玉米秸秆型日粮营养水平对肉牛肝脏IGF-Ⅰ及其受体基因表达的影响

为研究不同营养水平玉米秸秆型日粮对肉牛肝脏IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR基因mRNA表达的影响。选择9月龄、体重相近[(235±7)kg]的健康杂交肉牛(黄牛×西门塔尔)30头,随机分为3组,饲喂3种不同营养水平日粮(低营养水平、中营养水平和高营养水平),每组5个重复,每个重复2头,试验期为10个月。结果表明:(1)与低营养水平日粮组相比,中营养水平和高营养水平组的日增重显著升高(P0.05);随着营养水平的提高,血液中的IGF-Ⅰ呈上升趋势,且高营养水平组含量显著高于其他两处理(P0.05)。(2)肝脏中的IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR mRNA表达量也与营养水平呈正相关,高营养水平组显著高于其他两组(P0.05)。这说明高水平营养能促进杂交肉牛生长,提高血液中的IGF-Ⅰ含量,并能提高IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR mRNA在肝脏中的表达量。     

胰岛素样生长因子Ⅰ受体与生长发育的相关性研究

胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-IR)是一种跨膜酪氨酸蛋白受体,与胰岛素受体的氨基酸序列具有同源性。其广泛分布于机体的大部分组织,如大脑、肾脏、心脏、肺,在肝脏中分布最多。与胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)结合发挥生物学作用,可以调节体细胞有丝分裂、增殖和抗凋亡等。本文主要阐述胰岛素样生长因子Ⅰ受体结构、功能及其与生长发育的关系。     

不同发育时期蒙古马睾丸组织中GH和IGF-Ⅰ及其受体的表达

为进一步揭示蒙古马发育与生殖调控的分子机制提供试验数据和理论依据,研究不同发育年龄蒙古马睾丸组织中生长激素(Growth hormone,GH)、生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)、胰岛素样生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factorsⅠ,IGF-Ⅰ)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(Insulin-like growth factorⅠreceptor,IGF-ⅠR)表达的发育性变化模式,以性成熟前期(5匹)、性成熟期(5匹)、成年期(5匹)的蒙古公马为研究对象,采集其睾丸组织,利用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)对不同发育年龄蒙古马睾丸组织中的GH、GHR、IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因的表达差异进行分析,采用免疫组织化学方法对性成熟前期和性成熟期蒙古马睾丸组织中的GH和IGF-Ⅰ蛋白质进行定位。RT-qPCR试验结果表明蒙古马睾丸组织中上述4个基因的表达量从性成熟前期到性成熟期显著增加,成年期下降。免疫组织化学结果表明GH和IGF-Ⅰ免疫标记定位于精母细胞、精原细胞、精子细胞和睾丸间质细胞,其在相关细胞中的信号从性成熟前期到性成熟期逐渐增强。研究发现睾丸组织中GH、GHR、IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR的mRNA协同表达对蒙古马睾丸发育和性成熟有重要调节作用,GH和IGF-Ⅰ蛋白可能通过自分泌/旁分泌的方式调节蒙古马的精子形成和睾丸间质细胞的功能。     

卵巢摘除对山羊组织IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR基因表达量的影响

【目的】研究卵巢摘除对布尔山羊杂种母山羊羔肝脏、背最长肌、股二头肌中胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及其受体(IGF-ⅡR)基因表达量的变化,从分子水平探讨卵巢摘除对这些组织中IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR基因表达量的影响,探讨去卵巢是否可以促进羔羊生长发育。【方法】将体质量相近的5月龄布尔山羊杂种母山羊羔作为研究对象,随机分为处理组和对照组。试验初期摘除处理组母山羊羔卵巢,对照组不摘除。饲养60d后,取肝脏、背最长肌、股二头肌组织样,运用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测其中IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR基因mRNA相对表达量。【结果】卵巢摘除后,母山羊羔背最长肌、股二头肌中IGF-Ⅱ基因和肝脏中IGF-ⅡR基因mRNA相对表达量极显著高于对照组(P0.01),而背最长肌中IGF-ⅡR基因mRNA表达量显著低于对照组(P0.05),肝脏中IGF-Ⅱ基因和股二头肌中IGF-ⅡR基因mRNA相对表达量低于对照组,但差异不显著(P0.05)。【结论】摘除卵巢可上调背最长肌和股二头肌中IGF-Ⅱ基因以及肝脏中IGF-ⅡR基因的表达,但下调背最长肌和股二头肌中IGF-ⅡR基因以及肝脏中IGF-Ⅱ基因的表达,表明摘除卵巢有利于母山羊羔肌肉发育和肉质的改进与提高。     

胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)研究进展

胰岛素样生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factor-Ⅰ,简称IGF-Ⅰ)是与胰岛素结构相似并具有细胞分化和增殖功能的多肽,其生物学活性受IGF-Ⅰ受体及胰岛素结合蛋白的调节.IGF-Ⅰ具有调控细胞凋亡、影响蛋白质的合成、调节骨骼肌生长和修复、保护神经系统等生物学功能.     

