观赏桃未成熟胚子叶再生植株的研究

为了建立观赏桃的组织培养体系,加快观赏桃的育种进程,以观赏桃品种‘合欢二色’盛花后70d未成熟胚子叶为外植体,探讨了不同消毒方式、不同植物生长调节剂、不同时间的低温暗培养等因素对胚子叶再生的影响情况。结果表明:对子叶的最佳消毒方式是先用75%的酒精消毒30s,然后用0.1%的升汞消毒6min,污染率可控制在16.67%,成活率最高达65.13%;诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA0.2mg·L^-1,出愈率最高为92.5%;最适不定芽分化培养基为1/2MS+6-BA0.5mg·L^-1+IBA0.3mg·L^-1,不定芽分化率最高为34.4%;低温暗培养可促进不定芽的生根,暗培养14d时不定芽的生根率为21.4%。     

牡丹江玉米自交系幼胚愈伤组织诱导的研究

以牡丹江地区4个不同基因型玉米幼胚为材料,对影响诱导愈伤组织的几个重要因素进行研究。结果表明,对于同基因型的玉米愈伤组织的诱导,不同培养基诱导出胚性愈伤组织有明显的差异;玉米幼胚的愈伤组织诱导是较普遍的,但不同基因型诱导率是不同的;培养基中的激素配比对胚性愈伤组织诱导率有很大影响,2,4-D是非常有效的诱导愈伤的激素;幼胚的大小影响玉米愈伤组织的诱导,但盾片的放置位置并不影响其诱导。     

香樟未成熟合子胚体胚发生及植株再生研究

以香樟的未成熟幼胚为外植体进行诱导体胚发生影响因素的研究.成功地从香樟幼胚中诱导出胚状体并获得再生植株,MS为基本培养基,蔗糖是最佳的碳源.经2年对初生胚的继代培养,获得胚性愈伤组织;胚性愈伤组织经体胚诱导、体胚成熟、体胚萌发3个过程的诱导后能够获得再生植株.     

桂花幼胚培养及愈伤组织增殖诱导

采用不同培养基对桂花胚的培养进行了试验研究,结果表明:MS 1-1.5 mg.L-16-BA有利于桂花幼胚的萌发;MS 2 mg.L-16-BA 0.3 mg.L-12,4-D有利于幼胚苗的幼叶愈伤组织的诱导,诱导率高,且质地致密;B5 1.5 mg.L-16-BA 0.05 mg.L-1NAA有利于幼胚苗基部产生的愈伤组织的增值诱导,所形成的新愈伤组织呈淡绿色,且质地致密,生长很好,并能分化出根。     

3种牡丹的胚培养及植株再生研究

以牡丹胚为外植体,研究了不同牡丹的胚在不同培养条件下,愈伤组织和丛生芽的诱导、芽的生长及生根情况。结果表明:适合牡丹无性系建立的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+Vc100mg/L;适合3种牡丹胚生长的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+CH100mg/L;适合3种牡丹丛生芽产生的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+CH100mg/L;适合3种牡丹生根的最佳培养基为1/2MS+IAA1.0mg/L+IBA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,其中,朝霞生根效果最佳,生根率可达82.35%。     

樟树胚萌发早期影响因素及植株再生

【目的】植物体细胞胚胎发生和植株再生受多重因素影响。为了完善樟树体细胞胚胎发生培养技术,提高其遗传转化效率,满足樟树用材的需要。【方法】本研究以樟树未成熟种子为试材,探讨了预处理、不同采种时间、活性炭、肌醇及激素浓度对樟树胚萌发早期的影响,并对不同种源樟树胚性愈伤组织诱导体细胞胚胎发生、分化、生根等进行研究。【结果】预处理对樟树幼胚萌发无显著性影响;不同的采种时间对胚萌发率和平均出芽数影响很大;随着活性炭浓度的升高,胚萌发率呈现先升高后下降的趋势;肌醇浓度对樟树幼胚萌发率和平均出芽数均无显著性影响;对6-BA、NAA、IBA和链霉素进行正交设计试验,其影响的主次顺序为:6-BA> NAA>链霉素> IBA;长沙和郴州种源樟树胚性愈伤组织诱导率最高,达66.67%,但生长情况最好的是长沙和岳阳种源胚性愈伤组织;岳阳、郴州、醴陵、长沙、怀化、娄底愈伤组织诱导体胚发生最大诱导率分别为56.41%、42.31%、48.96%、64.71%、63.25%、56.31%;各种源樟树生根率良好,长沙种源有最高生根率89.25%,郴州和醴陵种源樟树最佳生根激素配比为1 mg/L IBA+0.1 mg/L IAA,其余种源生根最适激素均为1 mg/L IBA+0.1 mg/LNAA。【结论】浸泡处理不利于幼胚后期生长发育;附加150 mg/L的活性炭,培养基褐化率较低;6-BA对幼胚早期萌发占主导作用;实验时选择7月未成熟合子胚的长沙种源樟树最佳。     

