转植酸酶基因玉米植酸酶稳定性的研究

试验以转植酸酶基因玉米(PTC)为原料,通过烘箱高温处理,研究PTC的耐热性能;通过在不同挤压温度(60、80和100℃)和不同物料(750 U/kg PTC组和6 500 U/kg PTC组)组合下,研究PTC在制粒加工工艺中的稳定性。结果表明:PTC具有较好的耐热性能,120℃烘箱处理5 min,其植酸酶酶活损失率为13.38%;但在制粒温度上升时,植酸酶酶活损失率呈明显上升趋势,当制粒温度达到100℃时,PTC的植酸酶酶活损失率在90%以上。     

植酸酶应用的影响因素

１饲料加工温度植酸酶水解植酸或植酸盐使其中的磷酸根离子释放出来，其酶的活性随着温度升高而增加。但其作为一种生物活性蛋白质，当温度升至７０℃以上时，酶的活性会因其变性而降低，作为饲料添加剂应用时，人们考虑更多的是饲料加工工艺参数中的制粒温度对植酸酶活性的影响。尽管微生物来源的植酸酶比其他酶制剂更耐高温（植酸酶的最适温度可高达６０～７０℃），但高温度调制过程中的活性损失是在所难免的。解决这地问题的途径有三个，一是特异微生物菌株的筛选，使用Aspergillusniger生产的植酸酶在９０℃环境下放置３０min，其活性…     

植酸酶包埋后酶活和热稳定性的变化规律研究

为了了解植酸酶在包埋状态下酶活及酶性的变化,分别对酶的释放情况和热稳定性进行了研究。结果表明,随着时间的延长,包埋酶释放出的酶活逐渐上升(P<0.01),60min时达到最大值;而未包埋酶释放出的酶活逐渐下降(P<0.01),60min时达到最小值。包埋酶和未包埋酶在30、40、50、60、70、80、90和100℃的条件下,随着温度的升高,残留的植酸酶活力下降(P<0.01)。对于包埋酶,当温度升高到70℃时,植酸酶相对酶活仍保持在93%(P>0.05);当温度升高到80℃时,植酸酶的相对酶活才明显下降(P<0.01),不过在100℃时,仍能保持67%的酶活(P<0.01)。对于未包埋酶,当温度升高到60℃时,植酸酶相对酶活明显下降(P<0.01);当温度升高到100℃时,植酸酶相对酶活仅有23%(P<0.01)。通过在统一温度条件下,对包埋酶和未包埋酶处理组的相对酶活的对比发现,在50℃以下时,二者差异不显著,当温度超过60℃时,包埋酶的相对酶活极显著高于未包埋酶。     

植酸酶包埋后酶活和热稳定性变化的规律研究

为了了解植酸酶在包埋状态下酶活及酶性的变化,分别对酶的释放情况和热稳定性进行了研究.结果表明,随着时间的延长,包埋酶释放出的酶活逐渐上升(P＜0.01),60min时达到最大值;而未包埋酶释放出的酶活逐渐下降(P＜0.01),60 min时达到最小值.包埋酶和未包埋酶在30、40、50、60、70、80、90和100℃的条件下,随着温度的升高,残留的植酸酶活力下降(P＜0.01).对于包埋酶,当温度升高到70℃时,植酸酶相对酶活仍保持在93%(P＞0.05);当温度升高到80℃时,植酸酶的相对酶活才明显下降(P＜0.01),不过在100℃时,仍能保持67%的酶活(P＜0.01).对于未包埋酶,当温度升高到60℃时,植酸酶相对酶活明显下降(P＜0.01);当温度升高到100℃时,植酸酶相对酶活仅有23%(P＜0.01).通过在统一温度条件下,对包埋酶和未包埋酶处理组的相对酶活的对比发现,在50℃以下时,二者差异不显著,当温度超过60℃时,包埋酶的相对酶活极显著高于未包埋酶.     

pH值对植酸酶酶活的影响及其在猪、鸡消化道中的分析

通过测定在不同ｐＨ值条件下两种植酸酶的活性,发现ｐＨ值对植酸酶活力有较大影响。在鸡嗉囊的ｐＨ值条件下,Ｔ植酸酶和Ｎ植酸酶的酶活相对标准酶活都是１００％,而在动物真胃的ｐＨ值条件下,Ｔ植酸酶和Ｎ植酸酶的酶活相对标准酶活分别是７７．８２％和４９．６１％。     

