绵羊精液冷冻保存技术的研究进展

绵羊精液冷冻保存技术目前推广还比较困难,受胎率不高是其主要原因。目前,对于绵羊精液冷冻的研究主要集中在冷冻稀释液和冷冻程序两个方面,现就国内外有关精液冷冻稀释液和冷冻程序的研究进展做一概述,希望对今后有关此方面的研究具有一定的参考价值。     

绵羊冷冻精液研究进展

随着肉羊产业化、工厂化的发展,冷冻精液人工授精技术亟待应用于生产中.绵羊精液冷冻保存技术虽然得到了快速发展,但目前仍处在试验研究或小范围的应用阶段.因此,绵羊精液冷冻技术还需要深入、系统的研究.文章从绵羊精液冷冻保存稀释液中的添加剂、冷冻速率、冷冻-解冻对绵羊冷冻精液品质的影响,精液输精对受胎率的影响等方面进行了综述,为精液冷冻保存研究提供一定参考.     

必须改进绵羊精液冷冻的方法

由于绵羊冷冻精液的受胎率低,因此,公羊精液冷冻保存的方法还没有在实践中应用。为了解决羊的精液冷冻问题,必须寻找新的途径。据我们获得的试验资料,当用含有甘油的稀释液稀释精液时,冷冻程序对解冻精液     

影响绵羊精液冷冻保存效果的因素

随着畜牧养殖行业集约化、规模化的发展,为了提高生产效率,绵羊的人工授精技术得到了广泛的应用,因此对于优质种公羊的精液需求也日益增加。精液冷冻保存技术可以大大延长优质精液的保存时间并能维持良好的品质,提高优秀种公羊的利用率和配种效率。本文主要综述了精液稀释液的理化指标、冷冻-解冻方法、温度等因素对绵羊精液冷冻保存效果的影响,为绵羊的冷冻保存技术提供参考。     

水牛精液冷冻稀释液研究现状

牛的精液冷冻保存技术已较成熟,其商品化的精液冷冻稀释液也很多,而水牛的精液稀释液大多还是沿用奶牛和黄牛的,但是近年来关于水牛精液冷冻稀释液的研究也逐渐开展。文章对最新水牛的精液冷冻稀释液成分的研究现状进行了综述,期望在实际生产中对水牛精液的冷冻保存提供一些参考。     

猪精液冷冻保存影响因素研究进展

由于猪冻精在经济生产中具有重要意义,其关键技术——猪精液冷冻保存技术已成为研究的热点。本文对猪精液冷冻原理及冷冻损伤进行了说明,并对精液稀释前处理、稀释液及添加剂、冷冻保护剂、冷冻程序与解冻、冷冻剂型等方面的研究进展进行了综述。     

金华猪精液冷冻保存技术研究

本试验用0.5 mL细管作为冷冻载体对金华猪精液进行冷冻保存研究,比较3种冷冻稀释液及不同冷冻方法、解冻程序对金华猪精液冷冻的效果,以解冻后的精子活力、畸形率和质膜完整率为判定指标。结果表明:Ⅱ、Ⅲ号冷冻稀释液处理组解冻后精子的活力、畸形率和质膜完整性都明显地高于Ⅰ号冷冻稀释液(P0.05);Ⅱ号冷冻稀释液和Ⅲ号冷冻稀释液处理组之间没有明显差异(P0.05)。采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液冷冻保存精子,并在60℃,8 s条件下水浴解冻精子后,精子活力和质膜完整率最高分别为42.3%和50.3%,畸形率最低为17.7%。因此,采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液,在60℃,8 s条件下水浴解冻方法较为适合0.5 mL细管金华猪精液冷冻保存及解冻。     

影响猪冻精质量因素的研究进展

精液冷冻保存作为精液长期保存的最佳方法,具有保存时间长、生产成本低等优点,但由于猪精子较其他物种更容易受到低温的损伤,导致猪精液冷冻后精子活力低、受精率低,从而限制了冻精在养猪生产中的广泛使用。为优化猪精液冷冻-解冻方法,提高猪冻精质量,本文基于猪精液冷冻保存的损伤机理,从冷冻前处理、精液稀释液、冷冻和解冻程序等方面对影响猪精液冷冻质量的因素进行了详细阐述和总结。     