三角鲂IGF-I基因的分子克隆及其序列分析

 采用RT-PCR技术首次从钱塘江三角鲂肝脏组织克隆了IGF-Ⅰ基因(GenBank No.AY247412)，序列分析表明钱塘江三角鲂IGF-ⅠcDNA序列由486个核苷酸组成，编码包括B、C、A、D和E 5个区域的161个氨基酸，为Ea-2亚型。同源性分析发现，钱塘江三角鲂IGF-ⅠcDNA与团头鲂、草鱼和鲤鱼的同源性分别为99.8%、88.8%和85.8%，钱塘江三角鲂IGF-Ⅰ前蛋白氨基酸序列与团头鲂、草鱼和鲤鱼的同源性分别为99.4%、88.8%和85.4%。在鲤科鱼类中，亲缘性越近鱼种，IGF-Ⅰ及其基因的同源性越高。试验结果为三角鲂种质研究和开发高效生物饲料添加剂提供基础资料。     

山羊胰岛素样生长因子Ⅰ基因多态性及序列分析

采用PCR-SSCP技术检测胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)基因外显子在性早熟、高繁殖力品种(济宁青山羊)和性晚熟、中等繁殖力(波尔山羊)以及性晚熟、低繁殖力品种(安哥拉山羊和内蒙古绒山羊)中的单核苷酸多态性,分析该基因对济宁青山羊性早熟和高繁殖力的影响;并对济宁青山羊IGF-Ⅰ基因扩增片段进行克隆测序,拼接出山羊IGF-Ⅰ基因4个外显子序列,将济宁青山羊IGF-Ⅰ基因外显子核苷酸序列和推导的氨基酸序列与绵羊、牛、人、大鼠、小鼠和鸡6个物种的序列进行比较。结果表明,IGF-Ⅰ基因4个外显子在所检测的4个山羊品种中均不存在多态性;这7个物种的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为79.6%~99.3%和77.8%~99.4%;与牛、人等6物种相比,济宁青山羊IGF-Ⅰ基因氨基酸序列不存在特有变化。可见,物种间IGF-Ⅰ基因保守性强,IGF-Ⅰ基因可能不是影响济宁青山羊性早熟和高繁殖力的主效基因。     

Tbx5基因在漠斑牙鲆（Paralichthys olivaceus）变态前的表达

鲽形目鱼类仔鱼经过变态后形成眼睛和偶鳍等器官左右不对称的稚鱼。Tbx家族成员参与脊椎动物心脏、肢体和眼等器官的发育,而Tbx基因与鲽形目鱼类变态的关系目前尚无报道。我们运用扫描电镜和软硬骨染色等方法对出膜后2d（变态早期）和26d（变态前期）的牙鲆仔鱼的形态进行观察,牙鲆出膜后2d胸鳍原基出现,出膜后26d胸鳍发育成熟,而在出膜后26d胸鳍和腹鳍仍呈现左右对称。我们克隆了牙鲆Tbx5基因的CDS序列,该序列编码的多肽具有部分T-box保守结构域,与斑马鱼Tbx5同源性高达93%。系统进化分析显示：这段CDS序列与硬骨鱼的Tbx5基因聚为一支,但与四足动物Tbx5相分离。整体原位杂交显示出膜后26d的牙鲆仔鱼中,Tbx5基因不仅在胸鳍、眼背侧、脊柱和尿囊表达,且在胸鳍和眼背侧的表达呈现左右不对称,左侧面（有眼侧）的表达量均高于右侧面（无眼侧）的表达量。综上结果暗示,牙鲆Tbx5基因可能参与了变态过程中眼睛与胸鳍左右不对称的形成。 研究亮点： 鲽形目鱼类都经历变态发育过程,产生显著的左右不对称形态,但调控该过程的分子机制尚不清楚。本文对牙鲆变态初期仔鱼进行了形态学观察,并对牙鲆Tbx5进行克隆及其表达分析,并探讨Tbx5与牙鲆仔鱼眼睛与胸鳍不对称变态过程的关系,为进一步研究牙鲆变态机制奠定基础。     

