非洲猪瘟病原学检测方法研究进展

目前,非洲猪瘟(ASF)尚无有效疫苗可以预防,快速、准确的病原学检测是防控该病的重要技术手段。本文综述了ASF病原学检测方法:免疫荧光、ELISA、免疫层析试纸条等抗原检测方法,其使用方便、快速,目前主要应用于急性发病或病死猪的快速诊断及群体筛查;PCR、荧光定量PCR、环介导等温扩增等分子生物学检测方法仍是ASF病原检测的主要手段,特别是荧光定量PCR方法以其敏感、特异、快速、稳定的优点在我国实践中广泛应用。随着微流控、化学发光、基因芯片等新技术不断应用,各种自动化、一体化、便携式设备不断研发,将会为ASF防控提供有效技术支持。     

非洲猪瘟病毒的不同病原学检测方法比较

摘要：非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染导致的猪高死亡率的传染病,最早起源于非洲,是最复杂的猪传染性疾病之一。非洲猪瘟自首次报道至今已有1个世纪,但在没有疫苗和没有有效治疗方法的情况下,非洲猪瘟病毒的防控仍是一项巨大的挑战。当前,非洲猪瘟病毒已在我国“定殖”,该病毒的检测已经成为养猪企业的一项常规工作。实时荧光定量PCR是检测非洲猪瘟病毒最常用的方法,一些新型的核酸检测技术也被开发用于病毒检测,例如环介导等温扩增法、荧光重组酶介导等温扩增法等,均具有较好的特异性和灵敏度。本文阐述了非洲猪瘟的流行现状及不同病原学检测方法,对不同检测方法进行简单的比较,以期为非洲猪瘟病毒的检测提供参考。     

非洲猪瘟诊断技术研究进展

非洲猪瘟防控目前暂无安全有效疫苗可用,因此快速、可靠的检测方法对其防控至关重要。目前应用的非洲猪瘟诊断技术主要表现在病原、核酸、抗原与抗体四个方面:病原检测主要有红细胞吸附和病毒分离方法,核酸检测目前已开发出实时荧光定量PCR(qPCR)、多重PCR(mPCR)、微滴数字PCR(ddPCR)、巢氏PCR(nested-PCR)、环介导等温扩增技术(LAMP)、重组酶聚合酶扩增技术(RPA)、交叉引物扩增技术(CPA)、原位杂交技术(ISH)以及生物传感器技术等,抗原检测常用荧光抗体试验(FAT)、抗原ELISA、侧向流动免疫色谱分析(LFA)等,而抗体检测主要通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接荧光抗体试验(IFA)、胶体金快速免疫层析法(GICA)、免疫印迹法(IBT)等方法。每种诊断技术都有其特点,从而为不同情况下的A SFV诊断提供了多种选择。未来,其他技术如CRISPR等与上述技术的结合应用,以及不同诊断技术的联合应用,将成为非洲猪瘟诊断技术发展的趋势。     

非洲猪瘟疫苗和病原学诊断技术研究进展

非洲猪瘟疫情给我国养猪业造成了巨大经济损失,因而开发安全高效的疫苗和建立快速可靠的病原学诊断方法对该病防控具有重要意义。本文综述了当前国内外非洲猪瘟（African swine fever,ASF）疫苗和病原学诊断技术的研究进展,以期为今后ASF疫苗研制和诊断技术选择提供参考。疫苗研究方面,目前仍无安全有效疫苗上市。灭活疫苗不能提供有效的免疫保护力,已不作为今后研究的重点方向;减毒活疫苗存在生物安全隐患,疫苗接种后的安全性、有效性等有待进一步评估;基因工程疫苗与前两种疫苗相比,成本低且安全性高,但对强毒株攻击的有效保护作用不强。目前认为利用天然分离或敲除非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）毒力基因的致弱毒株开发重组减毒活疫苗具有较好的利用前景,但其安全性和有效性仍有待进一步研究。目前在没有有效疫苗免疫的前提下,建立快速、可靠的早期病原诊断方法对于ASF疫情确认和控制同样至关重要。近年来,ddPCR、LAMP、RPA、CRISPR/Cas等新兴诊断技术相继涌现。这些方法具有操作更简单、检测速度更快、特异性更强等方面的优势,但其检测能力与适用场景尚存在一定不足,还需要进一步完善。未来ASFV病原学检测的研究方向应建立在成本低廉、简单便捷、高效准确、集成化的基础上,或可将多种诊断方法联合应用,各取所长。     

