洱海捕食线虫真菌生物多样性研究(英文)

[目的]调查洱海底泥中捕食线虫真菌生物多样性。[方法]采集洱海底泥616份,应用传统的分类鉴定方法分离、纯化和鉴定。[结果]共分离鉴定3属,22种捕食线虫真菌,其中少孢节丛孢(Arthrobotrysoligospora),弯孢节丛孢(A.musiformis)和长孢隔指孢(Dactylellaleptospora)为优势种,检出率分别为28.05%,16.04%和8.92%。通过对4个季节捕食线虫真菌多样性分析,发现夏、春和秋3季的生物多样性较丰富,多样性指数分别为2.59,2.47和2.34,冬季多样性指数比较低,为1.48。在所分离到的捕食线虫真菌中,产黏性菌网的菌种占优势(41.00%)。[结论]洱海中存在丰富的捕食线虫真菌资源,其生物多样性具有季节性变化的特点,产黏性菌网的捕食线虫真菌为洱海中捕食线虫真菌的优势种群。     

洱海捕食线虫真菌生物多样性研究

[目的]调查洱海底泥中捕食线虫真菌生物多样性。[方法]采集洱海底泥616份,应用传统的分类鉴定方法分离、纯化和鉴定。[结果]共分离鉴定3属22种捕食线虫真菌,其中少孢节丛孢、弯孢节丛孢和长孢隔指孢为优势种,检出率分别为28.05%、16.04%和8.92%。通过对4个季节捕食线虫真菌多样性分析,发现夏、春和秋3季的生物多样性较丰富,多样性指数分别为2.59、2.47和2.34,冬季多样性指数较低,为1.48。在所分离到的捕食线虫真菌中,产黏性菌网的菌种占优势（41.00%）。[结论]洱海中存在丰富的捕食线虫真菌资源,其生物多样性具有季节性变化的特点,产黏性菌网的捕食线虫真菌为洱海中捕食线虫真菌的优势种群。     

江苏省天王镇磨盘山金蝉花分离菌株鉴定及系统发育分析

蝉花是一种名贵的传统中药,其分离物多样性丰富,不同菌株的药理作用及生物活性物质含量差异明显,因此,分离物的确证是蝉花研究的关键环节.对江苏省句容市天王镇磨盘山采集的金蝉花标本分离物进行菌落形态、产孢结构观察,并依据ITS区序列进行系统发育分析,确定为蝉棒束孢菌的不同地理株.该研究对于扩大传统中药资源,进一步深入研究该菌株的药理作用及活性成分具有重要意义.     

食线虫性真菌弯孢节丛孢菌的分离及捕食线虫过程的观察

【目的】从牛羊相关联的基质中分离食线虫性真菌弯孢节丛孢菌Arthrobotrys musiformis并进一步观察该分离株对捻转血矛线虫Haemonchus contortus 3期幼虫和秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans的捕食过程。【方法】用诱饵平板技术分离弯孢节丛孢,然后借助扫描电镜观察弯孢节丛孢对捻转血矛线虫3期幼虫和秀丽隐杆线虫作用的动态过程。将该菌分离株NPS045接种在表面铺有纤维素膜的20 g·L-1水琼脂平皿中培养4 d后并加入试验线虫,于2种线虫捕捉后不同时间段取样观察。【结果】电镜观察结果显示,加入试验线虫后5 h该菌产生捕食结构并开始捕捉2种线虫;弯孢节丛孢对捻转血矛线虫3期幼虫于捕捉后22 h刺入角质层,56 h虫体有侵入性菌丝长出,68 h消化完全;秀丽隐杆线虫于捕捉后14 h刺入并明显皱缩,19 h虫体严重皱缩,24 h消化完全。【结论】从1 502份与牛羊相关的样品中分离出17株弯孢节丛孢菌,其在总样品中的检出率为1.13%。     

镰刀菌对南方根结线虫卵的寄生特性

体外测定了分离于线虫的镰刀菌(Fusariumspp.)7个种的12个分离物对南方根结线虫(M eloidogyne incognita)卵的寄生性.结果表明:不同分离物对卵的寄生率有较大差异,有4个分离物对胚胎期卵的寄生率高于50%;所有分离物对含幼虫卵的寄生率低于40%;尖孢镰刀菌Fo-He3、茄病镰孢Fs-02100855对这2种发育类型的卵寄生率较高.测定了这12个镰刀菌分离物中几丁质酶活与蛋白酶活,结果表明,尖孢镰刀菌Fo-He3、茄病镰孢Fs-02100855表现出较高的几丁质酶活,这可能与卵寄生率高具相关性.扫描显微观测结果表明茄病镰孢Fs-02100855菌丝与胚胎期卵接触后,在卵壳表面蔓延侵入,最终卵壳完全被匐匍网状菌丝包被;含幼虫卵的卵壳表面蔓延侵入的菌丝很少.     

