林生山黧豆体内二氨基丁酸合成代谢的初步研究(简报)

本试验每个处理采用50μCi DL-[2,3-~3H]-天门冬氨酸(1μCi·μL~(-1))作为标记物,引入180mg 林生山黧豆带叶胚芽中,2h 吸收完毕后,继续光照处理,分别按3,6,9,12,15,18,21和24h 终止反应,提取游离氨基酸,以丹磺酰化制成 DNS-氨基酸,聚酰氨薄膜双向     

水分胁迫,盐胁迫和热激对林生山黧豆体内游离氨基酸含量的影响

用氨基酸自动分析仪测定经PEG、NaCl和高温处理后林生山黧豆幼苗中游离氨基酸的组成和含量。结果表明不同处理，特别是水分胁迫，使林生山黧豆幼苗中以DABA和HSE为代表的游离氨基酸的含量显著增加。本文讨论了不同胁迫条件对植物游离氨基酸组成的影响，以及林生山黧豆幼苗游离氨基酸组成对逆境反应的特点。研究证明，以DABA为主的天门冬族氨基酸是不同发育阶段和不同胁迫条件下林生山黧豆体内游离氨基酸的主体。     

山黧豆作为饲料资源的研究进展

山黧豆具有耐寒、耐旱、耐贫瘠等优良生产性状,营养丰富,可作为干旱半干旱地区潜在的饲料资源。动物长期饲喂山黧豆会引起山黧豆中毒,导致下肢瘫痪或死亡,这限制了山黧豆的开发利用。文章综合论述了山黧豆的饲料品质、毒素以及饲养效果,为山黧豆的进一步研究提供依据,以期探讨山黧豆作为一种蛋白质饲料资源的应用前景。     

米胚芽谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质的研究

【目的】分离纯化米胚芽谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD),并对其酶学性质进行研究。【方法】通过(NH4)2SO4分级沉淀、DEAE-Sephrose FF离子交换色谱、Superdex 200凝胶过滤色谱和Glu SephroseCL 4B亲和色谱等分离纯化技术,对米胚芽GAD进行分离纯化。用体积排阻高效液相色谱测定米胚GAD的相对分子质量,SDS-PAGE测定其亚基的相对分子质量。测定米胚GAD的最适温度和pH,通过酶动力学试验测定其动力学常数(Km)和最大反应速度(Vmax),并测定KCl和MgSO4等化学物质对酶活性的影响。【结果】分离纯化得到了米胚GAD,其纯化倍数为65.7,比活达223.4 U/mg,酶活回收率为10.8%。米胚GAD的相对分子质量为78 ku,亚基相对分子质量为40 ku,说明米胚GAD是由2个相同亚基构成的二聚体。米胚GAD的最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.6;米胚GAD的热稳定较差,80℃时酶几乎完全失活;米胚GAD在pH 4.5~8.0较为稳定,能保持88%以上的酶活。米胚GAD对谷氨酸Glu的Km为32.3 mmol/L,Vmax为1.159 mg/min;对磷酸吡哆醛(PLP)的Km为1.7μmol/L,Vmax为1.171 mg/min。K+和Ag2+对米胚GAD的活力有较大抑制,Mg2+、Mn2+、Al3+和Li2+等对活性影响不大,500μmol/L Ca2+对米胚GAD有较强的激活作用。【结论】米胚GAD的性质与其他植物GAD存在差异。     

山黧豆及其有毒成分(BOAA)的毒理学研究

 山黧豆粉通过乙醚回流萃取，减压浓缩，热水重结晶，获得β-草酰氨基丙氨酸（BOAA）纯品。试验研究包括急性中毒试验，慢性中毒试验，致癌试验，动物繁殖试验，致畸试验，临床观测，血液学和肝肾功能检查，病理解剖学和病理组织学检查，超微结构观察，心电图检查。试验结果，BOAA小白鼠腹腔注射LD#-(50)为748.86mg/kg，雏鸡腹腔注射LD#-(50)为694.93mg/kg，表现为明显的中毒性神经症状；动物长期饲喂大剂量高毒山黧豆，脊髓、脑神经细胞和肝、肾实质细胞出现明显的病理性损伤。山黧豆毒素无致癌或促发肿瘤的作用，对动物繁殖能力无明显影响，胚胎检查亦无畸形表现。试验证明，山黧豆有毒成分（BOAA）为神经毒素，其经血液循环，透过血脑屏障，主要伤害中枢神经系统。本文还针对低毒山黧豆作为畜禽高蛋白饲料的应用前景和推广使用过程中的注意事项进行了探讨。     

林生山黧豆体内的一种特异游离氨基酸——丁二氨酸(综述)

