不同浓度硒含量的富硒乳酸菌抑制黄曲霉菌生长以及产毒效果的研究

为研究不同浓度硒含量的乳酸菌对黄曲霉菌生长及产毒的抑制效果,测定了硒浓度分别为10、15、20、25μg/m L的MRS液体培养基中培养的乳酸菌对黄曲霉菌落生长抑制率、黄曲霉孢子生长抑制率以及黄曲霉产毒量抑制效果。结果显示:硒浓度在10~25μg/m L,培养48 h的富硒乳酸菌对于黄曲霉生长的抑制率较乳酸菌组增长了0.6%~9.4%,96 h抑制率达到了37.1%;培养6 h的黄曲霉孢子生长抑制率较乳酸菌组增长了0.2%~61%,24 h抑制率达到93.6%;产黄曲霉毒素B1抑制率较乳酸菌组提高10.3%~56.6%,24 h抑制率达到了97.3%。硒浓度达到25μg/m L的富硒乳酸菌对于黄曲霉生长的抑制率、黄曲霉孢子生长抑制率和产黄曲霉毒素B1抑制率均达到最大。结果提示,富硒乳酸菌对于黄曲霉菌落的生长、孢子萌发以及黄曲霉毒素的产生都有一定程度抑制作用,并且硒浓度达到25μg/m L,抑制效果最好。     

黄曲霉毒素降解菌N-1a的降解特性及在全株玉米青贮中的应用

为研究青贮用黄曲霉毒素降解菌N-1a的降解特性及在全株玉米青贮中的应用效果,本试验首先对菌株N-1a的发酵上清液进行不同处理后分别与毒素作用,初步研究降解活性物质的性质;然后研究N-1a发酵上清液在不同pH、不同温度下对黄曲霉毒素的降解率;最后通过发酵黄曲霉污染的全株玉米来验证N-1a在实际生产中的应用效果。结果表明:初步判定枯草芽孢杆菌N-1a降解黄曲霉毒素的活性物质是一种分泌蛋白,其在pH7.0和温度37℃时降解率最高;在全株玉米青贮试验中,N-1a明显降低了全株玉米青贮过程中的黄曲霉毒素,添加N-1a的处理组黄曲霉毒素含量为(8.56±1.68)μg/L,添加市售菌剂的处理组黄曲霉毒素含量为(15.26±2.53)μg/L;N-1a还有效降低了中性洗涤纤维(NDF)的含量,加入N-1a处理组NDF含量较加入市售菌剂的处理组降低7.98%;加入N-1a处理组乳酸含量比加入市售菌剂的处理提高1.66%,由此可见,N-1a处理组效果显著优于市售菌剂组。     

黑曲霉固体发酵DDGS降解黄曲霉毒素初探

研究考察了不同发酵条件对玉米干酒糟及其可溶物(DDGS)黄曲霉毒素的生物降解效果。结果表明,在最优发酵条件下,发酵后DDGS黄曲霉毒素B1(AFB1)含量为1.84μg/kg,比发酵前AFB1 8.12μg/kg降解了77.34%,其固体发酵的优化工艺条件为菌液添加量6%、发酵温度30℃、发酵时间为60 h,由此,取得了较好的降解效果。     

