青蛤酶解物抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除活性为指标对青蛤酶解条件(即时间、温度、pH、酶添加量和固液比)进行正交试验设计,研究了青蛤蛋白酶解物的抗氧化活性。结果表明,酶解条件为温度40℃、pH 11.5、酶添加量3000U/g原料以及固液比为1∶2(w/w)时,酶解物的DPPH自由基的清除活性最高。对最佳水解条件下所获得的酶解物进行抗氧化活性测试,内容包括DPPH自由基清除活性、超氧阴离子清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力。结果显示,酶解物有较低超氧阴离子清除活性,但却具有较高DPPH自由基清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力。     

鳕鱼皮胶原蛋白酶解液的制备及抗氧化研究

[目的]利用酶解法从鳕鱼皮中提取胶原蛋白肽,研究其抗氧化能力。[方法]以鳕鱼鱼皮为原料,采用胃蛋白酶进行酶解,通过正交试验研究pH、水解温度、加酶量及水解时间4个因素对酶解鳕鱼皮的影响,确定胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳条件,并采用试剂盒法对酶解产物进行抗氧化活性研究。[结果]各因素对酶解鳕鱼皮的影响为水解时间〉水解温度〉加酶量〉pH,胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳工艺条件为：加酶量4%、温度37℃、pH 3、时间3 h。此条件下,蛋白质水解度可达到6.91%。胃蛋白酶酶解鳕鱼皮得到的胶原肽粗品具有一定的抗氧化能力,并对超氧阴离子自由基具有较强的清除作用。[结论]该研究为开发新的抗氧化剂提供科学参考。     

鲶鱼骨酶解物的抗氧化活性研究

主要探讨鲶鱼骨酶解物的抗氧化活性,利用羟自由基（·OH）抑制实验、还原力的测定和油脂抗氧化实验判断酶解物的抗氧化活性。结果表明,酶解物对羟自由基有较强的清除能力,且随着浓度的增大,清除羟自由基的能力增强,半数抑制率（IC50）为0．374g／L;酶解物的还原能力随着其浓度的增加而增强,呈剂量效应关系;在猪油中添加0．0...     

沙蚕不同酶解产物抗氧化效果研究

海洋生物蛋白资源是海洋生物资源的重要组成部分,对其进行高值化加工利用是海洋生物技术研究的重要内容,酶解是提高海洋蛋白功能性的有效方式,但酶种类不同,其作用位点不同,可能对酶解产物的活性有一定影响。为了探究了沙蚕不同酶解产物的抗氧化性,采用6种蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶）酶解沙蚕,测定了不同酶解时间下的水解度、分子量分布、3种自由基（DPPH、O-2·、·OH）的清除率等反映抗氧化水平的指标。结果表明：胰蛋白酶小分子肽得率最高,为70.47%;胃蛋白酶次之,为68.12%。酶解液浓度为5 mg·mL-1时,胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解4 h时,DPPH清除率效果较好,分别为90.87%和90.52%。胃蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果最佳,为89.78%;木瓜蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果次之,为57.99%。碱性蛋白酶酶解4 h和胃蛋白酶酶解2 h时,·OH清除率效果较好,分别为85.07%和83.37%。胰蛋白酶和胃蛋白酶对提高酶解液水解度和小肽生成作用明显,胃蛋白酶的酶解产物对3种自由基清除率较好,更适用于制备沙蚕抗氧化肽。     

金华火腿副产品酶解物的MRPs抗氧化活性

 【目的】分析金华火腿副产品酶解物的组成,研究其美拉德反应产物(MRPs)的抗氧化活性。【方法】采用反相高效液相色谱对酶解物的氨基酸组成进行测定,高效凝胶过滤色谱分析相对分子质量分布情况。通过与葡萄糖、木糖进行反应制备MRPs,经体外试验评定MRPs的抗氧化活性。【结果】酶解物中游离氨基酸占5.52%,总氨基酸中必需氨基酸含量为21.68%;酶解物主要由相对分子质量180—500 D的成分组成。随着反应时间的延长,金华火腿副产品酶解物的MRPs颜色不断加深,DPPH自由基清除率与还原力均呈上升趋势。酶解物与木糖的反应速度相对较快;在反应90 min时,DPPH自由基清除率与还原力显著高于与葡萄糖的反应产物,抗氧化活性更强。【结论】金华火腿副产品酶解物具有较高的营养价值,主要由2—4肽构成,与葡萄糖、木糖反应所得的MRPs均具有一定的DPPH自由基清除能力和还原力。     

