西宁市猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

为了解西宁市部分地区猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的感染状况。应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对采自西宁市3个县6个规模猪场的365份血清样品进行PCV2抗体检测,并运用荧光定量PCR技术同步进行PCV2核酸检测。结果显示:PCV2抗体检测的平均阳性率为71.23%,猪场PCV2抗体阳性率最高达95.83%。荧光定量PCR对样品进行病原检测,阳性率达49.94%,此次调查反映了西宁市部分地区PCV2的感染情况,为西宁市PCV2的防控工作提供理论依据和指导。     

某规模化猪场猪2型圆环病毒病流行病学调查

为了弄清猪2型圆环病毒感染在该猪场的感染状况、流行特点及优势基因型等情况。采用ELISA检测技术和PCR技术,对新疆某规模化猪场的不同生产阶段猪群进行猪2型圆环病毒(PCV2)抗体检测和基因型检测。结果猪圆环病毒病(PCVD)在该猪场猪群中的平均抗体阳性率为72.41%,不同生长阶段的猪群感染情况分别为哺乳仔猪69.74%、断奶仔猪62.75%、育肥猪77.88%、母猪81.67%以及种公猪83.33%;对采集的11份抗体阳性的断奶猪只的脏器病料PCR检测,其中5份为PCR阳性(45.45%),经克隆测序分析发现,该猪场5株PCV2毒株序列之间的相似性在99.3%⁹9.9%之间,且均属于PCV2b这一亚型。结果表明,该猪场的PCV2感染流行已非常严重,整体流行特征表现为猪只日龄越大,感染情况越严重,且流行的优势基因型为PCV2b亚型,应该引起养殖户的高度重视,需要立即采取针对有效的防治净化措施。     

猪场母猪与仔猪猪圆环病毒2型感染情况调查

为了解目前母猪和仔猪猪圆环病毒2型(PCV2)感染情况,本试验对来自于15个猪场的85份母猪血清和29个猪场的55份仔猪可疑病料(脾脏、淋巴结、肾脏等),分别采用间接ELISA和PCR法进行PCV2抗体和病毒核酸检测。结果显示,在15个猪场中,1个猪场母猪抗体呈阴性,其他14个猪场母猪抗体均呈阳性,猪场PCV2阳性检出场为93.3%(14/15),85份母猪血清抗体总阳性率为75.3%(64/85)。29个猪场的仔猪,PCV2核酸检测阳性猪场为19个,猪场阳性率为65.5%(19/29),55份仔猪可疑病料病毒核酸检测总阳性率61.8%(34/55)。可见,母猪和仔猪感染PCV2相当普遍。对母猪群PCV2抗体阳性率及其仔猪群病毒核酸阳性率进行比较发现,母猪群PCV2抗体阳性率越高其仔猪群病毒核酸阳性率却越低。     

青海贵德地区猪圆环病毒2型感染调查

为了解青海贵德地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染状况,本研究应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自该地区2个猪场的73份血清样品进行了PCV2抗体检测,采用荧光PCR技术对45份猪病料样品进行了PCV2病毒核酸检测。结果显示:PCV2抗体检测的平均阳性率为95.89%,猪病料PCV2病毒核酸检测的阳性率为100%。     

湘西山区猪2型圆环病毒血清学调查

2013年8月至2014年12月,从湖南湘西未接种任何疫苗(除猪瘟苗外)的山区小型猪场、农村传统饲养户以及部分野猪场采集了1 390份猪血清样品,通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),血清学检测猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV2)的血清抗体,对已确认为PCV2抗体阳性的血清进行猪蓝耳病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),以及猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的血清抗体检测。检测结果显示PCV2血清抗体阳性率,小型猪场的为86%、农村传统饲养猪为78%、土猪场为69%、野猪场为25%。结果表明:湘西山区小型猪场、农村传统饲养户、部分野猪场的PCV2血清抗体阳性率不同,这种抗体阳性率的高低可能与饲养密度、饲养方式、品种和环境有关。本调查通过对湘西周边山区猪群的PCV2血清抗体阳性进行检测及统计分析,发现山区微小猪场及农户散养猪只具有较高的抗体阳性率,而抗体阳性率在一定程度上代表着PCV2的感染率。因此,加强PCV2免疫接种,将有利于防控PCV2相关性疾病的发生以及其他疾病继发的感染。     

