甘肃省永靖县奶牛布鲁氏菌病监测与病原分离鉴定

为查明甘肃省永靖县奶牛布鲁氏菌病流行情况、感染菌种和类型,2013—2017年对永靖县8月龄以上奶牛进行了布鲁氏菌病监测,对2016年检出的3份疑似感染布鲁氏菌奶牛的脾脏进行了病原分离与鉴定。结果显示:2013—2014年检测奶牛444头,未检出阳性;2015—2016年检测奶牛706头,检出阳性63头,个体阳性率为8.92%;3份脾脏样本均为布鲁氏菌PCR检测阳性,细菌分离培养15 d,只有1份生长菌落;将分离菌株用AMOS-PCR进行检测,获得流产布鲁氏菌特征的扩增条带,且分离菌株的omp25基因测序结果与流产布鲁氏菌高度吻合。本监测和细菌分离鉴定结果为该地布鲁氏菌病防控提供了技术支撑。     

新疆某地区3个牧场布鲁氏菌病流行状况调查及分析

为调查新疆某地区牛、羊布鲁氏菌感染情况,收集该地区3个牧场共3 223份样本,其中牛血液样本1 404份、羊血液样本1 590份、牛流产胎儿样本66份、羊流产胎儿样本75份、牛生鲜乳样本65份及羊生鲜乳样本23份。血液样本经血清分离后进行虎红平板凝集试验(RBPT),流产胎儿样本的部分脏器及生鲜乳样经DNA提取后进行聚合酶链反应(PCR),将PCR结果为阳性的样本进一步进行PCR扩增及系统进化树分析。RBPT结果显示,3个牧场RBPT平均阳性率为牛6.8%,羊9.5%;其中牧场A阳性率为牛7.1%,羊9.1%;牧场B阳性率为牛11.7%,羊10.8%;牧场C阳性率为牛4.2%,羊9.1%。经PCR共鉴定出54份布鲁氏菌阳性样本,其中包括牛流产胎儿22份、羊流产胎儿30份、羊生鲜乳1份及牛生鲜乳1份,其余均为阴性。从上述PCR阳性样本中共鉴定出38份为羊种布鲁氏菌,其中包括牛流产胎儿16份、羊流产胎儿20份、牛生鲜乳1份及羊生鲜乳1份。系统进化树分析表明,鉴定出的羊种布鲁氏菌与内蒙古地区、挪威及印度等国分离的羊种布鲁氏菌生物3型菌株亲缘关系非常接近。综上所述,羊种布鲁氏菌是引起该地区牛、羊布鲁氏菌病的主要病原菌。研究结果为新疆地区控制和预防布鲁氏菌的感染提供了流行病学依据。     

一株犬种布鲁氏菌的分离鉴定及其在巨噬细胞内存活能力的研究

为分离鉴定流产犬的致病病原及其生物学特性，本研究从重庆某宠物医院无菌采集流产犬全血2份，将其涂布于布鲁氏菌选择培养基，分别在不含CO2和含7.5%CO2条件下37℃培养72 h，观察菌落形态，并经结晶紫染色，观察细菌类型。按照国家标准鉴定分离菌的生化特性。细菌分离结果显示，在不含CO2和含7.5%CO2的培养箱中2份流产犬全血样品在布鲁氏菌选择培养基上均长出边缘整齐、光滑的圆形菌落，透射光下，菌落呈浅黄色且有光泽；结晶紫染色结果显示分离菌为典型的粗糙型细菌；生化鉴定结果显示，分离株在TSA中的生长不依赖于CO2，且不产生H2S，氧化酶和脲酶试验均为强阳性。上述结果表明分离到一株犬种布鲁氏菌，命名为B. canis CQ3。对分离菌进行全基因组测序，利用MAUVE对分离株与GenBank中38株不同种的布鲁氏菌基因组进行比对，并构建分离菌全基因组的进化树。将不同种布鲁氏菌及分离株分别接种于TSB培养基中，通过测定不同时间的OD450nm值绘制各菌株的生长曲线。将各菌株及B. canis CQ3株分别以MOI 100感染小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7，在感染后的不同时间(1 h、24 h...     

