动物源性空肠弯曲杆菌耐药性地域差异性分析

从上海家禽批发市场采集鸡盲肠内容物样品,分离到47株空肠弯曲杆菌,从上海屠宰场采集猪盲肠内容物样品,分离到99株空肠弯曲杆菌,分别测定分析了这些空肠弯曲杆菌耐药性; 通过对不同产地鸡源空肠弯曲杆菌耐药性状况比较结果显示,江苏南通、江苏海门和浙江金华分离到的鸡源空肠弯曲杆菌对9种抗生素(见表1)都有不同程度的耐药性,对万古霉素、红霉素和氨苄青霉素的耐药性达到100%。江苏海门、上海崇明和浙江温岭、金华等地的菌株分别对克林霉素和氨苄青霉素显示了高耐药性,分别达到90%、100%;通过对不同产地猪源空肠弯曲杆菌耐药性状况比较结果显示,山东莘县分离到的猪源空肠弯曲杆菌对9种抗生素都有不同程度的耐药性,对万古霉素、红霉素、克林霉素和氨苄青霉素的耐药性达到80%以上。河南孟津和安徽淮北分离到的猪源空肠弯曲杆菌对除头孢拉定之外的8种抗生素都有不同程度的耐药性,对氨苄青霉素的耐药性达到100%。结果显示动物源性空肠弯曲杆菌耐药性存在明显的地域差异性。     

猪源空肠弯曲杆菌的分离及鉴定

为了研究更快、更加准确分离空肠弯曲杆菌的方法,试验同时采用常规生化法对由12份猪盲肠内容物中分离的可疑菌进行检测,得到了6个阳性样品,经特异性PCR检测,2个样品可定性为空肠弯曲杆菌,检测时间为7 d;而对所得菌株直接进行PCR检测,检测结果相同,检测时间为2 d。结果表明:PCR可以快速、特异性地检测空肠弯曲杆菌,与常规生化检测法相比是一种更有效的方法。     

华东地区猪病毒性腹泻感染状况调查

为了解华东地区猪病毒性腹泻的感染状况,我们应用RT-PCR方法对2013~2014年间采集的156份临床样品(粪便、肠内容物、肠系膜淋巴结等)进行了病原学检测。检测结果显示:PEDV阳性样品98份,阳性率为62.8%;TGEV阳性样品14份,阳性率为9.0%;PoRV阳性样品6份,阳性率为3.8%,上海、江苏、浙江、安徽、江西和山东等地区腹泻猪群中均存在PEDV感染,部分猪场还存在TGEV和PoRV感染,但PEDV的感染率最高,这与国内的其他研究报道较为一致。本调查掌握了我国华东地区猪病毒性腹泻的感染状况,为猪病毒性腹泻病的防控提供了参考依据。     

间接ELISA对鸡猪空肠弯曲菌快速检验的实验研究

以方阵滴定法确定了空肠弯曲菌抗血清、酶结合物的最佳工作浓度和孵育时间,从而立了快速检测空肠弯曲菌的间接ELISA。该试验可检出含8～10个空肠弯曲菌经24h培养的标本(含30万个菌/ml的肉汤培养物);不与沙门氏菌等15种对照菌及其混合液发生交叉反应。以鸡源和猪源空肠弯曲菌抗血清分别作为ELISA的第一抗体,对144份鸡泄殖腔粪便标本和116份猪直肠粪便标本的选择性增菌肉汤培养物进行了检测。其阳性率分别为83.3％和79.3％,可于28h内报告结果;常规法对上述标本的阳性检出率分别为85.4％和81％,但程序繁琐,需5～7d方能获得最终检查结果。两种方法对鸡、猪粪便标本检测结果的阳性符合率,分别为97.5％与97.9％。     

部分省市鸡群空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的流行状况分析

本研究采用多重PCR方法对我国部分省市不同品种、不同类型的鸡群进行空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行病学调查。结果发现,在3132份鸡肛门棉拭样品中,检测出583份空肠弯曲菌阳性样品,平均阳性率18.61％;48份结肠弯曲菌阳性,平均阳性率1．53％。鸡饲养环境样品217份,6份空肠弯曲菌阳性,阳性率2．76％。不同鸡群感染率悬殊较大,空肠弯曲菌阳性率从0％-73．3％、结肠弯曲菌阳性率从0％-7．4％。30个鸡群中空肠弯曲菌阳性率为86.67％,结肠弯曲菌阳性率43．33％。本调查结果表明我国鸡群中空肠弯曲菌、结肠弯曲菌的流行呈现多样化。     