林生山黧豆是由美国引进的一种多年生豆科植物,它根系发达,枝叶繁茂,并具有抗逆力强、生产力高、动物饲养价值高等多种优良特征特性。在牧草生产和生态平衡失调地区水土保持中有着极好的利用前景。目前在我国北方地区试种的结果已表明这种植物在我国有较好的适应能力。如能加强对林生山黧豆在农学、畜牧学和生理生化方面的研究,加速推广这种植物在生产中的利用,必将为广大农牧区,特别是许多自然条件恶劣、自然生态平衡失调的地区带     

发芽粟谷中谷氨酸脱羧酶的主要酶学性质初探

[目的]探讨发芽粟谷[Setaria italica（L.）Beauv.]中谷氨酸脱羧酶（GAD）的主要酶学性质。[方法]以发芽粟谷为试材,研究发芽粟谷GAD的活性及其主要酶学性质。[结果]发芽粟谷GAD最适温度为40℃,其耐热性较差,32℃保温1 h后其酶活保持率为86.3%;发芽粟谷GAD最适pH值为5.5,在pH值5.0～5.5范围内酶活保持率在80.0%以上;发芽粟GAD对Glu的Km为22.36mmol/L,Vmax为2.28μmol/min;Ca2＋、Mg2＋、Li＋、PLP和VB6对发芽粟谷GAD活力具有促进作用,而Zn2＋、La3＋、Cu2＋起抑制作用,Mn2＋、Na＋、Fe2＋和EGTA则无显著影响。[结论]该研究可为利用发芽粟谷内源GAD富集GABA提供理论依据。     

橘小实蝇谷氨酸脱羧酶的生化及分子特性

【目的】在测定橘小实蝇（Bactrocera dorsalis）γ-氨基丁酸（GABA）含量和谷氨酸脱羧酶（GAD）活性的基础上,克隆获得橘小实蝇GAD基因（BdGAD1）全长序列,进一步解析GABA、GAD以及BdGAD1在橘小实蝇各发育阶段、成虫不同体段以及经阿维菌素刺激后的表达模式,分析橘小实蝇GAD对阿维菌素作用的应激反应,为系统解析GABA介导的阿维菌素抗药性机制提供基础数据。【方法】采用高效液相色谱法测定橘小实蝇体内GABA含量,分析阿维菌素刺激对GABA含量的剂量和时间效应;以谷氨酸为底物,采用微量滴度酶标板法测定橘小实蝇经阿维菌素刺激后GAD活力的变化;通过同源序列比对的方法,从橘小实蝇转录组数据中筛选出1条GAD基因片段,利用cDNA末端快速扩增技术（RACE）获得该基因的全长cDNA序列;应用生物信息学分析软件对该基因的开放阅读框、编码的氨基酸序列、分子量等信息进行预测,并基于最大似然法构建该基因与其他昆虫相关基因序列的系统发育树,明确其系统进化关系。此外,分别提取橘小实蝇各发育阶段和成虫不同体段的RNA,以表达稳定的α-Tubulin为内参基因,应用qPCR技术,解析BdGAD1在橘小实蝇各发育阶段（卵、幼虫、蛹和成虫）和成虫不同体段（头、胸、腹）以及经阿维菌素刺激后的表达模式。【结果】经阿维菌素刺激后,橘小实蝇体内GABA含量升高,且与阿维菌素剂量及处理时间呈正相关,暗示橘小实蝇可能通过调节GABA含量以抵御阿维菌素的毒害。同时,橘小实蝇体内GAD的比活力也随药剂剂量增加而升高。通过RACE扩增,获得了橘小实蝇BdGAD1的cDNA全序列,长度1 755 bp,开放阅读框1 197 bp,编码398个氨基酸,GenBank登录号为KC763804。基于最大似然法构建的系统发育树显示,该基因编码的蛋白质与冈比亚按蚊的GAD亲缘关系最近,序列一致性高达97%。qPCR分析结果表明,BdGAD1在幼虫期表达量最高,不同体段间相比较发现该基因在成虫腹部的表达量最高。经阿维菌素刺激后,BdGAD1表达水平上调。【结论】BdGAD1的表达具有发育阶段和体段特异性。阿维菌素能够刺激橘小实蝇体内BdGAD1表达水平上升,进而引起GAD活力增加促使虫体合成产生大量的GABA,这可能是橘小实蝇抵御阿维菌素毒害甚至产生抗药性的原因。     

Response of Endogenous Salicylic Acid and Jasmonates to Mechanical Wounding in Pea Leaves

