放线菌19G-317菌株的鉴定及其抑菌活性研究

    对分离自三江源自然保护区的1株放线菌(编号:19G-317)采用平板对峙法和盆栽试验测定其抑菌活性,并通过形态学观察、培养特征、生理生化特性和分子分类方法研究其分类地位.结果表明,放线菌19G-317菌株对供试的23种植物病原真菌均有不同程度地抑制作用,其中对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、水稻纹枯病菌(Thanatephorus cucumeris)等14种供试病原菌的抑制作用较强,其抑菌带均大于10 mm;盆栽试验结果表明,其发酵液对番茄灰霉病的保护效果和治疗效果分别为47.82%和45.77%;根据形态观察、生理生化特征和 16S rDNA序列比对分析,初步鉴定该菌株为链霉菌属中黄色类群链霉菌Streptomyces sp.     

一株放线菌次生代谢产物抗菌活性的初步研究

研究了从秦岭山区中筛选得到的一株放线菌(编号为No.24),对其产生的次生代谢产物的抑菌活性进行了测定。生测结果表明,离体条件下,发酵液对农业常见的病原真菌均有较强的抑制作用,对苹果轮纹病菌和小麦根腐病菌的菌丝生长抑制作用最强,其EC50分别是146.87 mg.L-1和164.09 mg.L-1;对玉米大斑病菌和马铃薯干腐病菌孢子萌发的抑制作用较强,其EC50分别为129.33 mg.L-1和184.99 mg.L-1。盆栽试验在浓度为6 000 mg.L-1时对小麦白粉病的保护和治疗作用分别为76.1%和70.7%,对番茄灰霉病的保护和治疗作用分别为66.9%和61.1%。田间药效试验结果表明,No.24菌株发酵液可以有效控制番茄灰霉病和小麦白粉病的进一步蔓延。     

放线菌A19菌株次生代谢产物的初步研究

【目的】对放线菌A19菌株发酵液中的次生代谢产物进行初步研究,以了解其抑菌活性及其稳定性。【方法】采用抑制菌丝生长法、管碟法、盆栽试验等方法,测定了A19菌株发酵液的抑菌活性和发酵液中有效成分的热稳定性及酸碱稳定性;并以活性追踪为指导,采用大孔吸附树脂、硅胶柱层析、高效液相色谱等技术对其有效成分进行了分离。【结果】室内生测发现,A19菌株发酵液对10种供试病原真菌均有明显的抑制作用,其中对小麦根腐病菌的抑制效果最好,抑制率达100%;对枯草牙孢杆菌、金黄色葡萄球菌和L-链球菌3种病原细菌也有较好的抑制作用,其中对枯草芽孢杆菌的抑制作用最强,抑菌圈直径达到21 mm。盆栽试验表明,A19菌株发酵液对小麦白粉病有一定的保护作用和治疗作用,防治效果分别为54.3%和65.0%。A19菌株发酵液对热稳定,对酸碱不稳定。从A19菌株的发酵液中分离得到15-1,15-2和15-3 3种化合物,其中15-2鉴定为7-羟基-3异丁基六氢吡咯[1,2-α]吡嗪-1,4-二酮。【结论】放线菌A19菌株发酵液抗菌谱较广,具有较好的研究价值。     

放线菌GZ933菌株代谢产物的抗菌活性研究

[目的]对GZ933菌株发酵产物的杀菌活性进行了离体测定。[方法]采用抑制菌丝生长速率法和孢予萌发法测定菌株发酵产物对植物病原茵的生物活性。[结果]GZ933发酵产物对油莱菌核病菌、辣椒疫霉病菌、番茄灰霉病菌菌丝生长的EC50分别为183,96、128．43eh,117．39mg／L;对葡萄白腐病菌和黄瓜霜霉病菌孢子萌发的EC5。分别为133．46和188．73mg／L。[结论]GZ933菌株对许多植物病原菌具有较好的抗茵活性,有很高的推广和应用价值。     

放线菌ZX01菌株发酵产物抗TMV活性的初步研究

【目的】探明新发现的一种放线菌ZX01菌株发酵产物对烟草花叶病毒（TMV）的抑制活性,为该菌株在植物病毒病害防治中的开发应用提供依据。【方法】以心叶烟和普通烟K326为材料,采用半叶枯斑法、叶圆片法和室内盆栽试验,测定放线菌ZX01菌株发酵产物抗TMV活性。【结果】放线菌ZX01菌株发酵产物对TMV具有明显钝化作用,其中发酵液在对TMV钝化10,30和60 min后,抑制率分别为62.29%,75.46%和84.78%;接种TMV 6 h后,在普通烟K326上,ZX01菌株发酵液对TMV复制增殖的抑制率可达53.27%;并且ZX01菌株发酵液对烟草花叶病毒病寄主保护和治疗作用显著,其保护和治疗作用的防治效果分别为54.48%和44.85%,明显高于对照药剂病毒A。【结论】放线菌ZX01菌株代谢产物对TMV有较高的抑制活性,值得在菌种鉴定、发酵条件优化、活性物质的分离与鉴定等方面进行深入研究。     

