苦马豆素人工抗原接种和田羊的免疫学研究

为了探索苦马豆素(SW)人工抗原SW-BSA免疫接种后对和田羊的保护作用,试验通过间接血凝试验(IHA)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)分析SW-BSA免疫和田羊后血清抗体效价的变化,并检测试验羊血清E-玫瑰花环率的变化,以及血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-甘露糖苷酶(AMA)、肌酐(CRE)活性的变化,同时检测试验组尿液和血液中有无SW。结果表明:SW-BSA可以诱导和田羊产生高效价的抗SW抗体,而且这种高效价保持的时间较长,机体E-玫瑰花环率显著上升;试验组与对照组比较,血清中AST、ALT、AKP、LDH、AMA、CRE水平均差异不显著(P0.05),尿液和血液中均未检查出SW。说明合成的人工抗原SW-BSA具有较好的免疫原性和安全性。     

苦马豆素人工抗原免疫对饲喂小花棘豆家兔血清免疫和生化指标的影响

用小花棘豆饲喂经苦马豆素人工抗原免疫接种过的家兔,通过检测家兔的血清学和免疫学指标,探讨苦马豆素人工抗原免疫接种对动物机体的保护作用.将30只家兔随机分为免疫对照组、免疫攻毒组、攻毒对照组和正常对照组,免疫组家兔接种苦马豆素人工抗原,攻毒组家兔按干重拌料饲喂10 g/(kg·d)小花棘豆草粉,检测血清抗体效价、相关生化指标和苦马豆素含量的变化以及E玫瑰花环率的变化.结果表明,免疫组家兔均有抗苦马豆素抗体产生,免疫攻毒组家兔较攻毒对照组家兔血清酶活性异常变化延缓,苦马豆素含量降低,E-玫瑰花环率升高.说明苦马豆素人工抗原能够有效预防小花棘豆对家兔造成的损伤,有一定的利用前景.     

SW-OVA接种家兔血清抗体变化的研究

试验将苦马豆素(SW)与鸡卵白蛋白(OVA)合成人工抗原SW-OVA后免疫家兔,通过酶联免疫吸附法(EUSA)检测抗体变化规律,为免疫学检测和治疗家畜疯草中毒奠定基础.将8只家兔随机分成对照组(4只)、试验组(4只),试验组家兔每2周免疫1次,共免疫4次,第1次免疫后第21天开始采血,以后每周采血1次,每次采血1 mL,分离血清,ELISA检测抗体效价.结果发现:SW-OVA能够诱导机体产生很高效价的SW抗体,且高效价的抗体保持时间长,在免疫学检测和治疗家畜疯草中毒方面具有广阔的应用前景.     

SW-OVA接种家兔血清抗体变化的研究

试验将苦马豆素(SW)与鸡卵白蛋白(OVA)合成人工抗原Sw-OVA后免疫家兔,通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体变化规律,为免疫学检测和治疗家畜疯草中毒奠定基础.将8只家兔随机分成对照组(4只)、试验组(4只),试验组家兔每2周免疫1次,共免疫4次,第1次免疫后第21天开始采血,以后每周采血1次,每次采血1 mL,分离血清,ELISA检测抗体效价.结果发现:sw-OVA能够诱导机体产生很高效价的SW抗体,且高效价的抗体保持时间长,在免疫学检测和治疗家畜疯草中毒方面具有广阔的应用前景.     

疥螨病对兔血细胞及免疫功能的影响

应用血细胞分析、E-玫瑰花环试验、红细胞C3b受体花环试验和红细胞免疫复合物花环试验,比较了疥螨病兔和健康家兔在血细胞和免疫功能上的差异。结果表明：疥螨病兔的血细胞指标、E-玫瑰花环结合率与健康家兔无显著差异（P〉0.05）,红细胞C3b受体花环结合率显著低于健康家兔（P〈0.05）,红细胞免疫复合物花环结合率显著高于健康家兔（P〈0.05）。疥螨病兔血细胞指标和T淋巴细胞功能无明显变化,而红细胞免疫功能明显下降。     