发酵玉米蛋白粉对奶牛瘤胃体外发酵特性及微生物菌群的影响

本试验旨在研究全混合日粮(TMR)中添加发酵玉米蛋白粉(fermented corn gluten meal,FCGM)对奶牛瘤胃体外发酵特性及微生物菌群的影响。选用3头体重(600±25)kg,安装永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛作为瘤胃液供体,发酵底物为TMR,分为对照组和3个试验组,各组分别在发酵液中添加0、0.3、0.6、0.9g/L FCGM(干物质基础),每个处理3个重复。记录体外发酵12、24、36和48h产气量,测定体外发酵12、24和48h发酵液pH、体外干物质消失率(IVDMD)、纤维素酶活性、氨态氮(NH3-N)、挥发性脂肪酸(VFA)和菌体蛋白浓度,并测定体外发酵24h发酵液中瘤胃微生物菌群相对丰度。结果显示:(1)添加不同水平FCGM组的体外产气量(除12h外)、慢速产气部分、潜在产气部分和有效产气速率均显著或极显著高于对照组(P0.05;P0.01);(2)与对照组相比,添加不同水平FCGM处理组的发酵液pH显著或极显著低于对照组,纤维素酶活性、菌体蛋白、挥发性脂肪酸、氨态氮含量和体外干物质消失率均显著或极显著升高(P0.05;P0.01),且0.9g/L FCGM组达到最高。(3)添加0.6和0.9g/L FCGM组发酵液中白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、牛链球菌、普雷沃氏菌、溶纤维丁酸弧菌、嗜淀粉瘤胃杆菌、真菌和原虫相对丰度均显著高于对照组(P0.05),且0.9g/L FCGM组达到最高,而产甲烷菌相对丰度显著低于对照组(P0.05),且0.9g/L FCGM组达到最低。综上所述,TMR中添加FCGM可提高体外发酵产气量,增加发酵液内纤维素酶活性、VFA、NH3-N及菌体蛋白含量,提高瘤胃内某些纤维降解菌、蛋白降解菌、淀粉降解菌、真菌和原虫相对丰度,降低产甲烷菌相对丰度,调节瘤胃微生物菌群结构,改善瘤胃发酵,其中以添加0.9g/L FCGM为宜。     

黄曲霉毒素B1与吸附剂对肉鸭生长及禽流感疫苗免疫的影响

本文旨在研究日粮黄曲霉毒素B1与霉菌毒素吸附剂对肉鸭生长性能,肝脏中黄曲霉毒素B1沉积和禽流感抗体合格率的影响.选择11日龄健康北麻杂1代肉鸭900只,随机分为9组,每组5个重复,每个重复20只.采用2×3双因子试验设计,以黄曲霉毒素B1和吸附剂为试验因子,黄曲霉毒素B1水平分别为25、50和75μg/kg,吸附剂水平分别为0、750和1500 mg/kg.黄曲霉毒素B1由发霉玉米提供,发霉玉米中黄曲霉毒素B1含量为500μg/kg.试验期为32 d.结果表明:1)随着黄曲霉毒素B1水平提高,肉鸭平均日采食量和平均日增重显著下降(P<0.05),而添加吸附剂对肉鸭平均日采食量、平均日增重和料重比无显著影响(P>0.05);2)随着黄曲霉毒素B1水平提高,肝脏绝对重量及黄曲霉毒素B1沉积量显著或极显著提高(P<0.01或P<0.05),添加吸附剂后在一定程度上减轻了毒素对肝脏的危害;3)黄曲霉毒素B1含量高于50 μg/kg时,不利于肉鸭禽流感抗体的产生;高于75μg/kg时,能引起肉鸭黄曲霉毒素中毒死亡,且添加吸附剂不能消除或减缓其不利影响.由此可知,霉菌毒素吸附剂在一定程度上减轻了黄曲霉毒素B1对肉鸭生长性能和肝脏的损害,提高了禽流感抗体合格率.     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素

建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素(AF)B1、B2、G1和G2。该方法样品用甲醇-水提取,稀释后经免疫亲和色谱柱纯化,应用高效液相色谱法检测。以Cloversil C18柱为分离色谱柱,甲醇-水(45∶55,体积/体积)溶液为流动相梯度洗脱,流速0.8 m L/min,柱温30℃,进样量20μL,荧光检测器检测,激发波长360 nm,发射波长440 nm。试验结果表明:空白样品分别按照1、10、20和50μg/kg添加黄曲霉毒素,平均回收率在85.9%~113.2%,精密度10%,4种毒素在标准溶液为0、1、5、10和50 ng/m L的条件下呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 8、0.999 9、1.000 0和0.9998,根据3倍信噪比的峰响应值,确定黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检测灵敏度分别为0.2、0.2、0.3和0.3μg/kg。该方法简单快速、灵敏度高和溶剂用量少且环保,适用于饲料中的黄曲霉毒素总量的测定。     

