一种快速低廉的PCR探针标记方法

【研究目的】探针标记技术是分子生物学和基因工程研究中常用实验技术,需要发展高效、快速、低成本、安全、简捷的DNA探针标记方法;【方法】利用普通的Taq酶进行PCR探针标记,电泳和Southern杂交检测探针标记结果;【结果】电泳检测发现标记产物在电泳时相对非标记的对照表现明显滞后,表明探针标记成功;电泳条带清晰明亮,表明探针标记效率高;Southern杂交条带清晰,说明该方法标记的探针可用于Southern等分子杂交实验;【结论】利用普通的Taq酶进行PCR探针标记,是一种低成本、高效、快速的DNA探针标记方法。     

水稻不同组织总DNA对叶绿体标记分析的影响

叶绿体DNA标记是水稻分子生物学分析中的常用方法之一。但是水稻叶绿体DNA的提取过程复杂且耗时,为了简化分析步骤,本试验使用CTAB与SDS方法分别提取栽培水稻籼93-11和粳沈农265的叶、根、种子3种组织总DNA,选择3对叶绿体基因间隔区标记(psbA-trnH、petG-trnP和infA-rpl36)以及2对水稻叶绿体籼粳分类标记(ORF100和ORF29-TrnCGCA)进行PCR扩增。结果显示以它们种子、根为模板的扩增效果与叶片模板的扩增效果相一致,并与预期的结果相符合。最后对60份杂草稻种子总DNA进行叶绿体籼粳分类标记扩增分析,结果表明,杂草稻种子总DNA中扩增出目的片段同样能够进行有效的籼粳分类。这在一定程度上简化了水稻叶绿体标记的分析过程,加快分析速度。     

不同酶处理对浓缩苹果汁品质及香气成分的影响

以酶先科（AET）、康地恩（KDN）、诺维信（NOV）3家公司的系列酶制剂为对象,在生产工艺下研究不同酶的处理对浓缩苹果汁品质及香气成分的影响。通过试验对比分析不同酶处理前后苹果汁的色值、透光率等各项品质指标和香气成分的变化情况,结果表明康地恩果浆酶处理的出汁率最大,酶解得到的混浊苹果汁的品质指标最高;诺维信果浆酶处理得到的混浊苹果汁果胶含量最低,但AET系列酶制剂处理后澄清苹果汁果胶含量最小。不同酶制剂处理得到的澄清苹果汁香气成分都以酯类化合物为主,其中诺维信酶制剂处理的苹果汁香气中的酯类化合物最多。     

苹果不同HRM反应体系分析效果评价

高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析是一种新型的DNA多态性快速筛查技术。本研究以苹果品种富士和舞姿为试材,用来自苹果基因组的SSR标记CH03d11对不同反应体积、不同DNA浓度以及不同PCR退火程序下的HRM分型效果进行了测试与评估。结果表明:采用5μL反应体积可以获得与10μL或20μL反应体积相同的检测效果。在5μL反应体积中,DNA浓度小到0.25ng/μL时,PCR扩增及随后的HRM分析效果依然良好。另外,研究表明,采用降落PCR扩增模式也能取得良好的HRM多态性检测结果。     

不同产量水平鲜食型甘薯品种产量形成及品质差异分析

旨在研究不同产量水平的鲜食型甘薯品种生长发育、产量形成及品质的差异,为高产优质鲜食型甘薯品种的选育提供借鉴和指导。以2 个不同产量水平的鲜食型甘薯新品种‘泰薯14’和‘烟薯25’为材料,测定2 个品种不同生长时期茎叶生长、块根膨大速率、以及收获期产量和品质性状,分析其差异。结果表明,‘泰薯14’茎粗、蔓长、茎叶鲜重和单株叶面积均高于‘烟薯25’,‘烟薯25’的地下部发育早于‘泰薯14’,而‘泰薯14’生长后期地下部发育快于‘烟薯25’,栽苗后80 天‘泰薯14’块根单薯重和单株薯重均显著高于‘烟薯25’;‘烟薯25’的块根商品薯率高于‘泰薯14’,‘泰薯14’块根产量高于‘烟薯25’,薯干产量低于‘烟薯25’。‘泰薯14’的干物率、淀粉率和可溶性糖含量显著低于烟薯25,β-胡萝卜素含量显著高于‘烟薯25’,食味评分低于‘烟薯25’。茎叶较长的功能期使‘泰薯14’具有更大的高产潜力,而‘烟薯25’的品质及食味优于‘泰薯14’。     