西宁市猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了西宁市8个规模养殖场和部分散养户的161份猪血清样品的猪圆环病毒2型（PCV2）抗体。结果显示，所有被检猪场均有PCV2抗体阳性猪存在，161份血清样品中PCV2抗体阳性率为86．95％。从上述样品中随机抽取28份样品，用PCR方法检测了PCV2ORF1基因；结果，从13份血清中扩增到了特异性PCV2ORF1基因，阳性率为46．42％。证实，西宁市猪场和散养猪群中存在PCV2感染。     

猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

应用ELISA方法对河北省及北京、天津地区部分规模猪场和散养猪群共398份猪血清样品进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测,结果抗体阳性率为90.9%,血清样品抗体总阳性率为84.2%,其中种母猪抗体阳性率86%,种公猪88.2%,育肥猪85.2%,断奶仔猪76.7%,初步表明PCV2感染在被检地区猪群中普遍存在。对阳性的血清样品中随机抽取14份,用PCR方法进行PCV2 ORF1基因的检测,结果从6份血清中扩增到了特异性目的基因片段,检出率为42.9%,进一步证实了PCV2感染在上述地区规模猪场和散养猪群中存在。     

某规模化猪场猪瘟和猪圆环病毒病2型混合感染的诊断

为调查贵州省某规模化猪场送检病料的感染状况,试验首先对该猪场进行了流行病学调查和临床症状观察,并对送检的2头发病仔猪进行病理剖检,然后采用ELISA方法对该猪场送检的80份血液样品进行了CSFV和PCV2血清学检测,最后采用RT-PCR和PCR技术进行确诊。结果表明：通过流行病学调查、临床症状观察、病理学剖检和ELISA方法检测猪瘟和猪圆环病毒病2型的血清抗体阳性率分别为56.25%和52.5%后,初步判定该猪场疑似猪瘟和猪圆环病毒2型混合感染;RT-PCR和PCR检测确诊该猪场为猪瘟和猪圆环病毒病2型混合感染。     

某规模化猪场主要病毒性疫病的ELISA及PCR检测

为了达到对猪主要病毒性疫病进行早期诊断的目的,本研究对某规模化猪场500份血清和部分组织进行ELISA和PCR(RT-PCR)检测.ELISA检测结果表明:PCV2、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、CSFV及JEV的抗体阳性率分别为87.6％、72.4％、85.8％、75.4％、77.0％、79.2％、82.2％,均大于70％,达到国家相关免疫标准;PCR(RT-PCR)检测结果表明:PCR扩增检测到PCV2特异性条带,综合分析表明,该规模化猪场部分猪只感染猪圆环病毒2型,提示该猪场应补免猪圆环病毒疫苗.     

猪圆环病毒病血清学调查及病原分析

本文采用ELISA法对龙岩市的5个县、区10个猪场送检的315份血清进行猪圆环病毒病血清学调查。结果表明猪场PCV抗体阳性率为80％，猪群的阳性率为48．9％，种猪阳性率为69．3％，育肥猪阳性率为50．5%．仔猪阳性率为21．1％；同时。我们还应用PCR法对猪场送检的两份病料进行了猪圆环病毒的病原学分析。结果1份为阳性，1份为阴性。     