体外法研究不同磷添加水平对奶牛瘤胃内pH 和挥发性脂肪酸的影响

采用体外法研究无机磷添加浓度对瘤胃发酵的影响。无机磷在培养液中设0、30、60、90、120、150、200、250、300、350 mg/L 10个水平。体外培养发酵48 h后终止培养,测定培养液的pH、总挥发性脂肪酸(VFA)。结果表明,不同无机磷添加水平对乙酸、丙酸、丁酸和总VFA产量影响显著(P＜0.05),无机磷添加水平为200 mg/L时,乙酸、丙酸、丁酸及总VFA产量最高,随后下降。瘤胃培养液pH随无机磷添加水平的增加而显著降低(P＜0.05),无机磷添加水平为200 mg/L时达到最小值5.65,随后又上升。在本试验条件下,添加无机磷明显促进瘤胃微生物对饲料养分的发酵,适宜添加水平为200 mg/L。     

利用荧光定量技术检测生鲜乳中黄曲霉毒素M_1

本试验利用荧光定量检测技术检测生鲜乳中黄曲霉毒素M_1,最低检出限为0.047μg/L;取空白生鲜乳样品按0.05μg/L、0.1μg/L黄曲霉毒素M_1标准品进行添加,回收率均在90.00%～110.00%之间。各添加浓度批内、批间变异系数均低于15%;用该黄曲霉毒素M_1荧光定量检测卡和仪器法分别对50份生鲜乳盲样进行测定,结果全部相符,提示该法简便快捷、检测结果可靠,可用于黄曲霉毒素M_1的快速检测。     

硫酸亚铁添加对体外瘤胃微生物发酵的影响

为研究日粮中添加无机二价铁对瘤胃微生物发酵的影响,用人工瘤胃模拟装置发酵72 h研究添加不同水平亚铁(0、30、60、90、120和150 mg/kgDM,源于硫酸亚铁)对体外瘤胃液氨浓度、微生物氮产量和挥发性脂肪酸(VFA)产生量的影响.结果表明:添加亚铁可使发酵液不同时间点氨浓度和总氨产量、有机物发酵率、总微生物氮产量显著提高(P<0.05);与不添加的对照组相比,添加亚铁可使发酵液的总VFA、乙酸、丙酸、丁酸浓度明显增加(P<0.05),但乙酸、丙酸、丁酸摩尔比例没有差异(P>0.05);添加亚铁明显促进瘤胃有机物的发酵,增加瘤胃VFA产生量,过多的亚铁对瘤胃微生物生长有抑制作用.     

宏基因组学揭示AFB1对牦牛瘤胃微生物多样性及CAZy谱影响

采用宏基因组学方法探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)对牦牛瘤胃微生物多样性及碳水化合物酶类(CAZy)功能谱的影响。试验设E1、E2两个试验组和对照组C,日粮中添加AFB1量分别为20μg·kg^-1、60μg·kg^-1和0。采集瘤胃液,提取DNA,进行宏基因组分析。结果表明,AFB1降低拟杆菌门及厚壁菌门的丰度,在属水平上较高水平的AFB1对普雷沃氏菌具有抑制作用。牦牛瘤胃中降解植物纤维素主要的CAZy是糖苷水解酶(GH)和糖基转移酶(GT)。AFB1对CAZy中6类酶以及3种纤维小体构成组分均产生影响,且高水平影响更大。研究揭示,AFB1降低瘤胃细菌多样性,影响CAZy功能。研究结果有利于探讨AFB1影响反刍动物瘤胃微生态的机制,为饲料安全使用及牦牛健康养殖和产品安全生产提供参考。     

