卡那霉素对川芎愈伤组织诱导和生长的影响

以川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)的根、茎、叶及其对应的愈伤组织为试验材料,研究不同浓度的卡那霉素对其诱导和生长的影响。不同的外植体对卡那霉素的敏感度不同,根的敏感度高于茎,茎的敏感度高于叶片。方差分析和总体观察的结果表明,在川芎的遗传转化中,卡那霉素的最佳抗性筛选浓度范围为20~40 mg/L。     

抗生素对国槐愈伤组织诱导和生长的影响

由于不同植物不同外植体对抗生素的反应不同,在进行国槐农杆菌介导的遗传转化研究之前,必须对新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)有抗性的抗生素种类及其使用浓度进行探讨.结果表明,卡那霉素在浓度达到150mgL时仍然没有完全抑制国槐叶片和茎段的生长;而遗传霉素在低浓度下对国槐愈伤组织的诱导和生长的抑制作用较卡那霉素明显.随着遗传霉素浓度的增加,愈伤组织形成的频率降低,外植体的死亡率上升.当遗传霉素的浓度超过10mgL时,叶片和茎段愈伤组织的诱导和生长已完全受到抑制.另外,研究发现不同外植体对遗传霉素的敏感程度不同,茎段较强,叶片稍弱茎段的抗生素致死浓度在8～10mgL之间,叶片的抗生素致死浓度8mgL左右.     

卡那霉素对紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响

[目的]研究紫花苜蓿叶片在诱导愈伤组织阶段、愈伤组织分化阶段对卡那霉素的敏感程度。[方法]确定卡那霉素对紫花苜蓿叶片愈伤组织形成的影响,并在形成愈伤组织的基础上,进一步确定卡那霉素对愈伤组织分化的影响。[结果]不同浓度的卡那霉素对紫花苜蓿叶片诱导愈伤与分化均有一定的抑制作用,而且随浓度升高,抑制作用增强;卡那霉素对愈伤组织分化阶段的敏感程度比诱导愈伤阶段高;分化阶段选择压力要控制在25 mg/L以下;延迟加入卡那霉素或在分化阶段降低卡那霉素浓度是对筛选转化苗的可取办法。[结论]该研究为利用农杆菌介导法转化紫花苜蓿奠定了基础。     

抗生素对薰衣草愈伤组织诱导和生长的影响

研究了卡那霉素（Kanamycin）和头孢霉素（Cefotaxime）对法国孟士德薰衣草（Lavandula angustifolia,cv．Munstead）愈伤组织诱导和生长的影响。结果表明：在以卡那霉素为抗性选择标记时,叶盘的选择压力为10mg／L,愈伤组织的选择压力为20mg／L;在以头孢噻肟钠为抑菌剂用于薰衣草叶盘遗传转化实验时,其浓度为200mg／L时即可有效抑制农杆菌的生长,同时又不会对薰衣草愈伤组织产生明显的伤害作用。     

抗生素对薰衣草愈伤组织诱导和生长的影响

研究了卡那霉素(Kanamycin)和头孢霉素(Cefotaxime)对法国孟士德薰衣草(Lavandula angustifolia,cv. Munstead)愈伤组织诱导和生长的影响.结果表明:在以卡那霉素为抗性选择标记时,叶盘的选择压力为10 mg/L,愈伤组织的选择压力为20 mg/L;在以头孢噻肟钠为抑菌剂用于薰衣草叶盘遗传转化实验时,其浓度为200 mg/L时即可有效抑制农杆菌的生长,同时又不会对薰衣草愈伤组织产生明显的伤害作用.     

卡那霉素对黄河蜜甜瓜愈伤组织抑制效果的研究

卡那霉素(KM)对黄河蜜甜瓜愈伤组织的作用结果表明,在一定浓度范围内,卡那霉素对黄河蜜甜瓜愈伤组织产生抑制作用,随着KM浓度增加,抑制作用增强。KM对下胚轴及子叶愈伤组织起完全抑制作用的临界浓度在75mg/L至100mg/L之间。子叶愈伤组织比下胚轴愈伤组织对卡那霉素更为敏感。     