放线菌菌株AH-1的分离鉴定与抑菌活性研究

为筛选具有农用抑菌活性的微生物,从采自安徽黄山山区的土壤中分离得到一株具有抑制真菌活性的菌株AH-1。通过对其形态和培养特征、生理生化特性和16SrDNA序列分析,确定其为卡那霉素链霉菌。室内活性测定结果表明,该菌株发酵液具有广谱、较强的抗植物病原真菌活性,其对小麦根腐病菌和苹果褐腐病菌的菌丝生长抑制率高达94.4%和95.7%。抑制孢子萌发生测结果表明,AH-1菌株发酵液抑制玉米大斑病和马铃薯干腐病菌孢子萌发的EC50分别为15.81mg/L和10.17mg/L。推测,该菌株发酵液中可能含有广谱农用抑菌活性物质,值得深入研究。     

产抑菌活性物质放线菌菌株的筛选

[目的]筛选产抑菌活性物质的放线菌菌株。[方法]以金黄色葡萄球菌、对青霉素和头孢菌素类耐药的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为指示菌,采用滤纸片扩散法对300株放线菌的发酵产物进行抗菌活性筛选,通过最小抑菌浓度法（MIC）对筛选的阳性菌株进行抗菌活性测定。[结果]筛选到抗菌活性物质产生菌111株,抑菌率为37.0%;其中对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和耐药金黄色葡萄球菌有抑制活性的菌株分别为111、10和47株。各菌株的最小抑菌浓度有很大差别,菌株174883对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,其发酵样品稀释到2 048倍仍然表现出抑菌活性。用青霉素酶和头孢菌素酶作用于阳性菌株发酵产物,筛选到6株菌株代谢产物的抑菌活性变弱,菌株32349和kj0428的抑菌活性被抑制最明显。[结论]筛选得到的阳性放线菌菌株具有良好的抗菌活性,为新型抗生素的筛选提供了研究基础。     

除虫菊内生拟盘多毛孢Y1菌株发酵产物抑菌活性初步研究

摘　要:在对从除虫菊中分离到的内生真菌进行抑菌活性系统筛选的基础上,对其中活性较高的Y1 （Pestalotiopsis sp.）菌株进行了抑菌活性测定。其发酵液10倍稀释液和菌丝丙酮提取物对玉米大斑病菌 Exserohilum turcicum等 6种供试植物病原真菌菌丝生长的抑制率分别在85. 2%～95.1%之间和40%～80%之间,其 5倍稀释液对番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea和苹果炭疽病菌 Glomerella cingulata孢子萌发的抑制率均大于 82%。活体生测结果表明,该发酵液对番茄灰霉病,辣椒疫霉病和黄瓜霜霉病的保护效果大于 55%,治疗效果不明显。     

土壤多重抗生素抗性放线菌的筛选及其发酵产物的初步研究

从4个不同地区土样中共分离得到20株天然无抗菌活性或抗菌活性微弱放线菌,采用链霉素(Streptomycin)、庆大霉素(Gentamycin)及利福平(Rifampicin)三重抗性法对其进行活性菌株的筛选后,17株放线菌的发酵液显示了抑菌活性,其中1号放线菌对链霉素、庆大霉素和利福平抗性分别为40、10和150 g...     

鳞柄小奥德蘑发酵产物抑菌活性初步研究

采用抑制菌丝生长速率法、活体组织法及盆栽法对鳞柄小奥德蘑发酵产物的抑菌活性进行了研究。结果表明，鳞柄小奥德蘑发酵产物具有较强的抑菌活性，且抑菌活性成分主要分布于菌丝体提取物中。在供试浓度为0.5 mg/mL（菌丝干重）时，其菌丝体丙酮提取物对苹果腐烂病菌（Cytospora sp.）、烟草赤星病菌（Alternaria alternata （Fries） Keissler）、苹果炭疽病菌（Golletotrichum gloeosporioides （Penz.） Penz.et Sacc.）、玉米小斑病菌（Bipolaris maydis（Nisikado.et Miyake）Shoem.）和番茄灰霉病菌（Botrytis cirerea Pers.et Tris.）等5种病原真菌菌丝生长抑制率均高于80%；在活体组织法测定中，菌丝体丙酮提取物对番茄灰霉病具有较好的防治效果，3 d的治疗效果和保护效果分别为71.2%和76.2%；在盆栽试验中对玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum（Pass.）Leonard＆Suggs）和小麦白粉病（Blumeria graminis（DC.）Speer.f.sp.tritici Marchal）的治疗效果和保护效果均在60%以上。     