6种商品植酸酶对热和pH的耐受性比较

本试验测定了六种商品植酸酶(A、B、C、D、E和F)分别在不同的温度和pH条件下的酶活性,以比较这6种商品植酸酶对不同温度和pH的耐受性。试验结果表明,A、B、C、D、E和F等6种植酸酶产品经40℃水浴处理15h后残留的相对酶活分别为88%、83%、93%、76%、51%和43%;经80℃水浴处理1min后残留的相对酶活分别为97%、96%、69%、84%、67%和98%;经95℃水浴处理5min后残留的相对酶活分别为83%、76%和22%;在偏离pH5.5时,6种植酸酶的相对酶活均呈大幅下降,其中在pH6.0时均下降到60%以下,在pH2.0时分别下降至43%、42%、24%、30%、45%和52%。     

不同来源植酸酶抗逆性的研究

本试验通过模拟饲料制粒过程及动物胃环境,对不同来源的植酸酶在经过高温和酸处理后酶活变化情况进行了对比分析,为植酸酶的实际应用提供理论依据。(方法)搜集到11种市售的植酸酶产品,编号为1~11采用湿热法,温度分别设置为75℃、80℃和85℃,处理时间为2.5min,p H处理值设定为4.0、3.0和2.5,处理时间为2h。结果表明,不同来源的植酸酶耐温性和耐酸性存在很大差异,从耐温性看,温度在75℃~80℃时,1号样相对酶活最高,而继续升至85℃时,11号样稳定性最好,10号样次之;从耐酸性看,p H值从4.0降至3.0时,10号样相对酶活最高,11号样次之,其他稳定性均比较差。因此,综合考虑,在模拟饲料制粒条件和动物胃环境下评定酶的作用效果,以10、11号样耐受性最好,4、5号样酶活稳定性最差。     

不同制粒温度对植酸酶活性的影响及畜禽饲养对比试验研究

试验将含有制粒专用植酸酶制剂的日粮样本在4种温度条件下进行制粒．制粒后的饲料应用植酸酶国标法进行酶活测定,结果表明：制粒专用植酸酶在调制温度70℃左右、蒸汽压力不高的情况下酶活基本未丧失,性能比较理想：当制粒温度达到80℃以上时,酶活明显降低,但总体保持在500U／kg以上．制粒用植酸酶仍具有较好的耐热性能。经过动物饲养试验表明．肉鸡和育肥猪饲养对照组和处理组之间的平均日增重和料肉比差异都不显著（p〉0．01）,这说明在添加制粒专用植酸酶后．对磷酸氢钙的量进行调整并不会影响肉鸡和育肥猪的生长性能．且同样能达到普通植酸酶在粉状饲料中的应用效果。     

发芽、温度及pH对麦类籽实中植酸酶活性的影响

在25℃的条件下发芽 ,小麦东农123、小麦东农973821、大麦垦啤2号在第3天植酸酶活性达到最高 ,分别为原来的2.04、2.55、4.63倍 ;小黑麦92021、小黑麦5305及黑麦2号在第1天即达到最大 ,为发芽前的1.36、1.82和2.45倍。小黑麦5305中植酸酶的适宜温度为50℃ ,在40℃～60℃范围内可保持较高的酶活 ;适宜pH为5.5 ,低于4.0或高于7.0 ,酶活性基本丧失。温度与pH对植物植酸酶活性的影响存在互作效应     

饲用植酸酶酶活测定过程中底物的影响研究

参照国标法测定饲用植酸酶活性,研究不同来源的底物植酸钠、底物浓度、底物pH对饲用植酸酶活性的影响。结果表明,以P8810为代表的植酸钠盐水合物作为底物,其测定出的植酸酶酶活显著高于使用以P3168为代表的植酸钠作为底物所测定的植酸酶酶活。以P8810作为底物时,其反应浓度在高于6.6 mmol/L时,会产生底物抑制效应。以P8810作为底物时,调节底物pH至国标中定义的5.5与未调节pH所测得的植酸酶酶活相比较,差异并不显著,且在低底物pH条件下,某些植酸酶同样能够释放出最大催化活性。因此现有的国标法测定饲用植酸酶活性已与实际应用有一定的差别,不能照搬国标方法测定现有饲用植酸酶产品。