鹅多个组织GHR和IGF-Ⅰ基因表达的发育性变化

为研究鹅不同组织生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因发育性变化,本试验选择0日龄杂交鹅(吉林白鹅×农安籽鹅)78只作为试验动物,应用荧光定量技术分别对0、14、28、42、56日龄鹅心脏、肝脏、腺胃、腿肌GHR以及IGF-I mRNA进行测定。结果显示,0~56日龄期间杂交鹅GHR以及IGF-I mRNA在肝脏中表达量最高,其次为腿肌和腺胃,心脏GHR以及IGF-I mRNA表达量最低。鹅心脏、肝脏、腺胃和腿肌GHR mRNA表达量随日龄增加有极显著的发育性变化(P0.01)。鹅心脏、肝脏、腿肌GHR mRNA表达量均于14日龄达到峰值,鹅腺胃GHR mRNA表达量于28日龄达到峰值。鹅肝脏、腺胃和腿肌IGF-I mRNA表达随日龄增加有极显著的发育性变化(P0.01)。鹅心脏、腿肌IGF-I mRNA表达量于28日龄出现峰值,但肝脏、腺胃IGF-I mRNA表达量在0~56日龄不断升高。总体上看,公鹅与母鹅各组织GHR以及IGF-I mRNA表达量无显著差异(P0.05)。结果表明,日龄对于GHR和IGF-I基因在鹅各组织表达具有重要影响;性别对鹅组织GHR和IGF-I基因表达影响较小;鹅各组织GHR和IGF-I基因发育性变化具有组织特异性,各基因表达量在鹅不同组织出现峰值的时间并不一致。     

日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响

选择年龄、体质量相近的杂交母羊(萨福克♂×小尾寒羊♀)24只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白水平的日粮(中蛋白日粮,低蛋白日粮和高蛋白日粮).采用半定量RT-PCR方法,检测日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响.结果表明:日粮的蛋白质水平影响绵羊腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪和半腱肌组织IGF-Ⅰ基因的表达,随着口粮蛋白质水平的升高IGF-Ⅰ表达量增加.但表达具有组织特异性,在腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪中,中蛋白组和高蛋白组均显著高于低蛋白组(P<0.05),在半腱肌组织中,高蛋白组极显著高于低蛋白组(P<0.01),而中蛋白组与高蛋白组和低蛋白组间均无显著差异(P>0.05).     

五指山猪8种组织IGF2和IGFBP3基因表达的发育性变化研究

采用Q-PCR 技术检测了胰岛素样生长因子2(IGF2)和胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)基因在30、60、90、120 和150 日龄五指山猪心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、肌肉、胃脏和小肠等8种组织中的mRNA表达水平.结果表明:(1)IGF2基因在8种组织中的表达呈相似的变化规律:各组织mRNA表达量随着日龄的增加而降低,30日龄时表达量最高,150龄时表达量最低,差异显著(P<0.01);(2)IGFBP3基因在心脏、肺、脾脏、肾脏、肠、胃等组织中的mRNA表达规律相似:即从30～150日龄,依次递减;而肝脏和肌肉mRNA表达从30日龄开始上升,肝脏在90日龄达最高,肌肉在60日龄时达最高,随后二者开始下降,在150日龄时达最低水平.以上结果初步揭示了五指山猪IGF2和IGFBP3基因表达的发育性变化模式,为深入研究五指山猪生长发育及矮小性状形成机理提供了基础数据.     

二花脸猪和大白猪睾丸IGF-Ⅰ和IGF-IR基因表达发育变化的研究

为了研究生长轴激素对猪繁殖性能发育的影响,随机选取0、3、20、30、90、120、180日龄纯种二花脸公猪和大白公猪各4头,屠宰并采取睾丸组织样,以18S rRNA为内标,用相对定量RT-PCR法研究睾丸IGF-Ⅰ和IGF-IR mRNA的表达及发育性变化。结果表明,二花脸猪与大白猪睾丸IGF-ⅠmRNA表达的发育模式在30日龄前完全相同,即随着日龄的增加而呈极显著增加（P〈0.01）;二花脸猪睾丸IGF-Ⅰ mRNA相对表达量在30-180日龄无显著变化;大白猪睾丸IGF-Ⅰ mRNA相对表达量在90日龄有所下降,而在120和180日龄又恢复到30日龄水平。二花脸猪睾丸IGF-Ⅰ mRNA相对表达量显著高于大白猪（P〈0.05）。二花脸猪与大白猪睾丸IGF-IR mRNA表达的发育模式不同。二花脸猪睾丸IGF-IR mRNA相对表达量在90-120日龄呈显著下降趋势（P〈0.05）;大白猪IGF-IR mRNA相对表达量在0日龄较高,随后显著下降（P〈0.05）,并在观察期内持续保持较低水平。二花脸猪IGF-IR mRNA相对表达量显著高于大白猪（P〈0.05）。睾丸IGF-Ⅰ mRNA和IGF-IR mRNA相对表达丰度呈极显著正相关（r=0.575,P〈0.01）。结论：（1）不同品种猪睾丸IGF-Ⅰ和IGF-IR mRNA表达具有特定的发育模式;（2）猪睾丸中IGF-Ⅰ和IGF-IR mRNA的协同表达可能对猪繁殖性能的发育有重要调节作用。     

