酶免疫分析法诊断家畜妊娠研究进展(续上期)

1．2水牛黄右军等（1994）采用EIA法测定了87头杂种水牛，对头摩拉水牛的脱胎乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态孕酮变化规律。将配种后第21d和27d次取奶样测定孕酮浓度均达到或超过1．7×10~(-9)g／mL者判为妊娠牛，前高后低者（不达者）为空怀牛，对64头配种水牛进行测定，1个月后直检复查，空怀确诊率为97.390（36／37），妊娠确诊率为88．9％（24／27）。与国内外EIA法诊断奶牛妊娠结果基本一致。[11]1．3羊李学斌等（1993）应用ELISA法测定绵羊血清中干扰体液免疫反应的因子，发现在配种后48…     

酶免疫法测定水牛奶孕酮作早期妊娠诊断的研究

本试验采用酶免疫分析法（ＥＩＡ）测定８７头杂种水牛，７１头摩拉水牛的脱脂乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态的孕酮变化规律。摩拉和杂种水牛发情配种时脱脂乳孕酮含量均在０．５毫微克／毫升以下，妊娠２１天和２７天时孕酮含量两次都在１．７毫微克／毫升以上，妊娠３０天以后直至产前干奶期间，脱脂乳孕酮保持在４～５毫微克／毫升的水平。母水牛流产和胚胎死亡时孕酮浓度下降。为对水牛繁殖状态的监控提供了可靠的方法和依据。结合生产实践，用上述方法和标准对６４头配种后２１天的母水牛进行早期妊娠诊断，判断妊娠牛和非妊娠牛的准确率分别为８８．９０％和９７．３％，总准确率为９３．８％。     

大力发展杂种牛

岑溪市从2001年开始进行牛品种改良，每年配种几千头，逐年有发展，2004年人工授精配种母牛13741头（其中黄牛5854头、水牛7887头），产下杂种牛5520头（其中黄牛3031头、水牛2489头）。2005年上半年人工授精配种母牛6718头（其中黄牛2905头，水牛3813头），产下杂种牛仔4521头（其中安格斯杂种牛仔l852头、尼里拉非杂种牛仔2669头）。     

合浦县奶水牛发展现状

合浦牛杂交改良工作起步较早。上世纪六十年代初就先后引进摩拉和尼里／拉菲公牛和冷冻精液,采用本交和人工授精相结合的办法改良本地牛,有较好的品改基础。水牛是本地牛改良的重点。到上世纪末,全县有良种公牛12头,人工授精配种点6个。三十多年来共杂交配种水牛26356头。配种受胎率45．1l％。     

浅谈如何在农村提高水牛冻配受胎率

在牛品种改良工作中,人工授精受胎率是一项关键性技术环节。对于水牛来说,因体况差异,季节气候的不同,发情表现差异较大,同时由于农村中牛的分布较散,难于集中配种,判定适时配种的难度较大,受胎率出现偏低的现象。笔者从2001年以来,主要从事水牛的人工受精配种工作,冻配水牛136     

引用摩拉水牛改良本地水牛的效果观察

水牛是我区农业生产的主要动力之一。为了加速水牛的发展和提高水牛的品质,我区一九七八年开始引进摩拉水牛冻精杂交改良本地水牛。五年来,用摩拉水牛冻精配种本地水牛1564头,产杂交牛636头,深受群众欢迎。为了摸索杂交牛的经济效益和生产能     

地中海水牛人工授精效果研究

[目的]为了解意大利地中海水牛冻精的授精效果及其在我国生长适应情况。[方法]利用国内首次引进意大利地中海水牛冻精与我国现有的摩拉、尼里——拉菲和本地水牛进行人工授精,试验选取自然发情的摩拉水牛20头,尼里水牛16头,本地水牛32头,年龄在2.5~9岁之间,采用直肠把握子宫角深部输精法,配种后40 d应用B超进行早期妊娠诊断怀孕情况。[结果]：摩拉、尼里——拉菲和本地水牛受胎率分别为50.00%、75.00%、56.25%,平均人工授精配种受胎率为58.82%,品种间人工授精受胎率差异不显著（P〉0.1）。[结论]表明引进地中海水牛冻精开展杂交组合,改良我国现有的水牛品种,提高其生产性能是切实可行的。     

提高奶水牛人工授精受胎率的技术措施

奶水牛由于其发情期有明显的季节性,发情表现特征没有黄牛明显,且有一部分还处于隐性发情壮态。因此奶水牛的发情鉴定比较困难,适时输精的时机较难于把握。故奶水牛的受胎率偏低。笔者总结多年在基层开展奶水牛人工授精配种的经验,认为提高奶水牛人工授精受胎率的关键技术是:一需要有优质的冷冻精液;二要准确的把握母水牛的适时配种时机;三要有娴熟的人工授精配种技术。     

