紫花苜蓿SANDITI愈伤组织诱导和分化的研究

利用紫花苜蓿SANDITI无菌苗的下胚轴、茎和叶3种外植体,研究了在附加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织的效果.结果表明:SANDIT最佳外植体为下胚轴,最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基为MS 2,4-D2.0mg/L 6-BA0.5mg/L.15d继代1次,或适当降低2,4-D浓度、提高6-BA或KT浓度,可以降低愈伤组织的褐化率.用源于下胚轴的愈伤组织在SH 2,4-D1.0mg/L 6-BA0.5mg/L CH2000mg/L培养基中进行悬浮培养,每5d继代1次,1个月可以建立良好的胚性悬浮系,并伴有体细胞胚胎的发生.愈伤组织在6-BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L、GA31.0mg/L、YE250mg/L、CH250mg/L的MS培养基上,可获得较高的分化率.     

外植体及激素对SANDITI紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响

以SANDITI紫花苜蓿无菌苗下胚轴、茎、叶3种不同外植体为试材，在附加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明，SANDIT最佳外植体为下胚轴，最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基为MS 2，4-D2．0mg／L 6-BA0．5mg／L。15d继代1次，或适当降低2，4-D浓度，提高6-BA或KT浓度，可以降低愈伤组织褐化率。愈伤组织在6-BA0．5mg／L，NAA0．1mg／L，GA31．0mg／L，YE250mg／L，CH250mg／L的MS培养基上，可获得较高的分化率。     

花生根瘤愈伤组织的诱导和分化

生长健壮的花生根瘤在CLS培养基上诱导出愈伤组织，形成愈伤组织的频率达到26．5－46．6％。瘤愈伤组织能多次继代，生长良好，在分化培养基D－57和D－59上已分化形成了根，其生根频率分别为56％和78％。显微观察表明，愈伤组织分化的具有正常根的解剖结构。     

高压静电场对草莓花药愈伤组织诱导和分化的影响

利用高压静电场在接种之前处理明晶和明磊２个草莓品种的花药，可有效提高花药愈伤组织的诱导率、分化率和分化芽丛数，增加易产生花药苗的颗粒致密型愈伤组织的比率。在该试验所设场强范围内，最佳场强为２４４．０ｋＶ／ｍ。     

不同品种紫花苜蓿愈伤组织及分化体系的建立

[目的]建立不同品种紫花苜蓿的愈伤组织及分化体系。[方法]以4个品种的无菌苗子叶为外植体,研究不同的激素浓度及基因型对紫花苜蓿胚性愈伤组织诱导及分化的影响。[结果]4个品种诱导形成的愈伤组织差别不大;最佳胚性愈伤组织诱导培养基为改良SH+2,4-D 2 mg/L+KT 0.05 mg/L;苜蓿王的分化率和出苗率表现较佳;最佳分化培养基为改良SH+KT 0.4 mg/L。[结论]该试验为今后筛选易分化的苜蓿品种和研究"转基因苜蓿疫苗"奠定了基础。     

不同激素配比对紫花苜蓿不同外植体愈伤组织诱导的影响

[目的]为紫花苜蓿外植体培养筛选最佳激素配比培养基。[方法]分别以盛世无菌苗的下胚轴、子叶、叶片、叶柄、根为外植体。在MS附加不同激素配比的培养基上诱导愈伤组织,研究不同处理对愈伤组织诱导率的影响。[结果]5种外植体均能诱导出愈伤组织,其中下胚轴的愈伤组织诱导率最高（达87．5％）,且愈伤组织长势良好,其次为子叶〉叶柄〉叶片〉根;不同外植体愈伤组织的形成时间为下胚轴〉子叶〉叶柄和根〉叶片;2,4-D诱导愈伤组织的效果优于NAA.[结论]2,4-D、NAA、6-BA和KT配合使用的培养基上形成的愈伤组织浅黄带绿,表面突起,松软,带簇状芽或单芽或形成胚状体.     

