链格孢菌产细交链孢菌酮酸条件的优化研究

鉴于链格孢霉毒素细交链孢菌酮酸（TeA）对防治月季长管蚜有明显效果,为了进一步开发利用TeA,对1株链格孢菌（编号5390）产TeA的条件进行研究,通过单因素试验的方法,研究了不同培养基、不同培养温度、不同培养时间及不同光照条件对TeA含量的影响,在此基础上用响应面对链格孢菌产毒条件进行优化。结果表明产TeA的最佳条件为：理查培养基,黑暗培养,温度30 ℃,培养时间29 d。在此条件下进行试验验证,TeA含量为14.99 μg/g,与模型预测接近。对链格孢属真菌产TeA的培养条件进行筛选,探索真菌培养方式获得链格孢菌毒素TeA的方法,将有利于TeA的进一步开发利用。     

链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸在土壤中的降解研究

细交链孢菌酮酸是病原真菌链格孢菌（A lternaria sp．）产生的主要毒素之一,在霉变的粮食、感病的植物和腐烂的水果中都能检测到,其具有较强的动物毒性,给食品安全带来一定的隐患。分别在实验室和大田条件下对链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸在土壤中的降解动态进行了观察。结果表明,在实验室条件下,微生物对细交链孢菌酮酸在土壤中的降解影响较大,光照的影响较弱,不灭菌条件下,其半衰期小于10d,加药10d时,其降解率就大于50％;灭菌条件下,其半衰期大于30d,加药40d时,其降解率才超过50％。土壤含水量的增加和土壤温度在一定范围内的升高可促进其降解,土壤含水量为12．5％-50％,其半衰期为11．38-5．14d,加药10d时其降解率为38．98％-62．14％,温度为20—40℃时,其半衰期为14．26-5．11d,加药10d时其降解率为36．94％-62．45％。田间研究表明．细交链孢菌酮酸在自然条件下降解的半衰期约为3．22d,20d后就可完全降解。可认为细交链孢菌酮酸属于易降解类物质。     

链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸对空心莲子草的致病性

以空心莲子草离体叶片和植株为材料,采用离体叶片针刺法及离体植株培养法研究链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸对空心莲子草的致病性。结果表明,细交链孢菌酮酸对空心莲子草叶片具有较强的致病性。在31.25 ～ 500.00 μg/mL浓度范围内,随着毒素浓度的升高,空心莲子草叶片的病斑直径增大,500.00 μg/mL时为2.41 mm;浓度为20.00 μg/mL时,毒素对空心莲子草植株不同部位叶片的致病性存在差异,对幼嫩的顶部叶片致病性较强;细交链孢菌酮酸对空心莲子草植株的生长产生抑制作用,抑制强度随浓度的升高而增强,与对照相比,当浓度达到125.00 μg/mL时,毒素对植株生长的长度、鲜重及平均根长的抑制作用达到显著水平,浓度达到250.00 μg/mL时,植株的生根数也受到显著抑制,在最高浓度500.00 μg/mL时,植株处于零生长,生长长度和生根数均为0,鲜重为负增长,达－0.77 g。本研究表明细交链孢菌酮酸具有开发为防除空心莲子草生物源除草剂的潜力。     

链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸对空心莲子草叶片生理生化特性的影响

以空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)成株为材料,采用植物抗性生理分析测定技术研究了链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸对空心莲子草叶片细胞膜透性、叶片内MDA含量、SOD、POD和CAT酶活性变化的影响。结果表明,空心莲子草叶片经细交链孢菌酮酸处理后,细胞膜透性随着细交链孢菌酮酸浓度的增加而增高,MDA含量在500μg/ml以下,随着毒素浓度的增加而升高,500μg/ml以上,又有所下降;随着细交链孢菌酮酸浓度的升高,SOD、POD、CAT活性下降,与对照相比,在1 000μg/ml时,SOD、POD和CAT活性达到最低,分别比对照(CK1)活性降低了86.24%、72.72%和82.05%。可见,细交链孢菌酮酸可严重降低空心莲子草叶片的生理生化活性,显示了其生防潜力。     

狭卵链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸诱导稗草叶片氧化胁迫和抗氧化酶变化的研究

[目的]确定细交链孢菌酮酸（tenuazonic acid,TeA）对稗草的毒害作用是否与其诱导氧化胁迫及抗氧化酶活性变化有关。[方法]通过离体试验研究了TeA处理稗草叶片丙二醛和过氧化氢含量及抗氧化酶活性的变化。[结果]稗草叶片经500μmol/L TeA处理后,叶片中丙二醛和过氧化氢含量分别较对照增加了247.86%和67.00%,表明TeA处理诱导了稗草叶片中活性氧暴发,并导致丙二醛和过氧化氢的大量积累。TeA引起超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GR）和过氧化氢酶（CAT）活性显著升高,其中在500μmol/LTeA处理下,稗草叶片SOD、GR和CAT活性均较对照增加1倍以上。[结论]TeA诱导活性氧的产生引起稗草叶片氧化胁迫,同时诱导叶片抗氧化酶活性升高。     