家畜配种年龄及最佳配种时间

牛 配种适龄:初配母牛为18～30月、且黄牛较水牛略早。母牛最佳利用期为10～15年。最佳配种时间:母牛一年四季都可发情、不受季节影响,但以春季4～5月,秋季8～10月为配种旺季。母牛发情持续时间黄牛为10～20小时、水牛为48～72小时,因此,黄牛应在发情后8～12小时配种、水牛应在发情后第二天下午或第三天上午配种好。母牛的发情周期黄牛为18～21天、水牛为18～25天。妊娠期黄牛为285天、水牛为305～307天。     

水牛早孕诊断方法比较研究

本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现：配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9～8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。     

浅谈水牛配种受胎率低的原因和预防对策

主要从水牛的生理特点分析了水牛人工授精受胎率低的原因,并提出了相应的措施。认为造成水牛人工授精受胎率低的原因主要有：水牛发情的持续时间比较长,发情外部表现、卵泡发育不明显,以及适时配种的判断不正确和人工授精输精部位不正确等因素。提出解决的措施主要有：正确判断母牛的发情、排卵和适时的配种时间,选择最佳的输精部位和增加输精次数（情期内进行2-3次输精）等,可有效地提高水牛的配种受胎率。     

不同输精部位对母牛配种受胎率的影响研究

随机选择自然发情的母牛900头,其中黄牛450头,水牛450头,采用冷冻精液和新鲜精液进行人工授精,观察不同输精部位对母牛配种受胎率的影响。试验结果表明,①冷冻精液组:采用子宫颈内输精,配种受胎率黄牛和水牛均为0;采用子宫颈与子宫体交界处输精,配种受胎率黄牛达86.67%,水牛达66.67%;采用子宫体前1/3处输精,配种受胎率黄牛为60.0%,水牛为40.0%;采用子宫颈内5～6 cm处输精,配种受胎率黄牛为26.67%,水牛为6.67%;在子宫体与子宫角交界处输精,配种受胎率黄牛达13.33%,水牛达6.67%;采用子宫颈与子宫体交界处输精,配种受胎率显著高于其他输精部位(P0.01);②新鲜精液组:采用子宫颈内输精,配种受胎率黄牛为46.67%,水牛为13.33%;采用子宫颈与子宫体交界处输精,配种受胎率黄牛为80.0%,水牛为60.0%;采用子宫体前1/3处输精,配种受胎率黄牛为66.67%,水牛为33.33%;采用子宫颈内5～6 cm处输精,配种受胎率黄牛为33.33%,水牛为20.0%;采用子宫体与子宫角交界处输精,配种受胎率黄牛和水牛均为13.33%。同样表明采用子宫颈与子宫体交界处输精,配种受胎率显著高于其他输精部位(P0.01),为母牛输精的最佳输精部位。     

云南省边境地区口蹄疫抗体检测

应用口蹄疫O、A、Asia-1型cELISA抗体检测试剂盒和口蹄疫非结构蛋白抗体单抗阻断ELISA试剂盒,对采集自云南省10个边境县的牛和猪血清进行检测。检测结果显示,牛口蹄疫O、A、Asia-1型抗体阳性率分别在9.23%~37.75%、3.00%~23.57%、9.75%~48.67%之间,阳性率偏低,并且地区间差异较大。非结构蛋白抗体阳性率在14.16%~51.00%之间,其中勐海为51.00%、芒市为48.96%,动物带毒风险较大。境内牛与境外入境牛口蹄疫O、A、Asia-1型抗体阳性率基本相当,非结构蛋白抗体阳性率略高于境内牛。由于入境牛免疫率较低,须加大对入境牛的监控。黄牛和水牛口蹄疫O、A、Asia-1型抗体阳性率基本一致,但黄牛非结构蛋白抗体阳性率为36.47%,水牛为26.86%,黄牛阳性率显著高于水牛,这可能是因为云南省边境地区的黄牛主要来自印度、孟加拉国,经缅甸进入我国。猪口蹄疫血清抗体阳性率较低,除芒市O型口蹄疫抗体阳性率达到81.00%外,其余均在0~6.00%之间,这可能与云南省近年来大量免疫合成肽疫苗有关。建议加强云南省边境地区的口蹄疫防控工作,提高口蹄疫免疫密度和抗体水平,严控边境地区口蹄疫易感动物的无序流动。     