赖氨酸对绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-Ⅰ基因表达调控的影响

为了研究赖氨酸对绵羊组织生长的影响,试验选用15只年龄、体重相近的杂交母羊(陶塞特♂×蒙古羊♀)随机分为3组,于基础日粮中分别添加不同水平的赖氨酸(0,4,10 g),采用Realtime PCR方法检测日粮不同赖氨酸水平对绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-Ⅰ mRNA表达的影响.结果表明:日粮赖氨酸水平影响绵羊肝脏...     

赖氨酸对绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-Ⅰ基因表达调控的影响

为了研究赖氨酸对绵羊组织生长的影响,试验选用15只年龄、体重相近的杂交母羊(陶塞特♂×蒙古羊♀)随机分为3组,于基础日粮中分别添加不同水平的赖氨酸(0,4,10 g),采用Real-time PCR方法检测日粮不同赖氨酸水平对绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-ⅠmRNA表达的影响。结果表明:日粮赖氨酸水平影响绵羊肝脏和背最长肌中GHR和IGF-Ⅰ基因的表达,随日粮赖氨酸水平的提高肝脏GHR和IGF-ⅠmRNA及背最长肌IGF-ⅠmRNA表达量相应增加;背最长肌中4 g和10 g赖氨酸组GHR基因相对表达量均极显著高于对照组(P<0.01),10 g赖氨酸组的GHR基因相对表达量与4 g赖氨酸组间差异不显著(P>0.05)。说明添加一定量的赖氨酸可以调节绵羊组织的生长发育。     

T1R1和T1R3在从江香猪附睾发育中的表达模式

为研究味觉受体第一家族亚型1(T1R1)和3(T1R3)在从江香猪附睾发育过程中的表达模式,探讨味觉受体在哺乳动物雄性生殖机能中可能发挥的作用及潜在医学价值,本试验以从江香猪附睾组织为研究对象,分析附睾发育4个关键时期:初情前(15 d)、初情时(30 d)、初情后(60 d)和性成熟期(180 d)T1R1与T1R3的差异表达。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学(IHC)和Western blot检测两个味觉受体在不同日龄从江香猪附睾组织中转录、翻译水平的变化及其分布情况。RT-qPCR结果表明:TAS1R1与TAS1R3 mRNA在从江香猪附睾初情前(15 d)至性成熟期(180 d)表达量逐渐增加,且任意两个时期间差异极显著(P<0.01)。Western blot结果显示,T1R1/T1R3蛋白在180 d表达量最高,在15 d表达量最低,两者之间差异显著(P<0.05),平均表达丰度依次为180 d> 30 d> 60 d> 15 d。IHC结果显示,T1R1和T1R3蛋白在各日龄组从江香猪附睾组织均有分布,其中T1R1蛋白主要在上皮细胞膜上,尤其是基细胞和窄细胞;而T1R3蛋白主要在微绒毛、环状空泡和精子呈强阳性表达。综上,本研究发现不同日龄从江香猪附睾的T1R1/T1R3表达从15 d逐渐增加,至性成熟达到峰值,这一表达变化与附睾上皮基细胞和窄细胞及微绒毛的T1R1/T1R3的差异表达有关,这些特殊的表达模式与附睾生理功能存在时间关联,故推测T1R1和T1R3参与附睾内精子成熟和储存的调节过程。     

湖羊MSTN基因表达的发育性变化

实验以湖羊为研究对象,采用RT-PCR法对MSTN基因在湖羊不同生长阶段背最长肌中表达丰度,为湖羊肌肉生长性状的选育提供遗传学资料.研究表明,出生后随着月龄的增加,母羊MSTN在背最长肌的表达趋势为:除在3月龄略有下降外,2日龄到6月龄大体上处于一个上升的过程,并于6月龄到达最高点;公羊MSTN在背最长肌的表达趋势为:2日龄到3月龄处于一个上升的过程,于3月龄到达最高点,3月龄到4月龄相对表达下降,4月龄到6月龄又逐渐上升.MSTN在湖羊公母以及各月龄间大多存在显著或极显著差异.结果显示,性别和年龄对于MSTN在湖羊不同生长阶段的肌肉中的表达均没有出现随着日龄的增加而一直增加或下降的趋势.     