非洲猪瘟病原学及单克隆抗体制备技术研究进展

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起猪的高度接触性、传染性、出血性以及高死亡率的传染病。20世纪中期以来,已在非洲、欧洲和美洲等数十个国家流行,并在近几年内蔓延至欧亚两洲接壤处的格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆以及俄罗斯境内,其一旦侵入我国,将会给我国养猪业带来极大的危害。非洲猪瘟病原学研究以及制备相应的单克隆抗体对非洲猪瘟病毒快速诊断技术研究和疫苗研制有着重大的现实意义。主要从病原学和单克隆抗体制备方面对非洲猪瘟的研究进展进行了综述。     

非洲猪瘟病毒检测方法研究进展

文章对非洲猪瘟病毒的结构特征及各种检测方法的应用情况进行阐述,比较各种方法的优缺点和适用性,为非洲猪瘟的诊断及防控提供参考。     

非洲猪瘟检测方法的研究进展

非洲猪瘟起源于非洲,2018年开始传入我国,对我国的养猪业造成了巨大的影响,目前非洲猪瘟疫苗的开发尚不成熟,有效检测成为了预防非洲猪瘟的主要手段。本文主要从病原学检测和血清学检测对非洲猪瘟的检测方法进行阐述,病原学检测主要包括红细胞吸附试验、聚合酶链式反应、等温核酸扩增技术,血清学检测主要包括酶联免疫吸附试验、胶体金免疫层析技术、免疫印迹法。通过这些方法可以有效的检测出非洲猪瘟。     

非洲猪瘟分子病原学及分子流行病学研究进展

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种烈性传染病,具有急性、高热、高病死率等特征。主要暴发于非洲、东欧国家、俄罗斯及高加索地区,给受灾国家的养猪业造成严重的影响。现主要从分子病原学和分子流行病学对非洲猪瘟研究情况进行综述,为非洲猪瘟的防控提供理论依据。     

用PCR技术检测非洲猪瘟病毒

由病毒引起的烈性传染病一非洲猪瘟（ASF）临床表现差异较大，毒力较强的非洲猪瘟病毒毒林引起急性出血性疾病，以高热、食欲度绝、皮肤和内脏器官出血并在2—10天向死亡为特征，死亡率可尚达100％；毒力较低的每株产生的症状比较温和，表现为低热、食欲减退和沉郁，与其它猪病     

Comparative evaluation of novel African swine fever virus (ASF) antibody detection techniques derived from specific ASF viral genotypes with the OIE internationally prescribed serological tests

The presence of antibodies against African swine fever (ASF), a complex fatal notifiable OIE disease of swine, is always indicative of previous infection, since there is no vaccine that is currently used in the field. The early appearance and subsequent long-term persistence of antibodies combined with cost-effectiveness make antibody detection techniques essential in control programmes. Recent reports appear to indicate that the serological tests recommended by the OIE for ASF monitoring are much less effective in East and Southern Africa where viral genetic and antigenic diversity is the greatest. We report herein an extensive analysis including more than 1000 field and experimental infection sera, in which the OIE recommended tests are compared with antigen-specific ELISAs and immuno-peroxidase staining of cells (IPT). The antibody detection results generated using new antigen-specific tests, developed in this study, which are based on production of antigen fractions generated by infection and virus purification from COS-1 cells, showed strong concordance with the OIE tests. We therefore conclude that the lack of success is not attributable to antigenic polymorphism and may be related to the specific characteristics of the local breeds African pigs.     

氟苯尼考检测技术研究进展

氟苯尼考(FF)是兽医专用酰胺醇类广谱抗菌药物,具有安全高效、体内分布广等特点,在兽医临床上应用广泛.随着研究深入,氟苯尼考的检测手段从复杂、繁琐的电位法,发展到了简便、快速的、智能的色谱法;同时,各种先进检测技术的联用手段也得到了研究者的广泛应用,如色谱与质谱联用技术、毛细管电泳技术等,这些方法具有定性定量准确、抗干...     

