用随机扩增多态DNA (RAPD)技术分析野生与笼养绿孔雀种群的遗传多样性

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对野生14个和笼养18个绿孔雀(Pavomuticus)个体进行了种群遗传多样性分析。用23个随机引物对野生与笼养绿孔雀基因组DNA扩增,分别获得161和166个扩增片段。计算发现野生与笼养绿孔雀的种群内平均相对遗传距离分别是0.0555和0.1355,两种群间的平均相对遗传距离为0.1635;野生绿孔雀和笼养绿孔雀种群的Shannon多样性指数平均分别是0.4348和1.0163,表明有显著性差异。以上分析都显示野生绿孔雀的遗传多样性很低。利用UPGMA法聚类显示两个种群都是分别来源于两个家系,可据此进行绿孔雀的繁育管理。图1表3参5。     

一种适合AFLP分析的油茶DNA提取方法

以油茶的成熟叶片为材料提取DNA,40个样品用改良的提取纯化方法成功提取出适用于AFLP分析的高质量DNA,OD260/OD280在1.7-2.0之间,可以用于AFLP反应。该方法打破了仅能用幼嫩叶片作为提取材料的限制,具有更广泛的适用性和重要的实用性。     

油桐DNA快速提取以及RAPD扩增初步研究

油桐（AleuritesfordiiHemsl）是我国重要的工业油料树种。在不断进行的遗传育种过程中,筛选是一项耗时费力的主要工作内容。传统的筛选工作主要依据的遗传标记是成年期的经济性状及其连锁住状,包括外观形态指标和生理指标。由于这些遗传标记往往是模糊的,信息量极少,同时林木育种周期太长,阻碍了油桐等经济树种的品种选育。随机扩增多态性DNA（RAPD）标记技术是一种新兴的分子遗传标记技术,通过提供大量的DNA标记信息迅速推动了生物群体遗传学研究及遗传育种选育的发展［’1。与同工酶标记、RFLP标记技术等相比,具有征作简单…     

Analysis of genetic diversity for wild and captive green peafowl populations by random amplified polymorphic DNA technique

The genetic diversity of the populations for 14 wild green peafowls (Pavo muticus) and 18 captive green peafowls was investigated by using the technology of random amplified polymorphic DNA (RAPD). Totally 161 and 166 amplified bands were obtained by using 23 arbitrary primers to amplify the genomic DNA of wild and captive green peafowls respectively. The results showed that the average relative genetic distance of the wild and captive green peafowls populations was 0.0555 and 0.1355, respectively, and difference of the average relative genetic distances between the two populations was 0.1635. The Shannon diversity index for the wild and captive green peafowl populations was 0.4348 and 1.0163, respectively, which means that there exists significant difference in genetic diversity between the two populations, and the genetic diversity of wild green peafowl was low. The two populations originated from two different families according to analysis by the UPGMA method. This research can provide the theoretical basis for supervising genealogies management of peafowl populations.     

《林业研究》（英文）2004年第15卷第3期中文摘要

本文利用体内法测定了喜树幼苗不同器官以及不同叶位叶片的硝酸还原酶活性(NRA)，同时观察了喜树幼苗不同叶位叶片的NRA的H变化规律，并考查了NRA与叶面积及比叶重的相关性。结果表明，与根、茎及茎尖中的NRA相比，叶片中的NRA最高。不同叶位叶片的NRA有明显的筹异，在所测定的10个不同叶位的叶片中，上数第4～6片叶片的     

红山茶总DNA提取及ITS-PCR扩增条件优化研究

利用CTAB法对红山茶组植物总DNA进行提取研究,发现用嫩叶可获得纯度较高的DNA,样品在-20℃低温下短期保存对DNA的提取质量无明显影响,同时,对红山茶PCR扩增条件中的各个因素也进行了多梯度的优化研究,建立了引物浓度0.5μmol/L、Mg2 浓度为2.0～2.5mmol/L、dNTP浓度为0.2mmol/L、Taq酶的用量为1.2U、DNA模板用量为50～60ng的最佳ITS-PCR扩增条件。     

