自噬调节剂对感染日本脑炎病毒小鼠脑部细胞凋亡的影响

旨在研究自噬调控药物对感染日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)小鼠脑部细胞凋亡的影响,本试验建立自噬调控药物处理的感染日本脑炎病毒小鼠的动物模型,其中,雷帕霉素为自噬诱导剂,渥漫青霉素及氯喹为自噬抑制剂.实验动物分成8组:DMEM对照组(Control);JEV感染组(JEV)...     

不同途径感染猪血球凝集性脑脊髓炎病毒的比较病理学

用传代鼠血球凝集性脑脊髓炎病毒接种液，经不同途径感染12头5日龄仔猪作比较病理学研究。结果表明，经脑内注射、前后肢肌肉注射、口服、口服兼滴鼻等途径接种的仔猪全部感染发病，并在接种后36～98h死亡。发病猪出现脑、脊髓的小静脉和毛细管充血、出血、水肿，神经原水肿、急性肿胀、急性液化及中央染色质溶解，胶质细胞轻微增生等非化脓性脑脊髓炎特征。口服兼滴鼻接种猪脑脊髓出血、脑水肿最明显，神经原变质也最重。脑内接种猪脑膜的血管周围出现明显的免疫细胞反应。     

育成期不同饲养方式对水貂配种行为和配种进度的影响

观察并研究了水貂育成期不同饲养方式,即断奶后一直双层单笼单养和单层单笼多养(3~4只)对水貂配种行为变化和配种进度的影响。结果表明:育成期单笼多养的水貂的初配率和复配率均显著高于单笼单养的水貂(P<0.05)。说明水貂饲养环境的改变直接影响水貂的繁殖情况,单笼多养饲养方式代替传统的单笼单养饲养方式,显著提高水貂的配种进度及水貂的配种率,水貂育成期单笼多养饲养方式具有较大的推广应用前景。     

免疫鸡群感染新城疫强毒后的排毒规律

将经过２次新城疫（ＮＤ）基础免疫的ＳＰＦ鸡,随机分成５组,每组８只,在６０日龄时分别用Ｆ４８Ｅ８、Ｔｅｘａｓ、Ｈｅｒｔ３３ＮＤ强毒和Ｌａｓｏｔａ弱毒经口腔接种０．２５ｍＬ／只,１２ｈ后采取泄殖腔棉拭,利用ＮＤ强毒快速诊断试剂盒进行排毒的动态监测,并在攻毒前期、中期、后期测定各试验组ＳＰＦ鸡的ＨＩ效价。试验第３天开始排毒,２０ｄ结束,其间在６～７ｄ和１１～１３ｄ出现２次排毒高峰。ＨＩ抗体在初期先是降低１个滴度,后期开始升高而且离散度不断增大。     

H5N1禽流感病毒感染小鼠后内参基因的筛选

本研究旨在评定H5N1禽流感病毒(H5N1 avian influenza virus,H5N1 AIV)感染小鼠后,脾脏组织中6个候选内参基因酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein,Ywhaz)、次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase 1,Hprt1)、琥珀酸脱氢酶A亚基(succinate dehydrogenase flavoprotein subunit,Sdha)、β-肌动蛋白(β-actin,Actb)、肽基脯氨酰异构酶A(peptidyl prolyl isomerase A,Ppia)和18S核糖体RNA(18S ribosomal RNA,18S rRNA)的稳定性。通过H5N1 AIV强毒株A/DK/GD/378/08感染小鼠,采用Real-time PCR方法分别于12、24、48、72、96、120和144 h检测感染组与对照组中6个候选内参基因的表达水平,然后用Genorm软件对内参的稳定性进行评价。结果表明,正常小鼠脾脏组织中6个内参基因稳定度由高到低分别为Ywhaz/Hprt、Sdha、Actb、Ppia、18S rRNA;H5N1 AIV感染的小鼠脾脏组织中6个内参基因稳定度由高到低分别为Ppia/Sdha、18S rRNA、Hprt、Ywhaz、Actb;综合评价正常和H5N1 AIV感染后小鼠脾脏组织中6个内参基因的表达稳定度由高到低分别为Sdha/Hprt1、Ywhaz、Ppia、Actb、18S rRNA。因此,小鼠脾脏组织中Ppia和Sdha是研究H5N1 AIV在机体中复制时最理想的2个内参基因;Sdha和Hprt1则是在研究H5N1 AIV与机体相互作用时最理想的2个内参基因。     

3个不同基因型新城疫病毒间的抗原同源性比较

分别以鸡新城疫病毒（NDV）基因Ⅱ型弱毒疫苗株LaSota、基因Ⅶ型鸡源野毒株Y98F9和基因Ⅵ型鸽源野毒株PB9601为灭活疫苗，制备相应的抗血清。将3株病毒分别与相应的抗血清做交叉血凝抑制试验（HI）和在细胞培养上做交叉病毒中和试验（VI）．以此比较3个基因型病毒间的抗原同源性关系。在交叉HI中，LaSota株与基因Ⅶ型的Y98F9株间的同源性为90．0％，而基因Ⅵ型的鸽源PB9601株与Y98F9株间的抗原同源性仅为74．2％，与LaSota株间的抗原同源性更低至65．2％。在交叉VI中，也表现出非常类似的同源性关系，LaSota株与Y98F9株间的同源性为90．1％，而鸽源PB9601株与Y98F9株间的同源性也仅为75％，与LaSota的同源性进一步低至65．8％。     