钠基膨润土和黄曲霉毒素吸附剂对肉鸡生长性能屠体性能及免疫性能的影响

将本地0.5%钠基膨润土(sodium bentonite,SB)+龙胆紫),1%(SB+乙酸)及两种商品吸附剂(m和n)(处理黄曲霉毒素水平0～100μg/kg)分别添加在肉鸡饲料中。将300只1日龄商业雏鸡分成10个组,每组3个重复,按标准将黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)均匀混合在商业肉鸡饲料中饲喂6周。记录每周体增重和采食量,试验结束时在每组中取2只屠宰,并计算心脏、肝脏、肌胃相对重量和屠宰率,分别在21d、28d、35d和42d时测定鸡新城疫效价。结果表明,黄曲霉毒素在鸡饲料中的负面效应显著(P<0.05),肉鸡采食受黄曲霉毒素污染的饲料会抑制其体增重,降低采食量和饲料转化率。单纯添加0.5%钠基膨润土的试验组有明显改善,使添加有100μg/kg黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)的B组中肉鸡肝脏相对重量(5.34%),心脏(0.72%),肌胃(2.05%)分别恢复到3.57%、0.57%、1.43%,死亡率由40%降低至16.6%。而添加有100μg/kg黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)组(B)与未添加AF组(A)相比,屠宰率明显降低51.7%。结论:添加有本地钠基膨润土试验组效果总的来说比添加商品吸附剂效果好,而添加0.5%水平的钠基膨润土效果要优于1%钠基膨润土组。     

生物脱霉剂对黄曲霉毒素 B1 的作用研究

为了研究生物脱霉剂的脱霉效果,本试验测定了生物脱霉剂对黄曲霉毒素B1的吸附强度,同时采用全收粪试验检测了霉变饲料添加生物脱霉剂后,家畜粪便中黄曲霉毒素B1的排出率.结果表明,将黄曲霉毒素B1的浓度调整为2μg/g时,添加1.2‰的生物脱霉剂,可吸附98.34%的黄曲霉毒素B1,全收粪试验表明,在霉变饲料中添加1‰的生物脱霉剂,被吸附的黄曲霉毒素B1 随粪便的排出率为50.44%,添加2‰的生物脱霉剂,黄曲霉毒素B1的排出率为72.30%.     

不同组分植物甾醇对瘤胃发酵参数的影响

为了评定不同组分植物甾醇(甾醇A～E)对瘤胃发酵参数的影响,利用体外瘤胃发酵技术在含60 mL瘤胃培养液及600 mg全混合日粮的120 mL发酵瓶中分别添加0、2、6、12μg植物甾醇,39℃恒温培养24 h,于3、6、9、12、24 h读取产气量,发酵终止时测定产气量、底物降解率、氨态氮、微生物蛋白、pH值及挥发性脂肪酸产量。结果显示:添加的植物甾醇组分、浓度对体外发酵干物质降解率和乙酸/丙酸均有显著影响(P0.05),组分对氨态氮浓度有显著影响(P0.05),甾醇浓度对乳酸、菌体蛋白、总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸、丁酸浓度以及pH值、总产气量有显著影响(P0.05),且组分与浓度在体外发酵产气量、干物质降解率、菌体蛋白和乙酸/丙酸上均存在交互作用(P0.05)。发酵结束后,浓度为0.03μg/mL的B甾醇组累积产气量与丙酸浓度最高,乳酸浓度最低,B组平均氨态氮含量最低,浓度为0.03μg/mL分组的平均干物质降解率、总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸和丁酸最高。提示:在饲料中添加适量植物甾醇,可以促进瘤胃发酵,改善瘤胃功能,添加甾醇B,添加浓度为0.03μg/mL时效果更为明显。     

降解黄曲霉毒素B1芽孢杆菌的筛选及鉴定

为获得能够降解黄曲霉毒素B1的芽孢杆菌菌种,以香豆素为唯一碳源的培养基进行平板初筛,将初筛菌株再以100μg/mL浓度的黄曲霉毒素B1降解效果复筛,得到一株黄曲霉毒素B1降解能力达到88.6%的菌株CA01005.综合形态特征、生理生化特征以及gyrB基因进化分析结果,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).     

