枸杞髓部细胞悬浮培养及胚状体发生

应用枸杞髓部组织进行离体培养，建立细胞系，诱导胚状体发生。结果在含不同激素的４种ＭＳ培养基上都诱导出了愈伤组织，诱导频率在５６．７％￣９５．７％，其中以ＭＳ＋６ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％培养基诱导出的愈伤组织颗粒小，分散性能好，此愈伤组织在２－３次继代培养后，转入液体培养基中进行振荡培养，２４ｈ后获得大量单细胞，经过多次继代培养，建立稳定的单细胞悬浮率。悬浮细胞在液体培养基     

快速建立胚性细胞悬浮系的培养程序初探

为了缩短建立胚性细胞悬浮系的进程，快速获得松脆胚性愈伤组织，以普通小麦，大麦和多花黑麦草为材料，采用能促进植株再生的高浓度铜离子作为毒害筛选因子，以MSD培养基为基本配方，2．5mg/L的2，4－D浓度，不同梯度浓度的铜离子处理愈伤组织。结果表明，0．1mmol/L的Cu^2 对愈伤组织具有较好的筛选作用，能使松脆胚性愈伤组织保存下来，而其它类型愈伤组织褐化死亡，产生的松脆性愈伤组织能很快适应悬浮培养，从而使快速建立胚性细胞悬浮系。用密实细胞体积及其斜面高度评价细胞悬浮系的特点，发现悬浮细胞不仅具有很强的生长势，提高了愈伤对营养缺乏的忍受度，而且保持了高分化潜能的胚性。     

沙地云杉胚性细胞悬浮培养研究

通过本次试验,得到了沙地云杉胚性细胞悬浮培养的最佳培养条件,即DCR+0.1mg/L 2,4-D+1mg/L 6-BA+30g/L蔗糖,pH6.0,接种量3.0%(以鲜重计),摇床转速为110r/min,25±1℃,黑暗条件下震荡培养;研究了细胞生长鲜重、干重和pH值、细胞活力以及培养液中NO3-、NH4+、PO43-和总糖的消耗动力学变化.为今后进行沙地云杉的原生质体培养分离、基因导入及细胞融合等研究提供实验基础.     

石刁柏体细胞胚的培养与植株再生研究

石刁柏的体植体在附加激素的ＭＳ固体培养基上诱导愈伤组织，在愈伤组织的分类选择中获得的胚性愈伤组织，转移到含２，４－Ｄ １￣１．５ｍｇ／Ｌ的液体培养基中悬浮培养繁殖。在继代培养中，将颗粒大于１ｍｍ的愈伤组织，转移到无激素的ＭＳ培养基中诱导体细胞胚发生，提高培养基中琼脂的浓度，可减轻体细胞胚的玻璃化。     

草莓细胞悬浮培养条件优化及植株再生的研究

以不同基因型草莓花药为试材,建立草莓细胞悬浮系,研究结果表明:悬浮培养初期的褐化程度和褐化恢复的快慢可作为判别建成稳定悬浮细胞系的一个重要指标,并采用分步培养法获得了明旭的植株再生。     

大麦胚性悬浮细胞系的快速建立及其超低温保存

 禾谷类作物胚性悬浮细胞系的建立及其超低温保存是现代植物生物技术中的基础工作。本文分析了从大麦成熟胚培养快速建立胚性悬浮细胞系的两个关键步骤。愈伤组织的精心选择直接关系到建立细胞系的难易程度。悬浮培养过程中的细胞学观察可以用来判定2，4-D浓度和继代周期等因子是否需要调整。经过预培养和保护剂处理，用两步法冻存的大麦悬浮细胞能够高频率地恢复生长。在合适的条件下用玻璃化法冻存，TTC相对存活率可达51%，从恢复生长的细胞获得了再生植株。     

裸燕麦胚性愈伤组织调控及悬浮细胞系的建立

对裸燕麦成熟胚进行离体培养,结果表明,基因型和不同激素组合对成熟胚愈伤组织诱导具有重要作用;晋燕８号愈伤组织诱导率高达８５．７％;２,４—Ｄ对愈伤组织诱导必不可少。采用循环培养法对愈伤组织进行调控,获得了易分散、颗粒状的胚性愈伤组织,缓减了愈伤组织生活力衰退的速度。将松脆愈伤组织置于液体培养基中进行悬浮培养,得到分散性好、生长快的悬浮细胞系。悬浮系经分化培养,获得了成活率在９５％以上的健壮再生植株。     

马铃薯悬浮细胞原生质体培养及植株再生

试验所培养的 3个基因型的马铃薯悬浮细胞原生质体均获得再生植株。愈伤组织继代培养基、分化培养基及基因型对分化频率有显著影响     

甘薯胚性悬浮细胞遗传转化的研究

 以甘薯品种栗子香的胚性悬浮细胞为材料 ,以A2 0 8SE(pROA93)为供体菌株 ,对甘薯胚性悬浮细胞遗传转化的基本条件进行了研究。结果表明 ,对胚性悬浮细胞预培养 1～ 3d有利于转化 ,适宜的共培养时间为 4～ 5d ,适宜的Kan浓度为 5 0～ 75mg·L-1(悬浮培养阶段 )和 10 0mg·L-1(增殖培养阶段和植株再生阶段 ) ,适宜的Carb浓度为 10 0mg·L-1。获得了经GUS检测及PCR检测的转基因植株。     

