香菇单核原生质体的制备

从食用菌菌丝体中制备出的单核或同核原生质体,是一种不同于孢子单核体的新的育种材料,是原生质体技术在食用菌杂交育种中的重要应用.它为充分利用丰富的野生种质资源,扩大现有栽培种的基因型,缩短育种周期开辟了一个新的途径.本文以香菇为材料,研究了其单核原生质体的形成及其规律.     

香菇原生质体单核体的再生与交配型的关系

在８个香菇菌株原生质体单核体交配型的测定中,有４个菌株测定出两种交配型,其余４个菌株只测得一种交配型。在得到两种交配型的菌株中,其交配型比例也不是１∶１。进一步的实验表明,产生这一现象的主要原因与两种交配型原生质体单核体的再生能力不同有关。在申香２号菌株１０７个单核体中,ＡｘＢｘ交配型只有２６个,而且都是在再生阶段的前期产后的,后期出现的单核体则都是ＡｙＢｙ型菌落。     

香菇原生质体单核体杂交方法试验

本试验通过三种方法收集菌丝体 ,经原生质体制备与再生后得到其单核体 ,将不同菌株的单核体杂交配对后得到了不同于亲本的杂交后代     

采用原生质体单核体杂交技术创新香菇种质资源

以野生香菇和国内主栽菌株‘931’‘168’"荷香1号"为亲本材料,采用原生质体单核杂交育种方法选育香菇新菌株,并研究了杂交菌株与亲本菌丝长势、长速、产量和子实体形态等农艺性状的关系。结果表明:杂交菌株LNX3、LNX5和LNX6在农艺性状、产量和品质上均较亲本有明显优势,具有进一步开发的潜力。     

香菇孢子单核体与原生质体单核体遗传差异分析

本研究利用RAPD技术，对香菇孢子单核体和原生质体单核体的遗传差异变化进行了分析。9个随机引物共扩增出79条DNA带，在此基础上分析并构建了遗传相关聚类图。结果表明以交配型基因为标记的孢子单核体遗传变异大于原生质体单核体，同种交配型的孢子单核体遗传相似性分别为66．3％和71．7％，而原生质体单核体的遗传相似性为98．7％、93．7％。     

浅谈香菇单核原生质体杂交亲本的选择及后代性状分析

香菇菌种选育的主要手段有引种驯化、杂交育种、细胞工程育种及基因工程育种四种。当前应用最普遍的是引种驯化和杂交育种,在杂交育种中有单孢杂交、单双核杂交、单核原生质体杂交等方式,但是无论采用哪种方式杂交,亲本的选择都是不可缺少的,而且是十分重要的环节。近年来我们每年都选用不同亲本进行大量的杂交配对及杂交菌株的筛选工作。本文就1992年采用单核原生质体进行杂交得到的后代,从亲本选择、不同栽培方式的生物学效率、菇的质量诸方面进行分析评价。 我们选择了8个菌株做亲本(表1),其中包括2个栽培种,6个野生种。从大量的杂交后代中选择了138个组合,采用人造菇木和塑料袋栽培两种方式进行筛选,根据亲本的不同来源、遗传和生态特征,设计了三种组合类型(表2)。即栽培种×野生种、野生种×野生种、栽培种×栽培种,在栽培种×野生种的组合中,野生种又分别选用了在人工栽培条件下出菇和不出菇两种类型作为亲本。     

香菇孢子单核体原生质体的制备和再生的研究

本研究以香菇四种交配型的孢子单核本为材料,用酶解的方法制备出高得率的具四种交配型的原生质体,且均可再生。研究表明：四种交配型原生质体的再生率大小,与原生质体的得率高低并不是一致的,但与菌丝生长速度、再生菌落出现的时间以及交配型之间有一定的关系。这为原生质体的再生能力是受交配型基因控制的推断提供了实验证据。单一交配型的单核原生质体的大量获得也为蕈菌遗传学提供了一种新的研究材料。     

香菇原生质体单核体杂交后代性状变异初探

以香菇菌种939和本所实验菌株中19为亲本,进行原生质体单核体分离和配对杂交。对杂交组合和亲本菌株的菌盖直径、厚度,菌柄长度、直径等性状进行考察。结果表明,10个杂交组合在子实体外观形态上与亲本存在明显的差异,且原生质体单核体杂交后代的农艺性状表现规律与亲本交配型的类型存在一定的关联。     

香菇金针菇原生质体再生的研究

原生质体技术的应用为食用菌育种开辟了新天地,国内外均进行了以原生质体为材料的食用菌育种的研究。原生质体的制备与再生是开展以原生质体为材料育种工作的基础。笔者在进行原生质体融合育种研究的同时,也重点研究酶解时间、渗透稳定剂和再生培养基对香菇、金针菇的野生型和营养缺陷型单核体菌株原生质体释放、再生的影响,以及它们的再生过程,为食用菌原生质体的融合育种、诱变育种提供参考。     