猪CuZnSOD基因片段的克隆及不同生长阶段猪肝脏CuZnSOD基因表达的差异

从体质量1、20、40、60、90kg左右的杜长大猪的肝脏组织中提取基因组RNA，RT—PCR扩增CuZnSOD基因，获得了1务255bp的片段，以pGEM—TEasyVector为载体，将该片段克隆到大肠杆菌（E．coli）中，筛选阳性克隆测定其序列，分析表明该片段与报道的猪CuZnSODcDNA部分序列同源性达到100％，编码85个氨基酸组成的多肽，是成熟肽的一部分。以CuZnSOD基因片段的克隆为基础，构建了优化的半定量RT—PCR法，以18SrRNA为内标，研究不同生长阶段猪肝脏组织中CuZnSOD基因mRNA表达的差异。结果显示，1kg左右猪肝脏组织中CuZn—SODmRNA表达水平较高，体质量1～20kg猪的肝脏组织中CuZnSOD基因表达量呈下降趋势，体质量40kg的猪又显著上升，到生长后期即体质量90kg左右，CuZnSOD基因表达量又急剧下降。     

重组猪生长激素对猪脂肪组织GH-R、IGF-1、IGF-I R和Leptin基因表达的影响

选用体质量50kg左右的去势长白×大约克公猪16头,随机分为试验组和对照组,试验组猪每日肌肉注射重组猪生长激素(rpGH)4 mg/头,28 d后屠宰采集背部皮下脂肪,用RT-PCR方法,以18S rRNA作内标,定量分析脂肪组织中生长激素受体(GH-R)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子I型受体(IGF-1 R)和瘦蛋白(Leptin)的mRNA丰度.结果显示,试验猪脂肪细胞GH R mRNA丰度比对照猪增加了50 9%(P＜0.05),IGF-lmRNA丰度增加27.8%(P＜0.05),IGF I RmRNA丰度增加48.1%(P＜0.01),而LeptinmRNA丰度则此对照猪减少28.2%(P＜0.05).结果提示,生长激素不仅可以直接调节脂肪组织,还可能通过脂肪GH-R介导产生IGF-I,以旁(自)分泌形式调节脂肪组织的代谢.     

江口萝卜猪PPP3CA和PPP3R1基因的表达规律研究

为探究PPP3CA和PPP3R1基因在江口萝卜猪不同生长阶段和组织中的表达规律,试验选取4个月龄阶段江口萝卜猪的9个组织,采用分子生物学方法检测2个基因的表达量.结果:(1)相同月龄时,PPP3R1基因在腰大肌、背最长肌中的表达量最高,显著高于其他组织;在心脏中表达量最低,显著低于其他组织;在肝、脾、肺、肾、胃、十二指...     

脂滴包被蛋白基因对猪肌肉发育的影响

PLIN(perilipin,脂滴包被蛋白)是脂滴表面含量最多的一种蛋白,被认为是影响猪生长、胴体及肉质性状的重要候选基因。PLIN基因几乎在所有组织中均有广泛表达,对脂肪组织中甘油三酯的分解和储存具有重要的双重调控作用,主要调控类固醇激素合成前体、胆固醇酯的分解;通过调节脂肪酶的功能和脂肪沉积来影响肌肉的生长发育并能影响高氧化能力组织内的线粒体功能。本文综述了猪PLIN基因背景、基因结构及组织分布情况,并对近年来PLIN基因对猪肌肉发育影响的研究进行了总结,解析其在骨骼肌发育差异调控网络中的地位和作用,为家猪生产性状改良提供理论依据。     