宁夏枸杞自交亲和性分析

对宁夏枸杞的11个品种和3个新优系采取不同处理的套袋试验,并对不同处理后的坐果率、种子含量进行测定和比较,分析其自交亲和性。结果表明,宁夏枸杞自交亲和性存在较大变幅。参试的所有材料不存在无融合生殖现象;在人工栽培过程中,宁夏枸杞已由自交不亲和向部分自交亲和逐步演变,麻叶系是宁夏枸杞家系中的一种部分自交亲和的突变。不论是宁杞1号还是小麻叶这样的高度部分自交亲和材料,在异交时亲和指数都高于自交时的亲和指数,平均单果质量与之相对应有了大幅度的提升。正是在自交亲和水平上的这一变化,使麻叶系的各材料能够在生产应用的过程中确保产量,单品种大面积推广,而宁杞1号和0207则是这一特征的突出表现。高的自交亲和水平是枸杞新品种能否在生产上大面积单一品种种植的关键,自交不亲和是诸多材料落花落果的主要原因。     

宁夏枸杞炭疽病病原的生物学特性研究

对宁夏枸杞炭疽病原(Colletotrichum gloeosporioides Penz)的生物学特性进行了研究.结果表明:22～31 ℃为最适温度,有利菌落生长、产孢,接种孢子6 h可萌发.相对湿度90%(RH)以上时,有利孢子萌发.碳源以葡萄糖、甘露糖对菌落生长有利,可溶性淀粉对产孢有利.氮源以蛋白胨菌落生长最快,硝酸钾、蛋白胨、尿素产孢量较大.孢子喜在弱酸条件下萌发,pH值4～5时有利菌落生长.连续光照有利菌落生长、产孢.10℃以下,40℃以上不能正常产孢,萌发.致死温度为55 ℃.     

Changes of the Main Carotenoid Pigment Contents During the Drying Processes of the Different Harvest Stage Fruits of Lycium barbarum L

The test analyzed the regularity of biosynthesis and degradation of the main functional components, such as zeaxanthin, β-carotene, and esterified carotenoids in the fruit of Lycium barbarum L. in order to provide theoretical basis for improvement of processing condition, appearance quality, and preservation of carotenoids. RP-HPLC was adapted to assay the changes of the main carotenoids of the different harvested stage fruit during the drying processing. Quantification was realized using external standard with gradient elution. The results showed that zeaxanthin and β-carotene contents in fruits increased dramatically, 2-22 times that of fresh fruits at the beginning of the drying period. In the middle of drying period, degradation occurred to a some extent, and the fall fruit degraded to a large extent. At the end of drying period, zeaxanthin and β-carotene contents increased to a little extent until a balanced state is obtained. Zeaxanthin dipalmitate content had a total degradation to more than 40% at the beginning of the drying period, and increased a little at the middle period, then reached a balanced state finally. The total carotenoid content analysis showed that the summer fruit had higher carotenoid content than the fall fruit. The experiments demonstrated zeaxanthin and β-carotene contents in fruits increased and zeaxanthin dipalmitate decreased during the drying process, which had an effect on the production appearance.     

不同采摘期枸杞品质变化研究

通过测定宁夏不同地区枸杞头茬果、盛果期果实和秋果中多糖、总糖、氨基酸、甜菜碱含量及百粒重，分析不同采摘期枸杞品质变化。结果表明：枸杞头茬果中各成分含量高于盛果期果实，夏果中各成分含量高于秋果；不同采摘期枸杞品质发生变化，头茬果品质较盛果期好，夏果品质比秋果好，但秋果中各项指标均能达到枸杞营养成分的要求。此研究为枸杞果实的等级分类提供了依据，同时提示枸杞的秋果生产同样具有重要意义。     

不同产区枸杞品质比较研究

以宁夏惠北、园林场、舟塔3个产区的‘宁杞一号’枸杞为试材,对3个产区枸杞品质进行分析。结果表明,惠北、园林场和舟塔3个产区枸杞的可溶性固形物质量分数、总糖质量浓度、可滴定酸质量浓度、维生素C质量分数、可溶性蛋白质量分数、总黄酮质量分数和总酚质量分数都存在极显著差异。枸杞中可溶性固形物质量分数、可溶性蛋白质质量分数和总黄酮质量分数以舟塔的最高,分别为19.91%、1.23g/kg和1.09g/kg;可滴定酸质量浓度、维生素C质量分数、总酚质量分数以惠北的最高,分别为5.49g/L、0.29g/kg和3.29g/kg。园林场枸杞的可溶性固形物质量分数、可滴定酸质量浓度、维生素C质量分数、可溶性蛋白质量分数和总黄酮质量分数均低于惠北和舟塔,但总糖质量浓度高于另外两个产区,为68.50g/L。由此可见同一品种枸杞在不同产地其品质存在明显差异,舟塔产区枸杞品质相对较好。     