The roles of on endogenous jasmonates （JAs） and salicylic acid （SA） in wounding response were investigated. Pea （Pisum sativum L.） seedlings were treated with three different methods including mechanical wounding, JAs application, and SA application. The contents of endogenous JAs and SA, as well as the activities of the related enzymes were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）, high performance liquid chromatography （HPLC）, and spectrophotometer, respectively. The results showed that endogenous JA rapidly accumulated within 30 min after wounding. The increase in the activities of both lipoxygenase （LOX） and allene oxide synthase （AOS） lagged behind JAs burst. A second slight increase in JAs level was observed at 24 h after wounding treatment, and at the same time point, higher activities of LOX and AOS were also detected. Endogenous free SA content decreased accompanied with JAs burst. Effects of exogenous JA application were similar to those of wounding treatment on endogenous SA level and phenylalanine ammonia lyase （PAL） activity, whereas exogenous SA application led to the significant inhibition of LOX and AOS activities and the decrease of endogenous JAs level at the early stage of treatment. It is thus suggested that JAs burst and SA decrease in early response to wounding may constitute an important mechanism by which plant starts the related defense reaction and adapts to wounding stress.     

乳酸片球菌产谷氨酸脱羧酶的相关酶学性质研究

为研究乳酸片球菌谷氨酸脱羧酶（GAD）的性质,采用比色法测其酶活。结果表明：当底物L-MSG的浓度为100 mmol.L-1时,GAD的活力达到最大。GAD的浓度为3.16%,最适温度为37℃,最适pH为5.0,PLP浓度为0.1 mo.lL-1时,GAD酶活力最大。Mg2＋和Mn2＋使GAD活力提高10%左右,KCl...     

我国豌豆品种状况及天津豌豆新品种引种

对豌豆的原产地和习性、我国豌豆的种植简况和发展豌豆生产的必要性以及我国目前豌豆的育种和引种状况作了介绍。对天津豌豆生产状况、引种的必要性和天津豌豆新品种引进的方向做了简单介绍和分析,并指出豌豆品种的利用应侧重于高质量品种的引进与推广。     

黄瓜发芽期耐冷性与赖氨酸脱羧酶基因表达

 经15℃低温诱导，采用cDNA-AFLP技术从耐冷性强的黄瓜品种长春密刺中分离到一条特异片段，该片段在耐冷性弱的北京截头中不能被诱导，命名为cctr132。将cctr132回收测序并翻译为氨基酸序列，用blastx和blsatp程序在NCBI GenBank数据库中进行同源性检索和相似性比对，结果发现cctr132与水稻推测的类赖氨酸脱羧酶蛋白同源性为88.37%，相似性为100%，并且在CCTR132中检测到了赖氨酸脱羧酶家族推测的保守结构域PGGXGTXXE，说明黄瓜发芽期耐冷性与赖氨酸脱羧酶基因表达有关。     

FRW阻燃中密度纤维板与素板性能的比较

以FRW为阻燃剂,研制FRW阻燃中密度纤维板(MDFR).通过FRW阻燃中密度纤维板与素板各项性能的比较,分析FRW阻燃剂对中密度纤维板性能的影响.结果表明:施加FRW阻燃剂,使中密度纤维板的物理力学性能有所降低,而阻燃性却明显提高.通过对制板工艺条件的适当调整,可使FRW阻燃中密度纤维板(MDF)的物理力学性能达到国家一级品标准,阻燃性能达到JISD1322-77难燃一级标准.     

樟子松树皮多酚螯合亚铁制备工艺

[目的]优化樟子松树皮多酚与亚铁离子螯合的工艺参数。[方法]通过水体系合成法建立了樟子松树皮多酚与亚铁离子螯合的工艺,并通过响应面法优化了螯合工艺方法,得到螯合率较高的环状螯合物,并对其结构进行分析。[结果]试验得到最佳螯舍工艺条件为螯合pH为6．8,质量比为3．1：1,螯合温度为43．6℃,此工艺条件下樟子松树皮多酚与亚铁离子螯舍率可达到（39．16±0．89）％;通过紫外光谱分析研究表明,樟子松树皮多酚与亚铁离子发生螯合反应,导致其原有结构发生改变,反应产品呈螯合物特征结构。[结论]研究可提升松多酚以及亚铁离子的生物效价。     

山楂加工中还原型VC和氧化型VC含量变化的研究

 【目的】研究山楂加工过程中还原型VC和氧化型VC含量的变化。【方法】通过观测山楂打浆、糖煮和干燥工序中还原型VC和氧化型VC含量的变化，来研究其变化规律。【结果】应用EDTA 二钠和茶多酚处理能控制打浆中还原型VC损失，添加六偏磷酸钠可控制氧化型VC损失。真空糖煮比常压糖煮有利于山楂还原型VC含量的保持，但对氧化型VC含量影响不大。干燥对山楂还原型VC与氧化型VC含量均有显著影响。真空干燥和微波干燥有利于山楂还原型VC含量的保持。【结论】山楂果实含有较多的氧化型VC，其在加工过程中变化较明显，对山楂制品的总VC含量有显著影响。