用单核原生质体杂交育成香菇新菌株申香8号

以香菇栽培种Le1和野生种0426为亲本,通过原生质单核体杂交选育出申香8号。它具有优质、高产、抗逆性强和栽培适应性广等特点,现已成为我国香菇主产区的主栽种之一。这证明原生质体单核化技术在香菇育种上是行之有效的。     

香菇原生质体工程菌株的构建研究：Ⅰ.香菇原生质体的分离与再生行为

本研究通过电镜观察与酶解分析确定香菇菌丝细胞壁组成，并进行了双核菌丝原生质体的分离和培养。酶解过程中，菌丝原生质体一般只从菌丝顶端等新生部位释放出来，合适的渗透剂，菌龄和酶解温度是原生质体得率的重要保证；原生质体再生菌丝过程是一个间歇性的依赖于原生质团涌动流向的过程，再生菌丝的形成经历了原生质体形成突起－哑铃状－分枝状等不同形态类型的再生阶段；再生菌丝体在形态上没有观察到锁状联合，栽培后末能结实，     

松茸与香菇原生质体融合的研究

以获得利于半人工或人工栽培优良松茸菌株为目的，利用松茸与香菇分离纯化的再生原生质体对潮霉素自然抗药性的差异，结合原生质体灭活为融合子筛选的依据。在PEG、Ca^2 系统中以30％PEG4000，30℃处理25min，诱导松茸与香菇良用菌原生质体融合，获融合子5株，融合率0．45％。     

平菇和香菇原生质体融合育种研究简报

平菇和香菇原生质体融合育种研究简报李成一，王秉峰，卢洪英，路等学（甘肃省科学院生物研究所兰州７３００００）平菇、香菇皆属四极性异宗结合的食用菌类，其异核双核体菌丝（简称异核体）均具“锁状联合（Ｃｌａｍｐｃｏｒｍｅｃｔｉｏｎ）”结构。异核体菌丝经酶解后...     

从香菇原生质体克隆到子实体的研究

检测了１００多个香菇双核单细胞（原生质休克隆）的菌丝生长与产生的子实休的产量，这些原生质体克隆是从香菇菌丝原生质体双核细胞分离的，它们表现出了各种营养菌丝的生长速度，与一般的双核细胞比较它们没有明显差异，培养在营养段木上的１３４个原生质体克隆在产量上范围很广，其中４个比原双核细胞的子实体干重增加了３０％～４０％，而且这种高产可持续几年，这一结果表明香菇原生质体克隆可增加其菌种的子实体形成能力。     

香菇的原生质体融合育种技术

蕈菌菌株的选育有自然选育、单孢选育、杂交选育和细胞融合选育等多种方法。在掌握了分离纯化技术之后,用采集到的野生或栽培的蕈菌,用优良型的菌株组织或孢子进行分离纯菌株,而后进行人工栽培,经多次栽培菌株均能重现优良特性。自然选育缺点是成功率低,即菌株不能再现优良特性或优良特性不稳定。单孢菌株选育较适合于同宗结合的蕈菌（如草菇、双孢菇等）。通过挑取单孢子,再经过人工栽培、生理生化研究等,从中选育出优良菌株。单孢菌株选育方法较简便,但工作量大,盲目性亦较大。单孢杂交育种,诱变育种,细胞融合选育菌株是近年发…     

香菇原生质体工程菌株的构建研究——I.香菇原生质体的分离与再生行为

本研究通过电镜观察与酶解分析确定香菇(Lentinula edodes)菌丝细胞壁组成.并进行了双核菌丝原生质体的分离和培养.研究发现:酶解过程中,菌丝原生质体一般只从菌丝顶端等新生部位释放出来.合适的渗透剂、菌龄和酶解温度是原生质体得率的重要保证;原生质体再生菌丝过程是一个间歇性的依赖于原生质团涌动流向的过程,再生菌丝的形成经历了原生质体形成突起-哑铃状-分枝状等不同形态类型的再生阶段;再生菌丝体在形态上没有观察到锁状联合,栽培后未能结实,初步判断为单核菌株.     

原生质体诱变技术选育香菇菌株研究

本文比较了双核菌丝制备的香菇原生质体在不同培养基上的再生率,观察了原生质体再生过程.以存活率37%的剂量进行紫外线诱变处理后,选出102份再生克隆,从中选出在CM培养基和木屑培养基上菌丝长速较快的材料23份,进行栽培试验,其中10份产量提高,出菇较早.在随后的二次或三次组织分离后代的栽培试验中,大部分材料保持了增产、早熟的性状,经显著性测验.其中2份材料的产量显著提高.本研究初步建立了用原生质体诱变技术选育香菇菌株的试验程序.