苹果离体叶片培养直接体细胞胚胎发生研究

在ＭＳ＋ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ５０ｍｇ／Ｌ＋２，４＿Ｄ０＼＾５ｍｇ／Ｌ＋蔗糖２０ｇ／Ｌ的固体培养基上，苹果品种嗄拉试管苗叶片经７天暗培养产生胚性细胞。将具有胚性细胞的叶片转入ＭＳ＋ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ＋蔗糖２０ｇ／Ｌ的培养基上暗培养４０天，６５％的叶片直接发生体细胞胚，体细胞胚在同种培养基上萌发，长成小植株。     

分葱组织培养体细胞胚胎发生的研究

利用分葱茎尖培养成功地诱导了体细胞胚胎发生。具体步骤如下：Ⅰ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上诱导愈伤组织；Ⅱ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行愈伤组织的继代培养，继代培养３次以后，转变为胚性愈伤组织；Ⅲ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．２５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行胚状体的诱导；Ⅳ．在无任何激素的ＭＳ培养基上使胚状体再生植株。切片观察表明，胚状体大多数起源于愈伤组织表层及其以下细胞。     

防城金花茶体细胞胚状体发生的研究

本文研究了防城金花茶组织培养中胚状体的形成及各种影响因素。防城金花茶子叶在附加BA、KT、ZT、2,4－D和NAA的培养基上产生了体细胞胚,添加水解酪蛋白和酵母浸出汁能促进体细胞胚的发生。在低浓度激素或无激素的MS培养基上胚状体可进一步发育形成完整的小植株。     

唐菖蒲体细胞胚起源、发育的形态与组织细胞学观察

 以唐菖蒲‘Advanced Red’品种的籽球为试验材料,将籽球切片放在MS + 6.0 mg · L^-1 TDZ培养基上暗培养21 d,诱导胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转入MS + 1 mg · L^-1 2,4-D培养基中暗培养28 d诱导体细胞胚。使用立体显微镜和石蜡切片技术对体胚形态与细胞组织进行观察。结果表明：体胚诱导14 d后,开始出现一些胚性细胞,之后形成多个细胞组成的原胚（pre-embryonic cell complexes）,原胚进而发育形成球形、盾形,心形、鱼雷形胚和子叶期胚。将成熟的体胚转入MS培养基后长出不定根和不定芽,形成完整的植株。唐菖蒲体胚的起源有外起源和内起源两种方式。在初生体胚发育过程中还伴有次生胚的形成。     

仙客来体细胞胚发生和发育过程中淀粉粒的变化

 以仙客来（Cyclamen persicum Mill.）开花植株的新生叶片为外植体，诱导筛选胚性愈伤组织，并使其进一步发育成体细胞胚。组织切片观察结果表明：胚性愈伤组织由胚性和非胚性细胞组成，胚性细胞多以胚性细胞团的形式存在，胚性细胞团起源于诱导的胚性决定细胞。体细胞胚起源于单个胚性细胞，经多细胞原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚等时期发育成完整植株。在体细胞胚的发生发育过程中，淀粉粒出现4次积累高峰，分别为胚性细胞、球形胚、早期鱼雷胚和成熟胚发育成完整的小植株时期，淀粉代谢与体细胞胚发生、发育及小植株的形态建成密切相关。     

西瓜子叶离体培养获得再生植株

３个西瓜品种在无菌培养下，用５天左右苗龄的子叶作为外值体，在ＭＳ＋５．０ｍｇ／ＬＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ培养基上分化出营养胚，分化率达５０％以上。营养胚芽在ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＫＴ培养基中增长，在ＭＳ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ培养基中生根，成为完整植株。上述离体培养程序，是生物基因转移工程的最佳配套方法。     

水芋体细胞胚胎发生及植株再生休系的建立

以水芋幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基,建立了水芋体细胞胚胎发生体系.对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了水芋体细胞胚胎的发育过程.结果表明:水芋叶片胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜培养基为:LS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率为98.5%;体胚发育及植株再生最适宜的培养基为:LS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5mg/L+IAA 1.0 mg/L,体胚萌发率为96%,萌发的体胚在发育培养基上继续培养25 d后全部发育成完整植株.     