松材线虫和拟松材线虫种间及种下群体的RAPD指纹分析

利用ＲＡＰＤ技术对松材线虫（Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ）和拟松材线虫（Ｂ．ｍｕｃｒｏｎａ－ｔｕｓ）的分离物基因组ＤＮＡ进行了ＤＮＡ片段的随机扩增,以确定种间及种内群体的亲缘关系和筛选具有种鉴定特征的分子标记．通过对４０个１０聚体随机引物的筛选,应用８个引物对两种线虫种间及种内分离物扩增片段的遗传分析显示：两种间群体ＲＡＰＤ扩增片段的共享度为４０％～５６％,而在松材线虫的不同分离物之间的共享度为６０％～８４％;其中有一个引物（Ｐ２５３）可在松材线虫和拟松材线虫种间产生具有种鉴定特征的特异性ＲＡＰＤ片段,在松材线虫的不同分离物中均可产生一约７００ｂｐ的特异性片段,而在拟松材线虫中产生了两个分别约为１３００ｂｐ和１９００ｂｐ的特异性片段．     

刀孢蜡蚧菌的鉴定及其对南方根结线虫不同生活阶段的定殖

【目的】明确卵寄生真菌（Lecanicillium psalliotae）刀孢蜡蚧菌对根结线虫的防治潜力。【方法】采用分离自山东青岛城阳丝瓜根结线虫的卵寄生真菌CGMCC5329,通过形态学特征观测及分子生物学分析,鉴定该菌株为刀孢蜡蚧菌。显微观察刀孢蜡蚧菌对南方根结线虫（Meloidogyne incognita）不同生活阶段的定殖。【结果】刀孢蜡蚧菌能够寄生南方根结线虫生活史中的卵、2龄幼虫和雌虫,同时对卵块内卵孵化具有明显的抑制作用。该菌菌丝在卵表面形成侵染钉,卵壳皱缩凹陷,卵胚胎发育停止和内容物凝集,卵内长满菌丝,有时可见到菌丝上形成瓶梗细胞和分生孢子。第6天卵寄生率为85.76%;15 d卵块相对孵化抑制率为91.41%。被真菌寄生的2龄幼虫体表形成致密菌网,穿透体壁,体内长满菌丝,5 d后寄生率为79.23%。寄生的雌虫体壁形成致密菌网和侵染钉,体壁皱缩变形,有时内容物外渗。【结论】刀孢蜡蚧菌CGMCC5329不仅能寄生根结线虫生活史中定居态的雌虫和卵,还能寄生侵染态2龄幼虫。该菌是具有生物防治应用潜力的根结线虫寄生真菌。     

松材线虫携带细菌在疫区和寄主中的分布及致病性研究

作者在江苏、上海、广东、安徽、湖北、浙江等疫区 ,采集了呈现松材线虫病典型症状的黑松、马尾松的病样 ,采用病木组织分离法 ,分离获得松材线虫所携带的细菌菌株 2 4株 ,经鉴定 ,2 4株细菌中 ,假单胞菌属有 11株 ,泛菌属有 6株 ,其余有不解糖消化链球菌、河生肠杆菌、乡间步丘菌和粘质沙雷菌 .由此可知 ,假单胞菌和泛菌分布较广 ,在所有采样疫区感染松材线虫病的马尾松和黑松病死木中都能分离到 ,是普遍存在病木组织中松材线虫携带的主要细菌 .致萎活性测定结果表明 :所有假单胞菌属和泛菌属的菌株对无菌黑松切根苗均有致萎活性 .用假单胞菌和泛菌分别与无菌松材线虫混合接种室内无菌黑松苗和野外多年生黑松 ,结果表明 :用细菌单独接种 ,无菌黑松苗和野外黑松均不发病 ,无菌松材线虫单独接种的无菌黑松苗和野外黑松也不发病或发病轻、慢 ,无菌线虫和致萎细菌二者混合接种能使无菌黑松苗和野外黑松发病快且严重 .由此认为松材线虫携带到寄主组织中的假单胞菌和泛菌属的一些种对松材线虫病有明显的协同作用     

