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相似文献
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1.
应用1.8 mol/L乙二醇+蔗糖冷冻保存奶牛胚胎   总被引:1,自引:1,他引:0  
  相似文献   

2.
用甘油蔗糖或乙二醇冷冻保存的牛胚胎直接移植的妊娠率用甘油蔗糖或乙二醇冷冻保存的牛胚胎直接移植的妊娠率○M.Nibart,P.Humblot著○覃能斌译○吴明成校这个研究的目的是记录使用甘油蔗糖或乙二醇作抗冻剂时,牧场中牛冷冻胚胎移植的妊娠率。在199...  相似文献   

3.
选取奶牛体内生产胚胎93枚(其中囊胚54枚,桑椹胚39枚),比较研究了不同冷冻方法和保护剂对其的保护效果。结果表明:乙二醇处理组对奶牛囊胚的保护效果优于One-Step-Freezing组、甘油组和玻璃化组(回收率、形体正常率和继续发育率四组分别为91.0%、82.0%、66.6%;91.0%、91.0%、88.8%;86.6%、85.0%、83.3%和80.0%、66.7%、50.0%),其中继续发育率在乙二醇组、甘油组和玻璃化组间差异显著(P<0.05);而桑椹胚的各项指标以乙二醇处理组最高,玻璃化组最低,但各组间差异不显著。结果说明乙二醇处理组对胚胎的保护效果优于其它几个处理组。  相似文献   

4.
选取奶牛体内生产胚胎93枚(其中囊胚54枚,桑椹胚39枚),比较研究了不同冷冻方法和保护剂对其的保护效果.结果表明:乙二醇处理组对奶牛囊胚的保护效果优于One-Step-Freezing组、甘油组和玻璃化组(回收率、形体正常率和继续发育率四组分别为91.0%、82.0%、66.6%;91.0%、91.0%、88.8%;86.6%、85.0%、83.3%和80.0%、66.7%、50.0%),其中继续发育率在乙二醇组、甘油组和玻璃化组间差异显著(P<0.05);而桑椹胚的各项指标以乙二醇处理组最高,玻璃化组最低,但各组间差异不显著.结果说明乙二醇处理组对胚胎的保护效果优于其它几个处理组.  相似文献   

5.
本试验研究了①A、B、C三个质量等级胚胎的分割效果;②五种不同冷冻方法冷冻裸露半胚的存活情况;③冻前培养3.0、1.5~2.0、1.0小时的裸露半胚存活率。结果①A、B、C级胚胎的分割成功率分别为95.8%(92/96)、7且.4%(70/98)、30%(6/20),三者间差异极显著(P<0.01);②半胚冷冻前以20%FCS-PBS液培养3.0小时后,以五种不同冷冻方法冷冻,均未获得存活半胚;③半胚冷冻前培养3.0、1.5~2.0、1.0小时后,以添加10%而聚糖的10%甘油+0.1M蔗糖/PBS液冷冻,分别获得了0%(0/45)、68.8%(11/16)、75.0%(9/12)的存活率。结果表明,胚胎质量是影响胚胎分割成功率的关键因素,半胚冷冻前的培养时间是影响裸露半胚存活的重要因素。  相似文献   

6.
奶牛胚胎冷冻保存技术研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
胚胎冷冻保存是胚胎移植过程中的一个重要技术环节,不仅保存了多余的鲜胚,更有利于随时随地地实施胚胎移植工作。本试验对超排获得的胚胎用分步法和一步法进行冷冻、贮存和移植。用分步法生产可用胚胎25枚,冻存24枚;用一步法生产可用胚胎56枚,冻存53枚。分步法的移植受胎率达到50.00%,略高于一步法的47.17%,但差异不显著(P〉0.05)。一步法在保证移植效果的前提下,具有制作简单、易于标准化生产、应用非常方便的优点。  相似文献   