香雪兰种子胚的组织培养和植株再生

香雪兰的成熟胚和未成熟胚切段，在含有ＩＡＡ２ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ０３ｍｇ／Ｌ和ＢＡＰ０５ｍｇ／Ｌ的改良Ｎ６培养基上可形成半透明的瘤状愈伤组织。将这种愈伤组织培养于含有ＮＡＡ０３ｍｇ／Ｌ、ＢＡＰ０５ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０５ｍｇ／Ｌ的ＭＮ６培养基可分化出丛生芽。生根培养基为含ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ的改良Ｎ６培养基。相同的外植体可在ＭＮ６＋ＩＡＡ２０ｍｇ／Ｌ＋ＢＡＰ３０ｍｇ／Ｌ培养基上通过体细胞胚胎发生途径直接形成小植株。讨论了外源激素对香雪兰种子胚离体培养的作用。     

低温处理对杏胚培养的影响

通过将硬熟期的杏胚接种到ＭＳ或１／２ＭＳ培养基中经过不同时间的低温处理，结果表明：杏与桃等果树一样，其胚培养过程也需一定的低温处理才可使之正常前发生长成苗、低温处理的最佳时期为８０—９０天，其胚萌发率与成苗率分别为９５％和９５．９％（二年平均）。另外，杏胚在１／２ＭＳ培养基中比在ＭＳ培养基中萌芽、成苗率高。     

中国樱桃‘对樱桃’不定根离体再生植株的研究

 采用中国樱桃‘对樱桃’( Prunus pseudocerasus) 无菌生根苗的不定根作为外植体, 成功诱导了胚性愈伤组织, 实现了通过分化不定芽和诱导初生体细胞胚两种方式再生植株。根切段在MS + NAA1.0 mg/L + BA 0.05 mg/L + IBA 0.05 mg/L 培养基诱导获得胚性愈伤组织, 诱导频率达54.2 % , 该愈伤组织在MS + NAA 1.0 mg/L + BA 0.5 mg/L 培养基上不定芽分化率为100 % , 不定芽在MS + BA 0.5 mg/L + IBA 0.1mg/L 培养基上生长发育良好, 转入MS + NAA 0.02 mg/L + IBA 0.02 mg/L 生根培养基生根率达100 %; 整体不定根系统在MS 附加2 ,4-D 1.0～3.0 mg/L 和BA 0.5 mg/L 的培养基上同时诱导初生体细胞胚发生和单极不定芽发生, 每外植体上平均体细胞胚数5～25 个, 不定芽3～22 个。体细胞胚转到MS + BA 0.5 mg/L +IBA 0.1 mg/L 培养基上发育为完整植株, 植株再生率100 %。     

水芋体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立

以水芋幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基,建立了水芋体细胞胚胎发生体系。对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了水芋体细胞胚胎的发育过程。结果表明：水芋叶片胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜培养基为：LS＋6-BA0．5mg／L＋2,4-D2．0mg／L,诱导率为98．5％;体胚发育及植株再生最适宜的培养基为：IS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋IAA 10mg／L,体胚萌发率为96％,萌发的体胚在发育培养基上继续培养25d后全部发育成完整植株。     

黄瓜体细胞胚途径再生体系的建立及优化

以不同生态型的黄瓜（Cucumis sativus L.）为材料，利用不同基因型建立黄瓜体细胞胚再生体系，并在此基础上对 黄瓜体细胞胚再生体系进行了优化。结果表明：华南型黄瓜9101 和D4 能够诱导出正常的胚状体。以筛选出的9101 为材料， 进一步通过不同组织部位、激素配比、暗培养等对体细胞胚再生体系进行优化，认为子叶节是最佳的外植体，其胚性愈伤 组织诱导的最适培养基为MS + 2.00 mg·L-1 2，4-D，诱导率可达100.00%，出胚的最适培养基为MS+0.10 mg·L-1 2，4-D + 0.5 mg·L-1 KT，其出胚率可达33.33%。此外，在愈伤诱导培养前期给予暗培养条件能提高愈伤诱导率、出胚率及正常再生植株 的获得。对体细胞胚的形态学观察发现，黄瓜体细胞胚发源于子叶节表面的胚性愈伤组织，经历球形胚、心形胚、鱼雷形胚 和子叶胚等时期，最终发育成完整的黄瓜植株。     