不同晾房晾制白肋烟中性香气成分含量及感官品质的差异

采用气质联用仪对四川省6种白肋烟晾房(竹笆涂泥晾房、全板晾房、黑膜夹草晾房、全黑膜晾房、黑膜推杆晾棚、小青瓦晾房)晾制后烟叶中性香气成分进行了定量分析,并卷制单料烟进行感官评吸以确定最有利于提高白肋烟香气质量的晾房种类。结果表明,不同晾房晾制的中部叶总中性物质含量的排序为竹笆涂泥晾房黑膜夹草晾房全黑膜晾房黑膜推杆晾房全板晾房小青瓦晾房,上部叶的排序为竹笆涂泥晾房黑膜夹草晾房黑膜推杆晾房全板晾房全黑膜晾房小青瓦晾房,去除新植二烯后以黑膜推杆晾房晾制的烟叶总中性香气物质含量最低。竹笆涂泥晾房和黑膜夹草晾房巨豆三烯酮、大马酮、二氢猕猴桃内酯等主要类胡萝卜素类降解成分、茄酮及上部叶的氨基酸和糖类降解产物都较高,小青瓦和全板晾房晾制的中部叶总中性香气成分和上部叶类胡萝卜素降解成分含量多处于较低水平,黑膜推杆晾房和全黑膜晾房烟叶西柏三烯降解产生的茄酮含量显著低于其他晾房。中部叶感官评吸得分排序为竹笆涂泥晾房黑膜夹草晾房全黑膜晾房黑膜推杆晾房全板晾房小青瓦晾房。     

基于主成分分析的不同品种龙眼干品质综合评价

为评价不同品种龙眼干品质,构建综合评价体系,选取7个品种龙眼干对其12个理化指标进行测定,并结合主成分分析、聚类分析等方法对龙眼干品质进行综合评价.结果表明:所取龙眼干品种品质指标间差异显著,还原糖与总糖、可溶性糖与总糖、蛋白质与还原糖均呈极显著正相关(P＜0.01),氨基酸与可溶性糖呈极显著负相关(P＜0.01);主成分分析显示,前4个主成分累计方差贡献率达86.511％;通过综合得分进行排名可知,古山二号和石硖为品质较优品种;通过聚类分析得出,7个品种龙眼干可聚为3类,不同类别间品质存在较大差异,通过K值聚类分析将7个品种龙眼干聚为A、B、C三类,其品质从高到低依次为C类(古山二号、石硖)＞B类(FD310、储良)＞A类(草埔、凤大晚香、凤大晚蜜).聚类分析结果与主成分得分对龙眼干品种分类的判定结果较为一致,均可用于综合评价龙眼干品种品质.     

不同荞麦品种主要功能成分分析及评价

采用高效液相色谱法同时测定了48份来自不同产地的荞麦品种(系)种子中的粗多糖、芦丁、槲皮素、山奈酚、山奈酚-3-O-芸香糖苷5种主要功能成分含量。结果显示,不同产地、类型的荞麦品种,功能成分含量存在差异。荞麦的芦丁含量最丰富,平均含量达3.80 g·kg^-1。苦荞种子的粗多糖、芦丁、槲皮素、山奈酚、山奈酚-3-O-芸香糖苷的平均含量均远远高于甜荞,分别是甜荞的1.99、30.27、76.05、19.02、35.56倍,以上5种功能成分含量最高的品种(系)均来自贵州省的苦荞。     