民猪与长白猪初乳EGF、IGF-1和乳糖含量的比较研究

为了探究民猪与长白猪初乳表皮生长因子(EGF)、胰岛素生长因子1(IGF-1)和乳糖含量的变化规律,试验采用竞争ELISA法和Teles法,测定了母猪产后不同时间点初乳中EGF、IGF-1和乳糖含量。结果表明:民猪和长白猪初乳中EGF含量于母猪分娩后0小时最高,分别为(5.262±0.939)、(6.754±1.055)ng/m L,且在母猪分娩后的72 h内分别降低为(1.136±0.185)、(1.099±0.304)ng/m L;分娩后0~36 h,长白猪初乳中EGF含量高于民猪,于0,6小时达到显著水平(P0.05)。民猪和长白猪初乳IGF-1含量于母猪分娩后0小时最高,分别为(392.056±62.630)、(494.651±68.360)ng/m L,在母猪分娩后的72 h内分别降低至(18.025±4.628)、(19.076±7.1957)ng/m L;分娩后0~72 h长白猪初乳中IGF-1含量高于民猪初乳,于0小时达到显著水平(P0.05)。民猪和长白猪初乳中乳糖含量于母猪分娩后0小时最低,分别为(26.554±7.067)、(18.168±3.080)mg/m L,在母猪分娩后的72 h内分别升高至(50.629±7.001)、(48.877±7.396)mg/m L;分娩后0~72 h民猪初乳中乳糖含量均高于长白猪,分别于0,6,24,36小时达到显著水平(P0.05)。     

日粮铜对猪生长性能及血清GH、INS、IGF-I、IGFBP3水平的影响

选用60头断乳"军牧1号"白猪,分成6组,每组10头,分别饲以添加0、100、150、200、250、300 mg/kg铜(硫酸铜)的日粮,进行为期80 d的饲养试验,定期称重、采血,观测铜对仔猪生长性能及血液GH、INS、IGF-I、IGFBP3的影响.结果表明基础日粮中添加100～300mg/kg铜均能促进仔猪的生长,降低饲料消耗,其中以250mg/kg铜和第40～60天最为显著(P＜0.01).高剂量铜能显著提高循环血液中GH、INS、IGF-I、IGFBP3的水平,其中以添加250mg/kg铜水平,于试验期第20～40天最为明显(P＜0.01).高铜促生长作用显然是通过促进GH、INS、IGF-I的合成和分泌而实现的.     

荣昌猪和长荣猪肌肉生长抑制素基因表达规律的研究

为了研究荣昌猪和长荣猪胴体瘦肉率和骨骼肌肌肉生长抑制素( MSTN)基因表达量的变化规律,试验采用2×2因子试验设计,荣昌猪和长荣猪(两种基因型猪)分别饲喂按中国瘦肉型猪饲养标准和荣昌猪饲养标准配制的日粮,共4个处理,每个处理6个重复,在20 kg、35 kg、50 kg、80 kg和110 kg时每个重复屠宰1头.结...     

日粮精氨酸水平对生长肉兔氮代谢及肝脏胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)基因表达的影响

探讨日粮精氨酸水平对断奶～2月龄生长肉兔氮代谢和肝脏胰岛素样生长因子( IGF-Ⅰ)基因表达的影响.选用断奶肉兔100只,随机分成5组,在基础日粮中添加不同水平的精氨酸(0、0.2％、0.4％、0.6％和0.8％),预试期7d,正试期23 d.结果表明:日粮中不同水平精氨酸对生长肉兔的尿氮水平影响显著(P值为0.016 7),各添加组的尿氮含量显著低于不添加组(P＜0.05),日粮不同水平精氨酸对其它氮代谢指标均无显著影响(P＞0.05).采用实时荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ荧光染料法对家兔肝脏细胞中IGF-Ⅰ基因的表达水平进行了相对定量分析,结果表明:日粮不同精氨酸水平显著影响肝脏IGF-Ⅰ mRNA表达量(P值为0.018 2),并且添加精氨酸组IGF-Ⅰ mRNA表达量明显高于不添加组 (P＜0.05),各添加组之间差异不显著(P＞0.05).     