陕西部分猪场PCV2抗体及病毒检测分析

为了解陕西省猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)感染及其免疫抗体情况,2016-2017年间,在陕西省7个地区21个猪场采集544份血清样品(其中8个免疫猪场进行PCV2疫苗免疫,采集320份血清样品;13个非免疫猪场未进行PCV2疫苗免疫,采集224份血清样品),分别通过ELISA方法检测PCV2血清抗体及PCR方法检测PCV2核酸。结果显示,采集的544份血清中PCV2血清抗体平均阳性率为68%(368/544),其中免疫猪场为85%(271/320),非免疫猪场为43%(97/224);PCV2核酸平均阳性率为19%(103/544),其中免疫猪场为10%(32/320),非免疫猪场为32%(71/224)。结果表明,在PCV2疫苗免疫猪场和非免疫猪场均存在PCV2感染情况,疫苗免疫在一定程度上可以减少PCV2的感染,但是并不能完全阻止PCV2的感染。在防控PCV2感染工作中,除了做好生物安全工作以外,疫苗免疫接种是防止病毒感染的有效措施,但还要做好免疫猪抗体检测工作,减少病毒感染,防止猪圆环病毒相关疾病的发生。     

猪圆环病毒2型感染调查及防制

对玉林、贵港、南宁、来宾、桂林四市11个县（区）28个规模化猪场猪圆环病毒2型感染情况进行调查。采用血清学方法检测PCV2抗体；结果有16个猪场检出PCV2抗体；17个猪场中有4个猪场检出猪圆环病毒2型。血清抗体平均阳性率为26％，病毒平均阳性率为23．5％。对个别发生猪圆环病毒2型感染的猪场进行防制试验。     

同一猪只圆环病毒抗体水平与病原检出率之间的相关性分析

为探索一种鉴别猪圆环病毒(PCV)疫苗抗体与野毒感染的ELISA检测方法,本研究通过对江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊2017年1—4月接诊的接种过PCV疫苗的30头活猪同时进行PCV抗体和病原的检测,以分析抗体和病原之间的相关性。结果PCV抗体阳性率为100%,病原阳性率为30.0%(9/30);77.8%(7/9)病原阳性猪的PCV抗体S/P值大于1.8,70.0%(7/10)PCV抗体S/P值大于1.8的猪为PCV病原阳性;说明高PCV抗体猪与病原检出率之间的相关性较高。即通过对群体的抗体检测能较为准确地判断猪群是否感染了PCV野毒。由于检测抗体远比活体检测病原容易,本研究结果具有较高的实用价值,为江苏省乃至全国猪圆环病毒的诊断与防控提供了有效数据参考,具有推广价值。     

吉林省部分地区猪圆环病毒2型感染的血清学调查

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对吉林省部分地区5个猪场的300份猪血清样品进行猪圆环病毒2型(PCV2)血清抗体的检测。检测结果,被检猪场中血清抗体总阳性率为51.67%,5个地区猪场均检测出阳性猪。其中30日龄内仔猪阳性率为12.77%;种公猪总阳性率为56.19%;经产母猪总阳性率为67.80%。结果证实,吉林省不同地区猪场均存在PCV2感染,且比较严重。     

规模化猪场猪圆环病毒2型感染的实验室诊断

为了确诊贵州省某规模化猪场保育仔猪异常死亡原因,从怀孕母猪、产房母猪、后备母猪、种公猪、哺乳仔猪、保育仔猪6个猪群采集90份血清样本采用ELISA方法分别进行血清抗体检测,并对采集的90份血清样本和1份病死猪淋巴结组织采用荧光PCR方法进行病原学检测。结果:6个猪群综合的猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒g B蛋白、伪狂犬病病毒g E蛋白血清抗体阳性率分别为87.78%、70.00%、88.89%、4.44%;猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒病原核酸检测显示阴性,猪圆环病毒2型病原核酸检测淋巴结组织样本显示阳性。试验结果表明,引起该猪场保育仔猪死亡的原因为猪圆环病毒2型感染。同时,怀孕母猪群出现了伪狂犬病病毒g E蛋白抗体阳性,提示怀孕母猪群可能存在猪伪狂犬病野毒感染。     

