1为好。     

大蒜未受精子房离体诱导单倍体的研究

 以苍山大蒜品种‘糙蒜’为试材,通过花茎离体培养获得发育健壮的花器官。以其未受精子房为外植体进行离体培养,研究不同培养基（MS、B5、N6）及外源植物生长调节剂对单倍体诱导的影响,以建立大蒜单倍体诱导体系。结果表明,诱导未受精子房产生愈伤组织的适宜培养基为B5 + 2 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,愈伤组织及雌核发育胚总诱导率可达12.24%;诱导愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为B5 + 3 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,不定芽分化频率可达46.15%;将不定芽转移至B5 + 0.05 mg · L^-1 NAA培养基中可诱导生根,发育成完整植株。以再生植株叶片为材料,采用流式细胞仪进行倍性鉴定,所得18株再生植株中有16株为单倍体植株。     

不同栽培密度和钾钠离子处理对基质培番茄产量与品质的影响

以优质番茄品种京采6 号为试材,研究了不同栽培密度（3.8、5.0 株 · m^-2）与离子处理（K⁺、Na⁺）对基质培番茄生长、产量与品质的影响,构建了番茄果实品质综合评价指数TQI。结果表明：提高营养液中的K⁺ 浓度,能够在不影响产量的同时增加番茄第2 穗果实可溶性糖、可溶性固形物、糖酸比和VC 含量;栽培密度对番茄产量和品质的影响较小;栽培密度× 离子互作显著影响了第1 穗果实有机酸、亚硝酸盐含量与糖酸比;第2 穗果是生产高品质番茄的关键,其在3.8 株 · m^-2与高K+ 营养液条件下可获得最高的TQI。综合来看,建议在实际生产中控制栽培密度为3.8 株 · m^-2,同时采用高K+ 营养液灌溉,可在稳产条件下获得高品质番茄。     

离体雌核发育诱导洋葱单倍体与植株再生

 以来自日本的3个中日照型洋葱（Allium cepa L.）杂交种的未开放花蕾为外植体材料,研究了2,4-D和6-BA浓度及配比对单倍体诱导培养的影响,以建立洋葱单倍体诱导技术体系。研究结果表明,含有1.5 mg · L^-1 2,4-D + 1.5 mg · L^-1 6-BA和2.0 mg · L^-1 2,4-D + 2.0 mg · L^-1 6-BA的B5培养基适于洋葱单倍体的诱导,诱导率最高达到4.00%。共获得了43枚雌核发育胚,雌核发育胚转移至不含激素的B5基本培养基中即可发育成完整植株,再生植株驯化移栽成活率达到100%。利用根尖染色体计数和流式细胞仪鉴定有42株是单倍体。     

PEG胁迫下褪黑素对生菜幼苗形态和生理特性的影响

以‘奥跃生菜’为试材,采用盆栽法,设置正常浇灌营养液（对照,CK）、根系浇灌含有100μmol·L^-1褪黑素的营养液（MT）、根系浇灌含有25%PEG的营养液（D）和25%PEG的营养液+根系浇灌含有100μmol·L^-1褪黑素的营养液（D+MT）4个处理,研究了PEG胁迫下褪黑素对生菜幼苗生长和生理特性的影响,以期为褪黑素在生菜中抗旱栽培的应用提供参考依据。结果表明：干旱胁迫下根施褪黑素生菜幼苗总根长、根体积、根表面积、根平均直径、地上地下部分干质量、根冠比、叶绿素相对含量显著增加（P<0.05）,叶片相对含水量也呈增加趋势,但差异不显著;同时干旱胁迫下褪黑素增加了生菜叶片实际光化学效率和光化学淬灭系数,降低了叶片PSⅡ的非光化学淬灭系数;除根系过氧化物酶（POD）活性外,干旱胁迫下根施褪黑素幼苗叶片和根系超氧化物歧化酶（SOD）活性、POD活性、可溶性蛋白质含量均升高;而丙二醛（MDA）含量下降;其中SOD活性差异在叶片和根系中均达显著水平（P<0.05）。因此,根施100μmol·L^-1褪黑素能够通过调...     