狭卵链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸诱导稗草叶片氧化胁迫和抗氧化酶变化的研究

[目的]确定细交链孢菌酮酸（tenuazonic acid,TeA）对稗草的毒害作用是否与其诱导氧化胁迫及抗氧化酶活性变化有关。[方法]通过离体试验研究了TeA处理稗草叶片丙二醛和过氧化氢含量及抗氧化酶活性的变化。[结果]稗草叶片经500μmol/LTeA处理后,叶片中丙二醛和过氧化氢含量分别较对照增加了247.86%和67.00%,表明TeA处理诱导了稗草叶片中活性氧暴发,并导致丙二醛和过氧化氢的大量积累。TeA引起超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GR）和过氧化氢酶（CAT）活性显著升高,其中在500μmol/LTeA处理下,稗草叶片SOD、GR和CAT活性均较对照增加1倍以上。[结论]TeA诱导活性氧的产生引起稗草叶片氧化胁迫,同时诱导叶片抗氧化酶活性升高。     

玉米细交链孢菌叶枯病生物学特性研究

研究表明:玉米细交链孢菌生长的温度范围是20~35℃,pH值为3~11,最适温度是20~25℃,最适pH值为8。孢子产生的温度是20~40℃,最适温度是20~25℃。PDA培养基有利于菌丝生长和产孢,光照对产孢有促进作用,扑海因和达克宁对病菌有较强的抑制作用。     

杀菌剂对细交链孢菌的室内抑菌效果

为了筛选对细交链孢菌生长具有较好抑制作用的杀菌剂,分别使用抑菌圈法和生长速率法测定了18种杀菌剂对该菌3个不同菌株室内生长的抑制效果。试验结果表明,咪鲜胺、唑菌腈、丙环唑、戊唑醇、烯唑醇对该菌的抑制效果较好。根据试验结果,分析和讨论了抑菌圈法和生长速率法对该菌生长抑制效果的异同及其原因。     

交链格孢菌EST-SSR信息分析与分子标记通用性评价

为了弄清交链格孢菌(Alternaria alternata) EST数据库中的SSR信息资源,并开发可用于研究近缘种细极链格孢(Alternaria tenuissima)遗传多样性的EST-SSR分子标记。从NCBI数据库下载A.alternata表达序列标签(Expressed sequence tag,EST)共727条,经过研究分析发现,A.alternata EST中SSR含量非常丰富,每5.343 kb含有1个SSR位点。根据SSR两端保守序列,设计合成13对EST-SSR引物,对来自新疆不同地区不同寄主的38株A.tenuissima进行通用性检测。检测结果显示共有5对引物能扩增出多态性条带,扩增多态率为55.56%。因此,基于A.alternata EST数据库开发的SSR分子标记,在开展近缘种A.tenuissima遗传多样性研究时具有较好的通用性。     

由交链孢菌（Alternaria.sp）引起小麦病害的研究

通过对叶部，穗部、籽粒上的症状观察，揭示了由交链孢菌所引起的 三个不同部位发病特点和不同的联系。经室内鉴定证明上述症状均由腐生性强，寄生性弱的细交链孢菌Alternaria tenuis Nees为主病原所致。分析了八十年代该病的发生情况，指出在小麦籽粒浆达最大值前的易感阶段有连阴雨，加上寄主早衰或受损伤时该病更严重。病害在叶部发病导致粒重下降，籽粒灌浆达最大值后再在营养器官上腐生对粒重是无关重要的。而在籽粒上的为害能影响其品质，发芽率和造成霉粒，在采收前后连续降雨，该病愈加严重，使籽粒霉烂的潜在威胁极大，一般情况该病造成单位面积减产不多，若该病流行在一个大面积的降雨区，其总体损失严重，不可低估。     

烟草赤星病菌对菌核净的抗药性测定

为合理防治烟草赤星病,减少抗药性产生和农药残留,从云南省11个地州分离烟草赤星病菌菌株96株,就分离菌株对菌核净的抗药性进行了测定,结果表明,供试菌株中高抗菌株28个,中抗菌株39个,低抗菌株29个。不同来源的烟草赤星病原菌株的抗药性存在差异,以思茅、大理的菌株抗药性最高,昆明、红河、临沧抗药性最低。不同地州分离菌株高、中、低抗菌株的比例存在明显差别。大理永平昌街七昌村分离菌株AL208#抗药性最强,抗性倍数达20.30,玉溪市红塔区的菌株AL171#抗药性最低。96株烟草赤星病菌菌株对菌核净的EC50值平均为81.34 mg/L,范围在13.28~269.58 g/L。     