魁蚶加工副产物酶解工艺及酶解产物抗氧化效果研究

为高效开发利用魁蚶Scapharca broughtonii加工副产物,以水解度、氨基态氮含量和产物相对分子质量分布为指标,筛选了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶5种蛋白酶,通过单因素和响应面试验,建立碱性蛋白酶最佳酶解工艺,并对最优工艺条件下酶解产物的抗氧化效果进行测定。结果表明:从氨基态氮含量和水解度的变化可知,碱性蛋白酶的酶解程度最高,其次为风味蛋白酶和酸性蛋白酶,中性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解效果不佳;碱性蛋白酶酶解最佳参数条件为料液比(g∶mL)1∶4、pH 8.5、温度45℃、加酶量800 U/g、酶解时间3 h,在此条件下,水解度(DH)为35.74%;酶解产物具有明显的抗氧化效果,与十分之一用量的VC效果相当。研究表明,碱性蛋白酶是酶解魁蚶加工副产物获得较多小分子蛋白肽的良好用酶,本研究结果可为小肽型水产饲料开发提供基础数据。     

魁蚶加工副产物酶解工艺及酶解产物抗氧化效果研究

为高效开发利用魁蚶Scapharca broughtonii加工副产物,以水解度、氨基态氮含量和产物相对分子质量分布为指标,筛选了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶5种蛋白酶,通过单因素和响应面试验,建立碱性蛋白酶最佳酶解工艺,并对最优工艺条件下酶解产物的抗氧化效果进行测定。结果表明:从氨基态氮含量和水解度的变化可知,碱性蛋白酶的酶解程度最高,其次为风味蛋白酶和酸性蛋白酶,中性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解效果不佳;碱性蛋白酶酶解最佳参数条件为料液比(g∶mL)1∶4、pH 8.5、温度45℃、加酶量800 U/g、酶解时间3 h,在此条件下,水解度(DH)为35.74%;酶解产物具有明显的抗氧化效果,与十分之一用量的VC效果相当。研究表明,碱性蛋白酶是酶解魁蚶加工副产物获得较多小分子蛋白肽的良好用酶,本研究结果可为小肽型水产饲料开发提供基础数据。     

超声辅助酶解鹅肝蛋白的动力学和热力学及酶解物抗氧化性能

以鹅肝为原料,采用超声预处理鹅肝蛋白后,添加胰酶进行酶解,制备鹅肝多肽,研究超声辅助鹅肝蛋白酶解动力学和热力学,并比较常规酶解和超声辅助酶解制备鹅肝多肽的抗氧化性能。酶解时间为150 min时,与常规酶解相比,超声辅助酶解的水解度提高了16.05%。酶解时间为130 min时,与常规酶解相比,超声辅助酶解的鹅肝多肽得率提高了15.63%。酶解温度为20℃、30℃、40℃、50℃时,与常规酶解相比,超声辅助酶解动力学参数即反应速率常数k分别提高了214.00%、115.00%、64.00%、41.00%,其酶解反应的热力学参数Ea、△H、△S、△G分别下降了70.00%、79.00%、30.00%、2.00%,表明超声处理会导致蛋白质内部氢键破裂、氨基酸残基氧化修饰以及交联引发的聚合作用,降低其反应所需活化能,提高反应速率。抗氧化结果表明,超声辅助酶解产物中的多肽浓度为1 mg/ml时,其对2,2-二苯基-1-硝基苯肼(DPPH)自由基、2,2-联氮基双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氮盐(ABTS)自由基和羟自由基的清除率分别为51.20%、67.80%、61.70%,与常规酶解物相比差异显著(P0.05)。超声预处理破坏了鹅肝蛋白的非共价作用,包括氢键、范德华键和疏水性,鹅肝蛋白水解物能提供更多的单电子或氢的多肽,因此超声辅助酶解产物具有较高消除自由基的功能,表明超声辅助酶解制备的鹅肝多肽具有较高的抗氧化性能。本研究不仅为鹅肝抗氧化多肽的制备提供了科学依据,还为鹅肝蛋白精深加工及其附加值的提高奠定了理论基础。     