苦马豆素抗血清治疗家兔小花棘豆中毒

通过检测苦马豆素（swainsonine,SW）抗血清治疗小花棘豆中毒家兔血清免疫和生化指标变化,评价SW抗血清对家兔小花棘豆中毒的治疗效果。将18只家兔随机分为对照组（6只）、攻毒组（6只）和攻毒治疗组（6只）,攻毒试验兔按干重拌料饲喂10g／（kg·d）小花棘豆草粉,攻毒组试验兔出现死亡时（第70天）停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW抗血清,每只兔每天0．5mL,连续注射4d。以攻毒试验开始进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW含量显著高于对照家兔（P〈0．05）;第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔（P〈0．05）,血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔（P〈0．05）;第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU含量显著高于对照家兔（P〈0．05）。攻毒治疗组家免注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性及BuN、CRE、GLU、SW含量较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E～玫瑰花环率显著上升。结果表明,SW抗血清可有效治疗家兔小花棘豆中毒。     

“热毒效”对鸡新城疫免疫效果影响的研究

75只刚出壳的健康雏鸡，当其体内的鸡新城疫抗体为零时，随机分为3组，每组25只，并做如下处理：第一组免疫新城疫疫苗，同时饲喂中药热毒效4天，第二组免疫新城疫疫苗，第三组不做任何处理，各组于免疫后的7、14、21、28、35天，每组随机取5只鸡。通过HI实验、E-玫瑰花环实验，检测抗体水平和雏鸡T淋巴细胞的免疫功能；并将鸡宰杀，完整摘取法氏囊和脾称重，测定法氏囊和脾的系数。实验结果表明，第一组新城疫抗体产生迅速且持续时间长，玫瑰花环形成率明显高于其他两组，说明细胞免疫明显增强。     

"热毒效"对鸡新城疫免疫效果影响的研究

75只刚出壳的健康雏鸡,当其体内的鸡新城疫抗体为零时,随机分为3组,每组25只,并做如下处理:第一组免疫新城疫疫苗,同时饲喂中药热毒效4天,第二组免疫新城疫疫苗,第三组不做任何处理,各组于免疫后的7、14、21、28、35天,每组随机取5只鸡。通过HI实验、E-玫瑰花环实验,检测抗体水平和雏鸡T淋巴细胞的免疫功能;并将鸡宰杀,完整摘取法氏囊和脾称重,测定法氏囊和脾的系数。实验结果表明,第一组新城疫抗体产生迅速且持续时间长,玫瑰花环形成率明显高于其他两组,说明细胞免疫明显增强。     

肌肉注射不同剂量亚硒酸钠对健康家兔细胞免疫水平的影响

本试验通过E玫瑰花环方法对肌肉注射不同剂量亚硒酸钠的健康家兔进行检测,分析了亚硒酸钠对机体细胞免疫水平的影响。试验结果表明,注射亚硒酸钠后家兔的E玫瑰花环形成率均高于对照组,初步说明亚硒酸钠对健康家兔的细胞免疫水平具有一定增强作用。     

酵母铬对热应激牛免疫功能的影响

采用MTT法、ELASA、玫瑰花环试验法,对热应激奶牛在接受不同剂量酵母铬后免疫功能指标的变化,探讨酵母铬对热应激奶牛免疫功能的影响规律。结果表明:(1)试验Ⅲ组三类免疫球蛋白水平比其他组高,试验Ⅲ组夏季IgM含量与其他组相比差异显著(P<0.05),IgG,IgA差异均不显著(P>0.05)。(2)体细胞数不同组间差异均不显著(P>0.05)。(3)试验Ⅲ组奶牛淋巴细胞刺激指数上升,显著高于其他组(P<0.05),试验Ⅰ组与对照组E-玫瑰花环形成率均低于试验Ⅱ与Ⅲ组,差异均显著(P<0.05)。说明使用酵母铬奶牛在夏季的机体免疫功能较强,能较好地抵抗热应激的危害。     

苦马豆素人工抗原免疫山羊的安全性试验

试验通过分析疯草毒素人工抗原(疫苗)SW BSA免疫山羊时对机体肝功、肾功的影响,进行安全性评价。将30只羊随机分为对照组(6只)、免疫A组(12只)、免疫B组(12只),免疫组依次进行基础免疫、首免、加强免疫,每次免疫前进行采血,分析血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、尿素氮(BUN)、α苷露糖苷酶(AMA)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化,同时检测尿液中有无SW。结果表明,免疫组与对照组的血清GPT、GOT、BUN、AMA、AKP、LDH差异均不显著(P>0.05),尿液中未检查出SW。     

