根癌土壤杆菌DK-24生产辅酶Q10发酵培养基的优化

【目的】对根癌土壤杆菌(Agrobacterium tume faciens)DK-24发酵生产辅酶Q10的培养基进行优化,为辅酶Q10的生产提供技术支持。【方法】用Plackett-Burman设计法(Plackett-Burman design,P-B)筛选对辅酶Q10产量影响较大的主要因子,采用最陡爬坡试验逼近主要因子的最优水平,通过Box-Behnken设计,利用Design-Expert软件进行回归分析,优化确定各主要因子的最佳质量浓度。【结果】根癌土壤杆菌生产辅酶Q10的4个主要影响因子为蔗糖、玉米浆干粉(CSP)、酵母膏和对羟基苯甲酸(PHB);最陡爬坡试验、Box-Behnken设计及响应面分析表明,根癌土壤杆菌DK-24发酵生产辅酶Q10的发酵培养基中,蔗糖、CSP、酵母膏和PHB的最优质量浓度分别为46.56,22.30,13.46g/L和52.38mg/L。【结论】在优化培养基条件下,辅酶Q10产量可达24.97mg/L,较优化前提高了76.18%。     

糙米辅酶Q_(10)含量的分析

采用高效液相色谱法(HPLC)对糙米中辅酶Q10的含量进行测定,并对测定技术进行了优化.用该技术分析研究了100个水稻品种(含恢复系和种质资源)的辅酶Q10含量,其含量范围为0.30±0.03～5.36 ±0.04 mg·kg-1,品种之间糙米辅酶Q10含量差异极显著.辅酶Q10含量最高的为恢复系4B233(5.36±0.04 mg·kg-1),是最低含量的178.67倍.     

~(60)Co射线对辅酶Q_(10)产生菌三孢布拉氏霉的诱变选育

采用不同剂量的60Coγ射线对辅酶Q10产生菌——三孢布拉氏霉JSF 4菌株的孢子进行处理。结果表明,诱变剂量1.5 kG y对孢子的致死率为85%,具有较好的诱变效果。经复筛,分离得到了1株F 4-3菌株,其发酵平均单位达24.766 m g/L,较出发菌株提高了76%,且该菌株遗传性状稳定。     

花生芽组织块悬浮培养产辅酶Q_(10)的研究

【目的】建立花生芽组织块培养合成辅酶Q_(10)(CoQ_(10))方法,为高效生产CoQ_(10)提供参考。【方法】以花生芽组织块为试验材料,考察培养温度、培养时间、蔗糖质量浓度、初始pH值对CoQ_(10)合成的影响。在单因素试验基础上,通过L9(34)正交试验优化培养条件。【结果】花生芽经悬浮培养后,其产CoQ_(10)的最优条件为:培养温度24℃,时间20h,蔗糖质量浓度30g/L,初始pH值6.0,在此条件下CoQ_(10)产量最高,为182.147μg/g,比未经悬浮培养处理花生芽产CoQ_(10)含量提高了72.4%。【结论】建立了花生芽组织块悬浮培养产CoQ_(10)的最佳工艺,且这种工艺操作简便、周期短、成本低。     

猪心中提取辅酶Q_(10)的研究

研究了提取时间、提取温度、萃取次数3个因素对猪心中提取辅酶Q10的影响。从实验中得出,提取辅酶Q10时,最佳提取条件为温度为70℃,提取时间为30min,萃取的次数为两次。才能使辅酶Q10有较高的收率。     

产氨短杆菌的诱变以及TMTD抗性突变株发酵培养基条件的优化

通过对产氨短杆菌进行微波诱变,筛选TMTD(N,N-四甲基二硫双硫羰胺)抗性突变株以期获得辅酶A的高产菌株,并对其中菌株A3进行了培养基的初步优化.获得的优化培养基配方为:葡萄糖1.5％,蛋白胨1.0％,酵母膏0.5％,硫酸镁1％,磷酸氢二钾1％,磷酸二氢钾1％:接种量为15％.在此优化条件下.菌株的OD600可达512.     

