利用SSR标记鉴定玉米杂交种南校18号种子纯度

以南校18号玉米杂交种及其亲本自交系为材料,对胚芽和干种子的DNA进行提取,对24对SSR引物进行筛选,获得适合该杂交种纯度鉴定的SSR引物。结果表明,在快速检测中,从干种子胚提取DNA更加便捷、快速,无DNA降解,可用于PCR扩增反应;24对SSR引物中,有3对特异性引物6mmc0241、umc2025、phi323152可用于南校18号杂交种和亲本自交系的纯度鉴定。因此,应用SSR标记结合单籽粒DNA快速提取方法,可以快捷、准确地鉴定玉米杂交种种子纯度。     

玉米品种真实性鉴定中SSR技术体系的优化

[目的]优化玉米品种真实性鉴定中的SSR技术体系。[方法]以11份玉米骨干自交系为材料,通过对影响SSR扩增质量的Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶的浓度等因素进行优化和比较,建立了适于玉米品种真实性鉴定的SSR标记技术体系,并以5个玉米杂交种为例,验证该体系在玉米杂交种真实性鉴定中的可行性。[结果]Mg2+浓度为2.5 mmol/L时,扩增效果最佳。dNTPs浓度为0.3 mmol/L时,扩增效果最好。引物浓度为0.2μmol/L较为适宜。TaqDNA聚合酶浓度为1.0 U时,扩增效果较好。优化后的PCR反应体系为:1×PCR缓冲液,2.5 mmol/LMg2+,0.3 mmol/L dNTPs,0.2μmol/L正、反向引物,1.0 UTaqDNA聚合酶,40 ng样品DNA,总体积25μl。[结论]该研究优化的SSR技术体系可以有效地对玉米杂交种进行真实性鉴定。     

SSR标记鉴定玉米品种真实性及纯度的研究

[目的]探讨杂交玉米及其亲本种子真实性和纯度的分子检测判读标准。[方法]以16个玉米杂交种及其双亲和202个骨干自交系为引物筛选材料,分别构建3个杂交种和3个自交系人工群体的验证试验材料,用CTAB法提取幼苗叶片DNA,选137对SSR引物进行SSR扩增及产物检测,用于玉米品种的真实性鉴定和纯度检测,并与同批移栽至大田的种植鉴定结果相比较。[结果]从137对SSR引物中筛选出了多态性信息含量（PIC值）高、扩增条带清晰和重复性好的20对一级和20对二级核心引物,用一级核心引物对杂交种人工群体进行真实性鉴定,根据一级核心引物的扩增结果,从中选取3对（phi080、umc1196、umc2084）表现较好的引物用于杂交种人工群体的纯度检测。ssR分子检测结果与田间种植鉴定结果具有高度一致性。[结论]利用SSR标记技术鉴定玉米品种真实性和纯度的方法是可行的。     

应用SSR标记技术鉴定玉米杂交种的纯度

以利用常规盐溶蛋白电泳技术难以进行纯度鉴定的强盛1号玉米杂交种及相应亲本自交系和6对玉米SSR位点引物为材料,筛选出适合该杂交种纯度鉴定的SSR位点引物,结果表明,bilg 116引物的扩增产物呈现双亲互补的特征谱带,易于区分杂交种和亲本自交系。并通过对单子粒DNA提取等技术环节的改进,建立了一套简单、快速、准确、可靠的种子纯度鉴定方法。     

应用SSR标记技术鉴定强盛16号玉米单交种纯度

试验以强盛16号玉米单交种及相应亲本自交系和20对玉米SSR位点引物为材料,筛选出了适合该杂交种纯度鉴定的SSR位点引物。结果表明,bnlg2331引物的扩增产物呈现双亲互补的特征谱带,易于区分杂交种和亲本自交系。并通过对单籽粒DNA提取等技术环节的改进,建立了一套简单、快速、准确、可靠的种子纯度鉴定方法。     

玉米杂交种SSR标记纯度鉴定方法研究

以常规种子贮藏蛋白质电泳技术难以鉴定纯度的4个玉米杂交种、21个自交系和9对玉米SSR位点引物为材料,运用SSR分子标记技术分别筛选出适合这些不同杂交种纯度鉴定的SSR位点引物,建立了一套仪器设备要求相对较低、程序简单、较为快速地利用SSR标记进行玉米杂交种纯度鉴定的技术规程,并对利用SSR标记进行玉米杂交种纯度鉴定的可行性进行了分析。     

利用SSR技术鉴定区分玉米杂交种丹玉39和铁单10号

分别以丹玉39和铁单10号玉米杂交种及其亲本自交系为材料,对20对SSR引物进行筛选,筛选出两杂交种品种鉴定的特异性SSR位点引物;建立了利用SSR分子标记技术鉴定玉米品种真实性的方法。     

玉米SSR分子标记试验体系优化及其遗传多样性研究

为优化玉米SSR分子标记体系,丰富种质资源的多样性,以基础玉米自交系CK及其诱变系M为材料,优化了SSR分子标记试验体系,并对诱变玉米自交系遗传多样性进行了分析。结果表明:(1)优化后SSR分子标记试验体系,可以有效提高试验效率,减少试验误差;(2)利用23对SSR引物对诱变玉米自交系进行PCR扩增,共扩增得到59个等位基因,平均每对引物检测到2.565个等位基因;位点的多态信息量(PIC)和基因型多样性指数变化范围为0.110~0.525和0.234~1.061,平均值分别为0.331和0.643,说明基础材料CK与诱变材料存在真实的遗传差异。     

新疆玉米自交系通用多态引物库的构建研究

[目的]快速获得稳定标准的玉米基因组分子标记多态库.[方法]对Maize GDB上已公布的玉米SSR (simple sequence repeats)引物进行初筛,选取分布在玉米10个染色体连锁群上的700对多态性引物,通过对24份新疆玉米自交系进行了PCR扩增筛选,退火温度设定为58℃.[结果]最终得到114对稳定的多态引物,其扩增产物条带清晰,易读,以此作为新疆玉米自交系标记多态库.Indel引物和功能基因序列开发设计的Pumc引物的扩增的多态位点大多数位点为2个,极少数引物扩增多态位点为3～4个.这些引物扩增出的等位基因位点少与其功能基因在进化上比较保守相一致.[结论]筛选的多态引物可以作为新疆玉米自交系材料多态库,可用于新疆玉米品种鉴定、杂种优势群划分、遗传多样性分析等优先选用的引物.     

SSR、AFLP和SRAP分子标记用于玉米杂交种鉴定的多态性比较

选取2个普通玉米杂交种和1个糯玉米杂交种及其亲本自交系作为试验材料,分别采用SSR、AFLP、SRAP三种分子标记技术进行扩增,比较三种标记间的多态性差异,明确三者用于玉米杂交品种鉴定效率。结果表明:SSR、AFLP、SRAP标记平均每对引物扩增谱总带数分别是3.4、19.7、15.4条,三者用于品种鉴定每个引物特征带分别是2.2、2.5和2.4条,三种标记用于鉴定的无效扩增引物数分别占总引物的19.4%、7.8%和14.6%,另外还筛选出三种标记针对三个玉米杂交种鉴定的10个最佳引物组合。总之,三种标记在实际应用中各具优缺点,不同生产部门可根据需要进行选择。