铜缺乏奶牛肝脏金属硫蛋白的电泳特征

本实验选择铜缺乏区有明显临床症状的奶牛 6头 ,采集肝脏样品后用差速离心法分离肝脏金属硫蛋白 (MT) ,以Sephadex-G75进行柱层析纯化 ,将纯化后的 MT进行 SDS-PAGE不连续电泳 ,并作考马斯亮兰染色及扫描分析。将 6头健康奶牛的肝脏样品作为对照。实验结果表明 ,健康奶牛肝细胞浆 MT经不连续 SDS-PAGE电泳时可出现两条清晰的区带 ;发病奶牛的 MT除表现条清晰区外 ,同时在负极端条带前后位置均出现较为明显的杂带。发病奶牛的区带 及区带 的含量均显著大于健康奶牛。结论 :铜缺乏能够改变奶牛肝脏中 MT的代谢     

铜缺乏奶牛神经递质酶的组化特征

为探讨铜缺乏对奶牛大脑、小脑及脊髓乙酰胆碱酯酶(ACHEase)组化特征(分布特点及活性)的影响.本实验选择铜缺乏症高发区自然发病的奶犊牛6头.剖杀后采集大脑、小脑、脊髓作冰冻切片及酶组化染色.以6头同年生健康奶犊牛为对照.实验结果表明.发病奶牛大脑、小脑及脊髓中ACHEase计数值均显著低于对照组奶牛(P(0.05);除大脑外,铜缺乏奶牛脊髓上小脑中ACHEase的扫描值也显著低于对照组(P(0.05);发病奶牛组织中ACHEase酶颗粒的分布也发生特征性的变化.结论:神经递质酶活性的改变是导致奶牛铜缺乏症病理过程的重要原因.     

兔肝金属硫蛋白提取工艺研究

研究提取液Tris-HCl的浓度、pH、加热温度和时间对兔肝金属硫蛋白提取的影响,并用正交试验优选出最适提取条件,为兔肝金属硫蛋白的研究提供一种新的提取技术。结果表明,Tris-HCl的浓度对金属硫蛋白的提取效果影响最大,pH和加热时间次之,温度对其影响最小。金属硫蛋白的合适提取条件为Tris-HCl的浓度0.01mol/L,pH 8.2,热处理温度80℃,加热时间8min。     

金属硫蛋白应用研究进展

金属硫蛋白是一类低分子质量、高巯基含量、能结合金属离子具有独特性能的蛋白质。金属硫蛋白具有强烈的消除自由基的作用,可作为营养添加剂单独使用,或与GSH、VC、VE等配合使用,同时具有抑制脂质过氧化损伤、保护细胞、降低血液粘度、改善血液循环和提高机体免疫等多种生物功能。文章主要阐述了MT在吸收及动力学、医学、化妆品、保健食品中的应用研究。     

金属硫蛋白在动物营养学上的应用

综述了金属硫蛋白（MT）在动物的健康、疾病以及生长性能等方面的重要作用。MT能参与畜禽体内微量元素Cu、Zn等的代谢，可利用MT来评价动物机体Zn的营养状态；MT具有抗应激的作用，MT有重金属解毒作用，在高铜、高锌日粮的促生长机理中发挥重要作用；MT促进动物机体生长发育，此外．MT在Se对动物机体的各种生理作用中发挥重要作用。     

镉暴露家兔睾丸和肝脏中小分子金属结合蛋白的分离与比较

 【目的】通过对镉暴露家兔睾丸和肝脏中小分子金属结合蛋白分离与比较,揭示动物睾丸组织镉高敏感性的机制。【方法】6月龄雄性青紫兰家兔经皮下染镉,9 d后将兔子杀死,制备睾丸和肝脏匀浆超离上清液,用Sephadex G-75凝胶层析法进行蛋白分离,经双波长（280 nm和254 nm）测定紫外吸收和原子吸收分光光度法测定Cd、Zn元素含量两种方法确定洗脱液小分子量金属结合蛋白峰管;通过试验比较它们的紫外扫描特性、热稳定性、镉锌元素比值和氨基酸组成。【结果】肝脏分离蛋白分子量为6.0～10.0 kD,有254 nm特征紫外吸收峰,OD250nm/OD280nm的值为13.13,有较好的热稳定性,不被无水乙醇抽提,每摩尔物质中Cd与Zn的摩尔比为4.7﹕2,半胱氨酸相对比例为32.89%、不含芳香族氨基酸、氨基酸组成与MT的理论值非常接近。睾丸分离蛋白无254 nm特征紫外吸收峰,Cd结合能力低,半胱氨酸相对含量只有2.36%,氨基酸组成与MT的理论组成相差较大。【结论】雄性动物睾丸对镉暴露敏感性高的原因是睾丸中不能被诱导产生能够拮抗重金属镉毒性作用的特殊蛋白质——金属硫蛋白。     