山茶ISSR扩增条件的优化

以山茶基因组DNA为材料,测试山茶ISSR扩增的最适退火温度,并采用单因素试验,测试了模板DNA量,Mg2+浓度,dNTP浓度,BSA浓度,引物用量,Taq酶用量等6个因素对山茶ISSR扩增的影响。结果显示:山茶ISSR扩增的最适退火温度为56.3℃;适宜的扩增体系为:10μL PCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol.L-1Tris.HCl pH 9.0,50mmol.L-1KCl,0.1%Triton X-100),2 mmol.L-1MgCl2,0.6 mmol.L-14×dNTP,2 mg.ml-1BSA,16 ng模板DNA,10 pmol引物,0.5 U Taq酶。     

油茶ISSR反应体系建立及优化

以改进的CTAB高盐法提取油茶嫩叶总DNA,进行简单重复序列间扩增(ISSR)分析,分别测试了退火温度、模板DNA浓度、M g2+浓度、dNTP s浓度、T aqDNA聚合酶用量和是否加入去离子甲酰胺对反应结果的影响.油茶ISSR分析的最适反应体系为:在20μL PCR反应体积中,含20 ng模板DNA,2.5 mm o l.L-1M gC l2,0.2 mm o l.L-1dNTP s,1UT aqDNA聚合酶,0.5pm o l.μL-1引物,1%去离子甲基酰胺.扩增程序为:94℃预变性2 m in;94℃变性30 s,52℃退火30 s,72℃延伸90 s,反应38个循环;最后在72℃延伸7 m in.     

桤木群体遗传分化研究I.DNA提取和PCR条件的建立

桤木(ＡｌｎｕｓｃｒｅｍａｓｔｏｇｙｎｅＢｕｒｋ)为桦木科(Ｂｅｔｕｌａｃｅａｅ)植物,主要分布于四川盆地及其周边地区。桤木喜光、喜湿,根系发达,对土壤要求不严,适应性强,在长江中下游地区防护林建设中具有重要作用。国外对桤木属(Ａｌｎｕｓ)植物的研究起步较早,主要集中于生理生化方面包括生长、固Ｎ、抗涝性以及种间杂交研究等[1　3]。虽有学者利用ＲＦＬＰ研究其核糖体ＤＮＡ的基因结构、以同工酶技术研究桤木属的群体遗传变异[4　6],但未见应用ＲＡＰＤ技术的研究报道。随着现代生物技术的发展,生物多样性的检测技术日趋成熟和多…     

Micropropagation of Vitex negundo L. and Random Amplified Polymorphic DNA Analysis of Micropropagated Plants

A micropropagation protocol was established for a medicinal plant Vitex negundo. Genetic stability of micropropagated plants was investigated. Multiple shoots were induced from nodal explants cultured on Murashige and Skoog (MS) medium with 0.53 μM naphthalene acetic acid (NAA) and 11.0 μM benzyl aminopurine (BAP) along with additives (ascorbic acid, 283.9 μM; citric acid, 130.1 μM; and arginine, 143.6 μM). Shoots were further multiplied by repeated transfer of the mother explant. The shoots were further multiplied on MS medium + 0.57 μM indole-3-acetic acid (IAA) and 6.6 μM BAP. The micropropagated shoots were pulse treated with 122.5 μM indole-3-butyric acid (IBA), in liquid MS medium and then transferred to autoclaved soilrite. These rooted ex vitro. Shoots were also rooted in vitro on a half-strength MS medium + 2.45 μM IBA. The survival rate of in vitro rooted plantlets was poor during hardening compared to ex vitro rooted plantlets. About 95% of the ex vitro rooted, hardened plantlets survived in the field. Genetic stability of micropropagated plants was tested by using 25 random amplified polymorphic DNA primers. The cloned plants exhibited no variation in banding pattern in comparison with the mother plant.     