番木瓜胚性细胞悬浮系高效遗传转化体系的建立

【目的】建立番木瓜高效遗传转化体系，为番木瓜基因功能研究和重要农艺性状改良提供新的技术支撑。【方法】以紫晖番木瓜胚性细胞悬浮系（embryogenic cell suspensions,ECS）为遗传转化受体，利用植物表达载体pCAMBIA1301和农杆菌介导法进行遗传转化，对抗生素浓度筛选、侵染时间、继代培养、抗性胚的诱导与萌发以及植株再生整个过程进行探索，最后获得抗性再生植株。【结果】通过设置不同浓度的头孢霉素和潮霉素处理，观察ECS细胞状态，筛选、确定头孢霉素和潮霉素最适处理质量浓度分别为200 mg·L-1和5 mg·L-1。工程菌和ECS共培养侵染2 d后转到含有头孢霉素和潮霉素的液体筛选培养基上进行继代培养，继代周期为14 d。经GUS染色验证，表明继代3次后的ECS几乎全部为转化细胞。将以上ECS转移到液体胚诱导培养基中进行培养，2个月后可获得大量球形体细胞胚，且GUS组织染色为蓝色。将球形体细胞胚转到半固体成熟培养基上培养，2个月后可获得成熟子叶期体细胞胚。子叶期体细胞胚在萌发培养基上光培养30 d后，可获得再生芽。任意选取再生芽进行GUS染色，均可染成蓝色。抗性再生芽...     

朱顶红‘Red Lion’胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

以‘Red Lion’朱顶红(Hippeastrum vittatum)的鳞片为外植体进行体细胞胚诱导和形态学与组织学的胚性鉴定。结果表明,鳞片在MS+2 mg·L~(-1) BA+1 mg·L~(-1) NAA+2 mg·L~(-1) TDZ+30 g·L~(-1)蔗糖培养基上胚性愈伤组织诱导率可达90.63%,而不添加TDZ的培养基上胚性愈伤组织诱导率为0。胚性愈伤组织可呈白色松散、透明膨松、透明致密、微棕色松脆和翠绿色松脆等类型;非胚性愈伤组织呈微棕色致密状。胚性愈伤组织中可明显观察到球形胚、心形胚和棒状胚3个发育时期。体细胞胚在不添加植物生长调节剂的MS培养基上可发育形成芽和根,长成完整小植株。     

仙客来体细胞胚发生和发育过程中淀粉粒的动态变化

以仙客来(Cyclamen persicum Mill.)开花植株的新生叶片为外植体,诱导筛选胚性愈伤组织,并使其进一步发育成体细胞胚.组织切片观察结果表明:胚性愈伤组织由胚性和非胚性细胞组成,胚性细胞多以胚性细胞团的形式存在,胚性细胞团起源于诱导的胚性决定细胞.体细胞胚起源于单个胚性细胞,经多细胞原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚等时期发育成完整植株.在体细胞胚的发生发育过程中,淀粉粒出现4次积累高峰,分别为胚性细胞、球形胚、早期鱼雷胚和成熟胚发育成完整的小植株时期,淀粉代谢与体细胞胚发生、发育及小植株的形态建成密切相关.     

