高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽

建立一种高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPP)含量的方法。对3种样品前处理方法及2种上机条件进行优化,确定最优条件。结果表明:最优前处理条件为用盐酸(1 mol/L)调节乳粉样品溶液pH 4.6后用水转移至50 mL容量瓶中,用滤纸过滤后作为待测液;上机检测时用0.05%三氟乙酸-0.05%乙腈作为流动相体系进行梯度洗脱;样品加标回收率为94.50%～95.45%,线性良好(R~2=0.999 8),方法检出限为2.0 mg/100 g。该方法样品前处理简单、稳定性和可靠性好,检测结果满足线性、精密度、准确度及检出限要求,可用于婴幼儿配方乳粉中CPP含量的测定。     

微波辅助水解比色法快速检测羊奶粉中水解动物蛋白

目的：寻求一种快速、高效测定羊奶粉中是否添加水解动物蛋白（HAP）的方法。方法：以L-羟脯氨酸为水解动物蛋白特征物,样品通过微波辅助水解处理,测定样品羟脯氨酸的含量变化,并与传统湿法水解对比。结果：微波辅助水解条件：硫酸浓度4mol/L,功率720W,时间45min时,HAP及掺假合成品水解后测得的羟脯氨酸含量与传统湿法水解所测得的羟脯氨酸含量基本相同,RSD为-4.5%～1.6%。本方法可以快速判定羊奶粉中是否添加水解动物蛋白,具有较高准确度和重现性,羟脯氨酸含量与吸光度具有良好的线性关系,决定系数R2=0.9968,加标回收率86.24%～91.30%,可以满足比色法测定结果要求。结论：微波辅助水解可以将样品前处理时间从16h缩短到45min,此方法快速简便,重复性好,回收率高。     

脂肪酶产生菌的筛选、诱变及产酶条件的研究

从长春市油脂厂采集的土壤样品中分离到1株脂肪酶活力较高的白地霉1522(其发酵液酶活力为35U/mL)。以此为出发菌株,经紫外线、氯化锂、盐酸羟胺、亚硝基胍等诱变筛选后,获得1株高活力脂肪酶产生菌N79(其发酵液酶活力达80U/mL)。对诱变株N79最适培养条件的研究表明,其最适培养基组成为:蛋白胨4%,山梨醇0.75%,橄榄油0.5%,MgSO4·7H2O 0.1%;产酶最适发酵条件是,培养液起始pH为6.0～6.5,发酵温度为26～30℃,通气量为每250mL三角烧瓶中盛培养液30mL,发醇时间为32～36h。在量适培养条件下,其发酵液酶活力可达到105-115U/mL。白地霉N79的发酵液经硫酸铵盐析制得脂肪酶粗制品,它在聚乙烯醇橄榄油乳化液系统中,水解橄榄油的最适pH为7.8,最适温度为42℃,在pH4-8、4℃下存放24h及pH7.5、40℃下保温15min,酶活力不变。     

猪血红蛋白酶解工艺参数优化

本试验采用酶法水解猪血红蛋白．选择水解猪血红蛋白的最优蛋白酶,并确定其最佳水解条件（包括加水倍数、酶添加比例、pH值、温度、反应时间以及沉淀血红素的pH值）。结果表明,最佳水解条件为加水倍数的2．0倍、酶添加比例4‰、pH8．5、水解温度56℃、水解时间为12h,水解后喷雾干燥产品的氨基酸总含量高达85．67％．     

酶解猪血红蛋白工艺条件的研究

试验选用中性蛋白酶水解猪血红蛋白。通过单因素试验,研究水解温度、pH值、酶加量、底物浓度、水解时间对水解效果的影响。通过正交试验,得出最佳的水解条件为:温度55℃、pH值7.5、酶加量5000U/g蛋白、底物浓度10%、水解时间3h,在此条件下的水解度为22.03%、三氯乙酸可溶性氮含量(SN-TCA指数)为63.83%。     