放线菌株D35的分离鉴定及其抗植物病原真菌活性

从湖南壶瓶山国家自然保护区土样中分离放线菌株,经平板对峙培养初筛和发酵过滤液抑菌试验,得到一个较好的菌株D35,其发酵液经5倍稀释对稻瘟病菌、柑橘炭疽病菌和烟草黑胫病菌的菌丝生长抑制率分别为47.6%、80.3%和54.2%.经培养性状观察,生理生化测定,并结合16S rDNA序列分析,初步鉴定D35为三泽链霉菌(Streptomyces misawanensis).     

放线菌株SJY56的分离鉴定及其抗菌活性的初步研究

从青海省三江源国家自然保护区土样中分离放线菌株230个,经平板对峙培养初筛和发酵过滤液抑菌试验,得到一个较好的菌株SJY56,其发酵液经5倍稀释对金黄色葡萄球菌有显著抑制活性,抑菌圈直径为21mm.经培养观察,生理生化测定,并结合16S rDNA序列分析,初步鉴定SJY56为链霉菌(Streptomyces atroolivaceus).     

雅致放射状毛霉MGC317菌株对发酵腐乳性能的影响

为完善腐乳的酿造机制,以雅致放射状毛霉M3118和高大毛霉菌MHC-7为对照,对分离鉴定的雅致放射状毛霉菌株MGC317发酵腐乳过程进行了研究。结果表明:3个菌株前期发酵阶段产蛋白酶活力都较高,48 h达到最大值,为59.55~69.10 U/mL;后发酵过程中,MGC317发酵腐乳20 d时,蛋白酶活力达到最大值,为4.70 U/mL。3个菌株发酵腐乳的总酸和游离氨基酸态氮含量呈逐渐增加的趋势,其中,以MGC317较为明显,70 d时达1.55 g/100 g和0.6 g/100 g;而粗蛋白和黏度呈逐渐下降趋势;MGC317发酵成熟的腐乳,杂菌数最少。表明,MGC317菌株发酵腐乳具有风味独特、后熟期短、抗杂菌能力强等特点。     

油茶炭疽病拮抗放线菌CF17发酵液的抑菌活性及活性成分的分离纯化

采用十字交叉法测定CF17发酵液的抑菌谱,并通过离心、旋转蒸发浓缩、丙酮沉淀、固相萃取以及半制备高效液相色谱法对抑菌物质进行分离纯化和鉴定.结果表明,CF17发酵液对油茶炭疽病、油茶叶枯病、油茶软腐病、杉木炭疽病、核桃壳梭孢、降香黄檀炭疽病、檀香炭疽病等的病原菌均有抑菌效果.50%丙酮分离纯化效果优于乙醇沉淀法与乙酸乙酯沉淀法;在固相萃取中,活性物质主要集中在60%乙腈梯度洗柱样品中,最后经HPLC分离收集到一个有明显抑菌圈的样品.经质谱鉴定抑菌成分为Tetramycin A.     

一株抗根癌菌的拮抗放线菌菌株的初步鉴定及培养条件研究

对从土壤中筛选出的1株抗根癌菌的拮抗放线菌（G-19）进行了鉴定和培养条件研究。经培养性状,生理生化特性,以及16S rDNA序列分析鉴定。初步鉴定为链霉菌属（Streptomyces）。经摇瓶发酵筛选,放线菌G-19最佳培养基为高氏一号;最佳培养条件为摇床转速180 r/min、装液量40 mL/250mL、初始pH值7.0、培养温度28℃。     

放线菌Z139菌株的分离、鉴定及其生物活性

从陕西秦岭山区采集的土样中分离到1株具有广谱抗真菌活性的放线菌菌株Z139,经初步鉴定为小多孢菌属红棕褐小多孢菌(Micropolysporarabrobranea)的一个变种。该菌株发酵液对玉米小斑病菌、苹果轮纹病菌、棉花枯萎病菌、马铃薯干腐病菌和西瓜枯萎病菌菌丝的生长抑制中浓度(EC50)分别为0.979,0.505,1.733,0.425和0.849mL/L,对玉米大斑病菌、番茄叶霉病菌、马铃薯干腐病菌和烟草赤星病菌的孢子萌发抑制中浓度(EC50)分别为1.709,0.375,0.445和1.333mL/L。对小麦白粉病的保护和治疗作用分别达到98.6%和86.1%。