魁蚶加工副产物酶解工艺及酶解产物抗氧化效果研究

为高效开发利用魁蚶Scapharca broughtonii加工副产物,以水解度、氨基态氮含量和产物相对分子质量分布为指标,筛选了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶5种蛋白酶,通过单因素和响应面试验,建立碱性蛋白酶最佳酶解工艺,并对最优工艺条件下酶解产物的抗氧化效果进行测定。结果表明:从氨基态氮含量和水解度的变化可知,碱性蛋白酶的酶解程度最高,其次为风味蛋白酶和酸性蛋白酶,中性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解效果不佳;碱性蛋白酶酶解最佳参数条件为料液比(g∶mL)1∶4、pH 8.5、温度45℃、加酶量800 U/g、酶解时间3 h,在此条件下,水解度(DH)为35.74%;酶解产物具有明显的抗氧化效果,与十分之一用量的VC效果相当。研究表明,碱性蛋白酶是酶解魁蚶加工副产物获得较多小分子蛋白肽的良好用酶,本研究结果可为小肽型水产饲料开发提供基础数据。     

不同蛋白酶酶解猪血蛋白效果比较研究

本研究以猪血为原料,以水解度和可溶氮含量为指标,筛选出各种蛋白酶水解猪血的最优蛋白酶,并进一步以水解度和可溶氮含量为指标,确定最优蛋白酶水解猪血的最优条件,结果表明：碱性蛋白酶为最适蛋白酶,最优条件为初始pH为11,温度为50℃,加酶量为1g／100ml,水解时间为8h。     

酵母培养物在育肥猪中应用效果

为研究酵母培养物(YC)在育肥猪中的应用效果,选取90头健康的、体重约为60 kg的杜×长×大三元杂交猪,将其随机分为两组,每组45头。用猪场常规饲粮喂第1组(对照组)猪;在第2组(试验组)猪饲粮中添加加YC,并对其他原料比例适当调整,使2组饲粮主要养分含量相似。饲养试验周期60 d。结果表明:(1)试验组猪日均增重较对照组提高了11.84%(P0.05),饲料转化率提高3.58%(P0.05)。(2)试验组猪血糖较对照组增加了41.96%(P0.01),血清总抗氧化能力提高了17.21%(P0.01),血清谷丙转氨酶活性降低了15.05%(P0.01),血清谷草转氨酶活性降低了21.13%(P0.01),血清尿素氮减少了5.49%(P0.05),血清丙二醛降低了8.72%(P0.05)。(3)试验组猪背最长肌、肝中总超氧化物歧化酶活性较对照组分别提高了23.58%(P0.05)、6.23%(P0.05),肝中丙二醛降低了6.03%(P0.05),背最长肌滴水损失量降低了44.41%(P0.01),背最长肌亮度(L*)提高了3.57%(P0.05)。基于试验结果推断,YC可促进育肥猪生长,提高饲料转化率,改善猪体营养生化代谢,增强组织细胞稳定性,提高猪体抗氧化能力和猪肉保健价值。     