马精液冷冻保存研究进展

从马精液冷冻程序过程中不同采精方法、稀释液添加剂、冷冻保存承载工具等方面,概述了影响精液冷冻的因素,并介绍了解冻后精液的人工授精方法。     

绵羊精液冷冻保存技术的研究进展

随着现代科学技术的发展,中国畜牧业的规模化和集约化程度越来越高,绵羊的人工授精技术也进入了应用阶段,从中可以提高优秀种羊的利用率和提高种羊配种效益,降低饲养的费用,提高繁殖的质量,但由于受胎率低的原因,现在处于研究阶段或小范围内使用。文章分析介绍了绵羊精液稀释液中的成分、稀释方法、冷冻温度、冷冻-解冻方法对绵羊精液品质的影响等,对绵羊精液冷冻保存技术提供参考。     

冷冻方法对杜泊绵羊冷冻精液品质的影响

试验对绵羊精液分别采用液氮熏蒸冷冻法和冷冻仪冷冻法进行冷冻,通过测定精液解冻后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和谷草转氨酶活性及乳酸脱氢酶活性来比较不同的冷冻方法对解冻后精液品质的影响;通过测定精液稀释后、平衡后、冷冻仪法冷冻后的酶活性来比较谷草转氨酶与乳酸脱氢酶在不同阶段的释放量。结果表明,采用冷冻仪法冷冻后的精子活率和质膜完整率极显著高于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）;冷冻仪法冷冻后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）;精液稀释后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于精液冷冻后的活性（P<0.01）。表明采用冷冻仪冷冻法的绵羊精液品质好于液氮熏蒸冷冻法。精子中谷草转氨酶主要在平衡阶段释放,而乳酸脱氢酶主要在冷冻阶段释放。     

Pregnancy rates of mares inseminated with semen cooled for 18 hours and then frozen

The ability to ship cooled stallion sperm for subsequent freezing at a facility specializing in cryopreservation would be beneficial to the equine industry. Stallion sperm has been centrifuged, cooled to 5 degrees C for 12 h, and frozen without a detrimental effect on motility in a previous study; however, no fertility data were available. Experiment 1 compared the post-thaw motility of sperm cooled for 18 h at 15 or 5 degrees C at either 400 or 200 x 10(6) sperm/mL and then frozen. Storage temperature, sperm concentration, or the interaction of temperature and concentration had no effect on total (TM) and progressive motility (PM) after cooling. Post-thaw TM and PM were higher for control than (P < 0.05) for treated samples. There was no difference in post-thaw TM and PM due to temperature or concentration. Experiment 2 further evaluated procedures for cooling before freezing. Ejaculates were either cooled to 5 degrees C for 18 h and centrifuged, centrifuged at room temperature and then cooled to 5 degrees C for 18 h before freezing, or centrifuged and frozen immediately (control). There was no difference among treatments on post-thaw TM or PM. In Exp. 3, mares were inseminated with semen that had been extended in skim milk-egg yolk without glycerol, centrifuged, resuspended at 200 x 10(6) sperm/mL, cooled to 5 degrees C for 18 h, and then frozen or not cooled for 18 h before freezing (control). Pregnancy rates did not differ for mares receiving semen cooled and then frozen (21 of 30, 70%) or semen frozen directly without prior cooling (16 of 30, 53%). In summary, a procedure was developed for cooling stallion sperm for 18 h before freezing without a resultant decrease in fertility.     

不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂（SL）冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5% SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异（P<0.05）;添加18%蛋黄和1%～2% SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异（P>0.05）;添加18%蛋黄和1.0%～1.5% SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异（P>0.05）。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1～2%（g／L）。     

畜禽精液冷冻损伤保护研究进展

精液冷冻过程中液体冰晶化造成的机械损伤和氧化自由基造成的氧化损伤是畜禽冷冻精液产业化的主要限制因素。在冻精中添加外源抗氧化剂维持氧化还原平衡状态以此减轻氧化损伤、通过添加抗冻剂和控制冷冻速率来减少冰晶产生和减轻机械损伤成为畜禽冻精技术研究的重点。本文从不同种类抗氧化剂的抗氧化机理及其在冻精中的应用现状、添加抗冻剂和控制冷冻速率等方面减少机械损伤进行综述,以期为畜禽精液冷冻技术提供理论和技术参考。     

夏南横交种公牛生产性能研究

通过对8头采精夏南横交种公牛和18头本交夏南横交种公牛生产情况调查,夏南横交种公牛具有早熟性,无论是生产冻精还是本交,18月龄的种公牛均可投入生产,夏南横交种公牛生产性能良好,本交年均配种量可达264头,可制冻精细管20 175剂,配种数量、冻精产量、首配准胎率具有明显季节性,以春季最高,夏季最低。     