猪金属硫蛋白抗体的制备

以自猪肝提取的金属硫蛋白（MT）与牛备清白蛋白（BSA）偶联物为抗原,免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体。结果表明：加强免疫间隔时间10d，MT首次免疫量保持在16-32μg／只，加强免疫时用量依次加倍，其免疫效果最佳，可使大部分小鼠抗血清效价达到1：16以上。随后．将这部分抗血清IgG提纯并达到电泳纯，经直接ELISA鉴定其确为猪MT的特异性抗体．表明可用于酶标记方法检测猪MT。     

金属硫蛋白的检测方法及其应用

金属硫蛋白(MT)是一种普遍存在、富含金属和半胱氨酸的低分子量蛋白质,主要包括Ag、Au、Bi、Cd、Hg、Zn等硫蛋白,MT具有在体内可被金属和其他因素诱导合成的生物学特性。ELISA以其灵敏度高、特异性强且测定相对迅速、方便、无需特殊昂贵的仪器设备、无放射性同位素的污染等特点成为MT定量检测的理想方法。MT在与金属有关的动物机体的生理学研究、某些微量元素营养性缺乏症的诊断、治疗以及保护环境等方面起着重要作用,随着对MT研究的日益深入,不断对ELISA方法的改进,利用ELISA检测MT有着广阔的前景。     

柽柳金属硫蛋白基因的克隆及分析

应用生物信息学技术从柽柳cDNA文库中分离出了一种金属硫蛋白全长cDNA序列,去除PolyA后该基因全长517bp。其中,5′非翻译区31bp,3′非翻译区267bp,开放读码框(ORF)长219bp,编码72个氨基酸,含13个半胱氨酸Cys,分布在蛋白质的N端和C端,呈CXC形式排列,基因编码蛋白的分子量为7.1kD,等电点为4.71。疏水性分析表明,蛋白的30～50个氨基酸之间有较强的疏水性,经过Pfam15.0(St.Louis(USA))分析证明,为金属硫蛋白家族基因。金属硫蛋白基因参与了植物的发育、胚胎发生、抵抗逆境胁迫等多种生理过程,是一种重要的功能基因。此基因的Genbank登录号为AY620987(基因),AAT39518(蛋白)。     

高产奶牛泌乳初期能量需要的研究

试验研究高产奶牛泌乳初期能量的需要。选取体重、胎次、泌乳日龄和产奶量基本相同的健康荷斯坦奶牛20头,随机分成5组,每组4头,每组分4个重复,每个重复1头。A组为添加脂肪300 g;B组为添加脂肪450 g;C组为添加脂肪600 g;D组为添加自制脂肪450 g;E组为对照组。预饲期17 d,试验期3 d。加300 g脂肪酸钙的A组增奶效果差异显著(P<0.05)。加300g脂肪酸钙的试验组增加产奶量12.5%(P<0.05)。添加玉米油脂肪酸钙450 g增加产奶量16%(P<0.05)。结果表明,玉米油的性能优于其他脂肪酸钙。添加过瘤胃脂肪使乳脂率显著提高12.5%￣16.28%(P>0.05)。随着添加过瘤胃脂肪量的增多,乳蛋白有升高的趋势(P>0.05)。     

用奶牛乳房性状预测产奶量的研究

选择西安市草滩农场第四奶牛场第二泌乳期的奶牛 30头 ,测定乳房宽、乳房深、乳房长、乳房围、乳静脉直径、体长、体高、胸围、胸深、十字部高、腰角宽、尻长和 30 5 d产奶量 ,经相关系数分析 ,剔除了与 30 5 d产奶量相关不显著的体尺指标 ,以前 5项乳房性状为自变量 ,以 30 5 d产奶量为因变量 ,采用通径系数分析方法 ,计算了各自变量对依变量的通径系数 ,用多元回归分析方法 ,经统计检验后保留作用大的自变量 ,最后建立了 R=0 .930 6的“最优”回归方程。经对 30头奶牛 30 5 d产奶量进行估测 ,所得估测值与实际值的均数经差异显著性检验(t检验 ) ,差异不显著 (P>0 .0 5 )。     

奶牛育种中的遗传进展

分别采用直接回归法、公牛加权均值回归法、最小二乘回归法和BLUP回归法,对福建省南平市2个奶牛场的305d 胎产奶量遗传进展进行了评估.结果表明:整个16a期间平均遗传进展为60kg左右,约为均值的1.34%(前8a为26-35kg,约为均值的0.68%-0.89%;后8a为96-131kg左右,约为均值的1.97%-2.73%).16a间的平均世代间隔是:父-女6.59a,母-女5.94a,平均6.26a.由于评估遗传进展的需要,同时采用父系半同胞相关法对奶牛305d 胎产奶量遗传力进行了估计,其遗传力为0.29.     