根结线虫的寄生菌物生物多样性

从福建省8个县(市)采集的果树、蔬菜、花卉等作物根结线虫样本上,分离得到24属、868株菌物分离物,显示了根结线虫寄生菌物的物种多样性.淡紫拟青霉(Paecilomyceslilacinus)和厚孢轮枝孢(Verticilliumchlamydosporium)为优势种群.根结线虫的寄生菌物以卵寄生菌物为主,寄生性菌物区系和优势种群与根结线虫寄主植物关系密切.     

松材线虫携带的一株细菌分离及其致病性

从患松材线虫病致死的黑松和马尾松病树组织及松褐天牛虫体中分离的松材线虫虫体上均分离到同一细菌菌株 .经致病性、革兰氏染色、菌体形态、培养性状和生理生化反应等测定 ,将致病菌株鉴定为洋葱伯克霍尔德氏菌 .ATBExpression自动鉴定仪的鉴定结果与上述结果相同 .在分离过程中该菌出现频率较高 ,说明是松材线虫携带的主要细菌 .人工接种试验结果显示 ,用无菌线虫或洋葱伯克霍尔德氏菌菌株分别接种的黑松无菌苗不发病 ,而用二者混合接种则使无菌苗迅速发生褐变和萎蔫 .林间利用 6年生黑松进行的接种试验结果证明 ,用无菌松材线虫和洋葱伯克霍尔德氏菌菌株混合接种的黑松与使用野生松材线虫接种的黑松都 10 0 %的患病 .单独用无菌松材线虫接种有 4株发病 ,6株没有发病 .其中发病黑松中不仅分离到了松材线虫 ,也分离到了细菌 ,而没有患病的 6株黑松中仅分离到少量松材线虫 .这说明在野外条件下接种的松材线虫可以通过某种途径重新获得细菌 ,导致了接种的黑松患病 .而接种后无菌松材线虫没能获得细菌的那些黑松就没有患病 ,说明单独无菌松材线虫不能使黑松患病 .这些结果说明松材线虫携带的细菌与松材线虫的致病性有关 .因此 ,可以把松材线虫病看作是线虫和细菌共同侵染引起的一种植物复合侵染病害 .在这     

海南岛胡椒地穿刺巴斯德芽菌鉴定与多样性分析

穿刺巴斯德芽菌(Pasteuria penetrans)是根结线虫(Meloidogyne spp.)的专性寄生菌,且是研究最多的线虫天敌细菌之一.胡椒作为海南的主要经济作物之一,根结线虫发病率较高.前期的研究发现,在海南岛胡椒中较易分离到P.penetrans.结合形态学和16S rRNA序列分析的方法,着重对海南岛6个市县共13个胡椒园进行P.penetrans资源鉴定发现,在经筛选获得的33个具代表性巴斯德芽菌克隆中,32个克隆子被鉴定为P.penetrans,而克隆子tf-1与P.penetransT(AF077672)的相似性仅为97.7％,且在发育树上处于独立分支,可能为巴斯德芽菌属的一个新种.聚类分析结果发现,海南岛存在较丰富的P.penetrans资源,但在不同的地理区域内没有发现明显的种内地域特异性.     

海南岛胡椒地穿刺巴斯德芽菌鉴定与多样性分析

穿刺巴斯德芽菌（Pasteuria penetrans）是根结线虫（Meloidogyne spp.）的专性寄生菌,且是研究最多的线虫天敌细菌之一。胡椒作为海南的主要经济作物之一,根结线虫发病率较高。前期的研究发现,在海南岛胡椒中较易分离到P. penetrans。结合形态学和16S rRNA 序列分析的方法,着重对海南岛6 个市县共13 个胡椒园进行P.penetrans 资源鉴定发现,在经筛选获得的33 个具代表性巴斯德芽菌克隆中,32 个克隆子被鉴定为P. penetrans,而克隆子tf-1 与P. penetransT（AF077672）的相似性仅为97.7%,且在发育树上处于独立分支,可能为巴斯德芽菌属的一个新种。聚类分析结果发现,海南岛存在较丰富的P. penetrans 资源,但在不同的地理区域内没有发现明显的种内地域特异性。     

