猪繁殖与呼吸综合征类NADC30与HP-PRRSV毒株RT-PCR鉴别方法的建立与应用

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种能够引起大面积呼吸道疾病并快速传播,导致母猪流产和仔猪死亡的RNA病毒,其特性为变异快,存在毒株间的重组。因此,病原的快速检测和鉴定对于该病的防控十分重要。本试验建立了一种能够区分类高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30与HP-PRRSV毒株的检测方法,根据nsp2基因的高变区的比对结果,选择其保守序列,设计一对检测引物,类NADC30扩增片段大小为334 bp,HP-PRRSV毒株扩增片段大小为514 bp,通过优化反应条件,最终建立了一种一对引物就可以区分检测类NADC30与HP-PRRSV毒株的RT-PCR检测方法。应用本试验所建立的RT-PCR方法对2017年12月至2018年2月采至四川多地区的疑似PRRSV感染发病的46份肺脏进行检测。结果显示,类NADC30检出率为32. 6%,高于HP-PRRSV毒株的检出率(10. 9%)。该方法的建立,为类NADC30和HP-PRRSV毒株的快速鉴别诊断提供了方法,具有重要意义。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like分离株致病力分析

为探究天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株的流行情况,从天津市某猪场发病猪肺脏组织中分离到 1 株PRRSV,扩增其 Nsp2 基因,核苷酸序列比对结果显示该病毒属 NADC30 分支,与 TJnh1501 株同源性最高,命名为 TJ18114 株,并对其感染细胞能力和对猪的致病力进行了研究。结果显示：该毒株能够在 Marc145 细胞上稳定增殖,引起明显的细胞病变,最佳收获时间为 72 h(0.1MOI 接种),TCID₅₀为 10^6.445·mL^-1;用 2×10⁵TCID₅₀·头^-1的剂量经肌肉注射结合鼻腔喷雾方式接种 45 d 杜长大三元猪,猪只感染后 24 h 体温升高至 40 ℃以上,血液中病毒载量达 10^7.3copies·mL^-1;感染后 7 d PRRSV 抗体阳转率 100%;感染后 15 d 猪只消瘦、咳喘,剖检可见间质性肺炎,显微病理观察提示弥漫性肺泡萎缩、炎性浸润;PRRSV...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株与JXA1-R疫苗株荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用

为鉴别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株,根据类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株非结构蛋白2(Nsp2)基因序列差异,设计特异性引物和探针,建立TaqMan荧光定量PCR和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法.结果显示,2种方法中,标准品在103～...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株单克隆抗体的制备

目的是经蔗糖密度梯度纯化PRRSV变异毒株,制备抗PRRSV的单克隆抗体。方法是用经纯化的PRRSV接种BALB/c小鼠后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合用间接ELISA筛选阳性克隆,对单抗进行特异性鉴定及亚型鉴定。结果是经4次单克隆筛选,获得5株具有稳定分泌特性,与PRRSV变异株呈阳性反应的细胞株。结论是所获得的抗PRRSV特异性单克隆抗体,可作为PRRSV感染的诊断和研究依据。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断

<正>猪繁殖与呼吸综合征(porcine…reproductive…and…respiratory…syndrome,PRRS)是由PRRSV(Porcine…reproductive…and…respiratory…syndro…me…Virus,PRRSV)引起猪的一种高度接触性传染病,主要特征是妊娠母猪早产、流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍及各种年龄猪呼吸系统疾病,仔猪高死亡率、感染猪出现免疫抑制等。高致病性     

新疆南疆猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株分型鉴定

了解新疆南疆PRRSV毒株类型,为新疆南疆PRRS防制疫苗的选择和防制措施的制定提供理论依据。本实验利用可同时扩增PRRSV欧洲型和美洲型毒株的ORF7基因特异性引物,进行RT-PCR、克隆、测序及序列分析。结果显示:本研究获得的14个ORF7基因片段不存在类似欧洲型代表株LV的9个核苷酸缺失,进化树显示均与国内外的美洲型代表株在同一分支内,其中XJNJ-5-2和XJNJ-5-3株与高致病性代表株JXA1在同一个小的分支内。结论为本实验未检测到欧洲型毒株,获得了14个美洲型毒株,其中有2株属于高致病性毒株。利用新疆南疆PRRSV分子流行病学调查结果,对新疆南疆PRRS的防制具有现实意义。     

猪繁殖与呼吸综合征诊断和防治

猪繁殖与呼吸综合征又名蓝耳病,本病是由病毒引起的一种传染病,猪是唯一的易感动物,对不同猪龄和性别的猪都可感染,尤其以对怀孕母猪和1月龄的仔猪最易感,患病猪和带毒猪是本病的重要传染源。主要传播途径是接触感染、空气传播和精液传播,也可通过胎盘垂直传播,可对养殖业造成重大的影响,被世界卫生组织列为二类传染病,对该病的诊断和防治非常重要,下面就对本病的诊断和防治进行一下论述。     

猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防治

猪繁殖与呼吸综合征（prrs）俗称蓝耳病，是一种由lelystad病毒（在分类上属动脉炎病毒）引起的猪高热稽留，是妊娠母猪流产、死产和仔猪死亡率很高的疾病。猪一旦被该病毒感染。将长期带毒。带毒猪的流动可引起本病传播。饲养管理不完善、防疫消毒不规范、饲养密度大等可诱发本病的发生与流行。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗弱毒株的克隆与鉴定

自美国和荷兰引进的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）疫苗弱毒株,经MARC-145细胞培养复壮,采取有限稀释法对疫苗株进行纯化克隆,克隆毒株在MARC-145细胞上培养72h出现典型的细胞病变（CPE）。取接种病毒后36h的MARC-145细胞作超薄切片电镜观察,于感染细胞浆内及空泡化内质网内均有散上的病毒培养物初步纯化作用抗原,检测了PRRS可疑猪场的血清80份,其中阳性34份,阳性率为42.5%,并探讨了疫苗毒株作为抗原的可能性。     

猪繁殖与呼吸综合征的诊断和防治

猪的繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种高度接触性传染病,不同年龄,品种和性别的猪均能感染,但以妊娠母猪和仔猪最易感。本文论述一起疫情的诊断、治疗和综合防治措施。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征的流行与诊断

猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)于1987年首次在美国报道。1988和1990年分别在亚洲和欧洲发现该病。该文简单介绍了猪繁殖与呼吸障碍综合征,具体的分析了该病的流行病学、临床症状、如何诊断以及免疫效果。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征的诊断与控制

猪繁殖与呼吸障碍综合征传播速度快,仔猪病死率高,给猪场造成巨大的经济损失。该病是危害我国生猪产业的主要疫病之一。对一例猪繁殖与呼吸障碍综合征患猪开展临床观察、剖检、抗体检测和诊断,提出了切实可行的猪繁殖与呼吸障碍综合征防控措施,以期为规模猪场同类疫病的诊断和预防提供借鉴。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征诊断及防治

猪繁殖与呼吸障碍综合征也被称为蓝耳病,其主要病因是由于猪繁殖与呼吸道综合征病毒感染而产生的接触性传染疾病.我国生猪养殖产业飞速发展,猪繁殖与呼吸障碍综合征对我国养殖产业经济的健康发展造成了极大的影响和阻碍,这一问题引起了相关专家和学者的高度重视.本文以猪繁殖与呼吸障碍综合征诊断及防治为主线,进行简要分析和描述,并分别从...     

1株PRRSV类NADC30毒株的分离鉴定及序列分析

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行株的变异情况,将PRRSV阳性病料处理后接种Marc-145细胞,成功分离到1株PRRSV毒株,将其命名为HENZXC-4,并对其全基因组序列进行测定和分析。结果表明,HENZXC-4为未发生重组的类NADC30毒株,其NSP2蛋白存在131个氨基酸不连续缺失,且其GP5蛋白存在1个氨基酸插入。     

新疆南疆一起猪繁殖与呼吸综合征的诊断

为了明确新疆南疆某猪场猪一起疫情发病原因,本研究采用发病情况调查、临床症状检查、病理学剖检、病理组织学观察和RT-PCR方法进行系统分析。结果诊断为该猪场猪感染猪繁殖与呼吸综合征病毒,且初步鉴定为高致病性猪繁殖与呼吸综合征。该诊断结果为该场乃至新疆南疆猪病的诊断和防制提供一定的方法和指导意义。     

猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断方法的建立

为建立一种方便快捷的检测猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR方法,根据GenBank中已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因设计一对引物,并以合成的cDNA为模板,初步建立了检测猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR方法,进而对对照病毒及采集的病料组织进行了特异性、敏感性和重复性检测。结果显示,该研究建立的RT-PCR方法敏感性高,最低检测阈为10 TCID50/mL,扩增产物的特异性良好,重复性良好,可用于猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及流行病学调查。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征的诊断及防治

[目的]减轻猪繁殖与呼吸障碍综合征对养猪业的危害。[方法]对某猪场病死猪进行病理剖检,采集病猪肺脏、脾脏和淋巴等组织,经过研磨、冻融、加双抗、离心后取上清液。[结果]采用RT-PCR方法进行实验室检测,结合病死症状及实验室结果,初步确定为感染PRRSV;根据室验室结果,采取相应的防治措施,已取得了较理想的效果。[结论]该研究为今后猪感染高致病蓝耳病的诊断及防治提供了重要依据。     

猪繁殖与呼吸综合征简述

文章介绍了猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行病学、病原学、基因学、免疫学特征和传播特点、临床症状病理变化及对养殖业的危害性,并简要介绍了PRRS的防治。     

浅谈猪繁殖与呼吸综合征

猪繁殖与呼吸综合征称猪蓝耳病,是猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种高度接触性传染病疾病。本文主要对该病的主要特征、发病机理、了临床症状、病理变化、诊断要点以及必要的防控措施做一介绍,为有效防控猪蓝耳病,保障养猪业健康发展提供参考。     

猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是1987年发现的一种猪的接触性传染病。目前还没有有效的疫苗和治疗措施。2006年夏季以来,我国部分地区陆续发生猪高致病性PRRS疫情,其死亡率高并呈多发态势,为进一步了解该病,本文综述了PRRS病源分子生物学及其防制。