狼爪瓦松愈伤组织生物反应器培养及提高有效物质积累研究

为筛选狼爪瓦松愈伤组织生物反应器培养的适宜接种量,该试验研究了4种接种量(10.0、12.5、15.0、17.5 g/L)对愈伤组织生长和有效物质积累的影响。结果表明:随着接种量的增加,愈伤组织生物量随之升高,在接种量为15 g/L时,狼爪瓦松愈伤组织中总黄酮、总酚及总多糖的含量和生产量达到了最大值。另外,为促进愈伤组织中有效物质的积累,以茉莉酸甲酯(MeJA)作为诱导子,在愈伤组织培养25 d后用不同浓度的MeJA处理。结果发现MeJA处理对愈伤组织中有效物质的积累有促进作用,当MeJA浓度为100μmol/L时,狼爪瓦松愈伤组织中黄酮、总酚和总多糖的含量及生产量达到最大。     

茉莉酸甲酯对生物反应器培养高山红景天愈伤组织有效物质积累的影响

为提高高山红景天愈伤组织中有效物质的积累,试验研究了茉莉酸甲酯(MeJA)的处理时间及浓度对生物反应器内培养的愈伤组织中有效物质含量及生产量的影响。结果表明:MeJA处理对愈伤组织中有效物质的积累有促进作用,在反应器培养20d时,加入MeJA 175μmol处理3d最有利于红景天苷、酚类、多糖及黄酮含量的增加;MeJA 275μmol处理,对红景天-苷、酚、多糖及黄酮等有效物质的积累效果最佳,其生产量分别为未处理的4.6、1.6、1.3和1.3倍。因此,利用生物反应器培养愈伤组织生产高山红景天有效物质时,可在培养第20天时加入275μmol的MeJA处理3d,可在短期内达到有效物质生产量最大化。     

CPPU对鸡冠花愈伤组织生长及花青素积累的影响

以含2,4-D 0.2 mg·L-1的B5培养基为基础,研究CPPU单独使用和其与BA混合使用后,对鸡冠花愈伤组织生长和花青素积累的影响.结果表明,低浓度的CPPU(0.5～5 mg·L-1,尤其是0.5～2.5 mg·L-1)能显著促进鸡冠花愈伤组织生长和花青素的积累,0.5 mg·L-1CPPU的作用与2 mg·L-1BA相当.在已含2 mg·L-1BA的培养基中,0.5～2.5 mg·L-1的CPPU对鸡冠花愈伤组织生长和花青素的积累有一定的增效作用.当细胞分裂素浓度稍高(大于10 mg·L-1CPPU或5 mg·L-1CPPU 2 mg·L-1BA)时,则对鸡冠花愈伤组织的生长和花青素积累起抑制作用.     

狼爪瓦松中活性成分提取工艺的优化

为建立狼爪瓦松叶中黄酮、萜类同步快速提取工艺,为狼爪瓦松活性成分开发提供理论基础,以狼爪瓦松为原料,以总黄酮、总萜提取率为技术指标,通过提取方法对比试验,采用正交设计探讨提取工艺的影响因素。结果表明:各因素影响依次为提取时间温度功率固液比,其最佳工艺参数为超声温度60℃,固液比1∶20,提取时间40min,超声波功率100W,该工艺下,2种活性物质主要指标均比传统提取法高,总萜得率为2.66%,总黄酮得率为0.901%。放大10倍试验表明,工艺较稳定,标准偏差均在2.5%以内。     

不同生长调节物质对苎麻愈伤组织诱导的影响

用3种细胞分裂素和4种生长素类生长调节物质进行苎麻(Boehmeria nivea)单因素、双因素诱导愈伤组织试验，结果表明苎麻的脱分化容易。在培养基中仅加2，4-D和6-BA均能较快地启动苎麻下胚轴、子叶、叶、茎外植体的脱分化。6-BA与2，4-D、IBA、IAA、NAA组合使用诱导愈伤效果均较好，生长势强；ZT和IBA、2，4-D组合、KT与2，4-D和NAA组合均有好的诱导效果。细胞分裂素类用量范围2．0～2．5mg／L，生长素类用量范围0．2～1．0mg／L，对诱导苎麻愈伤发生及增殖有较好的效应。     

激素对东北矮紫杉愈伤组织中紫杉醇积累的影响

为了利用植物生长调节剂组合促进东北矮紫杉愈伤组织生长和紫杉醇的积累,以东北矮紫杉幼茎为材料诱导愈伤组织,分析不同种类和水平植物生长调节剂条件下愈伤组织的增殖速度和紫杉醇含量.结果表明,东北矮紫杉愈伤组织在24 d的培养过程中基本呈"S"型;细胞生长对数期,紫杉醇积累下降或上升缓慢,进入生长稳定期,紫杉醇的含量达到最高值.适宜浓度的2,4-D和NAA均能促进东北矮紫杉细胞的生长,以1.5 mg/L 2,4-D组合最有利于东北矮紫杉愈伤组织的增值;6-BA组合有利于紫杉醇积累,其平均含量在100 μg·g-1之上.因此,利用植物生长调节剂促进东北矮紫杉愈伤组织生长及紫杉醇的积累是可行的.     