硫对大葱生长及氮硫同化关键酶活性的影响

 为探讨硫对大葱（Allium fistulosum L. var. giganteam Makino）生长及氮硫吸收同化的影响, 采用盆栽沙培方法,研究了0.01、2.01、4.01 和6.01 mmol · L^-1 不同供硫水平下‘天光’大葱的生长量、 植株氮硫含量及氮硫同化关键酶活性的变化。结果表明,适当提高供硫水平,可显著促进大葱生长,提 高植株氮、硫含量及产量和品质,硫水平过高,则大葱产量降低,品质下降。大葱叶片硫酸化酶（ATPS） 活性随硫水平的升高而降低,而乙酰丝氨酸水解酶（OASS）、硝酸还原酶（NR）、谷氨酰胺合成酶（GS） 活性在不同生长期的表现不尽相同,大葱生长前期,较高硫水平提高了NR 活性,但对GS 和OASS 活性 无显著影响;大葱生长中后期,适量提高供硫水平显著增强了OASS、GS 活性,但降低了NR 活性,表 明供硫水平可显著影响大葱对氮硫的同化利用。综合分析表明,大葱营养液硫水平以2.01 mmol · L^-1 较佳, 其产量较对照0.01 mmol · L^-1 增加19.13%,且综合品质显著改善。     

土壤高温处理对连作草莓根系呼吸代谢及植株发育的影响

为探讨草莓连作障碍机理,模拟太阳能消毒设置5个连作土壤高温灭菌处理,研究不同处理对草莓根系呼吸代谢及植株生长发育的影响。结果表明,连作土壤经高温灭菌后,各处理土壤中细菌和真菌数量都显著降低,经70℃高温连续20 d处理的土壤中真菌甚至消失,且对草莓根系呼吸代谢及植株发育的促进效果最明显;70℃高温连续10 d处理及55℃高温连续20 d处理对草莓植株生长、根系活力和根系总呼吸速率都具有不同程度促进作用,前者依然以PPP呼吸途径为主,后者的TCA呼吸途径是PPP呼吸途径的1.34倍;连作土壤55℃高温连续10 d处理作用效果最差。可见连作土壤高温灭菌后,土壤微生物数量减少,促进草莓根系呼吸代谢及植株生长,减轻了草莓的连作障碍,进而证明了土壤微生物是引起草莓连作障碍的重要因素之一。     

利用实时荧光PCR 方法检测香蕉软腐细菌

 由Dickeya spp.引起的香蕉细菌性软腐病是近年来在中国广东发生的一种严重危害香蕉的病 害,检测方法的建立和应用是防止病害传播和实时防治的重要手段。依据报道的Dickeya spp.通用引物, 建立了用于香蕉细菌性软腐病发病植株和带菌土壤检测的实时荧光PCR 方法。优化后的检测体系对香蕉 软腐细菌（XJ8-3-3）靶片段克隆质粒DNA 的检测灵敏度可达到2.4 × 10^-5 ng · μL^-1,对菌悬液的检测灵敏 度可达到4.0 × 10² cfu · mL^-1,而常规PCR 对其检测的灵敏度为2.4 × 10^-3 ng · μL^-1 和4.0 × 10⁴ cfu · mL^-1, 实时荧光PCR 的灵敏度比常规PCR 高100 倍。利用实时荧光PCR 能够快速的检出香蕉细菌性软腐病发 病植株和带菌土壤中的病原菌量,对梯度稀释的菌悬液接种的带菌土壤检测结果表明,可检测到病菌DNA 最低含量为0.35 pg · L^-1。该方法适用于对香蕉软腐病菌的检测和监控。     