胰岛素样生长因子--潜在的生长和蛋白质合成促进剂

胰岛素样生长因子Ⅰ(Insulin-likegrowthfactorⅠ、IGF-Ⅰ)的发现至今已有50年了。IGF-Ⅰ可以在胚胎和成年动物的许多组织中表达,其分泌及作用方式可以是局部的(自分泌或旁分泌),也可以是长距离的(内分泌)。IGF-Ⅰ在体内的作用是多方面的。IGF-Ⅰ不仅能刺激细胞有丝分裂,而且能诱导分化和促进分化功能的表达。在仔猪方面的研究证明,IGF-Ⅰ能有效促进肠道发育和功能完善。最近,美国印第安那大学(IndianaUniversity)研究人员发现,IGF-Ⅰ能促进胎羊蛋白质合成代谢,有效抑制体蛋白质在体内的降解,从而增加了蛋白质在体内的沉积。他们还…     

鱼类胰岛素样生长因子研究进展

胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)主要包括IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ两种类型,其结构与胰岛素原(pminsulin)相似,因此与胰岛素(insulin,INS)、松弛肽(rela)(in)一起被称为INS／IGF／relaxin家族蛋白。与哺乳动物相似,对鲑鳟鱼类的研究发现IGF-I mRNA在肝脏中含量最高,表明肝脏是IGFs主要的分泌表达场所。目前已发现有4种亚型的IGF-I mRNA,     

鱼类胰岛素样生长因子研究进展

胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)主要包括IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ两种类型,其结构与胰岛素原(pminsulin)相似,因此与胰岛素(insulin,INS)、松弛肽(rela)(in)一起被称为INS／IGF／relaxin家族蛋白。与哺乳动物相似,对鲑鳟鱼类的研究发现IGF-I mRNA在肝脏中含量最高,表明肝脏是IGFs主要的分泌表达场所。目前已发现有4种亚型的IGF-I mRNA,     

半胱胺对羊毛生长及皮肤中GH受体、IGF-1和IGF-1型受体基因表达的影响

罗米丽×中国美利奴(新疆军垦型)杂交一代断奶母羔214只,随机分成两组,在日粮中分别添加3.5(试验组)和0 g·kg-1(对照组)生长调节剂CT2000(半胱胺盐酸盐),实验期为120 d.于试验前和试验结束时称重,采毛和皮肤样品,测定母羔生长速度,羊毛长度、细度、强度、弯曲度和羊毛油汗颜色,并用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析绵羊皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R) mRNA的相对丰度.实验结果显示,与对照组相比较,试验组平均日增重提高12.77%(P<0.01),羊毛平均日增长提高24.01%(P<0.01),羊毛纤维直径平均日增长提高217.31%(P<0.01),羊毛纤维强度没有显著的差异(P>0.05),羊毛油汗颜色和羊毛弯曲度的正常百分率显著提高(P<0.05);皮肤中GHR mRNA表达量增加110.57%(P<0.01),IGF-1、IGF-1R mRNA表达量无明显变化.结果表明,半胱胺(CT2000)能够显著提高羔羊生长性能,促进羊毛生长,其机制可能与提高皮肤中GHR水平有关.     

蛋氨酸对肉兔氮代谢、血清激素及肝脏胰岛素样生长因子-Ⅰ mRNA基因表达的影响

选用2月龄新西兰肉兔60只,随机分成五个处理组,在日粮中添加不同水平的蛋氨酸(0、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%),探讨了日粮添加不同水平蛋氨酸对2-3月龄肉兔氮代谢,血清胰岛素(INS)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)含量,及肝脏IGF-Ⅰ mRNA基因表达量的影响.结果表明:日粮添加蛋氨酸对生长肉兔氮的表观消化率(DN/IN)影响显著(P<0.05),添加0.4%的蛋氨酸时,DN/IN最高;蛋氨酸添加量对粪氮(FN)、尿氮(UN)、沉积氮(RN)、氮的总利用率(RN/IN)、氮的生物利用率(RN/DN)和可消化氮(DN)均无显著影响(P0.05),但是可消化氮(DN)呈现先升高后降低的趋势.蛋氨酸添加水平对血清中INS和GH的含量无显著影响,对IGF-Ⅰ含量影响显著(P=0.02),对IGF-Ⅰ mRNA基因表达量影响极显著(P=0.001).2月龄至3月龄生长肉兔适宜的蛋氨酸添加水平为0.4%.     

