葡萄糖氧化酶抑菌、产酸及耐受性试验

为了解饲料添加剂葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)在畜禽养殖过程中的应用效果,试验采取体外法进行了不同温度、不同pH值条件下不同浓度GOD对金黄色葡萄球菌、鸭沙门氏菌以及不同来源大肠杆菌的抑菌效果研究,同时评估了GOD的产酸性能及在人工胃液、人工肠液、猪胆盐中的耐受性。结果表明:GOD对不同致病菌均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,不同浓度GOD的抑菌效果间存在显著差异(P0.05);随着作用时间的延长GOD的产酸效果明显,pH值逐渐降低,且在试验开始的前4个小时中差异显著(P0.05);人工胃液对GOD的活性影响较大,人工肠液和猪胆盐对GOD活性影响较小。说明GOD有较明显的产酸效果,对大肠杆菌和沙门氏菌有较好的抑制效果,并且在消化道内有较好的耐受性。     

功能菌株及其复合菌剂发酵配合饲料的研究

发酵饲料富含有益微生物、消化酶及功能物质，已广泛应用于畜牧行业，应用效果良好。微生物种类及功能是影响微生物发酵饲料发酵效果的关键因素之一。为研究不同功能菌株在发酵过程中的作用，以pH、酸溶蛋白含量、抗原蛋白和抑菌活性为指标，对不同菌株及其复合菌剂固态发酵鸡配合饲料进行评价。结果表明：FM-20菌株产酸性物质能力较强，能显著降低饲料pH(P<0.05);FM-18菌株发酵产酸溶蛋白最快；JM-1菌株抑制大肠杆菌能力较强。经复配后，各菌株产生一定协同发酵作用，酸溶蛋白含量达到35.98%,β-伴大豆球蛋白降解明显，对大肠杆菌和沙门氏菌抑制活性显著（P<0.05），对大肠杆菌的抑菌面积达到1.18 cm2。试验为功能菌株及其复合菌剂在发酵配合饲料中的应用提供了相应的基础。     

葡萄糖氧化酶对肉鸡生长性能的影响及其替代抗生素效果研究

试验主要研究在饲粮中添加不同剂量葡萄糖氧化酶(GOD)对肉鸡生长性能的影响,以及GOD替代抗生素的效果。试验将640只1日龄健康AA肉仔鸡随机分为5个处理,每个处理8个重复,每个重复16只鸡(公、母各半)。其中Ⅰ组为饲喂基础饲粮组,Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加GOD 100、200 g/t,Ⅳ、Ⅴ组分别饲喂在基础饲粮中去除抗生素的同时添加GOD 200、400 g/t。试验全期共42 d。结果表明:添加不同剂量GOD,肉鸡全期日增重相比对照组出现显著性提高(P0.05),料肉比出现显著性降低(P0.05);GOD替代常规饲粮中抗生素,200、400 g/t添加量组与对照组相比各项生长性能未出现显著性差异(P0.05)。由此可见,在肉鸡饲料中添加GOD可有效改善日增重和料肉比,且GOD替代抗生素能起到有效的作用。     

葡萄糖氧化酶、葡萄糖酸、蜂蜜源添加剂对黄羽肉鸡生长及养分消化率的影响

为研究葡萄糖氧化酶(GOD)、葡萄糖酸(GA)、蜜蜂源添加剂(HE)3种试验材料对肉鸡生长性能、饲料消化率及肠道酸度的影响,将320只5周龄的黄羽肉鸡母鸡随机分为4个处理(对照组、0.2‰GOD组、2‰GA组、2‰HE组),每个处理设4个重复,每个重复20羽,饲养试验持续6周,结束前测定日粮主要成分的消化率、肠道酸度。结果显示:6～11周试验全期的平均增重, GOD、GA、HE组比对照组分别提高2.4%(P0.05)、5.5%(P0.05)、5.0%(P0.05);采食量、料重比,组间差异不显著(P0.05);日粮干物质消化率, GOD、GA、HE组比对照组分别提高1.1%(P0.05)、6.0%(P0.05)、5.3%(P0.05);粗蛋白、总磷消化率,GA组、HE组比对照组有显著提高(P0.05);钙消化率,组间差异不显著(P0.05);十二指肠pH值,组间差异不显著(P0.05);空肠pH值,以GA组最低(P0.05),GOD组、HE组降低不明显(P0.05);回肠pH值, HE组最低(P0.05),其次GA组(P0.05)、GOD组(P0.05)。综合分析,日粮中添加GA、HE对试验黄鸡生长性能的改善优于GOD。     