云南松成熟胚的离体培养

采用云南松(yunnanensis)成熟胚为外植体,培养室温度为25±4℃,培养基的蔗糖浓度为8％。以 1／2MS为基本培养基,在BA0．5-2．0mg／L+NAA0．5-1．5mg／L的激素配比范围内,可诱导离体胚产生愈伤组织及不定芽。外植体愈伤组织的诱导率达80％,由愈伤组织诱导不定芽,其分化率达17．8％。研究结果表明,激素的种类和浓度对外植体愈伤组织及不定芽的诱导起主要作用。     

七叶树胚的离体培养及植株再生

为给七叶树快繁体系的建立和大规模工厂化生产提供理论基础,以七叶树成熟胚为材料,研究不同激素配比条件下离体胚的生长、愈伤组织的诱导、再分化及植株再生.结果表明,适宜胚生长的培养基为不添加任何植物激素的1/2MS,适宜愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L;适宜愈伤组织分化的培养...     

火炬松胚性愈伤组织的诱导及体胚的形成

实验表明，火炬松以种胚诱导愈伤组织，一年中７月份是球果的最佳采集期。５月份获得的种胚未诱导出愈伤组织，６、７、８月份的诱导率分别为５５．０％、８８．０％和６６．０％。愈伤组织进行悬浮培养，观察到体胚形成。     

水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料,在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明,附加了5.0 mg·L^-1 NAA和2.0 mg·L^-1 6-BA的激素配比的MS培养基,为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基;在5种不同的外植体中,成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体;在诱导胚性愈伤组织中,成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中,WPM为最佳基础培养基,附加0.1 mg·L^-1 6-BA和0.15 mg·L^-1 2,4-D的激素配比,胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中,MS培养基内添加1.0 mg·L^-1 ABA时,体胚的诱导率最高,达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^-1 IBA和1.0 mg·L^-1 IAA的激素配...     

大果榉未成熟胚愈伤组织的诱导和植株再生

将大果榉的未成熟胚培养在不同植物激素种类和浓度的术本植物培养基(WPM)上产生愈伤组织,然后将愈伤组织接种在芽的诱导培养基上形成不定芽,不定芽在生根培养基上生根形成完整植株．结果表明:大果榉愈伤组织诱导的适合培养基为WPM附加BA 1．0 mg·L-1+NAA 1．0 mg·L-1,诱导事为59．1％;不定芽的分化培养基为在WPM+NAA 0．5 mg·L-1+6．BA 2．0 mg·L-1,不定芽的诱导率为71．1％,在WPM+BA2．5 mg·L-1+NAA1．0 mg·L-1的培养基种芽分化的平均数未为5．21±1．02;生根培养基以WPM+0．1 mg·L-1 IBA的效果量好,生根率可达63．33％,平均最多生根条数为．再生植株在温室适应培养的存活率为92％．     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

枇杷成熟子叶及叶片不定芽再生研究

枇杷(Eriobotrya japonica)是原产我国的特色树种,我国南方主要果树之一,栽培面积已达10万hm2以上,产量已达30万t以上(林顺权等,2004),超过世界总产量的70%(刘国强等,2000),因此有关枇杷的研究主要集中在我国.研究分别采用茎尖(杨永清等,1983;万志刚等,2000)、胚(王家福等,2000)、胚乳(彭晓军等,2002)、原生质体(林顺权等,1994;1996;1997;Lin et al.,1995)等类型,其中茎尖培养较为成功,胚乳培养最高再生率为18.04%(彭晓军等,2002),胚培养多用于种质资源保存(王家福等,2000).枇杷离体再生目前存在外植体类型单一且再生率低下、培养难度较大等问题,国内外可供参考的研究也较少,建立枇杷离体再生体系难度较大,已成为限制枇杷现代生物技术育种的因素之一,现今未见任何有关枇杷基因转化的报导与此是分不开的.因此有必要进一步拓宽外植体类型,进行其再生系统研究.本研究利用成熟种子子叶及种子苗叶片,试图建立其再生体系.作者在枇杷组织培养中做了大量尝试,多数研究毫无进展,本文所报道的试验结果,实现了成熟子叶和叶片(即使是种子苗叶片)再生报告零的突破,为今后枇杷种子诱变育种获得再生植株以及遗传转化工作打下基础.     