荣昌猪和长荣猪肌肉生长抑制素基因表达规律的研究

为了研究荣昌猪和长荣猪胴体瘦肉率和骨骼肌肌肉生长抑制素(MSTN)基因表达量的变化规律,试验采用2×2因子试验设计,荣昌猪和长荣猪(两种基因型猪)分别饲喂按中国瘦肉型猪饲养标准和荣昌猪饲养标准配制的日粮,共4个处理,每个处理6个重复,在20 kg、35 kg、50 kg、80 kg和110 kg时每个重复屠宰1头。结果表明:荣昌猪和长荣猪的瘦肉率随体重的增加呈降低的趋势,背最长肌中MSTN基因的表达量呈上升的趋势;在相同体重条件下,荣昌猪的胴体瘦肉率显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地低于长荣猪,其背最长肌中MSTN基因表达均明显高于长荣猪,而日粮营养水平及品种×营养水平交互作用对猪胴体品质和MSTN基因的表达量没有明显影响(P>0.05)。     

TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、FSH和TGFβ1对猪颗粒细胞增殖凋亡的影响

为研究TGF-β通路对猪颗粒细胞增殖、凋亡的影响,本研究对TGF-β通路基因进行调控处理,设计并筛选可高效干扰TGFβRⅠ及TGFβRⅡ表达的载体,转染不同干扰载体及添加10 ng/m L TGFβ1和25 ng/m L FSH,采用Westernblot、MTT和流式细胞法检测不同处理对颗粒细胞TGFβ RI和TGFβ RII蛋白表达量和细胞增殖凋亡的影响。结果表明：成功筛选出干扰效率最高的p OSP1-TGFβRⅠ-sh5和p OSP1-TGFβRⅡ-sh3载体,对TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的抑制率分别为78.00%和84.10%;转染后TGFβRⅠ干扰组的TGFβRⅠ蛋白表达量显著低于其阴性对照组;TGFβRⅡ干扰组、TGFβ1组和FSH组的TGFβRⅡ蛋白表达量显著低于其阴性对照组;TGFβ RI干扰组、TGFβ RII干扰组的增殖抑制率极显著高于PLL3.7空载体组,TGFβ 1组细胞增殖抑制率极显著高于空白对照组且FSH组的增殖抑制率显著高于空白对照组;TGFβRⅠ干扰组和TGFβRⅡ干扰组细胞凋亡率极显著高于PLL3.7空载体组;TGFβ1组和FSH组细胞凋亡率极显著高于...     

莱芜猪肌肉脂肪酸组成的发育性变化及其对肉质特性的影响

以40￣90kg6个体重阶段莱芜猪和新莱芜猪为试验对象(n=6),研究肌肉脂肪酸组成的发育性变化及其与肉质特性的关系。结果表明:①随着体重的增大,莱芜猪肌肉总脂含量显著(P<0.01)增加;饱和脂肪酸(SFA)总量的比例有下降的趋势,不饱和脂肪酸(UFA)总量有增加的趋势,但差异不显著;在UFA中,多不饱和脂肪酸(PUFA)总量及亚油酸的比例显著(P<0.01)下降,油酸比例显著(P<0.01)增加;②总体上,莱芜猪肌肉中的SFA+单不饱和脂肪酸总量、总脂、棕榈酸、棕榈烯酸的比例显著高于新莱芜猪,而PUFA总量、硬脂酸、亚油酸、花生烯酸的比例显著(P<0.01)低于新莱芜猪。各体重阶段2个品种间的脂肪酸组成也存在着较大的差异;③莱芜猪肌肉中的PUFA总量与总脂、水分、失水率、大理石纹评分相关显著;总脂与水分、大理石纹相关极显著(P<0.01);SFA、UFA总量与大理石纹呈显著(P<0.05)相关。     

水牛实验感染肝片吸虫后IGF-Ⅰ和β内啡肽含量变化及其对免疫功能的影响

头健康阉公水牛, ５ 头经口每日感染肝片吸虫囊蚴６０ 个／ 头, 连续２０ ｄ ; ３ 头不感染作对照。于感染前和感染后每周采集颈静脉血样１次, 共２７ 次, 分别测定血浆 Ｉ Ｇ Ｆ Ⅰ、β内啡肽 （β Ｅ Ｐ） 以及 Ｗ Ｂ Ｃ 、 Ｄ Ｃ ; Ｔ、 Ｂ 淋巴细胞比例和血清抗肝片吸虫 Ｉｇ Ｇ 水平。结果 Ｉ Ｇ Ｆ Ⅰ和β Ｅ Ｐ 分别在开始感染后第５ 周和第４ 周显著升高, 并持续到第２３ 周和第９ 周; Ｉｇ Ｇ 水平也在第４ ～２２ 周显著高于对照组, 嗜酸性粒细胞和 Ｂ 淋巴细胞比例也明显升高。结果表明肝片吸虫感染后水牛免疫功能的变化可能与 Ｉ Ｇ Ｆ Ⅰ及β Ｅ Ｐ 有关。