奶牛布鲁氏杆菌病的实验室诊断

该研究通过对阿勒泰市某奶牛场疑似布鲁氏杆菌病的33份血清样本,以及流产奶牛的胎衣、全血、牛奶做细菌分离培养、动物试验、虎红平板凝集试验、试管凝集试验、补体结合试验等方法来诊断奶牛的布鲁氏杆菌病。结果,从发生流产奶牛的血样、流产胎衣和牛奶中均分离出一种革兰氏阴性小杆菌,经诊断为布鲁氏杆菌;33份血清样本中,虎红平板凝集试验呈阳性的有6份,阴性27份;试管凝集试验呈阳性的有3份,可疑的有1份,阴性29份;补体结合试验中,阳性2份,其余31份为阴性。     

奶牛布鲁氏菌的监测与分离鉴定

本试验采用SAT方法对乌鲁木齐地区某牛场进行了布鲁氏菌病监测,对阳性奶牛的乳汁进行细菌分离培养,用VirB8-PcR方法对分离株VirB8基因进行扩增鉴定。结果表明,2个分离株均为布鲁氏菌,布鲁氏菌分子分型PCR的鉴定结果显示该牛场感染的自然菌株为布鲁氏菌牛种（3b,5,6,9型）。     

奶牛布鲁氏菌病的病原分离与鉴定

为给奶牛布鲁氏菌病实验室诊断提供技术参考,对疑似布鲁氏菌病病例进行了病原分离培养,并采用平板直接凝集试验、革兰氏染色镜检、柯兹洛夫鉴别染色镜检和PCR方法对分离菌株进行了鉴定.结果表明：分离的4株细菌均为布鲁氏菌属细菌.     

奶牛布鲁氏菌病的病原分离与鉴定

本试验对疑似布鲁氏菌病的样本进行了病原分离,采用血清学试验、染色镜检、PCR和基因克隆测序对分离菌株进行了鉴定。结果表明,4株分离菌株均为布鲁氏菌属细菌,与布鲁氏菌参考菌株的核苷酸同源性为99.52%~100%。采用AMOS PCR对4株分离菌株进行种特异性鉴定,结果显示,1株为猪种布鲁氏菌,3株为牛种布鲁氏菌。     

1981—1985年澳大利亚布鲁氏杆菌分离物的鉴定、分布和流行病学意义

本文介绍了堪培拉国立布鲁氏杆菌病参考中心和国立生物学标准实验室,对1981-1985年接收的布鲁氏菌分离物进行鉴定的结果,指出了该菌的种和生物型在各州和各种宿主情况的分布。在澳大利亚分离的培养物,被鉴定为流产布鲁氏菌1、2、3型和19号菌株;猪布鲁氏菌1型和绵羊布鲁氏菌。马尔他布鲁氏菌3型是从地中海地区感染的人分离的。最常见的分离物为流产布鲁氏菌1型。从牛分离的非典型培养物有猪布鲁氏菌1型和利用赤藓醇的19号菌株变异型,讨论了它们在影响国家根除布鲁氏菌病运动中的流行病学意义。本文记载了1981—1985年期间提交给国立布鲁氏菌病参考中心(NBRC)的所有布鲁氏菌(以下简称布氏菌)培养物的特性,它们来自除塔斯马尼亚外的各州和各地区,多数是由各州兽医实验室提供的,少数来自医院和开业者的病理材料。联邦血清实验室(CSL)1965—1976年的研究结果已在以前作过报导。     

奶牛布鲁氏菌的PCR鉴定

采集内蒙古某地区的可疑感染布鲁氏菌病奶牛的乳样及奶牛流产胎儿的肺、肝、脾等相关病料,分离并培养出11株病原菌,经BCSP31-PCR、VirB8-PCR、多重PCR及AMOS-PCR4种PCR方法鉴定,证实11株病原菌均为布鲁氏菌,并将11株菌定型为牛种5,6,9或3b型.     