抗生素对番茄愈伤组织诱导和分化的影响

利用番茄子叶和下胚轴为材料,研究不同种类和浓度的抗生素对番茄愈伤组织诱导和生长的影响,及对农杆菌的抑菌效果。结果表明,在以卡那霉素作为抗性选择标记时,选择压力子叶为50mg·L-1,下胚轴为40mg·L-1;抑菌试验中,头孢霉素和羧苄青霉素的抑菌效果无明显差异,均能很好的抑制农杆菌生长,但头孢霉素对愈伤组织的不利影响大于羧苄青霉素。因此在番茄的遗传转化试验中,用羧苄青霉素的抑菌效果较好,建议使用浓度为350mg·L-1。     

抗生素对猕猴桃叶柄愈伤组织诱导及分化的影响

以中华猕猕桃79－2组培苗叶柄为实验材料，将其分别接在含不同浓度及类型的抗生素的培养基（MS＋6umol/L ZT 12umol/L IAA)^[1]中，于25℃，12h光照下培养，结果：（1）发现卡那霉素对猕猴桃叶柄愈伤组织诱导及分化的影响是敏感（大于或等25mg/L就天不定芽分化），四环素次之，链霉素影响第三；（2）抑制细菌细胞壁合成的抗生素（如青霉，头孢霉素等），当其浓度范围分别在0－500mg/L时，叶柄均能在短期内形成愈伤组织并分化出芽，随着浓度的增加，差别不显著。     

薄荷离体培养愈伤组织诱导与植株分化

从薄荷幼嫩茎尖诱导出愈组织,以B5为基本培养基,添加1.0mg/L NAA和0.4mg/L BA,愈伤诱导率达到90%以上。植株再生,B5培养基优于MS培养基和N6培养基。在B5培养基中添加0.1mg/L NAA和5.0mg/L BA,植株再生频率达5%。     

卡那霉素对紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响

[目的]研究紫花苜蓿叶片在诱导愈伤组织阶段、愈伤组织分化阶段对卡那霉素的敏感程度。[方法]确定卡那霉素对紫花苜蓿叶片愈伤组织形成的影响,并在形成愈伤组织的基础上,进一步确定卡那霉素对愈伤组织分化的影响。[结果]不同浓度的卡那霉素对紫花苜蓿叶片诱导愈伤与分化均有一定的抑制作用,而且随浓度升高,抑制作用增强;卡那霉素对愈伤组织分化阶段的敏感程度比诱导愈伤阶段高;分化阶段选择压力要控制在25 mg/L以下;延迟加入卡那霉素或在分化阶段降低卡那霉素浓度是对筛选转化苗的可取办法。[结论]该研究为利用农杆菌介导法转化紫花苜蓿奠定了基础。     

紫花苜蓿组织离体培养的形态建成及其调控

本文对紫花苜蓿 (Medicago Sativa L .)组织离体培养并附加植物生长调节物质进行调控。研究表明 :紫花苜蓿愈伤组织的形成可分为 3个阶段 :启动期、分裂期及形成期。同时阐述紫花苜蓿愈伤组织的分化及其调控过程以及植物器官的发生 (苗的发生和根的发生 )。     

鞘氨醇和水分胁迫对紫花苜蓿愈伤组织培养的影响

研究了低于0.1 mg/L的不同浓度鞘氨醇处理对苜蓿子叶愈伤组织诱导及在干旱胁迫中的影响。结果表明,在15 d内该浓度范围的鞘氨醇明显抑制苜蓿愈伤组织形成,但30 d时,经鞘氨醇处理的愈伤组织诱导率与对照的无明显差异。继代培养时,供试不同浓度的鞘氨醇均明显降低细胞抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化物酶(POD)活性,但0.06 mg/L的鞘氨醇处理显著提高了POD的活性,在处理后15 d POD活性比对照增加了约2倍;不同浓度的鞘氨醇均使过氧化氢酶(CAT)活性大幅度升高,0.02 mg/L处理后15 d CAT活性增加了约8倍。在不同浓度聚乙二醇(PEG)胁迫下,鞘氨醇处理后紫花苜蓿愈伤组织中的过氧化物酶活性有所升高。     

不同因素对魔芋愈伤组织诱导及增殖分化的影响

以清江花魔芋1号为试材,分析了不同因素对魔芋(A morphophallus)愈伤组织诱导与增殖分化的影响.结果表明,培养基中激素配比为MS+ 2.0 mg/L NAA+ 1.0 mg/L 6-BA或MS+2.0mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT或MS+ 2.0 mg/L 2,4-D+ 1.0 mg/L KT时,均能获得较高的愈伤组织诱导率;4种外植体愈伤组织诱导率之间存在差异显著,诱导率大小依次为鳞片＞球茎＞叶片＞根段;添加活性炭(AC)可明显增强愈伤组织诱导效果;在MS+ 2.0 mg/L TDZ +0.1 mg/L NAA培养基上愈伤组织分化形成不定芽的效果相对较好,分化率达96.15％,分化系数达9.52.     