基于主成分分析评价不同基地“贵长”猕猴桃品质特性

为了解修文县不同基地对“贵长”猕猴桃品质特性的影响,以修文县主基乡镇10个代表性基地的“贵长”猕猴桃为材料,测定不同基地“贵长”猕猴桃果实的外观形态、理化特性和营养成分,并对其进行差异性分析、主成分分析、综合评价和分类。研究表明：不同基地间“贵长”猕猴桃果实的外观形态、理化特性和营养成分差异极显著（P＜0.01）,通过主成分将外观形态、理化特性和营养成分等12个指标降至3个,反映了88.68%原始信息。通过综合评价对不同基地“贵长”猕猴桃果实进行综合评分,将10个基地“贵长”猕猴桃分为3类,说明基地对“贵长”猕猴桃品质特性的影响较大,建议将同一类基地果实进行分类鲜销或加工,确保品质的一致性。     

不同桃品种的品质及加工特性评价分析

为构建不同品种桃的品质评价方法及加工特性评价体系,为桃果实的品种筛选、品质分析、贮藏加工提供参考依据,以10个品种的蒙阴蜜桃果实为试验材料,测定其感官性状、质构特性、营养品质及加工特性。结果表明,不同桃品种在感官性状、质构特性、营养品质及加工特性上存在差异,供试的10个桃品种中,白桃九号在质构特性、VC含量、糖酸比、固酸比、果汁特性等方面均具有优势,是既适合鲜食又适合加工的优良桃品种;新世纪、黄金绣的果皮硬度、可溶性固形物含量和果汁感官评分均较高,可鲜食,也可加工成果汁;黄金毛桃的可滴定酸含量较高,口感偏酸,在加工过程中需要考虑降酸以保证产品口感;寒露蜜、红焗油、黄焗油、红芙蓉的VC含量较高,可加工成高VC含量的产品;黄金蜜三号、中蟠十七口感较为软糯,但可溶性固形物和可溶性糖含量较高,甜度高,适合鲜食,同时需要注意后期的运输贮藏环节。聚类分析结果将10个桃品种分为3个类群,可根据不同果实类群特性进行加工与贮藏。     

甘蓝型黄籽油菜主要品质性状间的相关性分析

【研究目的】为探讨不同田间环境条件下,同一甘蓝型黄籽油菜基因型各品质性状之间的相关关系,【方法】以甘蓝型黄籽油菜基因型GH01为材料,研究了由播期与密度形成的9种田间环境条件下粒色及其它主要品质性状间的相关性。【结果】结果表明：黄籽度与胚含油量、种子含油量间呈明显的负相关关系（相关系数分别为r=-0.6617和r=-0.7458*）,胚含油量与胚蛋白质含量、种子含油量之间仍保持着极其显著的负相关和正相关关系（相关系数分别为r=-0.9071**和r=0.8973**）。【结论】甘蓝型黄籽油菜黄籽度、种子含油量之间的相关关系随供试基因型的不同而发生变化,但另一些品质性状（含油量、蛋白质含量）间的相关关系并不因供试基因型间的差异而改变。     

五指山野菜对镉的积累及其机理研究

试验通过对五指山野菜对镉的积累及其机理研究,从而为利用五指山野菜对土壤进行植物修复这一技术提供理论基础。试验在盆栽的基础上进行了植物的地上部生物量和镉含量,可溶性蛋白、叶绿素,叶片质膜透性等生化指标的测定,以及分析上述指标与土壤中镉浓度的关系。通过试验,得出以下结果：随处理浓度的增加,根、茎和叶Cd含量逐渐上升,且根部变化趋势最突出;在土壤中处理浓度为50 mg/kg时,植物根、茎和叶含量就已超过超积累植物临界值,且当处理浓度为400 mg/kg时,三者含量分别高达6566.00、948.46、520.39 mg/kg;但为800 mg/kg时,植株出现死亡;在处理浓度为0~50 mg/kg下,转移系数和累积系数均大于1,但在100~400 mg/kg之间,转移系数逐渐变小;在0~50 mg/kg下可溶性蛋白逐渐上升,质膜透性、生物量和叶绿素变化差异不显著（5%）,但当处理浓度再增加时（100~400 mg/kg）,植物叶绿素、生物量、可溶性蛋白等呈现下降趋势,而质膜透性上升。以上结果说明五指山野菜是Cd超积累植物,且50 mg/kg时是五指山野菜正常生长的临界值,高于此浓度,将对其产生毒害,当浓度为800 mg/kg时,植株出现死亡;随处理浓度的增加,转移系数逐渐变小,说明植物在高Cd胁迫下阻止Cd向地上部分转移而产生更严重的毒害。     