褐牙鲆早期发育阶段CRH基因表达及 受甲状腺激素的影响

[目的]探析褐牙鲆仔鱼早期发育阶段促肾上腺皮质激素释放激素基因(CRH)的表达情况及受甲状腺激素的影响作用,为开展牙鲆的人工繁育提供科学依据.[方法]通过实时荧光定量PCR检测褐牙鲆早期发育阶段CRH基因表达量,以ELISA测定褐牙鲆仔鱼甲状腺激素(T3和T4)水平,并测定经外源T3浸泡处理后早期发育褐牙鲆仔鱼CRH基因表达量的变化情况,探究CRH和甲状腺激素在褐牙鲆早期发育阶段的影响及作用关系.[结果]1~8日龄褐牙鲆仔鱼CRH基因相对表达量呈先升高后降低的变化趋势,在5日龄达最高值,显著高于其他日龄的仔鱼(P<0.05,下同).10~42日龄褐牙鲆仔鱼CRH基因主要在其头部表达,尾部CRH基因的相对表达量随着生长发育的进程而逐渐增加.褐牙鲆仔鱼变态前期甲状腺激素T4含量逐渐增加,变态高峰期迅速升高,在变态后期呈下降趋势.较其他早期发育时期,甲状腺激素T3在褐牙鲆变态期维持高水平,但含量低于甲状腺激素T4.22日龄褐牙鲆仔鱼经50 nmol/L外源T3处理2 h后,其头部和尾部CRH基因的相对表达量显著升高;但以外源T3处理8 h后,无论是头部还是尾部,CRH基因的相对表达量均呈显著下降趋势.[结论]褐牙鲆早期变态发育需CRH基因高表达及甲状腺激素积累,二者对褐牙鲆早期变态发育阶段具有重要作用并呈互相代偿效应.     

绵羊IGF-Ⅰ和IGF-Ⅰ R基因特征分析及其在肌肉组织中的表达差异

为了比较IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因在绵羊肌肉中的表达差异,根据GenBank公布的绵羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因mRNA序列设计特异性引物,采用实时定量PCR方法检测其在甘肃‘高山细毛羊’及其与南非肉用‘美利奴’杂交F1代(南甘F1代)羔羊肌肉组织中的表达量.利用生物信息学软件分析了绵羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因结构,并构建系统进化树,探讨了其生物学功能.结果表明:南甘F1代羔羊肌肉组织中IGF-Ⅰ基因的表达量显著高于‘甘肃高山细毛羊’(P0.05),而IGF-ⅠR基因的表达量在南甘F1代羔羊和‘甘肃高山细毛羊’肌肉组织中没有显著变化(P0.05).绵羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因分别含有465bp和4 518bp的完整开放阅读框,编码154个和1 505个氨基酸;其蛋白质分子量分别为17 011.71U和169 267.26U,等电点分别为9.36和6.70;IGF-Ⅰ基因信号肽切割点分别位于49~50位氨基酸之间,而IGF-ⅠR基因不含信号肽;IGF-Ⅰ基因编码产物的二级结构主要以无规则卷曲和α-螺旋为主,位于细胞核的可能性最高(62.5%);IGF-ⅠR基因编码产物的二级结构主要以无规则卷曲为主,位于细胞质的可能性最高(34.8%);IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因分别作为激素和信号传感器参与机体生物学过程.     

Let-7d在牙鲆变态发育期间的表达及靶基因预测

MicroRNAs(miRNAs)通过抑制编码基因的转录调控关键的生物学进程。研究发现,let-7是时序发育过程中的重要调控因子,在促进幼体向成体转变的发育过程中起着极其重要的作用。利用Solexa测序技术从牙鲆中成功鉴定出let-7家族的10个成员((let-7a,let-7b,let-7c,let-7d,let-7e,let-7f,let-7g,let-7h,let-7i,let-7j)。相对于let-7家族其他成员,let-7d的拷贝数最多,推测其在牙鲆发育过程中扮演着更重要的角色。运用实时荧光定量PCR方法分析let-7d在牙鲆变态发育不同时期的表达,结果发现,在对照组和甲状腺激素处理组,let-7d的表达模式类似:前5个时期(孵化后17 d,17dph;变态Ⅰ期,20 dph;变态Ⅱ期,23 dph;变态Ⅲ期,29 dph;变态Ⅳ期,36dph)表达量逐渐上升;变态晚期(36 dph)达到高峰;变态结束(41 dph)表达量呈现下降的趋势。定量结果显示,甲状腺激素下调let-7d的表达,与对照组呈显著性差异(P<0.05)。对牙鲆不同组织中let-7d的表达情况分析表明,let-7d主要存在于牙鲆的头部(脑,鳃,心脏)。靶基因预测发现,在目前已公布的482条牙鲆mRNA序列中,其中有30条mRNA的3’非翻译区(3’-UTRs)存在let-7d结合位点。这些预测的靶基因涉及到发育过程的许多方面:蛋白折叠,细胞分化,信号转导,病毒免疫反应和信号通路等。这些结果说明,let-7d在调控牙鲆从仔鱼向稚鱼转变的变态发育过程中起着极其重要的作用。     