交联壳聚糖树脂对扇贝裙边酶解液中镉的脱除研究

以壳聚糖为原料,分别添加不同量的茶多糖、硝酸铈铵及氯化锌,制备壳聚糖(CTS)、壳聚糖铈(CTS-Ce)、壳聚糖茶多糖铈(CTS-TPS-Ce)、壳聚糖茶多糖(CTS-TPS)和壳聚糖锌(CTS-Zn)等5种不同类型的树脂。研究这些树脂对扇贝裙边酶解液中重金属Cd的脱除作用,并分析其对蛋白质、氨基酸、锌(Zn)、铁(Fe)、钙(Ca)及镁(Mg)等有益成分的影响。结果表明,CTS-Zn树脂对扇贝裙边酶解液中的Cd的脱除率达80%以上,对蛋白质、氨基酸及人体有益的微量元素如Fe、Zn、Ca和Mg等影响较小。     

不同方法提取方格星虫胶原蛋白及其酶解物对HaCaT细胞的影响

以方格星虫（Sipunculus nudus）体壁为原料,分别采用酸法、酶法和热水法提取胶原蛋白并对其理化性质进行分析;通过检测氨基酸组成、紫外光谱、傅里叶红外光谱、SEM扫描电镜分析比较了3种胶原蛋白的特性,并采用HaCaT细胞,探讨3种酶解产物对其生长活力的影响。结果表明,热水法提取胶原蛋白的提取得率高于其他两种方法,3种胶原蛋白均含有胶原特征型氨基酸甘氨酸Gly、脯氨酸Pro和羟脯氨酸Hyp。紫外和红外光谱图显示,3种胶原蛋白均在222 nm附近有明显的吸收峰,且存在酰胺A、酰胺B的吸收峰和酰胺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的特征峰,提示3种胶原蛋白均属于Ⅰ型胶原蛋白,具有三股螺旋结构。而扫描电镜结果显示,相比于酶法和热水法,酸法提取的胶原蛋白三股螺旋结构保持更为完整,且较好地维持胶原纤维的原有结构。3种胶原蛋白酶解肽在50～100μg/mL时,能够显著提高正常和UVB损伤的HaCaT细胞活力,表明方格星虫胶原蛋白的酶解产物在皮肤光老化修复方面具有较好的潜在应用前景。     

鲮鱼鱼皮胶原蛋白酶解物分子量分布与抗氧化性的研究(英文)

[目的]为了研究鲮鱼鱼皮胶原蛋白水解物的分子量的分布及抗氧化活性。[方法]分子量分布采用分子排阻色谱法和基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),鱼皮用碱性蛋白酶2709处理。[结果]最佳水解条件为:pH 10.0、反应温度55℃、底物浓度为80 g/L、酶和底物比4%,水解时间3 h。两种方法分析水解产物的相对分子质量分布范围为400~1 800 Da,大多数胶原蛋白短肽的分子量在1 400 Da以下。[结论]结果表明,鱼皮水解物是一种潜在的抗氧化物。     

猪皮胶原蛋白提取过程中酶解条件优化及其结构鉴定

采用酶法从猪皮中提取胶原蛋白,以胶原蛋白的提取率为评价指标,对工艺中的酶解pH,酶解时间和胃蛋白酶用量3个因素进行优化,实验结果表明,酶解液pH 2.2,酶解时间18h,酶用量1%为最佳工艺组合,在此条件下胶原蛋白提取率可达84.35%±0.33%,纯度为82.5%±1.6%;所得胶原主要由α,β和γ3种亚基组分组成,具有较高的热稳定性;红外光谱和圆二色谱测定结果显示,其具备典型的胶原蛋白吸收特征,证明胶原天然三螺旋结构保存完整.     

