鸡传染性法氏囊炎活疫苗(B87株)生产工艺的改进--鸡胚绒毛尿囊膜渗透接种法应用试验

采用绒毛尿囊膜渗透法给鸡胚接种病毒,收获感染的胎儿及绒毛尿囊膜,制备鸡传染性法氏囊炎（B87株）活疫苗,相比于传统的人工气室绒毛尿囊膜接种法和尿囊腔接种法,可降低鸡胚早死率且无存活鸡胚,提高了鸡胚利用率,降低了生产成本.     

鸡传染性法氏囊病诊断和防制研究进展

<正>鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种急性、高度接触性的免疫抑制性疾病,1957年由Gosgrove在美国首次发现,1980年以后该病传入我国并大面积暴发和持续流行,成为对养鸡业危害较大的疫病。本文就IBD的诊断及防制研究进展作一简述。1诊断技术1.1病毒分离与鉴定取发病鸡的法氏囊和脾,经研磨后制成悬液,接种到9~12日龄的SPF鸡胚绒毛尿囊膜上,受感染的鸡胚在3~5天死亡,可见到被接种的胚胎水肿、出血,最后用已知的阳     

鸡传染性喉气管炎弱毒活疫苗生产工艺的优化及改进试验

《中华人民共和国兽用生物制品规程》规定,在生产鸡传染性喉气管炎弱毒活疫苗时,采用鸡胚尿囊腔接种和人工气室绒毛尿囊膜接种工艺生产成品。由于人工气室绒毛尿囊膜接种早死胚多,而且工艺比较繁琐,所以我国大多数生产企业在生产中多采用尿囊腔接种方法,但尿囊腔接种后病毒繁殖时间要比人工气室绒毛尿囊膜接种后延长1~2 d,增加了孵化成本,而且绒毛尿囊膜病变(增厚、水肿等)也不如人工气室绒毛尿囊膜接种后产生的病变严重(膜重)。为此,借鉴了鸡痘鹌鹑化弱毒活疫苗的新生产工艺———鸡胚绒毛尿囊膜渗透法[1],并将此方法用于鸡传染性喉气管炎…     

鸡传染性喉气管炎活疫苗生产工艺的改进——鸡胚绒毛尿囊膜渗透法接种应用实验

采用鸡胚绒毛尿囊膜渗透法给鸡胚接种病毒,收获感染的鸡胚绒毛尿囊膜制备鸡传染性喉气管炎活疫苗,相比于传统的人工气室绒毛尿囊膜接种法和尿囊腔接种法可降低鸡胚的早死亡率,提高鸡胚利用率,降低生产成本,提高单产量。     

鸡传染性法氏囊病毒鸡胚适应株的培育

将鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）野毒株分别经绒毛膜和尿囊腔途径接种于鸡胚进行传代培养，应用AGP法和Dot－ELISA法分别对每代收取的不同培养物（绒毛膜和尿囊液）进行检测。结果显示，经绒毛膜途径传至第3代，尿囊腔途径传至第4—5代，即成为鸡胚完全适应株，可作为鸡胚培养病毒用毒种，方法应选择操作简便、且收获物质量高。数量多的尿囊腔接种途径。     

肉鸡病毒性关节炎的诊断与防制

1病原 肉鸡病毒性关节炎是由呼肠孤病毒引起的传染病。病原为禽呼肠孤病毒,病毒可接种于鸡胚进行培养,病变的腱鞘经常规处理后经卵黄囊接种于5-7日龄的鸡胚,经5-6天后鸡胚死亡,胚体充血和出血,绒毛尿囊膜混浊,脾脏肿大,心肌有坏死灶。绒毛尿囊膜接种病毒时在其绒毛尿囊膜上形成大小不等隆起的疱斑。1日龄肉用雏鸡足垫内接种,第二天即可引起局部红肿等典型的病毒性关节炎。     

应用鸡胚培养试验检验鸡病毒病(Ⅲ)

4.5 鸡传染性支气管炎病料呼吸道分泌物,有病变的气管、肺。制成5—10倍悬液。接种途径经绒毛尿囊膜接种8—10日龄鸡胚。培养结果检查即便病料中含有鸡传染性支气管炎病毒,初次接种鸡胚时,亦缺乏显著病痕。然而,当用接种鸡胚尿囊液,经鸡胚连续继代2～3次后,再接种鸡胚时,便可出现本病特征性病变。鸡胚的死亡率,随继代次数的增加而增高,死亡时间亦随着提前。本病在鸡胚的特征性病变为,出现僵胚(侏儒胚)其大小有时仅为正常胚的     

不同接种途径对IBDV致死鸡胚时间的影响

不同接种途径对ＩＢＤＶ致死鸡胚时间的影响张雅坤胥桂华辽宁省益康生物制品厂辽阳１１１０００收稿日期：１９９７－０３－２４鸡传染性法氏囊炎病毒（ＩＢＤＶ）可通过鸡胚增殖，其接种途径可采用绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）接种和尿囊腔（ＣＡ）接种。根据我厂生产ＩＢＤ苗的...     