上海等4省市动物冠状病毒的流行病学调查

对上海、浙江、安徽和湖北4个地区感染鸡、鸭、猪、牛和犬的5种冠状病毒,即禽传染性支气管炎病毒(IBV)、猪传染性胃肠炎病毒(TEGV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)、牛冠状病毒(BCV)和犬冠状病毒(CCV)进行病原学和血清学抽查,共完成测试样品2 368份,包括566份拭子样品和1 802份血清样品。检出IBV抗原阳性4份。在血清学调查中,发现IBV抗体的阳性率为86.4%(鸡)和0.7%(鸭);猪TGEV阳性率为6.8%,PRCV阳性率为18.7%;牛BCV阳性率为5.4%;犬冠状病毒的阳性率为50%。     

空肠弯曲杆菌耐药性及其主要相关基因初步分析

从307份鸡盲肠内容物样品中分离到47株空肠弯曲杆菌,并测定这些空肠弯曲杆菌耐药性,结果显示对喹诺酮类药(环丙沙星)耐药性为31.9%;对氨苄青霉素,克林霉素和红霉素耐药性较高,分别达到85.1%、83.0%和83.0%;而对痢特灵和庆大霉素则较为敏感,敏感度分别为85.1%和74.5%。有89.4%的菌株显示多重耐药性。利用MAMAPCR技术,对获得的47株空肠弯曲杆菌进行检测,结果显示对环丙沙星耐药的15株空肠弯曲杆菌均检测出其在gyrA基因257位发生点突变,30株对喹诺酮药物敏感的菌株均未检出。另外2株对环丙沙星耐药的菌株,有1株检测出点突变。     

云南省部分地区猪衣原体感染的血清学调查

为了解云南省猪衣原体病流行情况,采用间接血凝试验对采自云南省部分地区规模化猪场及散养户猪只血清共1 257份,进行猪衣原体感染的血清流行病学调查.结果表明,共检出阳性血清232份,阳性率为18.5%.其中,采自规模猪场的956份样品中,阳性193份,阳性率为20.2%;其中母猪样品132份,阳性38份,阳性率为28.8 9,5,育肥猪样品824份,阳性155份,阳性率为18.8%.农户散养户301份样品,阳性39份,阳性率为13%;其中母猪样品53份,检出11份阳性,阳性率20.8%,育肥猪样品248份,阳性28份,阳性率11.3%.表明猪衣原体病在云南省呈流行趋势.     

江苏地区鸡源弯曲杆菌分离鉴定及耐药性研究

为了解江苏地区鸡源弯曲杆菌的流行和耐药状况,采集养殖场及农贸市场鸡泄殖腔棉拭子样品和超市鸡肉样品进行空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌的分离与鉴定,对分离菌株采用纸片扩散法检测其耐药情况。结果显示:泄殖腔棉拭子样品弯曲杆菌总分离率为38.68%(205/530),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为27.36%(145/530)和11.32%(60/530);鸡肉样品中弯曲杆菌总分离率为45.33%(68/150),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为30.00%(45/150)和15.33%(23/150)。所有样品空肠弯曲杆菌分离率极显著高于结肠弯曲杆菌(P0.01),就泄殖腔棉拭子样品而言,养殖场样品弯曲杆菌总分离率显著高于农贸市场样品(P0.05),泄殖腔棉拭子样品与鸡肉样品弯曲杆菌分离率无显著性差异(P0.05)。耐药检测结果显示,弯曲杆菌对9大类27种抗生素耐药率在80%以上的有6种,分别为头孢噻肟、头孢曲松、诺氟沙星、环丙沙星、甲氧苄胺嘧啶和克林霉素,所有菌株表现出多重耐药现象,耐药谱主要集中在12耐、13耐和14耐。研究表明,江苏地区鸡源弯曲杆菌流行普遍,分离菌株存在耐药现象且多重耐药情况较严重。     

规模化奶牛场犊牛腹泻的病原检测与分析报告

为了调查某规模化奶牛场犊牛腹泻的发病原因,试验采用血清抗体检测、细菌分离培养、寄生虫卵镜检和病毒核酸检测方法对腹泻犊牛的血样和粪便进行了检查。结果表明,该奶牛场牛病毒性腹泻/黏膜病病毒抗体阳性率为65.00%,牛轮状病毒抗体阳性率25.00%,牛冠状病毒抗体阳性率15.00%;分离到1 株结肠弯曲杆菌和1 株空肠弯曲杆菌;所检腹泻犊牛粪便和血液样品中,4 份粪便样品和1 份血液样品检出牛冠状病毒,2 份粪便样品检出轮状病毒,1 份粪便样品和1 份血液样品检出牛病毒性腹泻/黏膜病病毒,同一份粪便样品中同时检出牛病毒性腹泻/黏膜病病毒和牛冠状病毒;通过镜检,球虫卵囊检出率77.78%,在1 份粪样中发现蛔虫卵,2 份粪样中发现其他线虫卵。该牛场流行性腹泻的原因可能为夏季高温潮湿引起犊牛免疫力下降导致的多病原体感染。