艾叶水提液对3种细菌的体外抑菌试验

为了观察艾叶水提液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌的体外抑菌效果,试验采用二分法和牛津杯法分别测定艾叶水提液的最小抑菌浓度(MIC)和抑菌效果。结果表明:艾叶提取液浓度为2,1,0.5和0.25 g∕m L时,金黄色葡萄球菌与大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌的抑菌效果差异显著(P0.05);在浓度为2,1 g∕m L时,提取液对金黄色葡萄球菌表现为高敏,对大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌均表现为中敏;3种细菌的MIC均为0.125 g∕m L。说明艾叶水提液对3种菌均有抑制和杀灭作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果略优于大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌。     

脂肪酶对三丁酸甘油酯抑菌效果的影响研究

本试验旨在研究脂肪酶处理对不同浓度三丁酸甘油酯抑制大肠杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌能力的影响。选用的脂肪酶浓度为3、6、9 mg/mL,三丁酸甘油酯浓度为20、40、60 mg/mL,抑菌效果以抑菌圈直径表示,抑菌圈直径越大表明抑菌效果越强。结果表明:三丁酸甘油酯本身不具备明显的抑菌能力,在被脂肪酶酶解后,其抑菌能力增强;当三丁酸甘油酯浓度为20 mg/mL时,酶解后其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径由7.9 mm增大至11.6 mm(P0.05);对大肠杆菌的抑菌直径由10.0 mm增大至12.7 mm(P0.05);当三丁酸甘油酯浓度为40 mg/mL或60 mg/mL时,酶解后其对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果由低度或中度敏感提高至高度敏感,且脂肪酶浓度对抑菌效果无显著影响。结果显示,脂肪酶酶解能增强三丁酸甘油酯对大肠杆菌、沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌能力。     

黑曲霉葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母中的表达及性质研究

试验旨在提高葡萄糖氧化酶（glucose oxidase, E.C.1.1.3, GOD）的产量并进一步研究重组葡萄糖氧化酶的酶学性质及其对畜禽常见致病菌的体外抑菌效果。试验选取黑曲霉来源的GOD基因序列GOX4，经密码子优化后电击转入毕赤酵母，构建Pichia pastoris X33/pGAPZαA-GOX4重组菌，而后通过高浓度博来霉素筛选到一代高产葡萄糖氧化酶的重组菌。在此基础上，通过共表达糖酵解途径中的关键限速基因丙酮酸激酶基因BTS成功构建二代高产菌，并研究重组葡萄糖氧化酶的酶学性质，采用牛津杯法进行抑菌试验。结果表明：(1)第二代高产菌的GOD产量相比第一代提高了60%；(2)重组葡萄糖氧化酶的最适温度为50℃，最适pH为7.0；(3)稀释10倍和25倍的重组葡萄糖氧化酶发酵上清液对大肠杆菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌均有一定程度的抑制效果，但效果有所差异。综上所述，共表达丙酮酸激酶基因BTS提高了重组葡萄糖氧化酶的表达，重组葡萄糖氧化酶的酶学性质及体外抑菌试验表明其在畜牧行业具有良好的应用潜力。     

酸马奶提取植物乳杆菌DSM20174细菌素的理化特性研究

为研究从酸马奶中提取的植物乳杆菌DSM20174细菌素的理化特性,本试验提纯植物乳杆菌DSM20174细菌素,经过硫酸铵沉淀、透析后得到细菌素粗提液,再利用SephadexG-100凝胶柱层析进行纯化后,细菌素的比活力明显增加,达到154.70 AU/mL,得率为43.5%.采用牛津杯法测定纯化的植物乳杆菌DSM20174细菌素在3种不同方式处理下对牛源野生致病性大肠杆菌O78抑菌效果的影响.结果显示:①植物乳杆菌DSM20174细菌素在5组温度处理下,随着温度的升高抑菌作用降低,各组抑菌作用差异显著(P<0.05).即使121 ℃处理30 min后,抑菌直径仍达14.90 mm.②植物乳杆菌DSM20174细菌素在pH 2.0~12.0由低到高的11组酸碱处理下,pH越大抑菌直径越小,且除了pH 9.0和pH 10.0之间差异不显著(P>0.05)外,其余各组抑菌作用均差异显著(P<0.05). ③植物乳杆菌DSM20174细菌素经胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶3种酶处理后抑菌直径变化明显,处理前后抑菌作用均差异显著(P<0.05).结果表明植物乳杆菌DSM20174细菌素是较好的抑菌活性物质,但不是热稳定性物质;具有较广泛的pH适用范围,且pH越小时其抑菌活性越强,在最适生长pH时抑菌活性有所增强;不是蛋白酶稳定性物质.     