兔病毒性出血症蜂胶佐剂组织灭活苗的免疫效果

用ＰＭＶＲＶＨＤ和ＶＲＶＨＤ分别免疫家兔，用Ｅ－玫瑰花环形成试验测定细胞免疫水平（Ｔｃ），用微量血凝抑制试验（ＨＩ）进行体液免疫水平测定。并于免疫后期（第１６５ｄ和第１８７ｄ），用ＲＶＨＤ强毒对不同家兔分别进行攻击试验。结果发现：ＰＭＶＲＶＨＤ组（Ａ组）家兔Ｅ－玫瑰花环形成率显著高于ＶＲＶＨＤ组（Ｂ组）（Ｐ＜０．０１）；Ａ组家兔血清ＨＩ值极显著地高于Ｂ组（Ｐ＜０．０１）。同时，试验组家兔的细胞免疫先于体液免疫出现。在第１８７ｄ的攻击试验中，Ａ组家兔全部健活，Ｂ组家兔死亡２只，其余５只则有不同程度的发热表现。结合细胞免疫和体液免疫的测定结果，认为ＰＭＶＲＶＨＤ对家兔的免疫效果比ＶＲＶＨＤ更好。     

Immunomodulatory effects of C3bgp on the antibody response to hemocyanin in outbred rabbits and the F1 generation of breeding with siblings

Dynamics and quantitative analyses of monospecific antibody during the primary and secondary humoral responses were determined in outbred rabbits and in the F1 generation of breeding with siblings. The antibody response in rabbits immunized with Keyhole Limpet Hemocyanin (KLH) was studied during a 4-month immunization period. ELISA determination of anti-KLH Ig and anti-KLH IgG alone, in preimmune and immune rabbit sera, was performed. Antibody response in both groups of rabbits was similar when assessed by anti-rabbit Ig but displayed differences when assessed by anti-rabbit IgG. A statistically significant increase in anti-KLH IgG was observed in the F1 inbred rabbits compared to the control group after primary immunization from days 14 to 35. Immunomodulation also elicited differences in the antibody response in the two groups of animals. C3-binding glycoprotein isolated from Cuscuta europea (C3bgp), applied simultaneously with antigen (KLH), produced a much stronger secondary immune response than the antigen alone, in both experimental groups. The enhancement of anti-KLH Ig in C3bgp-treated inbred rabbits was statistically significant in comparison with nontreated inbred rabbits. A significant increase in anti-KLH IgG was observed only for the inbred group after treatment with C3bgp. The results demonstrate that the F1 generation of breeding with sibling leads to significant differences in antibody responses to immunization compared with outbred rabbits, as well as to immunomodulation with C3bgp.     

旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡对小鼠免疫保护作用

本试验通过差速超速离心法获得旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡(Trichinella spiralis muscle larvae extracellular vesicles,Ts-ML-EVs),经透射电镜观察、纳米颗粒追踪分析、流式细胞术和Western blot鉴定。选择6～8周龄的健康雌性BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只。试验设计为PBS对照组(PBS组)、佐剂对照组(PBS+佐剂组)、旋毛虫肌幼虫期排泄分泌产物免疫组(Ts-ML-ES+佐剂组)以及旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡免疫组(Ts-ML-EVs+佐剂组),分别取相应抗原与佐剂等体积混合采用多点皮下注射方式免疫小鼠。首免后第2,4周各加强免疫1次,剂量不变。三免后2周,每只小鼠灌胃300条旋毛虫肌幼虫,灌胃后6 d每组取2只剖杀,统计旋毛虫成虫减虫结果;攻虫35 d后所有小鼠全部处死,计算肌幼虫减虫率。每次免疫前、攻虫前以及处死前眼眶采血收集血清并保存,统一进行ELISA分析。结果显示：成功获得Ts-ML-EVs,随着免疫次数增加,小鼠血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgA和IgE抗体水平均显著上升,在三免后2周达到...     

牦牛ETEC灭活疫苗的研制及免疫效力试验

制备了耗牛ETEC铝胶灭活苗、油佐剂苗和蜂胶灭活苗。分别使用3种佐剂灭活苗进行对比试验。经抗体监测表明在免疫后7天，蜂胶苗产生的抗体效价最高（2^7），随着时间的推移，油苗抗体儿价最高（2^9-10)，于免疫后29日，使用ETEC进行攻毒，免疫兔全部保护，对照兔全部死亡。证明牦牛ETEC3种佐剂灭活疫苗均能有效保护家兔免受ETEC攻击。     