高短肽得率羊骨酶解物的制备及其体外抗氧化活性

以短肽得率为指标,响应面法优化羊骨碱性蛋白酶水解工艺,对酶解物的抗氧化活性进行研究,为羊骨的高值利用奠定基础。结果表明,以所得最优工艺即骨粉浓度8.24%,p H值9,加酶量4.35%,46℃水解5 h制备酶解物,短肽得率达71.19%;酶解物对3种自由基的清除率随浓度的增加而增加,对3种活性氧的清除能力为DPPH·O_2~-··OH;0.3 mg/m L酶解物对DPPH·,O_2~-·,·OH的清除率分别为46.21%,29.82%和24.16%。由此可见,以最优工艺制备的、富含短肽的羊骨碱性蛋白酶解物具有体外抗氧化活性,有望应用于饲料、食品、医药等领域。     

乳酸菌发酵酶解杂粕在中猪生产中的应用

以生长期中猪为试验对象,分别在日粮中添加杂粕和乳酸菌发酵酶解杂粕(棉籽粕、菜籽粕和玉米脐子粕),研究其对生长期中猪生长性能、血液生理生化指标和血液抗氧化能力的影响。结果表明,在生长期中猪的日粮中添加发酵酶解杂粕可促进动物生长,与对照组(添加豆粕组)相比,血液生理指标无显著差异(P0.05),从血液生化指标上看,发酵杂粕可以有效促进机体蛋白质合成,有助于蛋白质和氨基酸的利用,并且能够提高机体抗氧化酶活性,增强抗氧化能力。     

超滤在猪血红蛋白酶解液中的应用研究

采用6～10 kD和3 kD超滤膜对猪血红蛋白水解液进行浓缩实验,对超滤前后的多肽类蛋白质、氨基氮、血红素的变化进行分析.实验结果表明:采用3 kD超滤膜对酶解液的浓缩效果较好,浓缩倍数分别达到2.3、2.0、1.9,经冷冻干燥得产物蛋白质多肽含量91%,血红素含量2.9%混合营养物,可以用来制备含量较高的富含血红素肽的混合营养物.     

罗非鱼鳞胶原蛋白的提取及其酶解产物的抗氧化性

以罗非鱼鳞为原料,提取酸溶胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)和酶促酸溶胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,PSC),并对PSC的理化性质及其酶解产物抗氧化性进行探讨.实验结果表明: 0.1 mol/L HCl提取ASC和PSC的得率分别为3.52%和14.88%;PSC氨基酸组成中,每1000个氨基酸残基甘氨酸为351个,亚氨基酸脯氨酸和羟脯氨酸为180;PSC强吸收峰在205 nm处,磷酸盐缓冲液检测PSC的性质,与I型胶原蛋白相符.PSC经胃蛋白酶水解3 h, 过氧化抑制率达到82.8%,抗氧化效果略优于等量的Vc.     

鲟鱼软骨酶解条件优化及酶解物的体外抗肿瘤活性

为改善鲟鱼骨胶原的营养价值和生理功能,提高骨胶原多肽得率,提升水产品的附加值,采用碱性蛋白酶和中性蛋白酶复合酶解技术,以肽得率为指标,通过单因素试验、正交设计试验优化骨胶原多肽的酶解条件。采用CCK-8法测定鲟鱼骨胶原多肽对人源结直肠癌细胞Caco-2、乳腺癌细胞MCF-7、肝癌细胞HeGp2、肺癌细胞A549及宫颈癌细胞HeLa 5株癌细胞增殖的抑制能力,并选取抑制效果明显的肺癌细胞A549为模型,进一步检测鲟鱼骨胶原多肽作用后对其caspase-1、caspase-3以及细胞膜电位的影响。结果表明:1)鲟鱼软骨胶原肽的酶解工艺条件为:加酶量1.5×10~5 IU/g,骨粉与水质量比1∶25,酶解时间5 h,酶解温度50℃,碱性蛋白酶与中性蛋白酶酶活力比1∶2。该条件下骨胶原蛋白肽得率为(72.36±2.33)%;2)抑癌活性测定结果显示,鲟鱼骨胶原多肽通过激活凋亡蛋白酶caspase-1,使细胞线粒体膜电位发生改变,膜电位降低,诱导caspase-3酶活力增加,酶活力可达149.9 IU/μg,进而促进细胞凋亡的发生,抑制细胞的增殖。鲟鱼骨胶原多肽具有抑制癌细胞增殖的能力,有潜在的开发应用前景。