猪圆环病毒3型ORF2基因的截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

试验旨在建立一种快速的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法。采用PCR方法对PCV3 ORF2基因主要抗原区域进行扩增,并利用原核表达系统进行截短表达,以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示:PCR扩增了片段大小为348 bp的ORF2基因主要抗原区域,PCR扩增产物克隆至pET-32a原核表达载体,转入大肠杆菌BL21,获得了以包涵体形式表达的重组蛋白,纯化后经Western blot鉴定表明具有良好的反应活性。以重组蛋白作为包被抗原建立了检测PCV3抗体的间接ELISA方法,对PCV3阳性血清的最低检出效价可达1∶20 480;用该方法检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、乙型脑炎病毒(JEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪常见疫病阳性血清,结果均为阴性;批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均小于5%。应用该方法检测四川地区533份不同日龄临床猪血清样品,PCV3阳性感染率达14.82%。表明建立的ELISA方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和临床适用性,为我国商品化PCV3血清学抗体检测试剂盒的研制奠定了基础。     

北疆某规模化养猪场猪圆环病毒2型抗体及抗原检测与分析

为了解2019—2020年北疆某规模化养猪场猪圆环病毒2型(PCV2)抗体及抗原情况,研究采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)、PCR方法对采集的671份猪血清进行PCV2抗体检测及部分样品进行PCV2抗原检测。结果显示,该猪场PCV2抗体平均阳性率为62.00%(416/671),低于国家规定标准(70.00%)。不同类别猪群中,哺乳仔猪群、保育猪群、经产母猪群、后备猪群、肥育猪群、种公猪群抗体阳性率分别为38.46%(50/130)、29.20%(33/113)、83.93%(141/168)、75.34%(55/73)、72.30%(107/148)和76.92%(30/39)。通过对抗体过高的猪只进行抗原检测,发现各个猪群都存在PCV2感染情况。需要对种猪群逐个检查PCV2感染情况,并调整完善现有的免疫程序,进一步加强该猪场对猪PCV2的免疫防控。     

即墨市猪Ⅱ型圆环病毒的ELISA检测和PCR初步鉴定

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对即墨市某发病猪场8份血清进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体检测,结果表明总体阳性率达62.5%,初步表明此猪场已感染了猪Ⅱ型圆环病毒。同时利用已建立的聚合酶联式反应(PCR),从此发病猪场中,无菌采取淋巴结、脾脏和肺,经过研磨、冻融、抽提,得到DNA模板,进行了PCR扩增,并分别从淋巴结、脾脏和肺中获得预期长度的猪Ⅱ型圆环病毒的DNA片段,从而从分子生物学方面初步证明了此猪场已感染了猪Ⅱ型圆环病毒,也为即墨市猪Ⅱ型圆环病毒KF株的进一步分离鉴定奠定了基础。     

广西田东县部分猪场四种疫病病原及三种疫病血清学的检测与分析

为了解广西田东县部分猪场猪瘟?高致病性猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病的流行情况，采用RT-PCR方法及PCR方法检测组织样品，对各猪场送检的162份组织样品进行猪瘟病毒(CSFV) 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸检测。采用ELISA方法对送检临床健康猪群400份血清样品进行CSFV、HP-PRRSV、PRV-gE抗体检测。病原检测结果显示：病料CSFV核酸检测为阴性；HP-PRRSV、PCV2、PRV核酸总阳性率分别：6.79%、40.74%、1.23%;对不同猪群各种病原核酸阳性率分析发现，育肥猪HP-PRRSV阳性率最高，为11.53%,保育猪PCV2阳性率最高，为51.9%,种母猪PRV阳性率最高，为6.45%。抗体检测结果显示：CSFV抗体阳性率为87%,HP-PRRSV抗体阳性率77.5%,PRV-gE抗体阳生率为12.25%。本研究表明，CSFV免疫效果好，并有效地控制了该病在本区域的发生与流行。HP-PRRS、PCV2、PR这3种疫病仍在猪群中散发流行，需要加强防控...     

猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

以大肠杆菌原核表达系统表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为抗原,建立猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法,优化ELISA反应条件,研制猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。与商品化试剂盒相比,该检测试剂盒敏感性、特异性和符合率分别为95.12%、92.86%和94.55%;同时与猪圆环病毒1型（PCV1）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）等多种病毒阳性血清无交叉反应。试剂盒具有较好的重复性,在-20 ℃至少可保存1年以上,将其应用于临床血清样品的检测,结果安徽、广东、广西采样猪场的PCV2阳性率分别为100%、48.39%、100%。