抗生素对猕猴桃叶柄愈伤组织诱导及分化的影响

以中华猕猕桃79－2组培苗叶柄为实验材料，将其分别接在含不同浓度及类型的抗生素的培养基（MS＋6umol/L ZT 12umol/L IAA)^[1]中，于25℃，12h光照下培养，结果：（1）发现卡那霉素对猕猴桃叶柄愈伤组织诱导及分化的影响是敏感（大于或等25mg/L就天不定芽分化），四环素次之，链霉素影响第三；（2）抑制细菌细胞壁合成的抗生素（如青霉，头孢霉素等），当其浓度范围分别在0－500mg/L时，叶柄均能在短期内形成愈伤组织并分化出芽，随着浓度的增加，差别不显著。     

抗生素对台湾青枣茎段和愈伤组织生长的影响

探讨了卡那霉素 (Kan)、羧苄青霉素 (Cb)、头孢霉素 (Cef)和氨苄青霉素 (Amp) 4种抗生素对台湾青枣幼嫩茎段和疏松的愈伤组织生长的影响 ,初步确立了对台湾青枣 (ZiziphusmauritianaLam .)进行农杆菌介导的遗传转化研究中的抑菌和转化体的筛选策略 .Kan 75mg·L-1时 ,5 0d后茎段基本停止生长并开始变成白色 (白化 ) ;Kan2 5mg·L-1时 ,胚性愈伤组织生长受到明显的抑制 ,Kan 5 0mg·L-1时 ,其生长基本停止且开始褐变 ,Kan 75mg·L-1以上时胚性愈伤组织完全变褐 .适当浓度的Cb或Cef对芽的伸长生长有一定的促进作用 ,Cb +Cef却对芽的伸长出现轻微的抑制效应 .Amp对茎段生长有抑制作用     

黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生

【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,60,90,100,110,120,130,140和150 g/L蔗糖及1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基进行继代培养,每30 d继代1次,观察胚性愈伤组织的褐变情况及胚性分化能力,并用电子天平在超净工作台中记录胚性愈伤组织质量的变化。继代培养60 d后,将保存的胚性愈伤组织和体细胞胚移至含1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,待出现体细胞胚后移至MS培养基进行萌发,观察再生小植株的生长情况。【结果】将欧洲温室型黄瓜自交系14-1的子叶节,接种到附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上进行诱导培养后,子叶节一端的愈伤组织集中聚集于下胚轴处,之后有黄色胚性愈伤组织产生。在继代培养过程中,当培养基中添加的蔗糖为60～150 g/L时,胚性愈伤组织能保持胚性愈伤状态达60 d。之后将继代培养60 d后的胚性愈伤组织转接至附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,在蔗糖质量浓度为60 g/L条件下保存的胚性愈伤组织可诱导出正常胚状体,且能形成健康小植株。【结论】由黄瓜子叶节诱导出的胚性愈伤组织可在MS+60 g/L蔗糖的培养基上保存达60 d,之后能正常萌发形成胚状体,进而形成正常小植株。     

马齿苋种子萌发特性的研究

[目的]从生物学角度研究马齿苋种子的萌发特性。[方法]在室温条件下,测定3种光照(全光照、自然光照、全黑暗)、6种pH值(4.0、5.0、6.0、7.08、.0和9.0)、3种土壤类型(农田土、菜园土和河沙土)和3种浸种方式(蒸馏水0、.3%KNO3和0.3%KMnO4溶液)对马齿苋种子萌发的影响。[结果]马齿苋种子在自然光照和全光照条件下均有较高的萌发率,分别达95.33%和94.00%,而全黑暗条件下的萌发率则显著降低,仅有18.67%;该种子对pH值具有广泛的适应性,在pH值为4.0~8.0范围内均可萌发;该种子具有广泛的土壤适应性,河沙土最为适宜;经过0.3%KMnO4和0.3%KNO3处理12 h的种子发芽率(70%以上)要高于蒸馏水处理的(约60%)。[结论]0.3%KNO3和KMnO4浸种12 h能显著提高马齿苋种子的发芽率。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

向日葵水提液对马齿苋种子萌发及幼苗生长的化感作用

[目的]探索向日葵不同部位水提液对马齿苋种子萌发及幼苗生长的化感作用。[方法]以发芽势、发芽率、芽长、根长和化感效应指数等作为测量指标,研究了向日葵不同部位的水提取液对马齿苋种子萌发及幼苗生长的化感作用。[结果]向日葵不同部位对马齿苋种子萌发及幼苗生长存在化感作用,且化感作用为抑制作用,其大小依次为茎、花、叶、根;不同部位水提液对马齿苋的抑制作用随着浓度的增大而增大。[结论]为农业综合防治及生产提供了理论依据。     