纳米铜对瘤胃体外发酵纤维降解酶活性的影响

试验采用体外发酵法,研究在瘤胃液中添加不同浓度的纳米铜,铜添加量为(0、50、100、200、400、800、2 400μg/L)(0添加量为对照组),对绵羊瘤胃体外发酵干物质降解率、瘤胃主要纤维素降解酶活性的影响。试验共分7个处理,每个处理3个重复。结果表明:纳米铜添加量为100μg/L时,干物质降解率达到最高值,滤纸酶活性相比对照组和其他试验组都有显著提高(P0.05)。所以,体外发酵条件下,添加适量的纳米铜对瘤胃发酵有促进作用,适宜添加的纳米铜浓度为100μg/L。     

利用体外法研究不同水平维生素A对奶牛瘤胃内环境参数的影响

本研究以3只安装有永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛作为试验动物,利用体外培养法研究3个不同水平的VA(分别为8.3×10-2mg/mL(A组)、2.5×10-1mg/mL(B组)和4.17×10-1mg/mL(C组))对瘤胃pH、氨氮(NH3-N)、尿素氮和挥发性脂肪酸(VFA)浓度随时间的动态变化的影响以及VA在瘤胃中的消失情况。结果表明,随着VA添加量的增加培养液pH呈上升趋势,NH3-N和VFA的平均浓度呈下降趋势,但差异不显著(P>0.05)。C组培养液尿素氮浓度极显著高于A、B两组(P<0.01)。在高产奶牛的TMR日粮条件下,培养液VA浓度随着VA添加量的增加而增加,且不同VA水平下,培养液中VA浓度的峰值均出现在培养8 h后。     

发酵玉米蛋白粉对奶牛瘤胃体外发酵特性及微生物菌群的影响

本试验旨在研究全混合日粮（TMR）中添加发酵玉米蛋白粉（fermented corn gluten meal,FCGM）对奶牛瘤胃体外发酵特性及微生物菌群的影响。选用3头体重（600±25）kg,安装永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛作为瘤胃液供体,发酵底物为TMR,分为对照组和3个试验组,各组分别在发酵液中添加0、0.3、0.6、0.9 g/L FCGM（干物质基础）,每个处理3个重复。记录体外发酵12、24、36和48 h产气量,测定体外发酵12、24和48 h发酵液pH、体外干物质消失率（IVDMD）、纤维素酶活性、氨态氮（NH₃-N）、挥发性脂肪酸（VFA）和菌体蛋白浓度,并测定体外发酵24 h发酵液中瘤胃微生物菌群相对丰度。结果显示：①添加不同水平FCGM组的体外产气量（除12 h外）、慢速产气部分、潜在产气部分和有效产气速率均显著或极显著高于对照组（P < 0.05;P < 0.01）;②与对照组相比,添加不同水平FCGM处理组的发酵液pH显著或极显著低于对照组,纤维素酶活性、菌体蛋白、挥发性脂肪酸、氨态氮含量和体外干物质消失率均显著或极显著升高（P < 0.05;P < 0.01）,且0.9 g/L FCGM组达到最高。③添加0.6和0.9 g/L FCGM组发酵液中白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、牛链球菌、普雷沃氏菌、溶纤维丁酸弧菌、嗜淀粉瘤胃杆菌、真菌和原虫相对丰度均显著高于对照组（P < 0.05）,且0.9 g/L FCGM组达到最高,而产甲烷菌相对丰度显著低于对照组（P < 0.05）,且0.9 g/L FCGM组达到最低。综上所述,TMR中添加FCGM可提高体外发酵产气量,增加发酵液内纤维素酶活性、VFA、NH3-N及菌体蛋白含量,提高瘤胃内某些纤维降解菌、蛋白降解菌、淀粉降解菌、真菌和原虫相对丰度,降低产甲烷菌相对丰度,调节瘤胃微生物菌群结构,改善瘤胃发酵,其中以添加0.9 g/L FCGM为宜。     