地衣芽孢杆菌W10菌株发酵培养基优化

在培养基单因子筛选试验基础上,采用响应曲面法对地衣芽孢杆菌W10菌株发酵培养基组成进行优化。结果表明:最佳发酵培养基配方(g·L-1)为黄豆饼粉10.13、玉米淀粉16.89、蛋白胨1.13、葡萄糖2.41、硫酸铵7.96、硫酸镁0.45、磷酸氢二钾0.45、氯化钠4.50。用优化培养基对W10菌株进行发酵培养,发酵液对灰葡萄孢的抑菌率为90.37%,比优化前抑菌率(73.90%)提高22.3%。     

高降胆固醇嗜酸乳杆菌的紫外诱变选育

通过紫外诱变,选育出胆固醇清除能力较强的嗜酸乳杆菌菌株。正交试验结果表明:出发菌株稀释浓度10-6,紫外灯照射60 s,照射距离30.5 cm时为最佳的诱变条件;经过紫外诱变筛选得到了胆固醇清除性能良好的菌株,它的胆固醇清除率为21.5%,比出发菌株的清除率(13.5%)提高了8%;经检测突变菌株能够保持较好的遗传稳定性。     

枯草芽孢杆菌HS-09产芽孢发酵培养基的优化

枯草芽孢杆菌HS-09具备较好益生菌性能,已作为微生态菌剂应用于水产养殖业。为了提高菌株HS-09产芽孢发酵水平,以芽孢产量为指标,通过单因素试验及正交试验对枯草芽孢杆菌HS-09产芽孢发酵培养基的碳源、氮源进行筛选及优化,确定最佳发酵培养基。结果表明:影响枯草芽孢杆菌HS-09芽孢产量的主次因素为玉米粉>硫酸铵>葡萄糖。枯草芽孢杆菌HS-09产芽孢发酵优化培养基为葡萄糖10g·L^-1、硫酸铵8g·L^-1、玉米粉15g·L^-1、硫酸镁0.5g·L^-1、硫酸锰0.5g·L^-1、磷酸氢二钾1g·L^-1、磷酸二氢钾2g·L^-1、碳酸钙3g·L^-1;以最佳产孢发酵培养基进行200L发酵罐放大发酵,发酵有效菌落数可达4.3×109cfu·mL^-1,实现芽孢90%高转化率。该研究结果可为菌株工业化生产提供参考依据。     

高产辅酶Q_(10)光合细菌的筛选及鉴定

对池塘污泥中富集分离的5株光合细菌产生的辅酶Q10(CoQ10)进行定性定量分析,筛出CoQ10产量较高的菌株P1,并对其进行系统鉴定。菌株P1为革兰氏阴性菌,杆状,菌体大小为(0.5~0.8)μm×(1.0~1.9)μm;适合光照厌氧培养,适宜生长温度为28~36℃,适宜pH为7.0~7.5;菌体含有细菌叶绿素a和类胡萝卜素;多种有机化合物均可作为光合作用的电子供体和碳源,蛋白胨和硫酸铵是其生长的较好氮源。16S rDNA序列系统发育分析表明,菌株P1在系统进化树上与GenBank序列号为AB167544的沼泽红假单胞菌菌株聚为一类,初步确定菌株P1为沼泽红假单胞菌。沼泽红假单胞菌P1菌株CoQ10产量较高,在19 mg/L左右,至少能稳定传代10次。     

酿酒酵母的紫外诱变选育及发酵条件研究

以果园土为菌种来源,采用平板分离法得到5种酵母菌,对其进行紫外线诱变,筛选出7株酵母菌突变株,通过测定突变株的发酵性能,从中筛选出1株液化酶活力、糖化酶活力、蛋白酶活力及发酵力均较好的酵母突变株N4-4,其发酵液化酶活力、糖化酶活力、蛋白酶活力和发酵力比对照菌株分别提高了6.7%、7.5%、8.1%和39.0%,通过单因素和正交试验确定该突变株的最佳发酵条件。结果表明,在30℃、120 r/min的培养条件下,突变株最佳发酵条件为3%葡萄糖、3%(NH4)2SO4、p H 5.0、3%接种量(V∶V)。     

