百合幼胚的离体培养和植株再生

为了探索百合幼胚离体培养的最佳胚性生长条件及植株再生途径,以授粉后３５ｄ的百合幼胚为外植体,进行了幼胚胚性生长,愈伤组织的诱导,愈伤组织不定芽、不定根的分化和再生植的移栽试验,结果表明;在含有１ｍｇ／ＬＩＡＡ〈１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ培养基上培养,蔗糖含量为６－８％时,百合幼胚胚性生长最好,１ｍｇ／ＬＩＡＡ,１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ２基上培养,蔗糖含量为６－８％     

百合幼胚离体培养的研究

对百合败育胚离体培养的影响因素进行研究的结果表明：pH值对百合幼胚的萌发及成苗有一定的影响，以pH值5.0为最好；活性炭的浓度对其影响不明显，培养基中加入氨基酸类物质使胚萌发及成苗比率均高于对照，加入维生素类物质对胚的影响不大。     

百合杂种胚的离体培养

以剥除胚乳的两个百合杂交组合的杂种胚，进行离体培养，５ｄ后即开始萌发，１５ｄ后，萌发率达８８％。在不同激素含量的培养基比较试验中，发现以ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ激素浓度培养基培养效果最好，其中，７５％的种胚长成完整植株，１２．５％的种胚长出幼芽，培养过程中，无根的幼苗生长至３ｃｍ左右，约５张叶片时，转移至ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上，２￣３周后，有８０％的幼苗长出根。     

东方百合的离体培养

以东方百合杂种系基生根、试管苗鳞茎根、和鳞片为材料,对不同碳源和不同温度处理离体诱导小鳞茎的效果进行了试验研究。结果表明,百合鳞片和基生根均有较高的小鳞芽分化数,平均分别为2.25和3.13;4℃低温处理平均为6.35,明显高于对照的平均分化数5.0;A1和A2两种诱导培养基总诱导鳞芽数分别为11.7和11.0,无明显差异;A4培养基具有较高的小鳞茎增殖率,平均可达4.95。     

百合幼胚离体培养成株体系的建立

用5个百合常规栽培品种杂交组合的幼胚进行离体培养，探讨了不同的杂交组合、幼胚取材时期、培养基激素配比、4℃的预处理时间等条件对百合幼胚培养再生植株特性的影响，并在此基础上建立了一套可靠、重复性好的百合幼胚离体培养的成株体系。在MS＋KT1.0mg/L NAA 0.5mg/L激素配比培养基上，百合胚龄在50－70天时，采用适当的剥离胚的方法，80％以上的种胚可萌芽；在BA浓度较高的培养基上，剥离胚可诱导出愈伤组织并分化出苗。分化的苗丛在生根培养基MS＋NAA0.1mg/L上均能生成丛生苗；将苗丛从基部切开后，每棵单株均可独立成为完整植株。     

3种东方百合离体培养

【目的】研究3种东方百合离体培养技术,筛选出适宜其离体培养的统一培养基,为东方百合工厂化育苗提供技术保障。【方法】以3种东方百合提伯、索邦和西伯利亚的鳞片为外植体,筛选适宜的灭菌方法;在MS基本培养基上添加不同种类和不同浓度的激素,筛选适宜的增殖培养基和生根培养基,进一步筛选最适移栽基质。【结果】适宜3种东方百合外植体灭菌的较好方法是:75%酒精灭菌15 s结合升汞灭菌12 min;愈伤诱导和分化的适宜培养基为MS;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA是增殖培养的最适培养基,提伯、索邦和西伯利亚的增殖系数分别为3.32、3.32和3.00;MS+0.1 mg/L IBA是生根培养的最佳培养基,提伯、索邦和西伯利亚的生根率分别为96.33%、92.67%和93.67%;移栽的最佳基质为泥炭∶珍珠岩(体积比)=2∶1,提伯、索邦和西伯利亚的移栽成活率分别为97.34%、98.00%和100.00%。【结论】建立的3种东方百合离体快繁体系适用于东方百合种球工厂化生产。     

百合幼胚离体培养基的筛选

以切花百合品种间杂交获得的胚龄为30～50d的幼胚作为外植体 ,进行离体培养基的筛选。结果表明 :基本培养基对萌发率、成苗率、生长势的影响从好到差顺序为MS>N6>SH>LS>Monnier>DCR>改良White;碳源种类对萌发的影响从好到差顺序蔗糖、甘露醇、白糖、葡萄糖、果糖 ,胚的成活情况与渗透压密切相关 ;生长素(NAA)不同浓度对幼胚成活的影响从好到差顺序为0.001>0.01>0.1>1>0,细胞分裂素(6-BA)不同浓度对幼胚成活的影响从好到差顺序为0.001>0.01>0.1>1>0。采用正交试验设计对幼胚萌发率及生长情况进行分析得出最优组合培养基为:糖60g·L-1+6 -BA0.1mg·L-1+NAA0.001mg·L-1+CH和VB6,基本培养基为MS附加琼脂10g·L-1,pH值为5.0的培养基     