长白山区狼爪瓦松花器结构初步观察

以长白山区野生狼爪瓦松新鲜花朵为试验材料,采用常规石蜡切片法观察了狼爪瓦松花器的显微结构。结果表明:狼爪瓦松每朵花有5枚花萼与5枚花瓣,其中包含10枚雄蕊和5枚雌蕊;雄蕊的每个花药具有4个花粉囊,成熟花粉粒为2-细胞型,有3个萌发沟,3个萌发孔;雌蕊属离生雌蕊,子房上位,每个子房包含多个胚珠,胎座属侧膜胎座类型。     

黄豆芽愈伤组织培养条件对Vc积累的影响

优化了黄豆芽愈伤组织培养条件,建立了合适的黄豆芽细胞悬浮培养体系。以在25℃无激素条件下自然生长的豆芽子叶、叶芽、芽茎、芽根等部位为外植体诱导愈伤组织,以次生代谢产物Vc积累最多为目标,考察外植体、基础培养基、萘乙酸(NAA)浓度以及pH值的影响。结果表明:叶芽在pH值为5.0的B5培养基中,能有效诱导愈伤组织,且目标产物Vc积累最多。低浓度NAA对黄豆芽愈伤组织诱导及次生代谢产物Vc积累影响不大,随浓度增加,影响加大。     

铜和锌对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累的影响

[目的]考查培养基中铜元素和锌元素的含量对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累的影响。[方法]通过建立维生素E积累和细胞生长的数学模型,描述小麦胚芽愈伤组织的维生素E积累和细胞增长。以次生代谢产物维生素E积累最多为目标,通过试验优化确定铜锌含量的最佳组合。[结果]结果表明,当B5培养基中ZnSO4.7H2O为2.0mg/ml;CuSO4.5H2O为0.1mg/ml时,有利于维生素E积累。维生素E积累的动力学模型的拟合度为97.53%,细胞干重的动力学模型拟合度为95.60%,非线性关系良好。[结论]微量元素铜和锌对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累有影响,铜元素较锌元素的影响显著,且低浓度的铜锌之间有协同作用;随着浓度增大,抑制作用逐渐增强。     

不同因子对蝟实愈伤组织诱导及愈伤组织继代的影响

本文以虫胃实茎段、叶柄、叶片为外植体 ,将其培养于附加BA和NAA不同激素配比的MS或B5基本培养基上。结果表明 :在附加BA 2 /L和NAA 0 5 /L的B5培养基上外植体出愈快 ,愈伤组织诱导率高。在愈伤组织继代中 ,不同种类激素组合、激素浓度配比及不同琼脂浓度对愈伤组织的继代质量有不同影响 :1%的琼脂浓度、BA 2 /L +NAA 0 0 5 /L时 ,愈伤组织生长速度适中、质地较致密 颜色翠绿 ,适合作进一步研究的材料。     

狼爪瓦松全草粗提物体外抑茵作用研究

目的]研究狼爪瓦松（Orostachys cartilaginous A.Bor）全草粗提取物体外抑菌作用。[方法]采用液-液萃取法对狼爪瓦松的体积分数为0.75的丙酮提取液的活性成分进行初步分离,制备氯仿、乙酸乙酯、正丁醇及水相萃取物。采用滤纸片法和2倍连续稀释法测定了各相萃取物对4种供试菌的体外抑菌效果。[结果]狼爪瓦松全草体积分数为0.75的丙酮提取液的各萃取相对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和普通变形杆菌有不同程度的抑菌活性,其中氯仿萃取相、乙酸乙酯萃取相对金黄色葡萄球菌显示了较好的抑菌效果,最低抑菌浓度均为1.25 mg/m l。[结论]中药狼爪瓦松全草的抑菌活性成分主要存在于氯仿萃取相和乙酸乙酯萃取相中,为狼爪瓦松抑菌药物的开发提供了理论依据。     

植物生长物质对冬凌草愈伤组织生长及褐化的影响

研究了不同种类植物生长物质对冬凌草愈伤组织生长及褐化的影响,结果表明:培养基中植物生长物质的种类、浓度及其组合对愈伤组织生长及褐变起着重要的作用;适宜浓度的生长素(2,4!D、NAA和IBA)、细胞分裂素(6!BA和KT)、GA3能不同程度地促进愈伤组织的生长,减轻或抑制褐化作用,其中以2 mg/L2,4!D+0.2 mg/LKT+0.5 mg/LGA3效果最好。     