放射农杆菌产辅酶Q10培养基的优化研究

以放射农杆菌为出发菌株,采用6因素二次通用旋转组合设计法对影响放射农杆菌发酵产辅酶Q10的相关因素进行了研究。结果选取到6种有显著效应的因素：葡萄糖、蔗糖、蛋白胨、酵母膏、异戊醇和L-甲硫氨酸。运用高压液相色谱法对辅酶Q10的含量进行测定,经DPS模拟寻优,建立二次回归方程,优化了培养基的组成。结果表明,当葡萄糖2g/L、蔗糖1g/L、蛋白胨1．25g/L、酵母膏0．75g/L、异戊醇0．075g/L、L．甲硫氨酸0．0375g/L或葡萄糖1．5g/L、蔗糖1．5g/L、蛋白胨1．5g/L、酵母膏1g／L、异戊醇0．05g/L、L．甲硫氨酸0．025g/L时,辅酶Q10的产量最大。     

苏云金杆菌液态发酵培养基的优化

对苏云金芽孢杆菌液体发酵法的培养基进行优化,确定其适宜的配方为4%葡萄糖,4%蛋白胨,2.5%酵母水溶性浸出物,0.5%无机盐混合.在此条件下,经过32 h发酵后,还原糖0.49%,生物效价4 234.00IU·μL-1,晶体含量0.55%,菌体湿重18.72%.     

植物乳杆菌发酵培养基的优化

[目的]在成功筛选出1株有强产酸能力的植物乳杆菌的基础上,优化其发酵培养基,以提高其生物量。[方法]使用单因素试验和正交试验法对培养基的成分进行优化。[结果]优化后的发酵培养基为:蔗糖30.00 g/L,酵母浸膏50.00 g/L,无水乙酸钠5.00 g/L,磷酸氢二钾2.00 g/L,柠檬酸氢二铵2.00 g/L,硫酸镁0.58 g/L,硫酸锰0.25 g/L,吐温-80 1 m L/L,碳酸钙2.00 g/L。经优化后植物乳杆菌发酵液的OD值从5.701增长到15.021,活菌数达7.1×109cfu/m L。[结论]优化后的植物乳杆菌发酵培养基降低了生产成本,为后续工业化生产的研究提供了参考。     

地衣芽孢杆菌发酵培养基的优化

[目的]对地衣芽孢杆菌发酵培养基进行优化,并在此基础上确定最佳培养条件,为实现其工业化生产提供参考。[方法]借鉴谷春涛等关于地衣芽孢杆菌TS-1液体培养发酵条件的研究成果,对培养基进行澄清,并运用单因素试验和4因素3水平正交试验对其培养基进行改进,对地衣芽孢杆菌发酵条件进行优化以得到其最佳温度、pH值和接种龄。[结果]4种因素对地衣芽孢杆菌发酵影响的显著性次序为：玉米浆〉豆饼粉浸汁〉蛋白胨〉葡萄糖。培养基的最佳配比为：玉米浆0．45g,蛋白胨1．50g,豆饼粉浸汁为1：15,葡萄糖1．50g。最适宜种龄为18h,接种量8％,起始pH值7．5,最佳温度37．5℃,此条件下地衣芽孢杆菌对数生长期在14～20h,发酵周期为22～24h。活菌数每单位提高近1亿个,发酵周期比经验周期缩短10h。[结论]试验得出了地衣芽胞杆菌发酵培养基的最佳配比及最佳培养条件,在此条件下培养,收获菌体量大大提高,降低了生产成本,更有利于其大规模工业化生产。     

