西马特罗多克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立

为建立一种特异、敏感、快速、准确的西马特罗(Cimaterol,CIM)残留检测方法,成功合成其完全抗原并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立其免疫学检测方法。应用重氮化法偶联西马特罗与载体蛋白BSA、OVA,合成免疫抗原CIM-BSA和检测抗原CIM-OVA,并采用UV、SDS-PAGE、质谱3种方法进行完全抗原的鉴定。用CIM-BSA免疫新西兰大白兔制备抗西马特罗多克隆抗体并建立间接竞争ELISA检测方法。结果表明,成功合成了西马特罗完全抗原,具有合成抗原的分子特征;免疫新西兰大白兔后,成功制备了抗西马特罗多克隆抗体,其效价为1∶64 000,对西马特罗的半数抑制质量浓度为4.26μg/L,与特布他林、莱克多巴胺、沙丁胺醇、齐帕特罗等β_2型受体激动剂药物无交叉反应。经过条件优化,建立了西马特罗间接竞争性ELISA检测方法,其最低检测限为0.04μg/L,在0.1～12.8μg/L检测范围内,线性关系拟合度为R~2=0.977 1,拟合曲线方程为y=-0.246 9x+0.662 3。检测猪尿和饲料样品,回收率分别为96.3%～103.9%和67.0%～105.0%。综上,成功建立了具有良好应用前景的西马特罗间接竞争ELISA免疫学检测方法。     

睾酮多克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立

采用优化的碳化二亚胺法制备睾酮(TES)人工抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA标准曲线.标准曲线在PBS中的线性检测范围为0.096～92.200 ng/mL,相关系数R2=-0.972 2,半数抑制浓度(IC50)为2.800 ng/mL,最低检测限(LOD)为0.035 ng/mL;抗体与去甲睾酮的交叉反应率为22.3％,与其他检测化合物的交叉反应很小或忽略不计.羊尿20倍稀释后进行添加回收试验,其添加值与检测值的相关系数为0.985 2.因此,该免疫学方法可用于动物尿液中睾酮残留水平的定量分析.     

基层兽医站实验室抗体检测方法研究

动物传染病对于畜牧业发展而言,造成了非常严重的经济损失,对于人们的生存和发展也造成一系列危害.由于人们的日常生活与动物之间的联系相对比较密切.在针对各种不同类型的动物疫病进行防治时,通常会用注射疫苗的方式防治疫病,因此,达到良好的预防效果.疫苗在动物机体当中产生的抗体效果,会直接影响到疫病的整体防控情况.因此要全面有序...     

2,4-D残留免疫学检测方法研究进展

概述环境样品、生物样品和各类农作物等样品中2,4-D残留的免疫学检测方法的研究进展,并指出免疫学检测方法在使用中存在的问题和未来的发展趋势。     

养殖场氨气检测方法研究现状

随着养殖业向规模化、集约化、现代化发展,养殖环境成为突出的问题,养殖场的废弃物不仅对畜禽本身造成不良影响,也对周围环境产生了严重的威胁。文章对养殖场中氨气污染问题进行了简述,分析了目前国内外养殖场氨气检测方法的技术发展状况,并探讨了今后的发展趋势。     

养殖场氨气检测方法研究现状

随着养殖业向规模化、集约化、现代化发展,养殖环境成为突出的问题,养殖场的废弃物不仅对畜禽本身造成不良影响,也对周围环境产生了严重的威胁.文章对养殖场中氨气污染问题进行了简述,分析了目前国内外养殖场氨气检测方法的技术发展状况,并探讨了今后的发展趋势.     

养殖场氨气检测方法研究现状

随着养殖业向规模化、集约化、现代化发展,养殖环境成为突出的问题,养殖场的废弃物不仅对畜禽本身造成不良影响,也对周围环境产生了严重的威胁。文章对养殖场中氨气污染问题进行了简述,分析了目前国内外养殖场氨气检测方法的技术发展状况,并探讨了今后的发展趋势。     

免疫学方法在重金属快速检测中的应用

免疫学方法检测重金属污染是新兴的技术手段,操作简便,检测灵敏、快速,具有较大的市场应用前景。本文对近些年免疫学检测手段,尤其是酶联免疫检测技术和胶体金免疫检测技术在重金属检测中的应用进行综述,对免疫学方法的优缺点进行分析,并对未来研究方向提出建议,为相关研究提供参考。     

猪瘟抗原抗体检测方法及其意义的研究

本研究以本地猪场内40头发生流产的母猪、92头流产死胎、42头病死保育猪、100头未发生流产母猪与健康预出栏猪作为研究对象,完成采血、病料采集,制备待测悬液,据猪瘟病毒序列设计引物,进行病毒扩增,提取RNA,并进行反转录-聚合酶链式反应,凝胶电泳分析,重复以上实验5次。结果表明:发生流产的母猪阳性率12.50%(5/40),流产死胎阳性率1.09%(1/92),病死保育猪阳性率9.52%(4/42),合计阳性率5.75%(10/174),未发生流产母猪、健康预出栏猪阳性率2%(2/100),与发生可疑材料阳性率5.75%,差异无统计学意义(χ2=2.129,P=0.1450.05),阳性阳性电泳扩增目标条带大小100~200 bp,猪瘟病毒特异性条带可能为172 bp,重复性实验结果一致率在99.60%(2729/2740)。由此可知,猪瘟抗原抗体检测可作为猪瘟病毒基因蛋白表达筛查技术,可用于分析猪群猪瘟流行情况、病毒表现及指导防治工作。     

蜂蜜中兽药残留现状与检测方法

蜂蜜是一种纯天然的绿色营养品,对人体健康有益,且无副作用.为保证蜂蜜产品的安全,必须进行兽药残留检测,以提高蜂蜜产品品质,促进蜂蜜产业健康发展. 1.兽药残留现状 (1)药物残留的来源 蜂蜜中药物残留的来源,主要是部分养殖户为了预防蜜蜂疾病使用药物,导致蜂蜜中兽药残留超标,常用的兽药主要有氨基糖苷类、四环素类、大环内酯...     