谷朊粉的风味蛋白酶水解工艺研究

开发谷朊粉水解蛋白饲料有着重要的营养学价值和经济意义。试验选用风味蛋白酶水解谷朊粉,在单因素的基础上做5因素3水平正交试验,5因素分别为温度、时间、pH、底物浓度（固液比）和酶浓度（酶与底物的比值）。用甲醛滴定法测定其水解度,试验结果表明,风味蛋白酶最佳反应条件为酶浓度[E]1.5%,底物浓度[S]2%,pH6.5,温度55℃,时间8h,水解度18.26%。     

Alcalase、Flavourzyme合用体外水解豆粕生产大豆肽混合物的参数研究

试验首先采用单因子设计研究了Alcalase(内切酶)单酶体外水解豆粕生产大豆肽混合物的适宜参数,结果表明:Alcalase水解豆粕的适宜条件为温度60℃,初始pH值7.9～9.0,反应时间4～6h,酶水平0.012～0.024AU/g豆粕;在单因素试验基础上,采用三因素二次回归正交组合试验设计研究了Alcalase、Flavourzyme联合使用水解豆粕的回归方程,结果为:Alcalase与Flavourzyme同时合用水解豆粕时,蛋白酶水平、水解时间与反应体系中TCA-NSI、NH2-N含量的二次回归方程是成立的。据此方程及生产实际成本,确定在温度50℃、未外加任何酸碱调节pH值条件下,适宜参数为:Alcalase0.006～0.021AU/g豆粕,Flavourzyme水平为2LAPU/g豆粕,反应时间6～10.5h,此时NH2-N含量8.807%～13.33%,TCA-NSI为31.66%～56.53%,平均肽链长集中在2～5个氨基酸残基。     

饲料中沙丁胺醇酶联免疫前处理方法的探究

为探讨酶联免疫法(ELISA)检测饲料中沙丁胺醇(salbutamol,SAL)的前处理方法,试验对提取液的pH、离子强度、有机溶剂浓度及样品稀释倍数等条件进行了考察,选取最适宜的提取液条件对2种不同类型的饲料样本进行提取,用ELISA测定样品中沙丁胺醇的残留量。结果表明,沙丁胺醇标准曲线的IC₅₀值为0.606 ng/mL,线性范围为0.221～1.658 ng/mL,R²=0.9998,提取液的pH为7.5,PBS缓冲液最优浓度为0.06 mol/L,稀释倍数为10倍,2种不同类型的饲料样本的检测限(LOD)为5.0 ng/mL。当沙丁胺醇的添加浓度为5、10 μg/kg时,该方法的添加回收率为77%～110%,变异系数<8%。     

菌糠在崂山奶山羊瘤胃内的降解规律

试验采用瘤胃瘘管羊,利用尼龙袋法分别在0、2、4、8、12、24h进行采样测定菌糠的粗脂肪、粗蛋白和粗纤维的含量,以评定营养物质在瘤胃内的降解情况。测定结果表明:风干菌糠样品中水分4.8%,粗蛋白7.5%,粗脂肪7.2%,粗纤维45.16%,粗灰分11.3%,无氮浸出物38.19%;菌糠中的粗蛋白在瘤胃24h内没有显著变化(P0.05);粗脂肪在瘤胃内2h降解了90%(P0.05);粗纤维在瘤胃中降解缓慢,前12h粗纤维含量没有显著变化,12~24h时间里粗纤维降解了20%。     

血凝法测定饲料中植物凝集素含量

通过研究植物凝集素(lectin)的血细胞凝集活性与其浓度的关系，提出了用血凝法测定饲料中lectin的新方法，并探讨了试样粉碎粒度、脱脂方法、脱脂时间、抽提时间、抽提次数等测定条件对测定结果的影响。结果表明，lectin的活力与浓度之间存在高度线性相关(R^2=0．99)。血凝法测定饲料中lectin的含量时，以样品粉碎过40目、样品与30～60℃石油醚或乙醚比例(W／V)1：8脱脂8h、样品与生理盐水(W／V)1：8抽提8h为宜。在上述条件下测定，回收率可达88％～102％。经过对8种不同的饲料及原料样品lectin含量的测定，平均相对偏差为0．9％～2．4％，变异系数为1．3％～3．3％。结果表明，利用血凝法可快速测定饲料中的lectin含量。