德宏奶水牛SCD基因乳腺组织表达及生物信息学分析

本试验旨在研究德宏奶水牛SCD基因表达规律和探究水牛SCD生物学特性。用乳品分析仪测定乳脂率，依照乳脂率高低进行分组，分为高、中、低组（分别为H组、M组、L组）。采用qPCR法检测SCD基因表达量，与乳脂率进行关联分析。利用生物信息学方法对水牛SCD的结构进行预测。结果表明，H组SCD表达量极显著高于M组和L组（P<0.01）,M组极显著高于L组（P<0.01）。其mRNA表达水平与乳脂率呈强正相关。生物信息学分析结果显示，水牛SCD为不稳定亲水蛋白，不存在信号肽，主要在内质网（44.4%）发挥作用。二级结构主要由无规则卷曲（40.39%）、α-螺旋（39.55%）构成。SCD与ELOVL6、SREBP1、FASN等脂质代谢关键分子互作。研究表明，德宏奶水牛SCD基因的表达可能影响乳脂合成。     

广西水牛发情特点及适时输精的研究

针对水牛的发情特点、适时输精进行研究。结果表明：①水牛发情时性欲较冷淡，发情持续时间从1天至几天不等，特征（如粘液、外阴部的变化等）表现不十分明显。发情阶段的划分仅相对而言，必须结合直肠检查卵巢的变化，进行综合判断水牛的适时输精。②大部分水牛在发情后40h左右即进入发情的后期或末期，是比较理想的输精时间，母牛在发情后36～40h进行人工授精，配种受胎率达69．86％；在发情后24h以前或发情后60h以后的配种受胎率较低，相比分别相差44．15个百分点和37．86个百分点，差异显著（P〈0．05）。     

牛瘟组织培养苗的免疫性

印度试验,对欧洲杂种牛、哈里亚纳牛与摩拉水牛接种牛瘟组织培养疫苗后,测定病毒中和抗体,在免疫三周后,其抗体效价的最高平均数:杂种牛为2±0.47,哈里亚纳牛为1.7±0.65,摩拉水牛为1.9±0.6。用牛瘟强毒攻毒结果,所有22头杂种牛、4头哈里亚纳牛与4头摩拉水牛分别在64-100,20与20个月还保持临床免疫力。攻毒前     

奶水牛发情标记物的研究进展

水牛是我国产奶畜种之一，其适应能力强，耐高温高湿、耐粗饲，其奶营养丰富，经济价值高，被誉为“奶中之王”。然而，奶水牛性成熟晚、发情症状不明显，且其发情易受环境因素影响，导致其繁殖效率低下，从而在生产中造成人力浪费和经济损失。因此，掌握有效的奶水牛发情鉴定技术进而确定最佳配种时间对奶水牛生产具有重要意义。本文参考国内外相关报道，简要总结了奶水牛各发情阶段的人工和自动化鉴定方法及其优缺点，回顾了通过血液、尿液、唾液、宫颈阴道液(cervical-vaginal fluid, CVF)以及粪便等物质鉴定奶水牛发情的相关研究，探讨了利用组学技术开发新的奶水牛发情鉴定方法的可能性，旨在为开发奶水牛发情鉴定新方法提供一定参考。     

提高我区奶水牛饲养效益的几点建议

近年来我区水牛杂交配种取得了突破性进展,2006年已突破40万头,生产杂种牛16万多头.为加大奶水牛业的开发,2007年区财政安排1000万元扶持发展5000头奶水牛,以克服我区奶水牛发展滞后(目前只有4000头左右)、奶量不足的问题.     

应用同期发情定时输精提高水牛繁殖率

用国产氯前列烯醇对３６头本地沼泽型水牛，和１３头摩拉杂交水牛，进行激素诱导同期发情和定时人工授精，６０天内配种母牛发情率和配种受胎率是：本地水牛１００％和８６．１１％，杂交水牛１００％和５３．８５％，明显高于同期母牛的自然情率和配种受胎率。     

提高水牛冻配受胎率的措施

在牛品种改良工作中,提高母牛的受胎率是关键性技术环节,尤其是水牛,发情表现不明显,发情持续的时间差别较大,判定适时配种的难度较大,易出现受胎率偏低的现象。2001年以来,笔者主要从事水牛的人工受精配种工作,现就如何提高水牛的受胎率分析如下。1水牛的分布及主要的生理参数南方的本地水牛属于沼泽型水牛,主要分布在农村散养,用于农作物的耕种。成年公牛的体重达400～500kg,母牛达300～400kg。在1.5-2岁时达到性成熟,常年发情,其中以8-11月份为发情旺季,发情周期为18～23天,发情持续时间为2～3天,青年牛可达3～4天,部分达一周。妊娠时间…