云南半细毛羊精子冷冻前后转录组表达差异分析

【目的】 本研究旨在对云南半细毛羊精子冷冻前后差异表达的基因与精子冷冻损伤的关系进行研究。【方法】 采用电刺激法采集3只云南半细毛羊精液,各分成2份,一份直接用于提取精子RNA,另一份经过冷冻保存7 d后再进行精子RNA提取。利用获得的精子RNA,采用单细胞转录组测序技术分别检测新鲜精子和冻融精子的mRNA转录组,构建mRNA转录组文库,用Hiseq2500测序仪进行测序,对测序结果做进一步过滤处理,然后对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG通路分析。【结果】 6份精液样本共产生623 399 754条原始测序序列,过滤处理后得到514 313 802条（82.50%）高质量的Clean reads。生物信息学分析结果表明,冷冻前后差异表达显著的基因共1 213个。其中,解冻后表达量下调的有1 208个,上调的有5个。通过GO功能注释和KEGG通路富集分析,差异表达基因分别归类于56个GO分类,参与40个信号通路。其中与精子功能密切相关的主要包括精子细胞过程、代谢过程、应激反应、生殖、质膜和氧化还原反应;精子冷冻前后差异表达基因参与的信号通路主要有炎症、细胞因子-细胞因子受体相互作用和细胞凋亡等通路。【结论】 云南半细毛羊精子的冷冻损伤可能与获得的差异表达基因参与的生物过程有关。此外,获得的差异表达基因也可作为分子标记物应用于绵羊冻精品质的评价。     

猪精液冷冻关键技术的研究与应用探析

猪精液冷冻技术具有类似于牛冷冻精液的巨大的优越性,因而受到全球养猪业的高度重视和广泛关注,国内外学者也为其进行了大量的研究工作,取得了一定成效。但鉴于猪冻精输配的母猪繁殖成绩不理想,导致猪冻精的使用仍没有得到大范围推广,但这并不妨碍人们继续进行猪冻精制作的深入研究与实践,猪精液冷冻工艺流程中任何一个环节所能取得的进展都可为今后猪冷冻精液标准化、规模化生产提供依据。文章简要介绍了猪精液冷冻技术操作工艺流程、关键技术环节研究与应用以及存在的主要问题和对未来的展望。     

Influence of the Freezing Technique (Nitrogen Liquid vs Ultrafreezer of −152°C) and Male-to-Male Variation Over the Semen Quality in Canarian Mastiff Breed Dogs

This study was carried out to assess the in vitro quality of canine semen frozen in an ultrafreezer at -152 degrees C and to evaluate the male-to-male variation of frozen semen in five male dogs of the Canarian Mastiff breed. Four ejaculates of each dog were processed individually (5% glycerol and 0.5% Equex) to reach a final concentration of 100 x 10(6) spermatozoa/ml. Then, two freezing techniques were tested to assess the seminal quality (sperm motility, live spermatozoa and abnormal sperm cell percentages) at 1, 30, 60, 120 and 360 days after freezing: (i) semen was frozen and stored in liquid nitrogen; (ii) semen was frozen and stored in the ultrafreezer at -152 degrees C. After freezing-thawing, both freezing protocols showed no significant differences in sperm motility and the percentages of live and abnormal spermatozoa. On the other hand, the microscopic characteristics of spermatozoa in fresh semen were practically similar among males; however, after the semen processing and freezing, significant differences were observed (p < 0.05) among males, especially as regards sperm motility. This inter-individual variability was detected in both freezing protocols, showing that the male-to-male variation in the seminal quality post-freezing was independent of the freezing technique used. The in vitro results obtained in the Canarian Mastiff breed confirmed that the use of ultra-freezers at -152 degrees C is a potential alternative to liquid nitrogen for storing canine semen for long periods of time.     

牛精子冷冻损伤及其改善方法

牛精液冷冻与人工授精技术相结合，在牛品种改良、保护优良种质资源中发挥着重要作用。尽管冷冻后部分牛精子活力高达60%以上，但是冷冻后精子受损现象却普遍存在，尤其是受精能力与鲜精相比显著降低。作者详细介绍了冷冻-解冻过程对牛精子造成的主要损伤，包括精子的形态完整性、活力及遗传物质的改变等；阐述了冷冻造成精子损伤的主要原因，即细胞内冰晶形成和氧化应激反应及其产生的可能机制；并且对目前常用的提高冷冻精子质量的方法，如添加冷冻保护剂、优化冷冻程序以及添加抗氧化剂等进行了详细地综述；提出了在冷冻精液研究方面值得探索的问题，以期为家畜精液冷冻保存技术的进一步优化提供理论依据。