玉米DNA导入水稻选育高蛋白品系

据报道:湖南农业大学几名专家采用浸胚法将高蛋白玉米"马齿黄"的总DNA导入优质早籼稻91-L中,通过多年的选择,最近从变异后代中选育出了5个高蛋白水稻新品系.     

玉米DNA导入水稻选育高蛋白品系

据报道:湖南农业大学几名专家采用浸胚法将高蛋白玉米“马齿黄”的总DNA导入优质早籼稻91-L中,通过多年的选择,最近从变异后代中选育出了5个高蛋白水稻新品系. 稻米中蛋白质含量的高低不仅影响稻米的营养而且关系到以大米为主食人群的蛋白质摄入和健康水平.据不完全统计,我国人均蛋白质日摄入量仅为67g,大大低于发达国家日平均100g的水平.这主要是因为稻米蛋白质含量在8%左右,普遍低于小麦和玉米(12%～14%),因而选育蛋白质含量高的水稻新品种成为国内外普遍关注的问题,并关系到全民族的整体健康水平.     

大豆总DNA直接导入法培育优势高蛋白玉米材料研究

利用外源总DNA转导的花粉管通道法和经我们发展的减压渗透法将大豆总DNA导入玉米自交系统48-2和S37，在743份后代材料中筛选出8份高蛋白含量变异材料，它们的蛋白质与受体相比提高20%以上。用种子蛋白SDS-PAGE、谷氨酸-草酰乙酸同工酶及RAPD等分析方法对变异材料及其受体进行了鉴定分析。同时也对此8份变异材料的自交后代进行了筛选和S37在遗传上存在明显的差异。在其自交后代中仍有部分株系保持了主蛋白含量特性。此外，48-2的变异材料的植株形态、花药颜色上有明显变化。上述结果初步证明高蛋白特性是可遗传的，这为选育高蛋白玉米新自交系提供了新材料，也为利用外源DNA直接导入技术创造玉米新种质开辟了一条行这有效的新途径。     

大豆DNA导入水稻引起后代种子贮藏蛋白变异

以大豆为外源ＤＮＡ供体，用浸种及灌法和花粉管通道法直接将大豆总ＤＮＡ导入受体水稻，经常规栽培获得水稻后代种子。采用薄层等电聚焦电泳和十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳地，分析了经大豆总ＤＮＡ处理得到的水稻后代种子中的清蛋白，球蛋白，醇溶蛋白各谷蛋白。     

水稻外源DNA导入技术与遗传工程育种

本文综述了用载体介导法和直接导入法将外源ＤＮＡ导入水稻的研究进展，并对水稻外源ＤＮＡ导入技术在水稻育种中的应用作了简要评述。     

外源DNA导入诱导水稻高蛋白质变异的研究

为探明外源DNA导入水稻,其后代蛋白质含量的变化规律,采用浸种法,将大豆、高梁、玉米的DNA导入水稻品种0146,91-264,对其籽粒蛋白质量含量进行逐代分析。结果发现,后代蛋白质含量出现广泛变异,并分离出度蛋白含量的优良单株,各世代蛋白质含量的变异系数随种植世代的增加而变小,并趋于稳定。研究证实。利用该方法能选育出蛋白质含量高的水稻新品种。     

高粱DNA导入水稻的RAPD分子验证

对以密穗型高梁ＤＮＡ为供体、通过共继任这通道技术导入水稻所获得的水稻后代进行了ＲＡＰＤ分子验证。结果表明：从１２２个引物中找到９个引物检测出ＤＮＡ的多态性,证明外源ＤＮＡ导入受体后引起后代基因组的显著变异。     

密穗高粱总DNA导入水稻的研究

为了选育高产,优质,多抗的水稻新品种,采用花粉管通道法,将密穗高粱总ＤＮＡ导入水稻晚粳品种鄂宜１０５,从Ｄ１至Ｄ５代表异材料中选育出ＤＨ３,ＤＨ４,ＤＨ５筠多个具有高光效,高产和优质的新品系,经随机扩增多态ＤＮＡ技术对供体,受体,后代进行分子验证,后代中出现了在供体中存在而在受体中存在的泳带。解剖学发现了后代剑叶,穗颈及穗基的输导组织比受体发达,维管束数目比受体增加１０％－３０％。     

Bt毒蛋白基因导入甘蓝型油菜获得转基因植株

以甘蓝型油菜湘油13号为试验材料,建立了高效稳定的子叶柄再生体系,以4～5d无菌苗的子叶柄为外植体,6-BA含量为4.5mg/L时,不定芽的再生频率最高.同时探索了影响根癌农杆菌介导转化甘蓝型油菜子叶柄的各种因素,并将Bt毒蛋白基因导入甘蓝型油菜品种湘油13号,获得了转基因植株,Southernblot分子检测证明,Bt毒蛋白基因已整合到油菜基因组中.     