荔枝幼胚的离体培养

把３个不同胚胎发育类型荔枝，品种乌叶，兰竹，绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的ＭＳ培养基上进行培养，结果表明：授粉后１５ｄ的胚胎人工培养十分困难，而授粉后３０－４０ｄ的幼胚，在ＭＳ基本培养基附加一定浓度的ＢＡ，ＮＡＡ，ＧＡ以及ＡＢＡ等的不同组合培养基上，均可诱导形成细胞团，并能进一步形成胚状体或芽状体，部分育型品种兰竹，有胚胎败育早期但未死亡１／２ＭＳ附加低浓度的细胞人裂素及生长素等的培养基上，     

东方百合“索邦”离体培养技术探索

[目的]研究东方百合＂索邦＂的离体培养技术。[方法]以东方百合＂索邦＂的鳞片为外植体,考察了不同激素浓度配比和鳞茎不同部位对不定芽诱导的影响。[结果]以MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA培养基诱导出芽效果最好,其诱导率为60%。鳞茎不同部位诱导出芽的能力依次为中部〉外部〉内部,并将诱导出的不定芽转接到生根培养基（1/2MS＋0.1 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA＋0.2%活性炭）中,其生根率可达100%。[结论]东方百合＂索邦＂离体再生体系的建立对于减少我国对进口百合种球的依赖,扩大国产百合的生产有着重要的意义。     

荔枝幼胚的离体培养

把3个不同胚胎发育类型荔枝(Litchi chinensis Sonn.)品种乌叶、兰竹、绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的MS培养基上进行培养。结果表明:授粉后15d的胚胎人工培养十分困难,而授粉后30-40d的幼胚,在MS基本培养基附加一定浓度的BA,NAA,GA以及ABA等的不同组合培养基上,均可诱导形成细胞团,并能进一步形成胚状体或芽状体,部分败育型品种兰竹,在胚胎败育早期但未死亡的幼胚,以及完全败育型品种绿荷包,在授粉后30d的胚珠,经培养亦能形成胚状体,胚状体在MS或1/2MS附加低浓度的细胞分裂素及生长素等的培养基上,增殖能力甚强,甚至不加任何附加物的情况下亦能增殖。高浓度的附加物则不利于胚状体的增殖。从胚状体诱导成苗有待进一步研究。     

东方百合鳞片组织培养研究

以鳞片为外植体,研究了7个东方百合品种的组织培养方法。结果表明,东方百合不同品种之间鳞片不定芽的分化率以及单个外植体上再分化不定芽的数量存在显著差异,以西伯利亚最高,分化率为68．04％,瑞塔较低,仅为12．96％,索蚌最差。不同部位鳞片不定芽的分化率也存在显著差异,分化能力由大到小依次为中层、外层、内层。适宜东方百合鳞片不定芽分化和增殖的最适培养基为MS＋6-BA0．50mg／L＋NAA0．05mg／L,不定芽生根最适培养基为1／2MS＋NAA0．20mg／L。     

东方百合不同外植体愈伤组织诱导效果

对东方百合Tiber品种的多种外植体进行了组织培养试验,研究结果表明,在不同激素浓度条件下,东方百合Tiber品种不同外植体的组织培养效果不同,诱导形成愈伤组织在数量、质量和时间上具有明显的差异,形成愈伤能力大小依次为:幼嫩鳞茎>花托>鳞片>叶柄>叶片。     

切花百合杂种胚抢救方法

以东方百合杂种系(O)、亚洲百合杂种系(A)、麝香百合杂种系(L)部分品种为试材,采用子房切片培养、带胎座胚珠培养、胚培养3种方法对系间杂种幼胚进行抢救,并对系内杂种胚离体培养的影响因素进行研究。结果表明,采用子房切片培养和带胎座胚珠培养可使OA,LA型部分杂种胚萌发,且带胎座胚珠培养优于子房切片培养,采用胚培养可使OA,LA,LO型部分杂种胚萌发,最终仅1株LO型杂种苗继续生长,其余杂种苗褐化死亡;OO型杂种胚适宜在胚龄50 d培养,AA,LL型杂种胚适宜在胚龄40 d培养,且0.01～0.1 mg/L NAA的添加对胚萌发是必要的,6-BA是否添加在不同杂交组合中存在差异。     

东方型百合切花抑制栽培技术研究

本文研究了东方型百合切花抑制栽培技术、制定出适合北京地区反季节生产东方型百合切花的具体栽培方案 ,同时 ,研究多效唑 (PP333)对控制东方型百合生长的效应 .结果表明 :多效唑对东方型百合生长速度影响显著 ,对茎的粗生长、成花数的影响不显著     