铅胁迫下硒处理的彩叶草根系和叶片的SEM/XRD 光谱学分析

 以彩叶草（Coleus blumei Benth.）为材料,在含1.0 mmol · L^-1 Pb ²⁺ 的营养液中直接添加不同 浓度（0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 mg · L^-1）亚硒酸钠,利用X–射线衍射技术（XRD）和扫描电镜技术（SEM） 从光谱学角度初步探讨铅胁迫下不同浓度硒处理对彩叶草根系和叶片粉末的形态结构的影响。结果表明, 不同浓度硒对彩叶草根系和叶片粉末样品表面颗粒物微观形貌有较大影响,其中1.0 mg · L^-1 硒处理的 SEM 图中颗粒分布较其它浓度处理的均匀,结构紧密,成扁平褶状;XRD 衍射角向右移,强度、峰高、 峰面积和半高宽减小。这说明1.0 mg · L ^-1 的硒能降低溶液中铅的迁移和转化;颗粒的分布,衍射角的移 动,强度、峰高、峰面积和半高宽等变化说明彩叶草体内铅结合形态有所变化。     

多效唑在桃果实中的残留量评估

 为评估多效唑在桃园中使用的安全性,于2010-2011 年分别以3 个普通桃品种为试材,使用不同剂量（0.0375 ~ 0.225 g · m^-2）、不同浓度（500 ~ 1 500 mg · L^-1）多效唑进行土壤施入或叶面喷施,利用气相色谱-三重四级杆串联质谱仪（GC–MS–MS）对成熟桃果实中的多效唑残留量进行了测定。结果表明,仅在大棚桃试验中的1 个较高浓度叶面喷施处理（1 250 mg · L^-1 喷施2 次）的桃果实中多效唑残留量超过0.5 mg · kg^-1,其它处理的残留量均小于0.5 mg · kg^-1,其中大部分土施处理的残留量低于0.05mg · kg^-1。如果以最大残留量 ≤ 0.5 mg · kg^-1（欧盟现行桃残留限量标准）为标准,按树冠投影面积,土壤施入0.0375 ~ 0.225 g · m^-2 等不同剂量,桃果实中多效唑残留量不超标;在露地条件下叶面喷施浓度不超过1 500 mg · L^-1,在大棚条件下浓度不超过1 000 mg · L^-1,喷施次数不多于2 次,果实中多效唑残留量也不超标。     

草莓连作土壤灭菌与施用有机肥对根际土壤酚酸及土壤酶活性的影响

针对草莓连作土壤灭菌后与正茬相比草莓植株根系生长受到抑制,研究了连作土壤灭菌与施用不同种类肥料对草莓幼苗（移栽60 d后）根系分泌酚酸及土壤相关酶活性的影响。结果表明：连作土壤灭菌与施用有机肥料处理显著提高了草莓植株根际土壤中酚酸的含量,其中施用蚯蚓粪（经蚯蚓食用处理的牛粪）的增幅显著低于施用牛粪。土壤灭菌处理后施加不同肥料,土壤多酚氧化酶活性均能较快恢复;有机肥较无机肥能显著促进过氧化氢酶活性的恢复;蚯蚓粪较牛粪和无机肥能显著促进土壤脲酶活性的提高;土壤蔗糖酶受土壤灭菌影响显著降低且施加不同肥料对其没有显著地影响。综上所述,对于草莓连作土壤,无论灭菌与否,施用蚯蚓粪较牛粪能减轻连作障碍中的酚酸化感效应,促进脲酶等土壤相关酶活性提高,是缓解连作障碍及连作土壤灭菌对草莓植株生长发育影响的有效措施。     