7.
胚胎冷冻技术是胚胎保存、切割和性别鉴定以及建立胚胎库等的重要技术基础。试验应用CL-5500冷冻仪,采用乙二醇作保护剂冷冻奶牛胚胎,解冻复苏率达到85.7%。  相似文献   

8.
奶牛冷冻胚胎直接移植法的应用试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
直接移植法大大简化了冷冻胚胎的移植步骤,使胚胎移植的大规模推广应用成为可能。本试验采用1.61M的乙二醇代替甘油作冷冻保护剂,共冷冻保存A、B级奶牛胚胎276枚。解冻,在10分钟内直接装枪移植给受体奶牛。其移植青年牛42,180天后确认妊娠24头,受胎率为57.14%;移植成母牛85,180天后确认妊娠37头,受胎率为43.53%。两者合计,共植受体奶牛127头,确认受胎61头,受胎率为48.03  相似文献   

9.
奶牛冷冻胚胎移植成活率较鲜胚移植明显低.为明确低温冷冻造成胚胎损伤的机理、为冷冻保存方法的进一步改进提供理论依据,利用透射电子显微镜观察了奶牛胚胎常规冷冻和玻璃化冷冻前后的超微结构变化.结果表明,奶牛鲜胚细胞分为两种类型:一种位于内细胞团(ICM)外层,胞质电子致密度低而着色浅,并含有大量的线粒体和内质网;另一种位于ICM中心区域,着色较深,溶酶体的数量多,其余细胞较较少.常规冷冻后,透明带和卵周隙明显变宽,细胞间接触变得松散.囊胚中含有退化的胞核和凋亡小体,内质网变大、变粗,脂滴明显增多.玻璃化冷冻后,ICM细胞的结构发生破坏,部分细胞发生崩解,细胞碎片大量分布于细胞间隙和卵周隙中,并可见大量的脂滴,凋亡细胞和凋亡小体增多.冷冻过程对早期胚胎细胞器的损伤可能是移植后成活率下降的主要原因.  相似文献   

10.
11.
影响玻璃化冷冻兔胚胎效果的一些因素   总被引:4,自引:0,他引:4  
试验对影响玻璃化冷冻兔胚胎效果的一些因素进行探讨,以找出理想的玻璃化冷冻方法。在测试的5种玻璃化溶液中,含35%乙二醇(EG)和1.0mol/L蔗糖的溶液(VS1)对胚胎的毒性最小。用VS1冷冻桑椹胚和囊胚的理想程序是:在室温下使胚胎分别在20%EG和35%EG中平衡2、3分钟后,移入VS1中,0.5分钟内(囊胚也可在2分钟后)投入液氮中冷冻。桑椹胚的存活率为91.7%(33/36),囊胚的存活率为97.1%(33/34)~97.3%(36/37)。8~16细胞胚胎的理想冷冻程序为:在室温下使胚胎在20%EG、35%EG中平衡2、3分钟,移入4℃的37%EG+1.0mol/L蔗糖溶液中平衡2分或10分钟后冷冻,胚胎存活率分别为100%(37/37)、86.1%(31/36)。  相似文献   

12.
旨在基于高通量SNP芯片建立一种可评估牛早期胚胎染色体质量和生产性能的方法,为胚胎牛育种提供技术支撑。本研究通过胚胎切割技术分别对荷斯坦奶牛体内囊胚(n=27)、体外囊胚(n=21)、体外2细胞胚胎(n=6)和8细胞胚胎(n=5)进行切割取样并统计发育率,其中体内囊胚组分为1/2体内胚组(切取半个胚胎)和体内滋养层(trophoblast cells, TE)组(切取体内胚胎少量TE),体外囊胚组、体外2和8细胞胚胎分别为体外TE组(切取体外胚胎少量TE)、体外2细胞(切取体外2细胞胚胎的1个卵裂球)和8细胞组(切取体外8细胞胚胎的1个卵裂球)。切割取样后进行全基因组扩增(whole-genome amplification, WGA),对扩增成功且DNA量大于1 000 ng的样品进行SNP芯片检测,芯片检出率大于90%的进行生产性能评估,低于90%的进行染色体片段缺失分析和数据填充。结果显示:1)切割部分TE后,体内TE组剩余部分和体外TE组剩余部分继续培养24 h后的发育率分别为(94.4±5.6)%和(90.5±6.6)%,而1/2体内胚组剩余部分的发育率显著降低,仅为(22....  相似文献   