乙型脑炎病毒感染小鼠原代神经元细胞的miRNA表达谱差异分析

研究乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）感染后小鼠原代神经元细胞miRNA的表达谱差异,初步探讨JEV与宿主在miRNA水平的相互作用。分别提取JEV感染48 h后的小鼠原代神经元细胞和未染毒组细胞,高通量测序分析miRNA的表达谱并进行差异分析,选取显著差异表达的miRNA进行实时定量PCR验证。结果筛选出26个差异表达显著的miRNA,其中,18个表达上调,8个表达下调。小鼠原代脑神经元细胞中mmu-miR-21a-3p、mmu-miR-223-5p、mmu-miR-147-3p、mmu-miR-155-5p和mmu-miR-146a-5p的表达促进JEV-E基因在神经元细胞中表达,而mmu-miR-301a的表达抑制JEV-E基因的表达。神经元细胞中miRNA的表达影响JEV的复制,为进一步研究JEV致神经功能异常机制提供研究方向和理论支持。     

Analysis of the miRNA Expression Profiles in the Primary Neurons of Mice Infected with Japanese Encephalitis Virus

The interaction between JEV and the host at the miRNAs level was preliminarily explored by studying the miRNAs expression profiles of primary neurons in mice infected with JEV. Total RNA of JEV-infected and uninfected primary neurons of the suckling mice was extracted individually by Trizol and then analyzed miRNA expression profiles by high-throughput sequencing analysis. Significantly differentially expressed miRNAs were selected for verification by real-time quantitative PCR. Through bioinformatics analysis, 26 miRNAs with significant expression differences were screened out, among which 18 miRNAs were up-regulated and 8 miRNAs were down-regulated. The results of quantitative real-time PCR of the JEV-E gene indicated that the expressions of mir-21a-3p mir-223-5p mir-147-3p mir-155-5p and mir-146a-5p could promote the expression of JEV-E gene in neurons, while the expression of mir-301a was just on the contrast. The expression of miRNAs in primary neurons could affect the replication of JEV. This study provided the theoretical basis and direction for further studies on the regulatory function of miRNAs in the mechanism of neural dysfunction induced by JEV.     

不同中药方剂对弓形虫感染小鼠脾细胞分泌 IL-2活性的影响

通过观察不同方剂对小鼠感染弓形虫后脾 IL-2含量的影响,确定对弓形虫病治疗效果最佳的复方中药。将昆明系小鼠随机分为中药复方方剂组（A、B、C 组）、复方 SMZ 组（D 组）、模型组（E 组）和对照组（F 组）。用 RH 株弓形虫速殖子腹腔感染小鼠,2 h 后灌胃给药,其中 A、B、C 3个组每只每次0．5 mL 自拟弓形虫汤剂;D 组每只每次0．5 mL 复方 SMZ 混悬液300 mg／（kg· d－1）,疗程15 d。采用双抗夹心ELISA 法,观察不同方剂对小鼠脾细胞 IL-2含量的影响,并对照不同方剂之间的差异,采用 F 检验和 q 检验进行统计分析。结果表明,A、B、C 组和 D 组 IL-2活性水平均随着时间延长而逐渐升高;A、C、D 组与 F组有显著性差异;B 组 IL-2水平活性保持了较高值,与 E 组差异极显著。说明3种自拟中药复方方剂均能显著提高弓形虫感染小鼠脾细胞 IL-2的含量,增强小鼠免疫功能,其中复方二提高最显著,对 IL-2活性影响最大。     

仔猪感染猪繁殖与呼吸综合征病毒的病毒定位研究

以猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduction and respiratory syndrome virus,PRRSV)天津分离株(PRRSV-SJ株)滴鼻感染10日龄～15日龄PRRSV阴性的健康仔猪,采用免疫组织化学法检测PRRSV在仔猪体内靶器官的动态分布,初步探讨PRRSV感染后在仔猪体内的病毒分布规律.结果表明,间接免疫组织化学法发现PRRSV-SJ株感染仔猪后1 d～28 d,均可在仔猪肺、淋巴结、扁桃体、气管、脾、肾等组织中检出PRRSV.感染后1 d～7 d,肺门淋巴结和扁桃体的病毒阳性细胞数量最多,阳性反应强.感染后14 d～28 d,脾脏的病毒阳性细胞数量多,阳性反应强.感染后1d,PRRSV就可在气管、肺门淋巴结和扁桃体检出.     