高粱DNA导入水稻后代维管束与气腔的解剖观察

采用活体机械切片,对高粱ＤＮＡ导入水稻鄂宜１０５所获后代,于始穗,齐穗,乳熟３个时期对茎基、穗颈及剑叶中脉维管束进行了解剖观察。     

水稻浸胚法外源DNA导入过程中DNA分子降解研究

以湘早籼８号为受体材料，以易于大量获得的鲤鱼精液ＤＮＡ为分子供体，进行浸胚法ＤＮＡ导入水稻实验，研究了ＤＮＡ分子在浸胚过程中的降解情况。通过定时取样后琼脂糖凝胶电泳、紫外吸收光谱扫描分析，发现水稻胚在浸泡过程中能主动降解外源ＤＮＡ分子，４８ｈ后大部分ＤＮＡ分子被降解成小分子片段、单磷酸脱氧核苷酸、碱基甚或无机成分；紫外吸收光谱扫描发现２２０～２４０ｎｍ有明显的增色效应。鉴于浸胚法诱变优势的普遍性及基因导入的固有困难，推测外源ＤＮＡ浸胚过程中降解后的成分对诱变起更大的作用。     

介导玉米DNA的水稻高秆变异株AFLP分析

用AFLP分子标记技术,对花粉管介导玉米总DNA获得的2个高秆水稻变异植株C(HN28)和D(HN31)进行分析,揭示水稻变异植株和亲本间在DNA水平的差异,为进一步研究变异机制提供数据。首先对64对AFLP选扩引物进行筛选,优选出11对选扩引物,它们均能够在2个变异植株中扩增出较多清晰的DNA差异带。对变异植株和对照中的DNA图谱进行分析,结果显示,变异植株C、D、受体水稻B与阳性对照玉米A之间的DNA图谱相似率分别为38.30%、38.58%和32.99%,水稻变异植株C、D和受体水稻B的DNA图谱相似率分别为90.04%和85.84%,说明变异植株与受体水稻基因组DNA存在显著差异,变异植株与阳性对照玉米基因组DNA相似率明显高于受体水稻。变异植株C检测到12条与对照玉米一致的目的带,变异植株D检测到11条与对照玉米一致的目的带。说明变异植株C、D基因组中可能存在有玉米DNA片段,变异性状的差异可能是介导玉米DNA引起。     

外源DNA导入水稻体细胞胚研究初报

以水稻Ｒ２８８的幼穗为外植体，培养在附加激素的ＭＳ固体培养基上诱导出愈伤组织，挑选胚性愈伤组织进行液体振荡培养，建立体细胞悬浮细胞系，诱导出体细胞胚并大量增殖．用水稻紫香糯幼苗为材料提取其ＤＮＡ，以不同浓度ＤＮＡ浸泡体细胞胚，发现体细胞胚的生长发育与试管苗发生了明显变化．试管苗移植大田，获得了种子，植株矮小．初步表明外源ＤＮＡ导入体细胞胚能够诱发变异．     

外源DNA导入烟草后D_2代植株抗病性鉴定和酶活性的测定

提取抗赤星病烤烟CV87的总DNA ,采用花粉管通道法导入感赤星病烤烟NC89。D1代筛选出的优良株收种并种植后得到D2 代 ,对其活体接种赤星病菌 ,检测其抗病性 ,并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。结果表明 :接菌的 10个株系有 3个株系的抗病性与供体亲本CV87相似 ,并显著高于受体亲本NC89;抗病性强的个体接菌后其过氧化物酶活性较接菌前有明显升高 ,与CV87没有明显差异。但CV87的过氧化物酶活性在接菌前后没有明显变化 ,说明其接菌前就表现高的活性     

玉米DNA导入大豆的研究初报

用玉米作ＤＮＡ供体，栽培大豆品种作为受体，采用“改良浸种法”进行外源ＤＮＡ导入，其后代在生育期、株高、结荚数、单株产量、百粒重、节数、种脐色等性状上产生了明显的变异．