13.
The association of bovine immunodeficiency virus (BIV) with embryos derived by in vitro fertilization from oocytes of experimentally infected heifers or oocytes/embryos exposed to the virus in vitro was investigated. Using a nested-PCR assay, proviral DNA of BIV was not detected in follicular fluid or in embryos derived from BIV-infected donors. In vitro exposure of oocytes to BIV during maturation or insemination with BIV-infected semen resulted in zona pellucida-intact embryos testing negative for BIV provirus. However, exposure of zona pellucida-free day-7 embryos to the virus resulted in a positive BIV assay for 28% of the batches of embryos, suggesting that the zona pellucida has a role in protecting against BIV infection. The presence of BIV in the IVF system had no apparent effect on the development of bovine embryos to the blastocyst stage.  相似文献   

14.
模拟发情期(0~6d)母牛外周血浆雌激素和孕酮变化水平,在添加相应水平17β-雌二醇和孕酮的TCM-199液中,培养间情期牛输卵管上皮细胞(BOEC)。5%SDS-PAGE分析BOEC分泌物,发现上皮细胞受类固醇激素作用分泌的2类蛋白质分子量与自然发情期(0~6d)分泌的特异蛋白相似。证明类固醇激素可以调节和启动间情期BOEC的分泌活动。当雌二醇浓度高达1mg/L时,即使不加孕酮,BOEC仍能分泌这2类蛋白质。在培养小鼠原核胚的CZB培养液内添加牛输卵管上皮细胞分泌蛋白(BOEP),与添加间情期牛输卵管冲洗蛋白(BOP)和小牛输卵管冲洗蛋白(COP)相比,能显著提高通过2-细胞阶段胚胎的百分率和桑囊形成率,表明BOEP能较好地促进胚胎的分裂和发育。但BOEP组的桑囊形成率显著低于对照组,表明BOEP中可能缺少某些低于Mr1.0×104的蛋白因子的协调作用,以及含有Mr3.0×104~5.6×104的分泌蛋白的抑制作用而阻碍胚胎分裂与发育。  相似文献   

15.
通过考察牛体细胞核移植重构胚在无血清培养基(IVD101、G1/G2)条件下培养的囊胚发育率及其质量,从而评估无血清培养基支持牛体细胞核移植重构胚体外发育的能力。采用IVD101和G1/G2对牛体细胞核移植胚胎进行体外培养,并以CR1aa+5%FBS作为对照组。无血清培养基IVD101和G1/G2的囊胚发育率与对照组无显著性差异(41.2%&#177;9.1%、42.2%&#177;10.8%,48.0%&#177;9.2%,P〉0.05)。通过囊胚差异染色和冷冻/解冻胚胎存活率分析胚胎质量,发现无血清培养基ICM/Total略低于对照组(31.8%&#177;10.5%、29.5%&#177;11.9%vs .33.0%&#177;14.8%),但无显著性差异(P〉0.05);3个组别的囊胚经程序化冷冻/解冻后无血清培养基的存活率(IVD101、G1/G2)略高于对照组,但差异不显著(84.8%、80.4%'US.77.3%,P〉0.05)。结果证明无血清培养基(IVD101、G1/G2)可以支持体细胞核移植重构胚的体外发育,且其对程序化冷冻的耐受性与添加血清组(CR1aa+5%FBS)相似。  相似文献   

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