广西黑山羊羊种布鲁氏菌的分离和鉴定

为了对一起黑山羊流产死胎的病原进行诊断,采集10份黑山羊血清进行布鲁氏菌病抗体检测,并采集流产胎儿进行细菌的分离。虎红平板凝集试验结果表明10份血清全为阳性,试管凝集试验检测有8份血清为阳性;对流产死胎分离出的细菌进行PCR鉴定证实该细菌为羊种布鲁氏菌。     

奶牛传染性繁殖疾病的防控

正奶牛饲养过程中经常会有出现传染性的繁殖性疾病,常见的有布鲁氏菌病、弧菌病和流行性流产。传染性繁殖病重在预防,一旦发病会造成不必要的损失。1布鲁氏菌病布鲁氏菌病是一个叫大卫·布鲁斯的英国军医于1887年首次发现,随后命名为马尔他布鲁氏菌病。感染牛则被称为邦氏病;感染猪则被称为创氏病或传染性流产;感染山羊则被称为马耳他热或流产;感染人,则被称为地中海热或波状热。布鲁氏菌病尽管仍威胁着世界奶牛业,但是,人们在根     

奶牛魏氏梭菌病病原的分离鉴定

2010年11月沈阳市一奶牛小区奶牛发生猝死,在病料中分离到1株有荚膜、芽孢的革兰氏阳性粗大杆菌,分离菌株在绵羊血琼脂平板上培养后能形成溶血圈。根据发病奶牛临床症状、病理变化以及生化试验结果鉴定出该分离菌株为一株魏氏梭菌;动物回归试验证实,该菌菌株可致小白鼠发病死亡,并从试验致死的小鼠病料中分离到了与死亡奶牛病料相一致的细菌。从而确诊这起奶牛猝死是由魏氏梭菌感染所致。     

金黄色葡萄球菌小菌落突变株体外感染奶牛乳腺上皮细胞的研究

为了研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株对正常奶牛乳腺上皮细胞的侵袭作用,试验采用普通光学和扫描电子显微镜观察的方法对临床分离的一株金黄色葡萄球菌小菌落突变株及金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923体外感染培养的奶牛乳腺上皮细胞引起的细胞形态变化及细菌侵入细胞的过程进行了研究。结果表明:金黄色葡萄球菌分离菌株与质控菌株ATCC25923在体外感染乳腺上皮细胞3 h后出现凋亡现象,表现为细胞体积缩小,核质浓缩,核膜核仁破碎,胞膜有小泡状形成。说明金黄色葡萄球菌小菌落突变株对奶牛乳腺上皮细胞具有致病性,但致病力远低于金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923,金黄色葡萄球菌小菌落突变株可以在奶牛乳腺上皮细胞中持续存在,在细胞中有一定存活,与金黄色葡萄菌株质控菌株ATCC25923相比对细胞的侵袭能力较低。     

两种PCR方法调查宁夏奶牛流产原因及奶牛流产防控措施

为了探讨宁夏规模化奶牛场奶牛流产原因,采用奶牛衣原体Taq Man MGB探针实时荧光定量PCR法及相关的的布鲁氏菌检测方法,对采集自15个规模奶牛场的949份流产样品进行衣原体和布鲁氏菌的检测。结果表明:15个规模化奶牛场均检测到有衣原体和布鲁氏菌感染,其中衣原体感染阳性率最高的牛场达到57.4%,最低为21.4%;布鲁氏菌感染阳性率最高的牛场达到16.5%,最低为3.9%,说明宁夏规模化奶牛场奶牛流产的原因主要是由衣原体和布鲁氏菌感染引起。     