牙鲆胚后发育阶段HDAC1基因的空间表达

组蛋白去乙酰化酶(HDACs)可通过调节染色质结构和抑制特异性转录因子活性来调控细胞生长和分化。鉴于HDACs在蝌蚪变态发育过程中的作用,本研究克隆了牙鲆(Paralichthys olivaceus)HDAC1基因全长cDNA序列,并调查了其在牙鲆变态前和变态阶段的空间表达。牙鲆HDAC1全长cDNA序列为2 540 bp,包含长度为126 bp的5'UTR,1 470 bp的ORF和944 bp的3'UTR。HDAC1基因在牙鲆变态前以及变态阶段均有表达,这和蝌蚪中仅在变态前表达的现象不同。HDAC1在冠状幼鳍上的表达是随着幼鳍原基的生长发育逐渐增强的,直至冠状幼鳍分化成形后,基因表达减弱;随着牙鲆仔鱼肠道的变粗变短,HDAC1在肠壁的表达强度逐渐增强,孵化后第16天(16DAH)开始减弱并最终消失;鳍褶中HDAC1在9DAH开始表达,18DAH时主要在鳍褶基部表达,进入变态阶段,HDAC1可见在支鳍骨上表达,在变态高峰期表达最为强烈。在整个变态发育期HDAC1在鳃上均表达,变态开始后表达逐渐增强,而到变态后期表达减弱。牙鲆变态前及变态阶段的HDAC1基因表达模式表明,HDAC1参与了牙鲆冠状幼鳍、鳍条、肠道等多种器官的发育调控以及变态阶段眼睛移动的过程。     

Molecular Cloning and Sequence Analysis of IGF- I from Triangular Bream （Mega／obrama terminalis）

The insulin-like growth factor Ⅰ (IGF-Ⅰ) gene of triangular bream (Megalobrama terminalis)(GenBank No.AY247412) (Tb)was cloned for the first time from liver by RT-PCR. The nucleotide sequence analysis showed the Tb IGF-Ⅰ cDNA consisted of 486 nucleotides and encoded 117 amino acids including B, C, A, D and E five domains. Analysis of E-domainin dicated that cloned Tb IGF-Ⅰ belonged to IGF-Ⅰ Ea-2 subtype. Identity analysis showed the IGF-Ⅰ nucleotide sequence shared 99.8% homology with bluntnose bream, 88.8% with grass carp, 85.8% with common carp; the pre-IGF-[ amine acid sequence shared 99.4% with bluntnose bream, 88.8% with grass carp, 85.4% homology with common carp. In the Cyprinus Carpio, the higher homology of nucleotide sequence and amino acid sequence in IGF-Ⅰ showed that the closer relationship the fishes have. These results could provide basic data for the research on Tb germplasm and the development and utilization of biological feed additives.     

铜对猪原代肝细胞中类胰岛素生长因子及其结合蛋白的影响

采用细胞体外培养和免疫放射分析等方法,观察体外添加铜后猪原代肝细胞中类胰岛素生长因子(IGF-Ⅰ)、结合蛋白(IGFBP3)和生长激素结合蛋白(GHBP)表达量的变化,探讨铜对猪肝脏IGF-Ⅰ等生长相关因子的影响。结果表明:当铜的添加量为31.2μmol/L时,IGF-Ⅰ和IGFBP3含量显著高于空白对照组,对GHBP含量的影响不明显;添加生长激素不能产生相似的变化。这一结果说明铜是通过调节生长激素轴的相关因子的表达发挥促生长作用。     

军牧1号公猪睾丸组织不同发育时期IGF-Ⅰ基因表达量研究

胰岛素样生长因子I是1种具有促进动物生长发育和繁殖的的肽类物质。动物要达到正常的性成熟和生殖能力则需要适当的IGF-Ⅰ水平。睾丸是雄性动物的重要生殖器官,为了探讨IGF-Ⅰ基因对于雄性动物睾丸组织发育的影响,本实验采用Real Time RT-PCR方法研究了IGF-Ⅰ基因在军牧1号白猪不同发育阶段睾丸组织的表达规律。结果表明:IGF-Ⅰ在不同发育阶段的睾丸组织中均表达,但是各个不同发育时期的表达量差异显著,六月龄时(性成熟阶段)表达量最高。本研究为深入探讨IGF-I基因调控动物繁殖机能以及在生产中如何提高家猪的繁殖力奠定了分子生物学基础。