叶面施硒对甜柿果实品质及重金属含量的影响

 以‘阳丰’、‘兴津20’和‘次郎’甜柿为试材,分别用0、50、100、150、200 mg · L^-1 浓 度的亚硒酸钠进行叶面喷施,研究硒和重金属镉、铅、汞在甜柿机体内的积累情况以及硒对果实品质的 影响,探明硒对镉、铅和汞的互作效应,以期为叶面施硒改善甜柿果实品质提供理论依据。试验结果表 明：硒处理浓度以150 mg · L^-1 为最佳;甜柿叶片和果实中的硒含量随施硒浓度的增大而增大;在0 ~ 150 mg · L^-1 范围内随着外源硒浓度的增大,叶片和果实中的镉、铅、汞含量下降,果实中可溶性糖、维生素 C 和可溶性固形物含量上升,可滴定酸含量下降;施硒浓度达到200 mg · L^-1,叶片和果实中重金属含量 上升,果实品质下降;叶面喷硒可明显抑制3 种甜柿品种中镉、铅、汞的含量,并且对‘兴津20’的镉、 汞含量的抑制幅度最大,对‘次郎’中的铅含量抑制幅度最大。‘兴津20’综合表现优于‘次郎’和‘阳 丰’。     

陕西渭北红富士苹果园土壤有效养分及长期施肥对产量的影响

 调查了陕西渭北地区915 个盛产期红富士苹果园的土壤有效养分、全年施肥和产量情况, 并在合阳县1 个果园通过8 年定位试验研究了长期施用氮、磷、钾肥对苹果产量、单果质量的影响及肥 料农学效率和肥料贡献率的变化。结果表明,土壤碱解氮、速效磷、速效钾含量的平均值分别为60.1 mg · kg^-1、17.7 mg · kg^-1 和173.0 mg · kg^-1,有机质含量为12.6 g · kg^-1,最高分布频率的土壤养分分布范围 分别为碱解氮40 ~ 60 mg · kg^-1,速效磷10 ~ 20 mg · kg^-1,速效钾150 ~ 200 mg · kg^-1,有机质10 ~ 15 g · kg^-1。 碱解氮和速效磷含量与苹果产量的相关性分别达到极显著和显著水平,土壤速效钾和有机质含量与产量 的相关性不显著。果园氮、磷、钾肥平均用量分别为纯N 454.5 kg · hm^-2、P2O5 327.7 kg · hm^-2、K2O 313.2 kg · hm^-2,有机肥平均用量4.7 t · hm^-2;纯N、P2O5 和K2O 用量均为200 ~ 400 kg · hm^-2 的分布频率最高, 仅26.6%的果园施用有机肥。氮、磷、钾肥用量与苹果产量和土壤速效氮、磷、钾含量具有极显著或显著 相关性。在高产年份、中产年份和低产年份,氮肥对苹果产量、单果质量的影响效果及其农学效率和肥 料贡献率均大于磷和钾肥。对苹果产量的影响,高产年份磷肥显著大于钾肥,中、低产年则无显著差异。 对单果质量的影响效果,高产和中产年份磷肥和钾肥无显著差异,低产年份钾肥显著大于磷肥。氮、磷、 钾肥的农学效率和肥料贡献率,在高、中产年份为氮 > 磷 > 钾,低产年份为氮 > 钾 > 磷。     

4 种诱抗剂诱导番茄抗晚疫病的初步效果

为了明确苯并噻二唑、香菇多糖、几丁聚糖和氨基寡糖素对番茄晚疫病（Phytophthora infestans）的作用效果,测定了这4 种诱抗剂对番茄晚疫病菌的抑菌活性,并通过盆栽和田间试验明确了4种诱抗剂对番茄晚疫病的诱导抗性。抑菌活性测定结果表明：4 种诱抗剂在不同浓度下的抑菌效果普遍低于30%,无明显的杀菌活性。盆栽试验结果表明：不同浓度的4 种诱抗剂对苗期番茄晚疫病的诱导抗病效果良好,其中500 mg·L^-1 的2% 几丁聚糖水剂（AS）诱导抗病效果最佳,为90.06%。田间试验结果表明：不同浓度的4 种诱抗剂对成株期番茄晚疫病的诱导抗病效果均超过了70%（除125 mg·L^-1 的2% 几丁聚糖AS 处理外）,效果较好的为50 mg·L^-1 的1% 苯并噻二唑水乳剂（EW）和100 mg·L^-1 的3% 氨基寡糖素AS,诱导抗病效果分别为94.71% 和95.89%。     