不同温湿度和基质对东方百合鳞片子球快繁的影响

通过分析不同温湿度和基质对东方百合不同品种不同部位鳞片催芽、不同播种期对不同品种的小球培育的影响,确定了鳞片扦插法快繁子球的方法和技术.通过研究认为,鳞片外层在25℃和RH 80%的条件下,在草质泥炭∶珍珠岩＝2∶1的基质中催芽效果最好,品种间差别不大.3月上旬或9月上旬苗床播种鳞芽,可培育成周径达6～8 cm的小鳞茎,秋季更有利于小球生长,但品种间有差别.     

Effect of Phytohormones on Adventitious Bud Differentiation from Bulb Scales of Oriental Lily Test-tube Plantlets

[Objective] The purpose of this study is to investigate the effects of differ- ent phytohormones on the adventitious bud differentiation of oriental lily. [Method] The bulb scales of the test-tube plantlets of Tiber, Rodina and Constanta were cul- tured in media supplemented with different cytokinin and auxin at different concen- tration, and then the adventitious buds in each treatment were calculated. [Result] Cytokinins had different influence on the adventitious bud differentiation of the three oriental lily cultivars. Among them, 6-BA had the best effect to induce the adventi- tious bud differentiation from bulb scales of Tiber and Rodina, but there was some difference in the optimal concentration. KT had the best effect to induce the adven- titious bud differentiation of Constanta. The auxins had little influence on the quality of the adventitious bud of the three oriental lily cultivars, but caused some difference in differentiation coefficients. [Conclusion] The most suitable media for the adventi- tious bud differentiation from bulb scales in vitro of Tiber, Rodina and Constanta were MS＋0.2 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L 2,4-D, MS＋I.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IAA, MS＋ 1.0 mg/L KT＋0.5 mg/L 2,4-D, respectively.     

激素对东方百合鳞片扦插繁殖的影响

通过激素(6-BA、NAA、IBA、GA3)的不同浓度处理技术的应用,得出诱导东方百合鳞茎、促进叶芽生长健壮的方法。结果表明,东方百合鳞茎的最佳诱导及增殖激素组合为6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L;扦插鳞片根的诱导最佳激素组合为6-BA 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;GA3促进东方百合幼芽及根生长的理想浓度为0.05 mg/L。     

东方百合胚性愈伤组织诱导和植株再生研究

为建立东方百合元帅、提拔、西伯利亚的高频愈伤体系,以幼叶、花丝、生长点为外植体,进行了不同激素组合的MS固体培养基对胚性愈伤组织诱导及植株再生研究。结果发现,Picloram比2,4-D更有利于胚性愈伤组织的诱导,幼叶、花丝更能有效诱导出胚性愈伤组织和再生植株,生长点的出愈率较低。幼叶在MS＋2mg／L Pieloram培养基,花丝在MS＋2mg／LPicloraIn＋0．1mg／L ABA培养基,生长点在MS＋2mg／LPieloram＋0．03mg／LTDZ培养基上能高效诱导出愈伤组织,来自幼叶的胚性愈伤组织在MS＋1．0mg／LBA＋0．1mg／LKT＋0．1mg／LIBA培养基上能高频再生出芽,来自花丝的胚性愈伤组织在Ms＋1．5mg／LBA＋0．3mg／LKT＋0．2mg／LIBA培养基上能高频再生出芽。愈伤组织生长呈直线生长趋势。     

Study on Transformation of Oriental Hybrid Lily by Agrobacterium-mediated

An efficient procedure was described for the transformation of the monocotyledonous oriental hybrid lily, Lilium cv. Siberia. by Agrobacterium-mediated genetic transformation via leaves regeneration, The leaves of leaflets which derived from bulbs were sliced into 1.0 cm long and were co-cultivated with A. tumefaciens strain LBA4404/pB2AE12, which harbored a vector carrying the neomycin phosphotransferase, DREB2A genes in the T-DNA region. The suitable genetic transformation condition was determined as follows： the bacterial concentration reached 0.5-0.6 （OD600）, 15 min infection time, 20 mg.L^-1 acetosyingone, and 10.6 mmol.L^-1 NH4NO3 medium was used for co-cultivation 3 days, delayed 7 days for selecting by 30 mg.L^-1 kanamycin containing regeneration medium. Efficient shoot regeneration was observed on MS medium supplemented with 1.0 mg.L^-1 naphthaleneacetic acid, 0.5 mg.L^-1 benzyladenine and 0.1 mg.L^-1 Kinetin after about 6 weeks culture. The presence ofDREB2A gene in the genomic DNA of regenerated plants was detected by means of PCR analysis.