应用细菌防治植物寄生线虫

本文综述了细菌防治植物寄生线虫的研究历史、现状．包括了穿刺巴斯德杆菌、根际细菌和苏云金杆菌作用于线虫的机制,在生物防治上的应用及其前景展望．     

杨梅线虫研究

从福建省南安县杨梅树根部和根际土壤样本中鉴定出线虫计１２属、１８种和２个不定种．线虫群体一般由２－５个属组成．其中根结线虫、根腐线虫、螺旋线虫和拟毛刺线虫是分布较广泛的植物寄生线虫．根据杨梅生长衰退与根结线虫病发生的关系，认为根结线虫是杨梅的重要病原线虫．     

新疆棉田寄生线虫的种类

从新疆18个地区采集棉花根际土样及根样127份,对其中的寄生线虫种类进行鉴定.根据测量数据和形态特征,共鉴定出11属、11种寄生线虫.其中真滑刃线虫、茎线虫、螺旋线虫是优势种群.     

淡紫拟青霉与放线菌代谢物复配对南方根结线虫的防治

对淡紫拟青霉和放线菌的拮抗特性及其复配菌剂对南方根结线虫的防治进行了研究.采用杯碟法和平板对峙法测定了淡紫拟青霉菌株PL1和PL2与放线菌菌株LH117和LH121的拮抗性,结果表明两种生防菌4个菌株之间没有明显的拮抗作用;效价法测定结果显示,LH121的发酵上清液对PL2的菌丝生长有轻微抑制作用,抑制率为14.5%.室内生物测定表明,按等体积比例配成的淡紫拟青霉孢子液和放线菌发酵上清液组合的4种复配菌剂处理对根结线虫的卵孵化抑制率和二龄幼虫杀死率分别可达到66.6%和78.0%,明显高于各单菌株处理;温室盆钵试验结果表明,PL1孢子液和LH117发酵上清液的复配菌剂对番茄的根结形成和根结线虫卵块形成的抑制率分别为68.7%和58.4%.上述结果表明:淡紫拟青霉与放线菌的复配菌剂对根结线虫的防治效果比单菌株的防治效果显著,复配菌剂的防治效果与生防菌株间的相瓦拮抗性可能密切相关.     

四川省棉田植物寄生线虫种属研究

用浅盘法对四川省10个县的棉枯萎病圃和连作重枯萎病土壤进行线虫的分离和鉴定,共检出植物寄生线虫7个属、5个种.其中,肾形线虫(Rotylenchulus reniformis)、穿刺根腐线虫(Pratylenchus penetra)和矮化线虫(Tylenchorhynchus spp.)分布广,发生频率高,数量大,是棉田的主要种群。     

几种昆虫病原线虫对大蜡螟幼虫血淋巴及其能源物质含量的影响

用异小杆线虫（Heterorhabditis spp．）和斯氏线虫（Steinernema spp．）处理大蜡螟5龄幼虫。结果显示：处理后12h昆虫血细胞开始变形、崩解，且血细胞数量急剧下降，到昆虫接近死亡时（24～32h左右），血细胞数比正常水平下降85％；处理后24h血淋巴总量下降73．61％，酯酶活性不断增强，蛋白含量明显高于对照。总糖含量降低14％～70％。上述结果表明：昆虫病原线虫的侵入破坏了寄主的防御系统，改变了寄主血淋巴能源物质含量。     

江苏省瓜蒌根结线虫种类鉴定

本文对江苏瓜蒌上根结线虫样本进行广泛采集,单卵块纯化培养后,运用形态学方法和分子生物学方法对其进行了鉴定。根据雌虫会阴花纹、雌虫、雄虫和2龄幼虫的相关测量值等形态学鉴定特征,并结合特异引物的PCR扩增图谱,鉴定出该病原为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)。结果表明,江苏省瓜蒌根结线虫群体类型为南方根结线虫,将进一步为该病害传播、流行和控制提供可行的理论依据。     

一种新型培养与收集伞滑刃线虫的装置*

 介绍一种新型的培养与收集伞滑刃线虫的装置。其优点为获得虫量大,虫体洁净,实验取虫方便,收集到的活虫百分率可达90%以上。该装置已获国家专利,专利授权号：2008200816062。