黑龙江省主要栽培的豆科牧草对奶牛的营养价值评价

对常见的14种豆科牧草的常规营养成份测定及用尼龙袋法测定的干物质在瘤胃72 h降解率(RD-MD)的测定。结果表明,用营养成份和RDMD等指标进行评定,豆科牧草以蔓生野生大豆和无蔓野生大豆(Glycine max L.)的营养价值最高,全能苜蓿、草原2号苜蓿、直立黄花苜蓿(Astragalus adsurgens)和胖多苜蓿(Medicago sativa L.)次之。沙打旺(Astragalus adsurgens)、图牧2号苜蓿、草原1号苜蓿居中,大叶苜蓿、黄花草木樨(Melilotus officinalis L.)和特克苜蓿RDMD最低。2)豆科牧草RDMD与CP含量呈极显著正相关(P<0.001)。利用回归方程可以用CP来预测豆科牧草的RDMD。3)应用DMI、NE估测模型计算了各种豆科牧草的GI值并参照豆科牧草质量分级标准对本研究测定的豆科牧草等级进行划分,属于特级的有无蔓野生大豆,属于一级的有全能苜蓿、属于二级的有草原2号苜蓿,属于三级的依次有野生大豆(蔓生)、草原1号苜蓿、胖多苜蓿、日本紫花苜蓿、图牧2号苜蓿、直立黄花苜蓿和沙打旺。属于四级的有特克苜蓿、大叶苜蓿和黄花草木樨。4)用单一的营养指标如化学成分、干物质降解率均不能准确地评价牧草的营养价值。只有综合考虑DMI、养分含量、消化率和有效能才能对牧草的营养价值做出正确的评价。     

黑白花奶牛乳房性状对产奶量的影响效果分析

选择西安市草滩农场第四奶牛场第二泌乳期的奶牛 30头 ,测定了乳房宽、乳房深、乳房长、乳房围、乳静脉直径、体长、体高、胸围、胸深、十字部高、腰角宽、尻长和 30 5 d产奶量 (Y) ,计算了相关系数 ,剔除了与30 5 d产奶量相关系数不显著的 7个体尺指标 ,采用通径分析方法计算了以前 5个乳房性状为自变量对 30 5 d产奶量作依变量的通径系数、决定系数及相关指数。结果表明 ,乳房性状与 30 5 d产奶量的相关系数均达到极显著水平(P<0 .0 1) ,乳静脉直径和乳房围对 30 5 d产奶量的直接影响最大 ,是影响产奶量的主要因素 ;乳房宽对 30 5 d产奶量的直接影响最小 ,间接作用较大 ,主要通过乳房围间接影响 30 5 d产奶量 ;决定系数分析结果与通径分析结果有一致的变化趋势 ;所选乳房性状与 30 5 d产奶量的复相关指数 R2 =0 .86 6 0。     

应用6个STR基因座进行奶牛亲子鉴定

运用PCR技术用BM2113、BM1862、BMc701、BM2934、TGLA122、BM720共6个STR(短串联重复序列)基因座对7头奶牛DNA进行扩增，扩增产物分两组混合后经聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测，扩增片段互不干扰。采用已确定母女关系的2头奶牛血液样本和5个嫌疑父亲的精液样本，对一头母本已知的奶牛在嫌疑父本中找出父本，并计算父权概率为99．993％。结果证明，银染法检测STR基因座扩增产物可用于奶牛亲子鉴定。     

奶牛产乳计划编制计算机软件的设计与应用

研制该计算机软件,使奶牛产乳计划的编制科学化,同时可缩短制定产乳计划的时间.据奶牛的生产规律及解决问题的要求,采用BASIC语言,设置了6个结构化功能模块.在计算预产期模块中,针对每月日数的变化,使用开关语句判断处理;在自然月产乳量转换的模块中,采用破碎再组合的计算方法.数据的输入以提示方式进行.利用该软件处理冖奶牛场的记录资料,得知各月预产奶量与实际奶量高度吻合,表明其使用效果可靠.     

奶牛MHC基因多态性及其与经济性状关系的研究进展

简述了奶牛MHC基因的结构、位置、分类、多态性的一般特性，并且介绍了MHC基因与生产性状、乳房炎等一些经济性状的关系。