不同无机磷添加水平对混合瘤胃微生物体外发酵的影响

采用体外法研究无机磷添加浓度对瘤胃发酵的影响。培养液中设0mg/L、30mg/L、60mg/L、90mg/L、120mg/L、150mg/L、200mg/L、250mg/L、300mg/L、350mg/L共10个无机磷水平。体外发酵48h后终止培养,测定培养液的产气量、pH值、挥发性脂肪酸、干物质降解率、NDF降解率。结果表明:无机磷添加水平对48h总产气量和DM降解率影响显著(P0.05),随着无机磷添加水平的提高,48h总产气量和DM降解率显著提高,添加水平为200mg/L时达到最大值,分别为44.30mL和54.80%,随后下降。瘤胃培养液pH值随无机磷添加水平的增加而显著降低(P0.05),无机磷添加水平为200mg/L时达到最小值6.35,随后又上升。不同无机磷添加水平对乙酸、丙酸、丁酸和总VFA产量影响显著(P0.05),无机磷添加水平为200mg/L时,乙酸、丙酸、丁酸及总VFA产量最高,随后下降。     

免疫亲和柱荧光光度法和高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素

利用免疫亲和柱荧光光度法和高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素。免疫亲和柱—荧光光度法测定饲料中的黄曲霉毒素的测定范围0～50μg/kg;线性相关系数0.99;检测灵敏度1μg/kg;变异系数<18%;回收率82%～120%;分析时间20min,不需要剧毒的黄曲霉毒素标准品。免疫亲和柱-高效液相色谱法测定可以分别定量地检测饲料中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,在黄曲霉毒素B1为0～50μg/kg测定范围内其线性相关系数0.91;检测灵敏度1μg/kg;变异系数<10%;回收率81%～110%。     

沸石粉和酵母细胞壁对仔鸡黄曲霉毒素感染的防治作用

文章旨在评估两种吸附剂沸石粉与沸石粉+酵母细胞壁预防肉鸡黄曲霉毒素的效果。试验将550只1d肉仔鸡随机分为11组,每组5个重复,每个重复10只鸡。11个处理中包括3个没有添加吸附剂的日粮(含0、1和2mg/kg黄曲霉毒素B1),8个处理组日粮含1或2mg/kg黄曲霉毒素B1,添加沸石粉或沸石粉+酵母细胞壁。试验共持续21d。结果发现,随着日粮黄曲霉毒素B1水平的升高,肉鸡采食量、增重较对照组显著降低(P<0.05),肝脏重量较对照组显著提高(P<0.05)。在饲喂2mg/kg黄曲霉毒素B1日粮的仔鸡中观察到严重的肝脏损伤,病变与黄曲霉毒素病一致。日粮黄曲霉毒素B1污染显著降低了肉鸡血清葡萄糖、白蛋白、总蛋白、钙、磷含量和碱性磷酸酶活力(P<0.05)。1mg/kg黄曲霉毒素B1污染日粮中添加沸石粉或沸石粉+酵母细胞壁均可缓解毒素对肉鸡生长和肝脏病变的影响(P<0.05)。但2mg/kg黄曲霉毒素B1污染日粮中添加沸石粉+酵母细胞壁对毒素的影响无显著缓解效果,其中2mg/kg黄曲霉毒素B1污染日粮添加沸石粉的预防效果显著高于沸石粉+酵母细胞壁(P<0.05)。结果表明:日粮黄曲霉B1毒素污染显著降低了肉鸡的采食量、体增重,并导致高死亡率,同时导致肉鸡肝脏增大,肝功能受损。在本实验条件下,沸石粉和沸石粉+酵母细胞壁均能在较低黄曲霉毒素B1污染水平(1mg/kg)下有效缓解其负面影响,但沸石粉对2mg/kg黄曲霉毒素B1的缓解作用强于酵母细胞壁。