番茄品种与砧木苗期耐盐性指标评价及耐盐品种筛选

为了筛选出耐盐的番茄品种和砧木品种,确定番茄幼苗的可适应盐浓度、筛选强度和可用于鉴别番茄苗期耐盐性的指标,试验以19 个番茄栽培品种和3 个砧木品种为试材,在苗期浇灌不同盐浓度的营养液,对幼苗生长等相关指标进行测定并进行相关分析。结果表明佳西娜（产地荷兰,樱桃番茄,红果）和瑰丽绝粉（产地甘肃,大果,粉果）为耐盐的番茄品种,番茄砧木406（产地山东,大果,红果）为耐盐的番茄砧木品种。在每隔2 d 1 次的灌溉强度下,番茄苗期可适应盐浓度为4 g·L^-1,筛选强度为8 g·L^-1。可以作为鉴别番茄幼苗耐盐性的指标为全株干质量、地上部干质量、根干质量、株高、茎粗、功能叶片数和壮苗指数,而根冠比则不可作为番茄幼苗耐盐性的鉴别指标。     

5–氨基乙酰丙酸促进桃果皮提前着色机制研究

 在‘早白花’桃果实着色前,用300、100和50 mg · L^-1的5–氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid,ALA）溶液涂布果实。结果表明：ALA处理可促进果皮提前着色,促使果实提前成熟,且以300 mg · L^-1效果最为明显,比对照早约5 d。ALA处理还显著促进了UFGT、DFR、LDOX和CHS的提前表达,并且基因表达水平与花色素苷的积累趋势具有很好的一致性。据此推测ALA可能参与了桃果实成熟以及花色素苷合成的调控,对果皮花色素苷提前合成具有促进作用。     

大白菜、青花菜和叶用芥菜体细胞杂交种形态学与细胞学特性鉴定

 为拓宽十字花科蔬菜育种种质资源,以大白菜（Brassica campestris L. ssp. pekinensis）、青花菜（B. oleracea L. var. varitalica）和叶用芥菜（B. juncea L. Czern）的子叶、下胚轴为材料,分离、纯化原生质体,采用40% 聚乙二醇（Polyethylene glycol,PEG）融合法进行原生质体融合。融合细胞在附加0.2 mg · L^-1 2,4-D + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 0.1 mg · L^-1 激动素（kinetin）的改良K8p培养基中液体培养,当细胞分裂至8 ~ 10细胞期时,将分裂的细胞包埋于0.15%琼脂糖,然后在添加0.3 mol · L^-1蔗糖和2 mg · L^-1 6-BA + 2 mg · L^-1 玉米素（zeatin）+ 1 mg · L^-1 NAA + 0.5 mg · L^-1 kinetin的Kao培养基中诱导愈伤组织。将培养获得的936个愈伤组织转到3种不定芽诱导培养基MS + 5 mg ? L-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 2 mg · L^-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.5 mg · L^-1 NAA上诱导芽分化,当芽长3 cm左右时,转到1/2 MS + 0.2 mg · L^-1 NAA的生根培养基上诱导生根,共获得了96株再生植株,对其进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定。形态学观察显示再生植株表型变化大,包括3个亲本的中间型或两个亲本的中间型;PCR技术鉴定结果显示96株杂种植株中93株为细胞质雄性不育特性;染色体计数显示,再生的植株染色体数变化范围广（2n = 38 ~ 64）,但未发现染色体数总和与3种融合亲本染色体数总数（2n = 74）相一致的个体。基因组原位杂交（Genomic in situ hybridization,GISH）和扩增片段长度多态性（Amplified fragment length polymorphism,AFLP）分析结果表明,再生植株基因组中分别检测出大白菜、青花菜、叶用芥菜的DNA片段,证实了大白菜、青花菜、叶用芥菜种间体细胞杂交种的真实性。