5个秋葵品种果实性状、质地、营养品质及抗氧化性比较

秋葵果实具有食用和药用价值,用于生产保健食品和治疗多种疾病。比较了5个不同品种秋葵（咔里巴、红秋葵、杨贵妃、绿白一号、纤指）果实的性状、质地参数（硬度、黏着性、弹性、凝聚性、咀嚼性和回复性）、营养品质（总糖、还原糖、游离氨基酸、蛋白质、维生素C和粗纤维含量）以及抗氧化能力的差异。结果表明,绿白一号果实的各指标综合表现最优,可作为秋葵品质育种的重要材料。     

不同基因类型烤烟内在品质与香气质和香气量灰色关联度分析

采用灰色关联度法对烟叶内在品质与香气质和香气量进行分析。研究结果表明：与烟叶香气质关系最密切的因素是总氮、烟碱、蛋白质、总糖、还原糖,其次是钾、施木克值、氯、糖碱比和钾氯比;与香气量关系最密切的因素是总氮、蛋白质、烟碱、总糖、钾,其次是施木克值、还原糖、氯、糖碱比和钾氯比。     

水稻披垂叶突变体及其杂交后代耐冷性的鉴定与评价

在云南高海拔冷凉自然条件下对两个粳型水稻披垂叶突变体品系（MR304、MR312）及其与常规品种的杂交后代（F1、F2）进行了苗期耐冷性鉴定,在抽穗期对突变体及其杂交后代的花粉育性类型进行了分析,并在成熟期进行了相关经济学性状和生物学性状的考察。结果表明,在苗期的耐冷性鉴定中,突变体及杂交亲本均为抗型(R);杂交后代F1中南40/MR312、滇粳优5号/MR304、Ansanbyeo/MR304为中抗型（MR）,滇粳优5号/MR312为感型（S）,其余均为抗型（R）。抽穗期亲本银光花粉可育率最高,为88.9%;杂交后代F1组合中只有银光/MR304的花粉可育率最高,为94.5%,超过对照（92.5%）,组合Ansanbyeo/MR304的花粉可育率最低。亲本银光的结实率超过对照（70.9%）,达到82.4%,突变体MR304、MR312的结实率低,分别为26.2%和5.0%;F1中两组合（银光/MR304、银光/MR312）的结实率均超过对照或亲本。该研究揭示了利用水稻披垂叶突变体产生的F1杂种优势可以增强杂交稻在高海拔冷凉条件下的耐冷性优势;抽穗期的花粉育性大小是鉴定杂交后代（F1）植株耐冷性强弱的重要指标。     

甘肃麦积山景区核桃坚果品质比较研究

甘肃麦积山景区是秦岭生物多样性的重要组成部分和西段的代表地段,景区内核桃原生分布,栽培历史悠久。在麦积山景区筛选了17个核桃优树,在山东泰山筛选了7个核桃优树,连同栽培品种香玲、元林,对比分析了麦积山景区核桃优树的坚果性状。结果显示,麦积山核桃优树的果实较小,坚果重平均为9.98g,而泰山核桃优树的坚果较大,坚果重平均达22.49g。泰山核桃优株的平均坚果重、壳厚、横径、缝横径极显著高于麦积山核桃优株,纵径显著高于麦积山核桃优株,但出仁率极显著低于麦积山核桃优株。麦积山核桃优树脂肪和蛋白质含量的平均值和泰山核桃优树脂肪和蛋白质含量的平均值没有显著差异,但供试的所有优树间脂肪和蛋白质含量有极显著差异,麦积山优树GS-17的脂肪含量高达70.24%,GS-12的蛋白质含量达到了20.31%。供试优树的脂肪酸和氨基酸组成相差不大,但必须氨基酸均比美国国家营养数据库公布值为高。研究为更好地利用麦积山景区的核桃资源提供了科学依据。     