保加利亚乳杆菌乳酸高产菌株的紫外诱变选育

采用紫外线对保加利亚乳杆菌进行诱变处理,以期获得高产乳酸的突变菌株。正交试验结果表明:出发菌株稀释10-8,紫外灯照射60 s,照射距离26.5 cm时为最佳的诱变条件;筛选到的突变菌株,在培养36 h时,产酸量最大值为16.1 g.L-1,此后乳酸含量几乎不变,因此其最佳发酵时间不应超过36 h。在培养12 h时,突变菌株的产酸量为13.0 g.L-1,此时诱变菌株的产酸量比出发菌株(4.7 g.L-1)提高了56.6%;经检测突变菌株能够保持较好的遗传稳定性。     

发酵乳杆菌JN-2的分离鉴定及其发酵培养基优化

采用改良MRS固体培养基,利用稀释平板涂布法从健康奶牛新鲜粪便中分离筛选到一株肠道乳酸菌,经16S rDNA鉴定为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),并暂命名为发酵乳杆菌JN-2。为提高发酵乳杆菌JN-2的生物量,首先单因素试验设计对碳源、氮源、微量元素的种类进行了优化,并进一步利用正交设计确定了最佳发酵培养基配方:葡萄糖30 g/L、酵母浸粉40 g/L、硫酸镁0.25 g/L、磷酸氢二钾2 g/L、柠檬酸氢二铵2 g/L、乙酸钠5 g/L、吐温-80 1 mL/L。在该优化发酵培养基下,发酵乳杆菌JN-2的菌体生物量吸光光度值达到1.79。     

一株巨大芽孢杆菌及其发酵培养基的优化

以一株巨大芽孢杆菌为研究对象,分别通过正交试验和单因素试验优化了其最佳发酵培养基及最适发酵条件。结果表明:优化后的培养基配方为葡萄糖10 g/L、酵母膏5 g/L和硫酸镁1 g/L;确定的最适发酵条件为温度30℃,初始p H值为8.0,接种量5%,装液量20m L/250 m L,发酵时间16 h。优化后的培养基及培养条件能够有效提高巨大芽孢杆菌M03的活菌数,为其工业化生产提供理论基础。     

类球红细菌中辅酶Q_(10)含量的测定及其动态研究

以液体培养为基础,建立高效液相色谱分析测定辅酶Q10含量的方法,测定类球红细菌中辅酶Q10的含量,进而测定在生长过程中单位质量的湿菌体中辅酶Q10含量的动态变化。结果显示,菌体中辅酶Q10的相对含量在对数期表现出增长趋势,并在稳定期趋于稳定,而在菌体衰亡期则表现出相对含量减少的趋势。在利用类球红细菌进行发酵生产辅酶Q10时,应在菌体生长的稳定期进行提取分离。     

枯草芽孢杆菌B47高产拮抗物质菌株的紫外诱变选育(英文)

[Objective] The aim of this study was to breed new strains which have higher inhibitory effects on the pathogens of watermelon fusarium wilt.[Method] The endophytic Bacillus subtilis B47 strain was obtained from tomato stems by UV mutagenesis for two consecutive times,then genetic stability as well as physiological and biochemical properties of mutant strains were studied.[Result] The antibacterial activity of all the three mutant strains F303,F304 and F305 was higher than that of B74 strain.After subculture of 10 successive generations,the antibacterial activity of all the three mutant strains for the pathogens of watermelon fusarium wilt decreased,but the antibacterial activity of F305 strain decreased the least,indicating its best genetic stability among the tested strains.The antibacterial circle diameter of F305 strain was 5 mm larger than that of wild strain B47 under the same condition.The mutant strain F305 was in logarithmic growth phase within 36 h and in stationary phase within 36-96 h,while its optimum growth temperature was 35 ℃.F305 strain could grow in sodium salt with the concentration of 1%-10%,but it grew best at the concentration of 1%.Physiological and biochemical responses of F305 strain were in accordance with those of wild strain B47.[Conclusion] This study lays the foundation for the factorial production of antagonistic substance by B47 strain and new methods of preventing from the pathogens watermelon fusarium wilt.