HPLC法测定蓝莓中鞣花酸含量

建立了蓝莓提取物中鞣花酸含量的HPLC测定方法。色谱条件:ODS HYPERSILC18柱(100 mm×4.6mm,5μm),柱温40℃,用0.05 mol/L CH3OH-EtOAc-KH2PO4/H3PO4(体积比44∶2∶54)作为流动相,检测波长为254 nm。结果表明,鞣花酸含量在0.318~318.0μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 02。平均加样回收率为95.42%,RSD为1.03%。     

防治甜瓜黑斑病菌的药剂筛选

采用生长速率法测定8种杀菌剂对甜瓜黑斑病菌的毒力,结果表明咪鲜胺锰盐和苯醚甲环唑的毒力最高,其EC50分别为0.8602 mg.L-1和1.2407 mg.L-1;咪鲜胺锰盐和苯醚甲环唑对甜瓜黑斑病菌的联合毒力测定结果表明两药以6∶1和1∶1混配,具有增效作用;盆栽试验结果表明咪鲜胺锰盐-苯醚甲环唑(6∶1)的预防效果和治疗效果最好,分别达到100.00%和90.54%;抑菌谱试验发现咪鲜胺锰盐单剂和咪鲜胺锰盐-苯醚甲环唑(6∶1)混剂对6种病原菌的抑制作用最好。     

链格孢菌代谢产物的抑菌活性

采用室内生物测定方法对链格孢菌代谢产物的抑菌活性进行了研究.结果表明:链格孢菌不同极性代谢产物对小麦赤霉病菌、水稻稻瘟病菌、油菜菌核病菌、烟草灰霉病菌及杨树溃疡病菌5种植物病原真菌产生不同程度的抑制作用,乙酸乙酯相的抑制作用最强,正丁醇相次之;乙酸乙酯相含量为800 μg·mL1时,其代谢产物对5种病原真菌的抑制率分别...     

云南烟草赤星病菌遗传多样性的RAPD分析

 运用RAPD分子标记技术分析了来自云南各地24个烟草赤星病菌株的遗传多样性。结果表明，12个随机引物共扩增出了145条DNA条带，所扩增出的DNA条带均为多态带，表明云南烟草赤星病菌存在丰富的遗传多样性。不同地点赤星病菌的遗传结构之间都有一定的差异，生态环境相似性越大的地点，赤星病菌的遗传结构相似程度就越高。赤星病菌的遗传结构也随寄主品种(基因型)的不同而表现出一定的差异，寄主品种的遗传背景影响着赤星病菌的遗传结构。     

HPLC法测定果实中花色素苷含量

建立了果实中花色素苷的HPLC测定方法,采用ODS-C18柱(250 nm×4.6 nm),流动相A:1.6%甲酸水溶液;B:1.6%甲酸甲醇溶液,梯度洗脱为0~5 min,85%A 15%B;5~10 min,80%A 20%B;10~30 min,72%A 28%B;30~36 min,40%A 60%B;36~48 min,100%B。检测波长510 nm,流速为1 mL/min。2种花色素苷在0.00104~0.0104 mg/mL范围内线性良好,最低检出限为0.02μg/mL,平均回收率为99.5%和99.25%,平均标准偏差为1.98%和2.50%,并测定了大石早生李和藤稔葡萄中花色素苷含量。     

HPLC法测定大豆中嘌呤含量的研究

建立大豆中多组分嘌呤组分的高效液相色谱分析方法.通过高效液相色谱分析技术,确定水解条件以及色谱分离条件.样品确定的色谱分离条件为:Waters symmetryshield RPl8(4.6 mm×150 mm,5.0 μm)色谱柱,以0.02 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH4.6)作为流动相,流速0.6 mL·min-1,柱温25℃,进样量5 μL,检测波长(入1)为254 nm;当流动相pH为4.6时,各组分嘌呤得到完全分离,腺嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤和次黄嘌呤的含量分别为0.732 3、0.821 2、0.020 2和0.031 8 mg·g-1;但回收率不高,分别为68.90%、88.37%、57.19%和68.16%;样品的最佳水解时间为0.5 h.     

烟草赤星病研究现状及存在问题

烟草赤星病是烟草生产上危害最大的病害之一 ,迄今对病菌生物学特性 ,寄主抗病性 ,病害消长规律以及综合防治等方面进行了广泛的研究。本文综述了烟草赤星病的研究成果 ,分析了赤星病研究工作中存在的问题 ,提出了加强病害预测预报 ,病菌生理分化 ,寄主—病原物互作机制以及利用生物技术获得抗源材料研究的未来烟草赤星病研究新领域