几种复合有机酸体外效果的评价试验

为了研究复合有机酸体外应用的效果,笔者从市场中选择5种常见的复合有机酸(hlskx、sdxd、cdfl、wfjij、flt),分别对其感官、缓蚀能力、最小抑菌浓度(MIC)、抑菌作用时间、对不同禽日粮pH值及系酸能力进行验证评价。结果表明:①在感官评价方面,各复合有机酸化剂色泽、气味均无明显区别。②在缓蚀能力评价方面,各组别酸在倍比稀释浓度和不同水质中的p H值均稳定在3.5～4.0,无腐蚀能力,且稀释至1/1000时缓冲能力良好。③在MIC值与抑菌机制评价方面,笔者以大肠杆菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和沙门氏菌(ATCC14028)为指示菌,wfjyj及hlskx的MIC范围均为1/320～1/500,两者抑菌性能相当,优于其余3种产品;cdfl的MIC范围为1/320～1/200,抑菌性能较差。④在抑菌作用时间方面,经过216 h后,wfjyj抑菌圈回长程度小于其他产品,抑菌作用时间及效果较好,且同hlskx抑菌圈作用效果相近。⑤日粮pH值及系酸能力评价方面,5种复合有机酸产品对不同饲料的pH值及系酸力均有显著性影响。wfjyj及hlskx对8种饲料中pH值及系酸力极显著降低的饲料作用效果明显,且两者作用能力相当,均强于其他3类产品。其他3类产品的pH值及系酸力由强到弱依次为flt、cdfl和sdxd。以上试验证明,复合有机酸具有良好的缓蚀力、抑菌效果及抑菌作用时间,且对日粮系酸能力与p H值有显著影响,对确保产品质量的稳定性和工艺的先进性具有重要意义。     

乳酸菌及其培养物对鸡致病性大肠杆菌的抑菌试验

本试验研究了乳酸菌、乳酸菌上清液、抗生素及MRS对照液对鸡致病性大肠杆菌的体外抑菌作用.结果表明,乳酸杆菌菌液及培养后的无菌上清液都有较强的抑菌活性,其抑菌圈的直径显著大于对照组(P＜0.05);且随着乳酸菌培养时间的不同,乳酸菌培养液的pH值逐渐降低,对致病性大肠杆菌的抑制作用也逐渐增强.     

磷酸复合型酸化剂及抗生素添加剂体外抑菌效果研究

本试验旨在研究3种磷酸型复合酸化剂对常见致病菌的体外抑菌效果。以大肠杆菌(ATCC83912)、沙门菌(ATCC21512)和金黄色葡萄球菌(ATCC65213)3种常见的致病菌为指示菌,采用牛津杯双层板法,测定3种酸化剂和复合抗生素的抑菌圈直径(mm),比较3种酸化剂(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)不同浓度(0.20%、0.30%、0.40%、0.50%、0.70%)的抑菌效果,比较0.50%酸化剂与复合抗生素(日粮中含土霉素100 mg/kg+金霉素75 mg/kg+喹烯酮250 mg/kg)的抑菌效果。结果表明,①3种酸化剂的抑菌效果差异显著(P0.05),抑菌作用:沙门氏菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌;抑菌效果:酸化剂Ⅲ酸化剂Ⅱ酸化剂Ⅰ,并且酸化剂Ⅱ、酸化剂Ⅲ的抑菌效果随其浓度增加而增加;②0.5%酸化剂Ⅱ、酸化剂Ⅲ对沙门氏菌和大肠杆菌抑菌效果优于复合抗生素(P0.01),而对金黄色葡萄球菌的抑菌效果不如复合抗生素(P0.01)。综上所述:3种酸化剂中,酸化剂Ⅲ的抑菌效果最佳,酸化剂对沙门氏菌和大肠杆菌抑菌效果优于复合抗生素,建议在日粮中的添加量不低于0.5%。     