湖北中高海拔地区油茶新品种选育研究初报

自2006年起,对湖北省西部等中高海拔地区开展油茶选择育种工作。按照优良单株选择程序和标准,在五峰土家族自治县开展优良单株的初选、复选和决选工作,从192株初选单株中筛选出综合性状表现良好的155,47,167,147和68,134号优良单株,为湖北省西部及中、高海拔地区油茶品种选育提供材料。     

油茶单芽组培生根研究

采用基本培养基、培养温度、光照强度、单芽形态和激素等因素对油茶岑软2号无性系组培苗生根影响的筛选试验。结果表明,1/2ER为油茶组织培养最适基本培养基;ABT60.5 mg/L＋IAA 2.0 mg/L＋NAA0.8 mg/L为最优的激素浓度组合,组培单芽培养40天生根率达93.7%,每个单芽长根3～4条;在室温28℃±2℃,光强2 500～3 500 Lx条件下利于油茶组培苗的生根,生根率高达97.8%。     

油茶产量与密度模型研究

研究了我国油茶主要产区在不同立地条件下,林分密度对油茶产量的影响规律以及密度和产量之间的数量关系,提出了不同立地条件下油茶的最适栽培密度,以期为指导油茶生产提供科学理论依据。     

油茶胚组织离体培养实验

采用油茶上胚轴、下胚轴和子叶作外植体进行油茶组织离体培养诱导愈伤组织发生和不定芽分化的实验.实验结果表明,0.2％的HgCl2消毒处理油茶种胚外植体10 min效果较好;油茶上胚轴、下胚轴和子叶组织在MS+2,4-D2mg/L+KT0.5 mg/L的培养基上,愈伤组织诱导率分别为95.0％、66.7％和30.0％;在MS+6- BA2.5 mg/L+ KT0.1 mg/L+ NAA0.5 mg/L培养基上,不定芽诱导率分别是66.7％、33.3％和11.1％;以MS+6- BA 2 mg/L+ NAA 0.2 mg/L继代培养,上胚轴、下胚轴和子叶所形成愈伤组织芽增殖系数40天时为5.8、5.6和5.3.     

油茶林地土壤的研究

通过对油茶林地比较全面的调查，取得油茶林地土壤样地349块，挖取土壤剖面346个，分析测试土壤样品243份，比较全面系统的分析了江西油茶林地土壤的理化性状以及有机质、营养元素含量的变化，较为客观的对江西油茶林地土壤肥力状况进行了评估。     

油茶嫁接山茶花的技术

对山茶花品种嫁接技术进行了系统研究,结果表明:利用油茶(Camellia oleifera)树桩作砧木,经过砧木树桩的采集、移植、嫁接和嫁接后管理等过程,能较快地培育出较大型、树姿美观的茶梅(Camellia sasanqua)观赏树.油茶砧木树桩来源广,嫁接成本较低,经济效益较好.     

油茶高接换冠嫁接成活率影响试验

用长林系油茶4号、18号、21号、40号和55号5个优良新品种作接穗,对低产的普通油茶林进行高接换冠,开展砧木生长势、嫁接部位直径大小、嫁接高度、保留技数量和接穗新鲜程度5个因子对嫁接成活率的影响试验.结果表明,油茶砧木生长势越强嫁接成活率越高,砧木嫁接部位直径3～8cm嫁接成活率较高,接穗采集后越早嫁接成活率越高,砧木的嫁接高度、保留枝条数量对成活影响差异不显著.油茶砧木生长势强、嫁接部位直径3cm以上、接穗采集当天嫁接的成活率在90％以上.     

油茶胚状体发生诱导初步研究

为探求适宜油茶胚状体发生诱导培养条件,以油茶去壳成熟种子为外植体,进行胚状体发生诱导试验.结果表明:在其他培养条件相同的情况下,不同的油茶品种、不同的植物生长调节剂配比对诱导油茶胚状体发生的影响各异:2,4-D 2.0mg· L-1 +KT1.0mg·L-1对胚性愈伤组织的诱导率最高,达到73％;6-BA 0.6 mg·L-1 +NAA 2.0 mg·L-1对胚状体的诱导率最高,达到73％,诱导效果最佳.