支持物对月季愈伤组织诱导的影响

分别用脱脂棉、琼脂和河沙为支持物,以MS＋NAA1．00mg／L＋6-BA0．50mg／L为培养基,对月季茎段愈伤组织诱导进行了试验。结果表明,支持物为脱脂棉的培养基对月季茎段愈伤组织诱导有较好的效果,但污染稍大。     

钙对低温下柑橘愈伤组织渗透物质的调节

研究了不同Ca2 浓度和Ca2 信号系统抑制剂对低温下柑橘愈伤组织中3种主要渗透调节物质的影响。结果表明,外源5 mmol/L Ca2 能明显地增加柑橘愈伤组织可溶性蛋白质、可溶性糖和脯氨酸含量。采用Ca2 螯合剂EGTA或钙调素拮抗剂TFP对柑橘愈伤组织低温处理12 d后,柑橘愈伤组织中可溶性蛋白质、可溶性糖和脯氨酸含量降低。以上结果说明Ca2 信号系统参与了调节柑橘抗寒过程中渗透物质的合成。     

植物激素对韭菜愈伤组织诱导的影响

[目的]研究激素配比对韭菜愈伤组织培养和继代的影响。[方法]韭菜种子胚根为外植体诱导愈伤组织并继代培养。[结果]MS+NAA 1 mg/L+6-BA 2 mg/L适宜胚根诱导愈伤组织并进行继代培养。[结论]适宜的生长激素组合有利于韭菜愈伤组织的诱导。     

植物激素对玉米愈伤组织诱导的影响

设计了含有不同植物激素的4种培养基用于玉米未成熟合子胚愈伤组织的诱导,以确定植物激素在玉米愈伤组织诱导中的作用。结果表明,KT和6-BA会明显降低愈伤组织和胚性愈伤组织的诱导频率,对愈伤组织的生长有明显的抑制作用;2,4-D在愈伤组织诱导中起着重要作用,但是在诱导培养基中添加3.3mg/L Dicamba比2 mg/L 2,4-D的诱导效果更好,除了能提高愈伤组织诱导频率外,更重要的是能提高胚性愈伤组织比例和获得更好的愈伤组织生长状态;并获得了一个用于从玉米未成熟合子胚高效诱导出良好愈伤组织的培养基配方LM6-CI。     

秋水仙碱对猕猴桃愈伤组织分化的影响

[目的]探讨秋水仙碱对猕猴桃愈伤组织分化的影响。[方法]利用组织培养技术,研究秋水仙碱的不同浓度和处理时间对愈伤组织分化率和不定芽数量的影响。[结果]秋水仙碱对猕猴桃愈伤组织不定芽分化率有很大的影响。阔叶猕猴桃愈伤组织在秋水仙碱0.05%下处理24 h,其不定芽分化率达100%,而对照为58.33%。在0.50%秋水仙碱浓度下处理24 h,海沃德愈伤组织的不定芽分化率达到最高为75%。金桃胚乳愈伤组织不定芽分化率达到最大时的秋水仙碱浓度为0.20%,处理时间为24 h。[结论]秋水仙碱处理对猕猴桃再生芽数的影响因猕猴桃种类而异,海沃德再生芽数的最佳组合:0.20%的秋水仙碱处理24 h;阔叶猕猴桃再生芽数的最佳组合:0.05%的秋水仙碱处理24 h。     

5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响

以MS为基本培养基,研究不同浓度的5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响.结果表明:MS培养基中NH4 NO3、KN03浓度分别降至1/2C时,有利于愈伤组织生长和黄酮积累;当KH2P04浓度为3/2C时,愈伤组织生长量与黄酮含量均达到最大值,分别为0.53g/瓶和4.67%;MgSO4浓度在3/2C时,愈伤组织生长良好,而1/2C有利于黄酮积累;CaCl2在一定范围内不会影响愈伤组织生长,适当提高Ca2+浓度有利于黄酮积累.     

小麦胚芽愈伤组织培养条件对维生素E积累的影响

本研究通过优化小麦胚芽愈伤组织培养条件,建立了合适的小麦胚芽细胞悬浮培养体系。选用B5、N6和SH作为诱导培养基,采用液体悬浮培养,通过正交试验优选法确定最适培养条件。以次生代谢产物维生素E积累最多为目标,考察培养基、温度以及pH值的影响。结果表明,小麦胚芽在B5培养基中,于pH值5.0、25℃条件下培养144 h,能有效诱导愈伤组织,且目标产物维生素E积累最多。