山豆根多糖对感染PRRSV小鼠脾脏细胞因子水平的影响

探讨山豆根多糖对PRRSV感染小鼠脾淋巴细胞分泌细胞因子水平的影响。将70只昆明种小鼠随机分为7组(A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组),每组10只,雌雄各半,依据前期已经建立氧化应激模型的感染条件,D组、E组、F组、G组小鼠于试验第1、2、3天分别采用口服、滴鼻和腹腔注射3种途径联合感染PRRSV病毒原液1.0mL/只,A组、B组、C组给予生理盐水1.0mL/只。第4、5、6天,A、D组小鼠分别腹腔注射生理盐水,0.2mL/10g。B组小鼠腹腔注射5.0mg/kg的脂多糖(LPS)溶液,C组、E组、F组、G组小鼠分别腹腔注射不同剂量的山豆根多糖(200、50、100、200mg/kg)。供试小鼠均于第14天处死,并取其脾脏制备匀浆。采用ELISA检测脾匀浆中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和MCP-1等细胞因子的水平。结果显示,PRRSV感染小鼠后能升高小鼠脾脏匀浆内TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和MCP-1水平,50mg/kg~100mg/kg剂量的山豆根多糖能降低上述细胞因子的水平。结果表明,山豆根多糖能有效降低PRRSV感染小鼠脾脏细胞因子的水平。     

不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫活性影响的研究

试验旨在观察不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫活性的影响。用环磷酰胺作免疫抑制剂建立免疫功能低下动物模型,测定了小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和免疫器官脏器指数。结果表明,多糖组分A2和中间纯度的多糖B2能够显著提高正常小鼠和免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率、提高胸腺指数和脾脏指数,能够使环磷酰胺造成的免疫抑制逆转至正常水平,因此,具有合适分子质量的多糖组分和合适纯度的多糖能显著增强小鼠的免疫功能。     

鸡贫血病毒感染鸡细胞凋亡研究

用TUNEL法检测了1 日龄SPF雏鸡感染鸡贫血病毒(CAV)后胸腺和骨髓细胞的凋亡情况。结果,接种CAV 后6、10、20 d,骨髓细胞的凋亡率分别达51% 、52% 、57% ;接种后6 d,胸腺细胞凋亡率为53% ,比对照鸡胸腺和骨髓细胞的凋亡率明显升高( P< 0.01)。用流式细胞仪对胸腺细胞悬液所作的细胞凋亡分析结果与TUNEL法检测结果一致。     

我国马流感病毒不同分离株实验感染SPF鸡的研究

本试验分别用马流感病毒吉林株、青海株和北京株人工感染ＳＰＦ鸡,通过ＨＩ价测定、临床观察,病毒分离以及病理观察,证明马流感病毒可在ＳＰＦ鸡体内激发短期的免疫应答,在各实质器官引起轻微的损害,但无明显临床症状,病毒分离阴性。     

兔病毒性出血症灭活疫苗的研究

以三株本室分离的病毒作为种毒，研制了免病毒性出血症油乳剂灭活疫苗和氢氧化铝灭活疫苗。所研制的两种疫苗无菌及理化检验均合格。将疫苗大剂量接种实验兔无任何不良反应，两种疫苗免疫实验兔后用强毒攻击，均获得保护，免疫持续期至少5个月。     

不同饲养方式对羊毛丛匀度影响的研究

对自然放牧和均衡舍饲两种饲养方式下细毛羊体侧部毛丛匀度进行了分析测定,结果显示,全年自然放牧的甘肃高山细毛羊体侧部毛丛匀度较差,各部位细度差异极显著（P〈0.01）,其中,尖部最粗,与中部和根部差异极显著（P〈0.01）,中部与根部差异显著（P〈0.05）;全年均衡舍饲的毛肉兼用细毛羊体侧部毛丛匀度较好,各部位差异不显著（P〉0.05）。由此得出,羊毛生长期营养供给的均衡性是影响毛丛匀度的重要因素。     

不同培育方式对西门塔尔犊牛生长发育性能的影响

【目的】探讨不同犊牛培育方式对犊牛生长发育性能的影响。【方法】根据2018—2021年的犊牛培育方法及生长发育性能,以西门塔尔牛为研究对象比较四组的培育效果,试验Ⅰ组采用带犊母牛白天放牧,其余时间随母哺乳;试验Ⅱ组采用白天放牧+早补饲,其余时间随母哺乳;试验Ⅲ组(传统组)采用带犊母牛全天舍饲,犊牛全天自由哺乳;试验Ⅳ组采用母牛舍饲,定时自然哺乳方式(按月龄限制哺乳次数)和犊牛岛内补饲。补饲组采用犊牛7日龄开始补饲,然后比较各组间0—4月龄(4月龄断奶)、4—6月龄犊牛的生长发育性能。【结果】结果表明：西门塔尔牛公、母犊初生重分别为45 kg和41 kg,四种培育方式对犊牛初生重影响不大;而试验Ⅳ组采用母牛舍饲,定时哺乳方式提高犊牛日增重明显,生长发育性能表现最好,料重比最低,4月龄断奶和6月龄体重都最高,公、母犊体重分别达217.19±52.27 kg和191.50±14.62 kg、296.11±26.51 kg和259.11±24.92 kg。3—4月龄采取过渡性断奶,定时哺乳和犊牛岛内补饲可提高犊牛成活率,减少断奶应激,促进犊牛生长发育,提高了种牛的供种水平。【结论】母牛舍饲,分...