马齿苋的开发利用

对马齿苋的形态特征、分布、营养、食用、药用等方面进行了初步探讨,为其开发利用提供了较为科学的理论依据。     

马齿苋营养成分及硝酸盐含量的测定

[目的]分析马齿苋的营养成分和食用安全性。[方法]通过国标法对野生马齿苋可食嫩茎叶的主要营养成分、氨基酸、维生素、硝酸盐和亚硝酸盐含量进行测定并将其与常见栽培蔬菜进行比较。[结果]马齿苋的水分、粗蛋白、粗脂肪、总糖、膳食纤维和灰分含量分别为88．9％、2．8、0．6、3．2、5．6和1．4g／100g。除总糖含量外,马齿苋中其余主要营养成分的含量均高于对比蔬菜。马齿苋的氨基酸总量为22．23mg／g,必需氨基酸总量为8．99mg／g,天冬氨酸含量高达3．24mg／g。马齿苋的β-胡萝卜素和抗坏血酸含量高于对比蔬菜,分别为1996μg／100g和24．2mg／100g。马齿苋的矿质元素含量普遍高于对比蔬菜,其钾和铁的含量分别为340．0和2．1mg／100g．铅和镉的含量仅分别为0．08和0．12mg／kg。马齿苋的硝酸盐和亚硝酸盐含量分别为891．80和0．11mg／kg。[结论]马齿苋是一种安全可食、具有绿色营养和医疗保健功能的野生蔬菜。     

基于Iso-Seq技术的野生马齿苋叶片转录组分析

基于全长转录组测序(isoform sequencing, Iso-Seq)技术对野生马齿苋叶片(对照、干旱和低温胁迫3种处理的叶片)转录组进行测序及其转录组信息分析的结果显示,总共得到641 732条原始片段,质控后得到合格的插入片段26 758 071条,总碱基量为44 Gb,利用CCS软件获得442 760条一致性序列,根据smrtlink软件得到全长的插入片段和全长的去除嵌合体的插入片段分别为391 258条和301 412条,去除冗余得到103 298条转录本,最终得到39 717条unigene,预测出40 952条LncRNA和38 419条CDS序列;并将unigene与Uniprot、Pfam、GO、KEGG、eggNOG、Pathway和Nr等数据库进行同源比对,其中36 381条unigene被注释,从这些unigene里查找到25 898个简单重复序列标记(simple sequence repeats, SSR)位点。利用差异表达分析软件DESeq2筛选不同处理组间的差异表达基因,对照和干旱处理、对照和低温胁迫处理及干旱和低温胁迫处理间分别鉴定出16 194(...     

马齿苋提取物的生物活性研究

以乙醇、丙酮、乙酸乙酯、苯、石油醚为溶剂,利用温浸法从马齿苋(Portulaca oleracea L.)干粉中获得了提取物,测定了各溶剂提取物对菜粉蝶(Pieris rapae L.)5龄幼虫的触杀、拒食和胃毒活性。结果表明:各溶剂提取物均表现出一定的触杀活性,其中,以乙醇提取物的触杀活性最强,处理24 h后,乙醇提取物对菜粉蝶的触杀活性校正死亡率为55.13%;处理48 h后,校正死亡率为64.86%;而各溶剂提取物的拒食和胃毒活性微弱。     

马齿苋多糖的乙醇分级纯化及抗氧化研究

[目的]研究马齿苋各级分多糖的抗氧化作用。[方法]以热水浸提马齿苋,采用35%、55%、75%和95%的乙醇分级醇沉马齿苋多糖提取物,得马齿苋各级分多糖POP1、POP2、POP3和POP4,分析其对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用。[结果]醇沉马齿苋多糖量的比例为POP1∶POP2∶POP3∶POP4为0.83∶1.25∶1.82∶2.16;各级分多糖抗氧化能力随多糖浓度的上升而增强,呈现良好的量效关系,并且在等浓度条件下其抗氧化能力也表现出明显的差异,清除能力为POP4>POP3>POP2>POP1。[结论]乙醇浓度95%醇沉的马齿苋多糖具有较强的抗氧化作用。