猪博卡病毒病原学和检测方法研究进展

猪博卡病毒是2009年新发现的一种猪细小病毒,近几年来在我国感染率日益升高,且常常与其他病原混合感染,增加了疫病防控的难度。论文就猪博卡病毒病原学与检测方法做一综述,为提高我国猪博卡病毒的综合防控能力提供参考。     

广西德保县黑猪主要疫病病原学和血清学检测

为了解德保黑猪主要疫病流行状况和免疫效果,2018—2020年釆集166个德保黑猪饲养场点的300份病死猪样品进行非洲猪瘟(ASF)、猪瘟(CSF)、口蹄疫(FMD)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪圆环病毒病(PCV-2)、猪支原体病(PPLO)、猪传染性胸膜肺炎(PCP)、猪链球菌病(SS)、...     

六师地区规模化猪场7种主要猪病的病原学检测结果分析

为了解兵团六师地区规模化猪场疾病的发生情况,2021年笔者采用荧光RT-PCR和荧光PCR法对六师范围内的25家规模化猪场采集的1478份全血、扁桃体、鼻拭子、肛拭子、病死猪组织(心、肝、脾、肺、肾、淋巴)等样品进行了7种主要疾病的病原检测,包括:猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、支原体(MYCO)...     

恒温隔绝式荧光PCR检测非洲猪瘟病毒核酸方法的建立

恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)是一种简便、快速及可使用于现场检测的荧光PCR方法.本研究采用农业农村部推荐的检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)核酸的荧光定量PCR方法的引物和探针,通过对引物、探针、Taq酶等反应体系的优化,建立了基于恒温隔绝式荧光PCR的ASFV检测方...     

猪链球菌PCR检测技术研究进展

猪链球菌是猪的一种重要病原菌,并且也会引起人的链球菌病。有35个荚膜血清型(1/21、~34),通常自发病或死亡猪体分离获得1,2,7,9型和14型菌株,其中2型是毒力最强的血清型。根据已知猪链球菌16 SrRNA及溶血素(sly)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、荚膜多糖(cps)、胞壁蛋白或溶菌酶释放相关蛋白(mrp)、胞外因子(epf)编码基因序列设计特异性引物,建立猪链球菌群和1(14),2(1/2),7型和9型特异性PCR或多重PCR,建立2型致病性菌株和1型高致病性菌株毒力鉴定PCR或多重PCR,用于检测和鉴别临床病料和细菌分离物中的猪链球菌,具有高敏感性和高特异性,与其他致病菌及其他血清的猪链球菌型无交叉反应,为疫病诊断及流行病学的研究提供了快速、简便和有用的工具。     

隐孢子虫病检测技术研究进展

隐孢子虫是动物和人腹泻的重要病原,也是人类艾滋病患者的主要致死因素之一.当前,对隐孢子虫病的研究已成为全球寄生虫学研究领域的热点由,于迄今尚无治疗隐孢子虫病感染的特效药物,因此,快速、简便、准确地发现隐孢子虫是控制该病的关键.随着分子生物学技术的应用,隐孢子虫病的检测技术得到了极大的发展.笔者就近年来隐孢子虫病检测技术进行了简要综述.     

核酸探针和PCR技术在食品检验中的应用

核酸探针技术和多聚酶链反应( Polymerase chain reaction,PCR)技术是近年来发展起来的两种高新生物技术。本文着重介绍了核酸探针技术和 PCR技术的原理及其在食品检验中的应用。同时提出了这两种技术在食品检验中尚存在的问题以及解决的办法 ,并对其在食品检验中的应用前景作了展望。     

坏死梭杆菌检测方法研究进展

坏死梭杆菌是一种严格厌氧的革兰阴性(G-)杆菌,可以依据坏死梭杆菌的菌体形态、菌落特征、生化试验、耐药性试验、酶特性试验等进行检测。根据坏死梭杆菌的16 S rRNA基因序列、16 S～23 SrRNA基因间序列以及rpoB基因序列,可以对其进行菌种水平上的鉴定;根据坏死梭杆菌的gyrB基因序列和白细胞毒素操纵子启动子区序列,可以对坏死梭杆菌进行亚种水平的鉴别。环介导的等温扩增(LAMP)技术的发展也为坏死杆菌病的快速诊断提供了检测方法。