日本落叶松体细胞胚胎发生的研究

日本落叶松日永 10、日永 6 9和日草 34三个优株 ,将其未成熟种子和成熟种子的胚及成熟种子萌发的胚根、胚轴和绿色愈伤组织 5种外植体进行体细胞胚胎发生的试验 ,其中只有未成熟胚诱导出胚性愈伤组织 ,筛选出1)胚性愈伤组织诱导培养基 :S培养基 6_BA 0 5mg·L- 1 KT 0 5mg·L- 1 2 ,4_D 1 0mg·L- 1 ;2 )胚性愈伤组织保持与增殖培养基 :S培养基 6_BA 0 2 5mg·L- 1 KT 0 2 5mg·L- 1 2 ,4_D 0 1mg·L- 1 ;3)成熟体细胞胚诱导培养基 :S培养基 ABA 15mg·L- 1 PEG4 0 0 0 10 0g·L- 1 。以上 3种培养基均需附加蔗糖 30g·L- 1 ,谷氨酰胺 4 5 0mg·L- 1 ,水解酪蛋白 5 0 0mg·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。 4 )体细胞胚萌发培养基 :S培养基 ,不加任何激素 ,附加蔗糖 2 5g·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。     

离体条件下西黄松成熟合子胚不定芽的诱导及植株再生

以西黄松成熟胚为外植体诱导不定芽,在GD 9.85～19.70 μmol·L'-1 6-BA 0.0～14.42 μmol·L-1 NAA上不定芽诱导率最高达65.8%,平均增殖率为7,最大增殖率达10;不定芽形成有2种途径,即子叶直接形成不定芽和子叶组织再分化形成不定芽;NAA不利于外植体不定芽的诱导;不定芽的生长和扩繁采用不加生长调节剂的1/2 GD和1/2 SH培养基;培养基中加入适量的活性炭有利于不定芽和根的生长.不定嫩梢在1/2 GD和1/2 SH附加不同浓度NAA和GA,3的培养基上进行生根诱导,试验结果表明:NAA对不定根的形成起主要作用,在1/2 GD 28.84 μmol·L'-1 NAA 4.17 μmol·L'-1 GA,3培养基中不定梢的生根率为16.7%.在离体培养条件下,以西黄松成熟胚为外植体获得了再生植株.     

杂种落叶松未成熟胚的体细胞胚发生和植株再生

以未成熟合子胚为外植体,建立杂种落叶松胚性愈伤组织诱导和植株再生体系.从日本落叶松5×长白落叶松77.3和日本落叶松5×兴安落叶松9两个家系诱导出胚性愈伤组织,授粉后65天左右采集的合子胚在添加0.5 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 KT的S培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,为10%.从胚性愈伤组织中筛选出3个具有稳定分化能力的胚性细胞系,其中授粉后65天采集的日本落叶松5×长白落叶松77-3合子胚诱导的胚性细胞系的每克胚性愈伤组织形成的体胚数、体胚萌发率、植株再生率最高,分别为18.1个,77.O%,28.1%.再生植株的移栽成活率为41.8%.     

梨不同杂交和自交组合幼胚组织培养的研究

以新高×翠冠等10个杂交梨组合和新高×新高等3个自交梨组合的未成熟种胚为试材,诱导、分化和生根培养基皆采用1/2MS为基本培养基,附加0.5 mg·L-1的6-BA激素进行纯胚或非纯胚组织培养,研究不同组合的生长进程和生长状态.结果显示,杂交组合的幼胚接种3～6 d后开始萌发,萌发2～16 d后为出芽高峰期,出芽2～7 d后生根;自交组合的幼胚则在接种10～16 d后才开始萌发,萌发20 d左右才生根出芽,明显表现出杂交组合幼胚组培生长力较自交组合强,即体现了杂交优势;另外,杂交组合新高×翠冠和爱宕×翠冠在该种培养条件下生长最佳,移栽成活率达100%.     

黑松未成熟胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以未成熟合子胚为外植体,建立黑松体细胞胚胎发生和植株再生体系。研究基本培养基、2,4-D和6-BA对胚性愈伤组织诱导的影响,探讨ABA和PEG对体细胞胚成熟及植株再生的影响。结果表明:在添加4mg·L-12,4-D+2mg·L-16-BA的DCR培养基上胚性愈伤组织诱导率为3.33%;在添加30mg·L-1ABA+25g·L-1PEG的培养基DCR上,每克愈伤组织体细胞胚数量达72个,体细胞胚的萌发率为63.8%、植株转化率为43.5%,高质量的黑松体胚能提高体胚萌发率和植株转化率,再生植株1个月移栽成活率为50%。该研究可为抗病黑松的快速大规模繁殖提供一条新途径。