施氮水平对两个冬小麦品种面粉色泽及面条品质的影响

在大田条件下,研究了不同施氮水平对豫麦49-198和兰考矮早八面粉色泽及面条品质的影响。结果表明,两品种面粉及面糊的色泽等级值(CGV)、红色度(a*)和黄色度(b*)随施氮量的增加而增大,亮度(L*)随施氮量的增加而下降。随着放置时间的延长,面片的CGV、a*、b*升高,而L*值下降。质构仪分析表明,随着施氮量的增加,两品种面条的硬度、黏合性、咀嚼性呈上升趋势,以360 kg hm^-2处理的值最高,并且和其他处理之间的差异达显著水平。     

The Differences in Grain Weight and Quality Within a Rice (Oryza sativa L.) Panicle as Affected by Panicle Type and Source-sink Relation

The effects of panicle type and source‐sink relation on the variation in grain weight (GW) and quality within a panicle were investigated using four japonica (Oryza sativa L.) varieties differing in grain density and two source‐sink adjusting treatments. There were significant differences in GW and filling grain percentage (FGP) among superior and inferior grains for compact‐panicle varieties (Xiushui 994 and Xiushui 63), while not for loose‐panicle ones (Xiushui 11 and Chunjiang 15). The floret‐removal treatment significantly improved the development of inferior florets and reduced the differences in FGP and GW between superior and inferior grains for the compact‐panicle variety, while leaf‐deleting treatment reduced FGP and GW of both superior and inferior grains. For the loose‐panicle varieties, the two treatments had little effect. The difference in chalky grain percentage (CGP) and amylose content (AC) between the two kinds of florets was larger in compact‐panicle varieties than in loose‐panicle ones. Both floret‐removal and leaf‐deleting treatments caused the changes in CGP and AC of superior or inferior grains for compact‐panicle varieties, but not for loose‐panicle ones. The difference in starch content (SC) between superior and inferior grains was much larger for Xiushui 994 than for Xiushui 11, and the two varieties differed in the response of SC to the change of source‐sink relation. The differences in AGP‐glucose pyrophosphorylase (ADPG‐Ppase), starch branching enzyme (SBE) and soluble starch synthase (SSS) activities between the two kinds of grains were basically same for the two varieties, with superior being higher than inferior ones at early filling stage and smaller at later stage. In floret‐removal treatment, the activities of ADPG‐PPase, SSS, and SBE in superior grains of Xiushui 994 decreased at early filling stage and increased at middle or later stages. Meanwhile, the activities of SSS and SBE in both kinds of grains at early filling stage, and of ADPG‐PPase and granule‐bound starch synthase (GBSS) in inferior grains over the whole stage were increased. In leaf‐deleting treatment, the activities of ADPG‐PPase and SBE at early filling stage and GBSS at later filling stage were reduced in superior grains, while SSS activity at middle filling stage and SBE activity at later stage were increased.     

1-MCP和乙烯利处理对马兰头货架品质的影响

以马兰头为试材,研究0.5μL/L的1-MCP和0.1 g/L的乙烯利处理对马兰头常温(20±1)℃货架品质的影响。结果表明,常温货架期间,0.5μL/L的1-MCP处理可保持马兰头叶片中较高的叶绿素含量,延缓可溶性蛋白、VC、h°值以及还原糖含量的下降,抑制失重率的上升和游离氨基酸的积累,从而提高了马兰头的贮藏品质,延长其货架期至105 h;而0.1 g/L乙烯利处理促进马兰头叶片失重率的上升、游离氨基酸的积累,加快VC、还原糖及叶绿素含量的下降,货架期提早结束。     

盐地碱蓬SsDHN基因的功能分析

脱水素(DHN)是一种在逆境下起重要作用的功能性蛋白.为了分析脱水素蛋白在抗盐碱方面的作用机制,本研究以从盐地碱蓬中克隆获得的脱水素(SsDHN)基因为研究对象,对基因序列进行生物信息学分析,结果表明盐地碱蓬的脱水素蛋白为部分无序的亲水性蛋白,含1个S-片段和3个K-片段,属于SKn型脱水素蛋白.通过实时荧光定量PCR...