宁杞7号周年干物质与氮磷钾累积动态特征

【目的】明确枸杞干物质和氮磷钾周年动态累积规律,为枸杞施肥量和施肥时期的优化提供依据。【方法】以5年生宁杞7号整树为试材,采用树体分解法,分别于枸杞春梢期(4月)、花果期(5月)、盛果期(7月)、夏眠期(8月)、秋果期(9月)、休眠期(11月)整株挖取干周和树高相近的枸杞树各3株,分解为主干、枝条(分别按新生枝、1年生枝采集)、叶片、果实和根系样品,测定并分析其干物质及氮、磷、钾含量和累积量的动态变化。【结果】在枸杞周年生长过程中,干物质累积高峰集中在盛果期和秋果期;全物候期枸杞不同器官干物质累积量从高到低依次为:果实主干叶片根系新生枝1年生枝。枸杞叶片、果实中的氮、磷、钾含量显著高于其他器官;另外,枸杞叶片和果实中的氮、磷含量在春稍期、花果期较高,钾含量在花果期、秋果期较高。当经济产量为971.17 g/株时,枸杞氮、磷、钾累积量分别为72.80,11.87,32.62 g/株,累积高峰期出现在花果期和盛果期,其中新增氮、磷、钾累积量分别为58.41,7.98,27.19 g/株,多累积在果实、叶片中。【结论】宁杞7号枸杞每形成100 kg干物质,N、P(P_2O_5)、K(K_2O)养分需要量分别为13.56～15.58,4.90～9.22和5.50～8.97 kg/hm~2,需求质量比为1.00∶0.23∶0.48。应注意在干物质和养分累积的高峰期,即花果期、盛果期和秋果期保证养分供应充足。     

枸杞自交不亲和基因S-RNase密码子偏性分析

为了掌握枸杞S-RNase密码子及其使用偏好性,利用EMBOSS和Codon W软件分析了枸杞S-RNase基因密码子的使用偏好性,并将其与酵母、大肠杆菌和柑橘等10种植物S-RNase基因密码子偏好性进行比对,结果表明：枸杞S-RNase密码子偏好以A/T结尾;RSCU值显示该基因高频率使用的密码子有9个,相较其他物种同源基因存在明显的密码子偏好性差异。此外,较密码子使用偏好性分析结果,基于 S-RNase基因编码序列的聚类结果更能准确地反应物种之间的亲疏关系。比对其他物种该基因密码子的使用频率发现,同科物种差异较小,不同科物种差异较大;同时对比使用频率发现,枸杞S-RNase基因更适合导入酵母菌进行异源表达,但需要对其进行适当优化改造。     

微波辅助提取黄芪枸杞子中总多糖的工艺研究

[目的 ]建立黄芪枸杞子配伍中多糖的提取工艺,为后续应用及研究提供理论依据。 [方法 ]采用单因素实验考查提取时间、提取温度、料液比及微波功率4个因素对多糖含量的影响,然后利用L -9 ( 3 +4 )正交表设计实验方案。 [结果 ]最优提取工艺为提取时间30 min,提取温度45 ℃,料液比为1∶30,提取功率600 W。提取液多糖平均含量为13.84 mg·g^-1 ,RSD为4.56 %。 [结论 ]该工艺省时、高效、简单,稳定可靠。     

枸杞根腐病菌拮抗菌株的筛选与鉴定

目的揭示丛枝菌根(arbuscular mycorrhizal,AM)真菌−根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices)对枸杞植株的促生效果和抗根腐病能力。方法通过盆栽试验,设置不接种微生物(CK)、接种病原菌腐皮镰刀菌(Fusarium solani) (FS)、接种根内根孢囊霉(RI)和双接种(RI+FS)共4个处理,测定菌根侵染率、病情指数、植株生长指标及相关防御酶活性等,综合评价AM真菌对枸杞生长和抗根腐病的效果。结果RI处理后90 d,枸杞株高、茎粗、鲜质量和总叶绿素含量较CK显著增加54.86%、35.94%、126.91%和57.14% (P<0.05),其根系侵染率达45.61%;与FS处理相比,RI+FS处理下枸杞根腐病防治效果高达62.79%;RI+FS处理后枸杞植株体内多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性较FS显著提高60.81%、51.72%、48.13%、57.54%和88.31% (P<0.05)。结论根内根孢囊霉具有促进枸杞生长和增强植株对根腐病抗性等作用,这种抗性可能来源于AM真菌与枸杞根系形成的良好共生体系,可提高枸杞生理代谢水平,激发其抗病机制。