一例鸡传染性囊病的诊断及病毒分离鉴定

为获得目前引起传染性囊病的病毒对2017年5月山东青岛某蛋鸡养殖场疑似感染传染性囊病的病例进行了诊断和病毒分离。采用琼脂糖免疫扩散试验诊断该病;SPF鸡胚培养、动物接种分离培养病毒,用RT-PCR和琼扩试验鉴定鸡胚分离病毒。结果在琼脂糖免疫扩散试验中该病毒能与传染性囊病阳性血清呈现白色沉淀线;在SPF鸡胚接毒后第3~4天出现鸡胚死亡现象,且胚体皮下出血、绒毛尿囊膜增厚混浊等特征;RT-PCR反应中该抗原能利用特异性引物扩增出目的片段;对30日龄SPF鸡攻毒试验中出现腔上囊肿大,黏膜面有点状出血等病变。结果表明,在实验室确诊了传染性囊病并在鸡胚中成功增殖了该病毒。     

鸡胚和雏鸡接种ALV-J相关急性纤维肉瘤浸出液的致病性比较

为了比较鸡胚接种ALV-J相关急性纤维肉瘤浸出液对胚体及雏鸡的致病性,将含ALV-J相关病毒的肉瘤浸出液分别经5日龄胚卵黄囊、11日龄胚绒毛尿囊膜、1日龄雏鸡腹腔接种,比较不同接种方式对SPF鸡胚及雏鸡的致病性.结果表明,5日龄卵黄囊接种的鸡胚在18～22日龄死胚率为14/30,肿瘤发生率为8/14; 11日龄绒毛尿囊膜接种的鸡胚在18～22日龄引起鸡胚死亡率为17/30,肿瘤发生率为6/17.对雏鸡的致病性比较表明,绒毛尿囊膜接种的13只出壳雏鸡全部死亡,有11只出现肿瘤.结果提示,绒毛尿囊膜接种的致病性不仅高于卵黄囊接种,也高于1日龄雏鸡接种.绒毛尿囊膜接种不仅肿瘤发生率高,且发生得更早、更快,可作为这种急性纤维肉瘤进一步作人工造病的实验模型.     

安徽地区IBDV超强毒株的分离鉴定和VP2基因序列分析

经鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种、易感鸡接种试验、电镜观察,从安徽地区疑似病鸡的法氏囊组织分离到3株传染性法氏囊病毒。分离株人工感染4周龄鸡,致死率分别为92%、83%、67%。接种9～10SPF鸡胚测得的鸡胚半数致死量(ELD50)分别为10-6.8/0.2mL、10-5.4/0.2mL、10-4.6/0.2mL。应用Nested-PCR分别对3株分离株VP2基因高变区进行克隆测序和序列分析,结果表明:3个分离株与国内外参考超强毒株的核苷酸同源性为97.2%～99.5%,氨基酸同源性为99.3%～100%,VP2高变区核苷酸和推导的氨基酸符合传染性法氏囊病病毒超强毒株特征。     

鸡传染性喉气管炎病毒培养特性的研究

本试验从发病鸡群分离一株鸡传染性喉气管炎病毒(命名为NM98a)，并用分离株和ILT王岗株对鸡胚绒毛尿囊膜、鸡胚尿囊腔及鸡胚肾细胞上培养进行比较研究。结果表明：ILTV经不同途径接种鸡胚和鸡胚肾细胞上培养，在鸡胚绒毛尿囊膜和鸡胚肾细胞上引起的病变不同，但最终增殖达到的感染性病毒量没有明显区别。鸡胚尿囊腔接种是ILTV增殖最佳途径。     