缓释复方免疫增强剂对4种鸡传染病疫苗免疫增强效果研究

为了验证缓释复方免疫增强剂对鸡减蛋综合征(EDS-76)、鸡新城疫(ND)、鸡传染性支气管炎(IB)和鸡传染性法氏囊病(IBD)4种疫苗的免疫增强作用,试验选用30日龄海兰褐蛋鸡80只,随机分为4组,每组又均分为试验组和对照组,分别注射EDS-76、ND、ND-IB和IBD疫苗,同时对试验组雏鸡投服缓释复方免疫增强剂1粒/只,在免疫前、免疫后12、27 d采血测定抗体效价(或阳性率)、T淋巴细胞花环形成率和ANAE阳性率。结果表明,试验组鸡EDS-76、ND、IB抗体效价和IBD抗体阳性率、T淋巴细胞花环形成率和ANAE阳性率均显著或极显著高于对照组。以上结果说明,缓释复方免疫增强剂可以提高EDS-76、ND、ND-IB和IBD4种疫苗抗体效价(或阳性率),增强鸡体液免疫功能和细胞免疫功能。     

SW-BSA人工抗原疫苗对家兔的免疫效果

SW-BSA人工合成抗原与白油制成疫苗免疫家兔,饲喂甘肃棘豆后制备免疫血清,分别进行间接ELISA试验、SW浓度的测定、血清生化指标测定试验,并进行组织病理学检查。结果表明,免疫攻毒组家兔的临床中毒症状比攻毒对照组出现时间延迟30d,血清中SW浓度比攻毒对照组延缓21d达到较高水平,血清中AST、ALP、LDH、BUN活性比攻毒对照组延缓31d达到较高值,ALT的活性与攻毒对照组相比没有显著差异,血清α-甘露糖甙酶活性比攻毒对照组延缓28d下降到较低值。攻毒组家兔各器官组织的病理变化主要是以细胞呈现急性中毒性缺血缺氧和空泡变性为特点。结论得出SW-BSA人工合成抗原疫苗对攻毒家兔有一定的保护作用。     

猪流感病毒多表位抗原的小鼠黏膜免疫试验

为探讨经黏膜途径免疫接种猪流感病毒(SIV)多肽疫苗的可行性,选择STV主要结构蛋白血凝素(HA)的T、B抗原表位,将多个表位片段串联,定向克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,对串联表达的重组猪流感病毒蛋白SIV-ep1、SW-ep2、SIV-el2进行了小鼠免疫试验。重组蛋白以包涵体形式表达,经洗涤定量后,采用灌胃途径免疫6周龄KM小鼠,检测免疫小鼠抗体及细胞免疫水平。结果发现三免后各免疫组血清IgG抗体与PBS对照组差异极显著(P<0.01);黏膜分泌型IgA抗体,所有免疫蛋白组与PBS组差异均极显著(P<0.01);细胞免疫检测,所有免疫组小鼠外周血T淋巴细胞增殖明显;猪流感病毒血凝抗体检测,SIV-ep1免疫组、SIV-ep2免疫组、SIV-ep1与LT蛋白免疫组抗SIVH1N1亚型HI效价达1:1024,SIV-el2蛋白免疫组HI效价达1:512。结果表明,猪流感病毒重组多表位抗原灌胃免疫小鼠,能产生理想的黏膜免疫抗体和血清抗体。     

疑核内有关神经元在机体细胞免疫调节中的作用

研究了疑核内胆碱能神经元、去甲肾上腺素能神经元、脑啡肽能神经元对机体细胞免疫机能的影响 ,并对疑核内 3种神经元之间的相互关系进行了探讨。实验用麻醉家兔 ,分 6组进行 ,分别在疑核处通过微量注射器注入氯化乙酰胆碱 ( Ach)、密胆碱 -3( HC-3)、酒石酸去甲肾上腺素 ( NA)、6-羟基多巴胺 ( 6-OHDA)、盐酸吗啡 ( MP)、盐酸纳络酮 ( NX) ,并分别于注射前和注射后不同时间取外周血 ,测定 T细胞百分率及PHA诱导的有丝分裂原反应。结果 :Ach组上述免疫指标比注射前明显升高 ;HC-3组上述免疫指标比注射前明显降低 ;NA组上述免疫指标在注射后 30、60 min时明显低于注射前 ;6-OHDA组上述免疫指标在注射后 1 0～ 1 2 0 min时明显升高 ;MP组上述免疫指标在注射后 60、1 2 0 min时明显降低 ;NX组上述免疫指标注射前、后无明显变化。提示 :疑核增强机体细胞免疫的作用可能是通过胆碱能神经元实现的 ;疑核内的去甲肾上腺素能神经元与胆碱能神经元的作用相拮抗 ;而疑核内的脑啡肽能神经元可能对前两者的活动起一种调整作用