用离体培养二倍体×四倍体杂种干种子的异常胚来高效生产三倍体香瓜

将二倍体（２ｘ＝２４；ＧＳＩ和ＡｄＳＩ）和四倍体（４ｘ＝４８；ＧＥ４６和ＡｓＡｄ９）香瓜（ＣｕｃｕｍｉｓｍｅｌｏＬ．）植株相互杂交。二倍体×四倍体杂种果实有三种类型的种子①子叶发育不完全．②胚乳发育不正常，③空种子四倍体×二倍体杂种的果实仅含空种子一种类型。含异常胚的干种子插入土壤后不萌发，当把从干种子上切下的异常胚离体培养在ＭＳ培养基上时，大约有２０％长成正常小植株，染色体观察表明，这些小植株均为三倍体（３ｘ＝３６）。ＡｎＧＳＩ×ＧＥ４６杂交种和ＡｄＳＩ×ＡｓＡｄ９杂交种的每个果实中得到的三倍体植株数分别为６．８和１７．２。在温室中三倍体植株生长旺盛，但花粉授精能力很低。三倍体植株自交虽不能结实，但用生长调节剂处理后则自交能够结实，三倍体香瓜仅含有空种子。     

甜菜原生质体培养再生植株的研究

以栽培甜菜的未授精胚珠成胚为外植体，在ＭＳ附加ＮＡＡ和ＢＡ的培养基上诱导愈伤组织，选择胚性愈伤组织进行继代培养，从该愈伤组织分离原生质体并以液体浅层法或半固体琼脂糖法培养在一系列培养基上，植板率为０．０１％－１．２％。再生愈伤组织形成后，转入固体培养基（ＭＳＢ）上培养，再转入分化培养基上分化出苗，分化率可达２．５％，由愈伤组织上切下分化苗在生根培养基上很容易诱导生根。     

德国核桃‘No.120'幼胚胚轴与子叶体细胞胚胎发生及其植株再生

核桃 (Juglansregia)‘No . 12 0’品系授粉 7～ 8周的幼胚胚轴与子叶在含不同植物生长调节剂组合的诱导培养基上培养 4周后转移至无植物生长调节剂的继代培养基上培养 ,不同发育时期的体细胞胚直接形成于胚轴与子叶表面。子叶与胚轴分别在KT 2mg/L BA1mg/L IBA 0 .0 1mg/L与 2 ,4 D 2mg/L KT 1mg/L的组合的诱导下体细胞胚胎发生频率最高。体细胞胚经 3～ 5℃低温处理 2个月 ,31.6%的体细胞胚能发育成正常生长的植株     

狗枣猕猴桃叶片离体培养的器官、体细胞胚形成与植株再生(英文)

以狗枣猕猴桃试管苗的叶片为外植体,接种于含3%蔗糖和0.2%Gelrite的BW培养基上,外加2,4-D(0,0.1,1和10μmol/L)与玉米素(0,1和10μmol/L)的12种激素组合,置于25℃,光周期为16/8h,光照强度为4000lx的条件下培养。在含1或10μmol/L2,4-D与1或10μmol/L玉米素组合的BW培养基上,产生了体细胞胚,并分化出小植株。随着玉米素浓度的增加,每个外植体上的胚再生频率和体细胞胚的数量也随之增加。同时以叶片为外植体产生的狗枣猕猴桃试管苗的愈伤组织表层产生了不定芽,并抽长成枝。发枝率随着玉米素浓度的增加而增加,并受高浓度的2,4-D所抑制。枝芽转接到含1μmol/LNAA的BW培养基上生根,长成小植株。     

芸芥体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以芸芥子叶为外植体, 在MS + 2, 4-D 1.0 mg·L^-1培养基上培养2周后可诱导体细胞胚胎的发生。胚性愈伤组织在MS + 2, 4-D 0.2 mg·L^-1培养基上大量增殖, 体细胞胚胎在N₆培养基上成熟后, 可在附加0.1 mg·L^-1 IBA的1/2MS培养基上生长。切片观察表明: 芸芥体细胞胚胎为单细胞发生方式, 与合子胚形成过程相似。芸芥胚性细胞具有细胞小、胞质浓、核大、核仁明显, 排列紧密的特点, 首先由单个细胞分裂形成2 - 细胞原胚, 2 - 细胞原胚分裂成3 - 细胞原胚或4 - 细胞原胚, 3 - 细胞原胚或4 - 细胞原胚继续分裂形成多细胞原胚, 进一步发育成一个成熟的体细胞胚胎。