志贺菌分子生物学检测方法研究现状

志贺氏菌又称痢疾杆菌,是细菌性痢疾的病原菌。多年来,志贺氏菌引起的鸡腹泻对养鸡经济效益的影响很大,已引起高度重视。着重介绍了志贺氏菌分子生物学检测方法的研究现状,为临床诊断治疗志贺氏菌引起的腹泻病提供可靠依据。     

浅析禽流感抗体检测HI试验方法

自1997年香港发生禽流感并引发人类感染事例和当前H7N9禽流感浸染人类事例被报道后,高致病禽流感已成为我国疾控中心和役控中心重点检疫管控的禽病之一,也是当前我国强制免疫的传染病之一,搞好免疫接种是防止禽流感疫情发生的重要措施和管控手段,禽流感抗体检测是防止禽流感疫情发生的关键环节。微量血凝抑制试验由于其特异性好、方便快捷、结果准确又能进行大量样品分析、节省试剂、易于操作等优点,在禽流感病毒亚型鉴定和抗体检测等方面应大力推广和应用。     

LH抗体间接ELISA检测方法的建立

以高纯度的促黄体素（LH）作为包被抗原,建立了检测LH抗体的间接ELISA法,该法的最适抗原包被浓度为1μg/mL,最佳酶标山羊抗小鼠抗体稀释度为1∶1500.该法只与LH阳性小鼠血清呈现阳性反应,而与LH阴性小鼠血清和小鼠促卵泡素（FSH）阳性血清呈现阴性反应.结果表明,该法具有良好的特异性和重复性,可用于LH免疫后抗体水平检测.     

检测传染性支气管炎抗体NP-ELISA方法的建立

【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的检测IBV抗体的间接ELISA方法;【方法】以表达的重组IBVNP蛋白为包被抗原,将之包被于聚苯乙烯酶标板上,以封闭液进行封闭,然后加待检血清在37℃作用1h,洗涤后加酶标兔抗鸡IgG抗体,在37℃作用1h,加底物显色,终止反应后测定OD值;【结果】抗原包被浓度为1.45μg/ml,待检血清最佳稀释度为1:40,酶标二抗最佳工作浓度为1:1000,确定阳性判定标准为OD450≥0.314。NP-ELISA与AIVH9、H5、H7、IBD、ND、EDS76的标准阳性血清不发生交叉反应,具有良好的特异性;【结论】NP-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好、方便快速的特点,可用于临床IB抗体的检测。     

牛副结核抗体的检测以及各种检测方法的关系

本文采用变态反应、补体结合反应和ELISA对副结核阳性牛进行细胞免疫和体液免疫检测,并比较这三种方法在副结核病的检测过程中的作用和相互关系。结果表明:机体对副结核菌的感染,首先产生的是细胞免疫,然后才是体液免疫。变态反应是检测细胞免疫的手段。补反和ELISA是检测体液免疫的手段。两者不能互相替代,而只能互为补充。ELISA检测方法比补反更为敏感。     

检测新城疫抗体的Dot-ELISA方法的建立及其与HI方法的比较研究

建立了检测鸡群中新城疫病毒(New Castle disease virus,NDV)血清抗体的Dot-ELISA方法,对Dot-ELISA的最佳反应条件进行了研究,初步确定了该方法的感染保护临界值为7log2。通过对大量临床血清样本的检测,表明Dot-ELISA与血凝抑制试验(HI)相比,具有敏感、特异和稳定性好的优点。     

未知植物病毒分子生物学检测方法的研究现状

植物的真菌病原菌可以通过核糖体RNA或者其他通用引物进行鉴定,植物病毒缺乏通用引物,这给植物未知病毒病的鉴定带来较大挑战。随着分子生物学及测序技术的发展,出现了很多直接从植物病料中检测未知病毒的方法,这些方法推进了植物病毒的发掘和病原鉴定,取得了非常好的效果。本文主要阐述近年来应用于检测未知植物病毒的分子生物学方法。     

肥料中锌检测方法的研究

本实验参照国标GB/T 14540—2003的消化方法和SN/T 0736.12—2009微波消解一起,同时消化一份样品并加标,之后根据GB/T 14540—2003上火焰原子吸收,再根据NY/T 1974—010上ICP-OES,比较各测定结果及回收率。     

番茄酱中厌氧菌检测方法的研究

目前国内番茄酱的微生物检验仅限于罐头食品的商业无菌及霉菌的镜检计数.有关番茄酱中微生物的研究报道主要来自国外,内容涉及番茄酱中微生物种类、性质,种群变化与番茄酱品质的关系等,而番茄酱中厌氧菌的检测方法国内外文献未见报道.随着科技的发展,人们的生活水平的提高,人们对厌氧菌的认识也有所增强,厌氧菌对罐头食品的污染越来越引起人们的重视.所以建立番茄酱中厌氧菌的检测方法非常必要.通过大量的试验,筛选番茄酱中厌氧菌的增菌培养基及分离培养基,建立了番茄酱厌氧菌分离培养及检测方法.