喹乙醇对大肠杆菌抑菌效果的研究

采用药敏试验测定喹乙醇对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,二倍稀释法测出喹乙醇对大肠杆菌的最小抑菌浓度。结果显示喹乙醇对大肠杆菌和沙门氏菌有较强的抑菌作用,对金黄色葡萄球菌抑菌作用不明显,强弱依次为沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,另外喹乙醇对大肠杆菌的最小抑菌浓度为8ppm。     

酸马奶微生物代谢产物的提取及抑菌效果的分析

为了论证酸马奶微生物代谢产物的抑菌效果,试验进行了酸马奶原液微生物代谢产物与不同比例的增菌溶液微生物代谢产物对致病性大肠杆菌抑菌效果的研究,选择内蒙古锡林浩特地区酸马奶原液和不同比例(1/2、1/4、1/8、1/10)的增菌溶液(未灭菌和灭菌牛奶)作为试验样品,采用溶媒提取法提取微生物代谢产物,采用牛津杯法探讨微生物代谢产物对致病性大肠杆菌的抑菌效果。结果表明:酸马奶原液和不同比例增菌溶液微生物代谢产物在p H值为2的有机相中均有不同程度的抑菌效果,酸马奶原液的抑菌圈直径达28.26 mm,与其他溶液均差异显著(P0.05)。未灭菌牛奶中,1/2、1/8比例抑菌圈直径与1/4、1/10比例差异显著(P0.05);灭菌牛奶中,1/2比例与1/4、1/8比例抑菌圈直径差异显著(P0.05)。未灭菌与灭菌牛奶在相对应的1/2、1/4、1/8比例抑菌圈直径差异均不显著(P0.05)。说明酸马奶微生物代谢产物对致病性大肠杆菌有抑制作用,其中酸马奶原液的抑菌效果最好,未灭菌牛奶1/2比例和灭菌牛奶1/2比例次之。     

液体酸化剂的评估及其对肉鸡生长性能的影响

试验旨在研究不同比例液体酸化剂对饮用水的酸化作用、水质硬度的软化效果、饮水中大肠杆菌的抑菌效果及酸化水对肉鸡生产性能的影响.结果 显示:液体酸化剂能够能显著降低水的pH值(P＜0.05);硬水中添加0.2％液体酸化剂能显著降低水的硬度(P＜0.05);0.2％液体酸化剂能显著抑制大肠杆菌生长(P＜0.05).以饮用0....     

饲用芽孢乳酸菌的生物学特性研究

试验研究了芽孢乳酸菌的生长特性、泌酸能力、高温耐受性、耐酸性、胆盐耐受性和抑菌能力,旨在为微生态饲料添加剂的研发提供试验依据。结果表明,芽孢乳酸菌在30 h时菌体质量浓度达到最高值,在32 h时产酸量最高,最后在pH 3.80左右趋于稳定;芽孢乳酸菌经90℃处理10 min后存活率达到73.47%,pH 2.0及1.0%胆盐处理3 h后存活率分别为54.69%、24.36%;芽孢乳酸菌对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均具有较好的抑菌性能,抑菌圈直径分别为18.38、19.76、17.42 mm。结果说明,芽孢乳酸菌具备良好的生物学特性,是一株优异的益生菌株。     

抗菌肽与喹乙醇体外抑菌效果的比较及对断奶仔猪生产性能的影响

为研究肠杆菌肽与喹乙醇体外抑菌效果以及替代喹乙醇对断奶仔猪生长性能的影响,体外试验选用大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌为指示菌测定抗菌肽与喹乙醇的抑菌效果。体内试验挑选28日龄左右,144头健康断奶仔猪,分为2个处理组,每组4个重复,每个重复18头,研究两组之间生产性能和腹泻率的差异。体外试验结果显示,以大肠杆菌ATCC25922为指示菌株,0.5%肠杆菌肽与50%喹乙醇最低抑菌浓度均为400μg/mL,而相对于沙门氏菌CVCC50094,0.5%肠杆菌肽的最低抑菌浓度低于50%喹乙醇最低抑菌浓度。体内试验结果表明,300g/t抗菌肽替代喹乙醇后,日采食、日增重有所增加,腹泻率明显降低,肠道中大肠杆菌数量降低。     