伊氏李氏杆菌引发奶牛流产的诊断

李氏杆菌是引起家畜流产的主要传染性病因之一,其中单核细胞增生性李氏杆菌和伊氏李氏杆菌是引起奶牛李氏杆菌病的主要致病菌,主要引起动物脑膜脑炎、败血症和孕畜流产、死胎或新生畜感染等症状。本实验室于2010年4月接到北京某牛场流产病例样品3份（包括流产胎儿、胎盘及母牛血样）,经胎儿组织抹片染色、细菌分离培养与鉴定以及鉴别诊断,最终确诊该3例流产病例为伊氏李氏杆菌感染所致。     

牦牛流产胎儿中流产布鲁氏菌的分离与鉴定

牦牛流产胎儿中流产布鲁氏菌的分离与鉴定杨建梅（四川省金川县农牧局６２４１００）流产布鲁氏菌病的特征是在怀孕的母牛中引起流产。过去一般依据流产胎儿的消化道及肺组织内可找到布菌，其他组织则无菌，认为流产布鲁氏菌病垂直感染是细菌通过吞咽羊水进入胎儿所致，可...     

牛布鲁氏菌病的流行与防控

<正>牛布鲁氏菌病通常是由流产布鲁氏生菌引起的,猪布鲁氏菌对牛呈隐性感染。流产布鲁氏菌感染牛科的所有动物,包括瘤牛、牦牛、家水牛和野牛,同时也感染其他偶蹄类动物。本病主要的传染源是流产奶牛,布鲁氏菌病常引起妊娠母牛流产,同时导致子宫炎和胎衣不下(RFM);可以引起公牛发生睾丸炎、附睾炎及副性腺感染。通过实验室诊断可确诊本病。根据法规,本病不能治疗,以防控为主。1流行性分析绵羊和山羊布鲁氏菌病是由马耳他布鲁氏菌引起的,牛     

流产布鲁氏菌疫苗候选株RB6生物学特性研究

为了开发布鲁氏菌病新型标记疫苗,本研究对流产布鲁氏菌基因缺失株RB6的培养特性、染色特性、凝集特性、稳定性及小鼠体内毒力和免疫保护力进行了系统鉴定,旨在阐明该菌株具备的生物学特性。通过对亲本菌株和RB6的比较,发现固体培养基上RB6菌株单菌落可被结晶紫染成紫色,RB6菌株液体培养物可与0.1%吖啶黄染料以及抗布鲁氏菌粗糙型抗体发生凝集反应,证明该菌株为粗糙型。将RB6菌株在体外连续传代培养20次和牛体内连续5次继代,检测结果证明其表型未发生变化,说明该菌株遗传稳定性良好。通过小鼠体内试验发现该菌株毒力显著降低,并对流产布鲁氏菌强毒菌株2308攻毒的免疫保护力与现有疫苗A19接近。本研究结果表明,流产布鲁氏菌基因缺失株RB6为粗糙型菌株,毒力较低、安全性高、遗传性状稳定,并具有良好的免疫保护效力,有望开发成为动物布鲁氏菌病粗糙型标记疫苗。     

共和县布鲁氏菌病的血清学调查

2008-2013年间,应用虎红平板凝集试验（RBT）和试管凝集试验（SAT）对共和县奶牛累计检测布鲁氏菌病的血清7004份,检出阳性血清15份,阳性率0.21%,结果表明共和地区奶牛布鲁氏病得到有效控制。布鲁氏菌病（简称布病）,是由布氏杆菌感染引起的慢性接触性人畜共患的传染病,其特征是妊娠母畜发生流产,公畜呈现睾丸炎。该病可造成奶牛不同程度流产,生产性能下降,     

某奶牛场临床型乳房炎的病原分离及鉴定

从某奶牛场患乳房炎的奶牛乳汁中共分离到 13株细菌 ,经培养特性、菌落形态和生化特性等鉴定表明 ,13个分离菌株中 ,无乳链球菌最为多见 ,占 10株 ;金黄色葡萄球菌 2株及大肠杆菌 1株。将 3种细菌经人工感染小白鼠 ,都具有一定的致病力。药敏试验结果表明 ,氨苄青霉素及丁胺卡那对上述细菌具有较好的抑制作用