不同培养方式对呼肠孤病毒抗原制备的影响

呼肠孤病毒能在鸡胚内生长,可经接种卵黄囊或绒毛尿囊膜进行繁殖。通过对比不同的接种和收获方式(绒毛尿囊膜接种收获尿囊液、绒毛尿囊膜接种收获绒毛尿囊膜、卵黄囊接种收获尿囊液、卵黄囊接种收获绒毛尿囊膜)所收获的病毒样品对病毒效价、病毒稳定性、对雏鸡毒力、免疫原性等方面的影响,最终确定了在繁殖呼肠孤病毒时使用绒毛尿囊膜接种收获绒毛尿囊膜的效果最佳,为呼肠孤病毒疫苗的研究奠定基础。     

鸡传染性喉气管炎的诊断

从发病鸡场病鸡气管中分离到一株能使鸡胚绒毛尿囊膜产生典型痘斑的病毒。鸡胚分离物能使健康鸡发生与病鸡同样的临床症状。病愈后的血清与鸡传染性喉气管炎诊断抗原出现阳性反应,并能中和鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗,使绒毛尿囊膜不产生痘斑。鸡胚分离物置400倍“畜禽消毒液”和“抗毒威”溶液中,室温30分钟,失去在鸡胚中产生痘斑的特性。从临床症状和鸡胚分离物的各种特性证明,该场流行的为鸡传染性喉气管炎。     

单色光对产蛋期蛋鸡脾脏组织结构及脾细胞增殖的影响

为了解传染性法氏囊病病毒（IBDV）广西流行株的遗传变异规律,本研究通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）接种的方法对2006年-2007年间采集自广西各鸡场的疑似传染性法氏囊病（IBD）的病料进行病毒分离,设计针对VP2高变区（vVP2）g／引物对分离物通过RT—PCR进行鉴定及序列分析。共分离出9个IBDV毒株,其ELD50在105／0．2毫升～106．5／0．2毫升之间。     

扶正解毒微粉与扶正解毒散体外抗IBDV药效对比试验

将100℃浸泡制备的扶正解毒微粉和扶正解毒散溶液分别用生理盐水稀释成5个浓度,每个浓度经绒毛尿囊膜接种10～12月龄SPF鸡胚6枚,每胚0.2 mL,测定其对鸡胚的安全浓度;然后将由扶正解毒微粉和扶正解毒散制备的溶液在安全浓度下倍比稀释至500、250、125μg mL-13个浓度,分别与传染性法氏囊病毒(IBDV)在37℃共同培育1 h后,每个浓度中药和法氏囊病毒混合液经绒毛尿囊膜接种10～12月龄SPF鸡胚6枚,每胚0.2 mL,测定其ELD50,计算各病毒滴度。结果表明,在所选浓度范围内扶正解毒微粉和扶正解毒散制备溶液都可以降低病毒滴度值,且高浓度效果优于低浓度;同浓度扶正解毒微粉效果优于扶正解毒散。     

利用SPF鸡胚分离传染性法氏囊病病毒超强毒的研究

传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒(vvIBDV)不适应鸡胚成纤维细胞培养,其分离鉴定通常采用直接接种无特定病原体(SPF)鸡的方法。然而该方法需要特殊设备,成本较高,较繁琐。研究旨在探讨SPF鸡胚作为IBDV分离工具的可行性,将IBDV阳性病料混悬液通过绒毛尿囊膜途径接种9~11日胚龄SPF鸡胚,并盲传三代成功分离获得vvIBDV(IBD16GX01株)。分离毒各代次序列一致,且与SPF鸡分离氨基酸同源性100%。结果表明,SPF鸡胚可用于vvIBDV的分离鉴定,为vvIBDV分子流行病学研究奠定基础。     

鸡传染性喉气管炎疫苗生产工艺改进初探

在鸡传染性喉气管炎活疫苗生产中，用尿囊腔接种法代替绒毛尿囊膜接种法，收获的胚液和绒毛尿囊膜的含毒量(EID5D)均可达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》对制苗的要求，提高了种蛋的利用率。     

鸡马立克氏病病毒的分离与初步鉴定

从鸡马立克氏病病鸡拔取羽毛根 ,经处理后接种于 4日龄鸡胚绒毛尿囊膜。盲传到第六代出现典型的马立克氏痘斑。用第7代鸡胚绒毛尿囊膜研磨液与MD阳性血清进行琼脂扩散试验 ,结果出现了明显的白色沉淀线。此结果表明已分离到马立克氏病毒。     

鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗免疫异常的分析

鸡传染性喉气管炎(ILT)弱毒疫苗系用鸡传染性喉气管炎病毒弱毒株接种SPF鸡胚，收获感染鸡胚的绒毛尿囊膜，混合研磨，加适宜稳定剂，经冻干制成。该苗用于预防鸡传染性喉气管炎。