鸡源凝结芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

研究旨在筛选方便加工和储存及颉颃性强的乳酸菌菌株,并通过体外共培养法评价其抑菌效果及其发酵特性。试验从邢台山区散养鸡粪便中分离到1株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有强颉颃作用的产酸芽孢菌,编号为c-4,经形态及生理生化试验鉴定为凝结芽孢杆菌。该菌株具有好氧和厌氧双重发酵特性,可以利用葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇和麦芽糖等多种碳源及玉米浆、酵母粉、蛋白胨和豆饼粉等多种氮源。体外厌氧共培养抑菌试验表明,分别降低大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌数指数2和3个数量级以上,并可显著降低pH(P0.05),具有在肠道中替代抗生素抑制有害菌及调整微生态等多方面的应用潜力。     

鼠李糖乳杆菌对三种细菌生长的抑制作用

为了研究鼠李糖乳杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌的抑菌作用,试验采用牛津杯法检测了鼠李糖乳杆菌与三种细菌共培养的细菌数、抑菌圈直径,并测定了细菌生长曲线。结果表明:共培养后三种细菌的数量均显著低于对照组(P0.05);鼠李糖乳杆菌发酵上清液和全菌裂解液与三种细菌共培养后,细菌对数生长期明显滞后或未出现对数生长期;鼠李糖乳杆菌发酵上清液和全菌裂解液对三种细菌的抑菌圈直径均显著大于对照组(P0.05),全菌裂解液对大肠杆菌和产气荚膜梭菌的抑菌圈直径显著大于上清液(P0.05)。说明鼠李糖乳杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌的生长具有明显的抑制作用,其中对产气荚膜梭菌的抑制效果最强,全菌裂解液的抑菌效果优于上清液。     

不同温度和时间下散养鸡鸡蛋感官、微生物以及氨基酸变化分析

为研究散养鸡鸡蛋在不同温度和时间下感官指标、微生物数目以及氨基酸成分的变化，试验选取信阳市不同散养鸡场随机采集同一日龄、大小均匀、品质良好的鸡蛋200枚进行试验。将200枚鸡蛋随机分为2组，每组100枚，分别放置在4℃冰箱和25℃恒温箱两种条件下储存，每隔7 d取样，测定所取样品的蛋重、蛋黄指数、蛋清pH、菌落总数、大肠杆菌和沙门氏菌的数目，同时每隔14 d取样分析氨基酸成分的变化。结果表明：4℃和25℃条件下贮藏的鸡蛋其蛋重、蛋黄指数会随储存时间的延长而降低，4℃条件下，28 d时蛋重较1 d时下降了8.09%，但差异不显著（P> 0.05）,35 d时蛋黄指数较1 d时下降了14.89%，差异显著（P <0.05）,25℃条件，28 d时蛋重最低和1 d相比降低了14.86%，差异显著（P <0.05）;14 d时蛋黄指数较1 d降低了31.91%，在21 d时蛋清pH较1 d时增加了19.50%，差异显著（P <0.05）。鸡蛋内部微生物的数量也会随储存时间的延长而明显增加，4℃条件下，35 d时蛋黄中沙门氏菌、蛋清中的大肠杆菌和沙门氏菌数目分别是28 d...     

单一中药提取物对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果研究

试验旨在研究鱼腥草、五倍子、连翘、金银花、紫花地丁、蒲公英、板蓝根、黄连等8种中草药的提取物对鸡源性大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果。试验分别采用煎煮法和乙醇浸提法获得单一中草药提取物,采用琼脂平板打孔法进行大肠杆菌和沙门氏菌抑菌圈直径的测定,采用2倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,煎煮法所得的蒲公英提取物对大肠杆菌的抑菌和杀菌效果最强,其次是五倍子提取物;乙醇提取法所得的五倍子提取物对大肠杆菌的抑菌和杀菌效果最强,其次是鱼腥草提取物;煎煮法所得的五倍子提取物对沙门氏菌的抑菌和杀菌效果最强,其次是板蓝根,而鱼腥草、连翘、紫花地丁、金银花、蒲公英等提取物对沙门氏菌的抑制效果较差;乙醇提取法所得的五倍子提取物对沙门氏菌的抑菌和杀菌效果最强。研究表明,8种中草药对大肠杆菌和沙门氏菌均具有不同程度的抑制效果,对大肠杆菌的抑制效果比沙门氏菌的抑制效果更好,其中五倍子提取物对大肠杆菌和沙门氏菌均具有不错的抑菌效果。