紫花苜蓿两种再生体系的优化及比较

紫花苜蓿高频再生体系的建立有助于促进其遗传转化的研究。以陇东、阿尔冈金以及甘农4号紫花苜蓿为实验材料,比较了体细胞胚胎和丛生芽再生途径对于紫花苜蓿再生周期及频率的影响。并通过利用不同外植体、不同植物生长调节剂配比,以实现对这两种再生途径的进一步优化。实验结果表明：在三个苜蓿品种中,甘农4号的再生效果较好,下胚轴的再生频率较高,在愈伤诱导阶段添加2 mg/L 2,4-D、1 mg/L KT,胚状体诱导阶段添加1 mg/L KT、0.5 mg/L NAA可以达到较好的再生效果;在培养基中添加1 mg/L 6-BA、1 mg/L TDZ,则直接诱导丛生芽的效果最好;对比发现,丛生芽再生途径显示出较强的优越性,其再生时间仅10周,是紫花苜蓿再生体系建立的一种可选方式。     

大庆地区紫花苜蓿主要病害调查

对大庆地区主要紫花苜蓿种植基地病害发生情况进行了初步调查。此次调查共发现紫花苜蓿茎部和叶部病害12种,在生产中大面积发生且危害较重的主要病害有4种,分别为褐斑病、霜霉病、炭疽病、斑枯病和小光壳叶斑病,应立刻采取防控措施。苜蓿花叶病、锈病和轮纹病等病害危害虽较轻,但流行的潜在危险较大,也应及早预防。大庆胡吉吐莫、勇敢村地区的紫花苜蓿染病情况较为严重,林甸、银浪、星火牧场、肇源县等种植基地发病较轻。     

高寒地区紫花苜蓿对土壤养分的影响

[目的]探讨种植紫花苜蓿对高寒地区土壤养分的影响。[方法]通过田间试验,研究在高寒地区种植紫花苜蓿后其土壤中有机质、氮素、磷素、钾素等养分的变化情况。[结果]高寒地区种植紫花苜蓿可明显提高土壤中有机质、全氮和碱解氮含量,而土壤全磷含量的变化相对较弱。在青海高寒地区种植紫花苜蓿2年后,土壤耕作层中有机质、全氮、碱解氮的含量分别增加17.70%1、4.45%、13.53%,而全钾、速效磷和速效钾的含量则分别下降1.63%、9.03%和12.67%。[结论]在高寒地区种植紫花苜蓿可以改善土壤氮素水平,在种植过程中应增施磷钾肥以充分发挥其培肥地力、改良土壤、防治水土流失的作用。     

牡丹幼嫩花瓣愈伤组织诱导及芽的分化

以牡丹"凤丹"的花瓣为外植体,在优化植物生长调节剂的基础上,成功诱导出愈伤组织并实现植株再生,对愈伤组织诱导和分化的培养基类型、植物生长调节剂种类和浓度进行筛选,结果表明:不同的生长调节剂对愈伤组织诱导和分化的影响不同,愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg.L-1+6-BA 1.5mg.L-1+NAA 0.3mg.L-1,愈伤组织分化的最佳培养基为:MS+ZT 0.5mg.L-1+6-BA 2.0mg.L-1,分化率达到59.0%。     

紫花苜蓿茎尖离体再生体系的建立

以紫花苜蓿的成熟种子为外植体，以组培苗茎尖为材料建立了紫花苜蓿离体再生体系。研究结果显示：紫花苜蓿茎尖分化增殖的最佳培养基为MS＋6-BAl．5mg·L-1＋NAA0．1mg·L-1平均增殖系数为6．25；最适生根培养基为MS＋IBA0．05mg·L-1，平均侧根数为28．5条，生根率达到93．5％。该再生体系的建立为紫花苜蓿遗传转化后转基因植株的快速繁殖奠定了基础。