草地早熟禾的石蜡切片制作技术的优化

以草地早熟禾为材料,在传统石蜡切片方法的基础上,结合草地早熟禾组织结构特点,对脱水、透明、染色等重要制片环节进行改良。结果显示:脱水过程中,将乙醇逐级梯度脱水时间增加,有利于后续浸蜡,避免石蜡切片上的植物材料脱落;透明过程中,将纯二甲苯增加更换频率,同时减少每次处理时间,其透明更彻底;有效的番红固绿染色时间组合处理,使草地早熟禾解剖形态更为清晰。一系列针对草地早熟禾石蜡切片的优化,使得解剖图像染色均匀、图像清晰,不易出现植物材料脱落及组织结构不完整的情况,是观察草地早熟禾形态结构的有效方法。     

动物石蜡切片制作常见问题及改进措施

随着科学研究的进步,目前在动物传染病的诊断方面经常采用准确、快速的PCR、Elisa等分子生物学方法;但是PCR、Elisa等方法要求操作精细、准确,由于操作不当会出现假阳性或假阴性,对于肿瘤等内科病也无法诊断。石蜡切片可以直观地观察到组织细胞的病理变化,是一种准确、低廉的诊断疾病方法,在疾病诊断、病理学研究、教学等方面广泛应用。     

制作石蜡切片的注意事项

石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法.石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中.     

脊髓等柔软组织石蜡组织切片制作技术探讨

以家兔脊髓组织为实验材料,探讨制作大批量脊髓组织教学标本简便、可行的方法。结果表明,用常规方法制作优质的脊髓组织切片时,在10%的中性福尔马林固定液中固定7 d,进行H.E染色时,苏木精染色的时间为30 min,伊红染色时间6 min,制作的切片细胞核嗜碱性、呈蓝紫色,细胞质和细胞间质嗜酸性、呈粉红色,胞质内尼氏体为蓝紫色颗粒,两者间颜色对比度好,容易区分,是制作大批量教学标本的可选方法。     

制作石蜡切片的注意事项

石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。     

一种快捷安全的动物病理组织石蜡切片制作技术

为探索一种快捷、安全、实用的病理切片制作技术,本试验在传统石蜡切片制作技术的基础上,通过技术改良与创新,发现了一种快捷安全的病理切片制作方法。试验结果表明,运用这种方法制作病理切片不仅简单快捷,而且制得的病理切片质量高,H.E.染色细胞着色良好,镜下观察细胞结构清晰,胞质与胞核对比鲜明;本方法兼具冰冻切片和石蜡切片二者的优点。     

马睾丸石蜡切片制作前期处理条件的优化

目的优化石蜡切片制作前期处理——固定和脱水条件。方法对比Bouin固定液与4%多聚甲醛两种不同固定液在4 ℃和室温不同时长下的固定效果;对比6 h和18 h时长的脱水效果。结果4%多聚甲醛4 ℃固定24 h后进行18 h脱水或Bouin 4 ℃或者常温固定24 h后进行6 h脱水均能达到有效支持后期石蜡切片制作的目的。结论Bouin固定液常温固定24 h后进行6 h脱水处理可作为野外采取马睾丸组织制作石蜡切片最佳的前期处理方案。     

鸽常规石蜡切片制作技术的体会及改良

为了使传统的石蜡切片技术满足病理研究与诊断的需要,针对鸽的石蜡切片制作过程中易出错的环节,探讨制作优良鸽石蜡切片的具体方法,对制作过程中取材、固定、修整、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色及封固等步骤进行改良,镜检结果表明获得了高质量的石蜡切片。     

牛眼球石蜡切片制作方法的探索

为探索一种牛眼球的石蜡切片制作方法,本试验比较了常规石蜡切片制作方法和改良的石蜡切片制作方法．结果表明,试验组标本固定后肉眼可见视网膜与脉络膜紧密相连,仅有小部分视网膜出现脱离的现象;切片显示小梁网连续性未被破坏;眼球壁全层组织连续性未破坏,各层未出现分离现象;视网膜无脱离,各层组织细胞无收缩现象。说明试验组大大改进了眼球固定、脱水、透明技术方法,解决了较大眼球无法制作石蜡切片的难题,为眼球基础研究和相应病理研究提供了基础：     

驴皮肤石蜡组织切片制作技术的探讨

皮肤组织与其他组织不同,具有一定的特殊性,其特点是纤维组织多、细胞组织少、组织硬韧。与石蜡相容性差,按常规技术难获满意切片。本实验以驴的皮肤组织为实验材料,探讨制作优质驴皮肤组织切片的技术,为后续实验驴真皮中胶原蛋白的定性和定位研究奠定基础。结果表明,用常规方法制作优质的驴皮肤组织切片时在10%甲醛固定液中固定7d,低熔点蜡锅浸蜡1h,高熔点蜡锅浸蜡2h,制作出的石蜡切片的效果最好。     

快速HE染色切片制作

苏木精和伊红染色方法 (简称HE染色 )是生物学和医学领域中组织学和细胞学等学科中最常见的切片染色方法。染色质量的好坏直接影响到细胞观察的科学性和病理学诊断的准确性。但在一些特殊情况下 ,在保证切片质量的前提下需要进行快速石蜡HE染色切片。经过长时间的石蜡切片HE染色的制作实践 ,对实验室不具备自动脱水机和自动染色机的HE染色切片快速制作方法进行了如下的总结。1　石蜡切片的快速制作常规 (普通 )快速包埋法 :此方法快速而且制片的效果很好 ,整个过程一般在 10～ 15min完成。过程如下 :①取材、固定、脱水 :取材小而薄 ,组…     

制作石蜡切片验证鸡胚盘显微注射外源DNA的效果

胚盘下腔是禽类胚胎发育到囊胚时出现的特有腔室,通过向禽类胚盘下腔注射外源细胞或基因是常用的制备嵌合体和转基因禽类的方法。本试验通过制备石蜡切片,验证胚盘下腔显微注射效果的方法。以白来航鸡种蛋为模型,向胚盘下腔中微注射少量的标记物,经过琼脂糖包埋脱水后制作石蜡切片,获得完整的鸡胚Ⅹ期胚盘切片。经过HE染色,可以观察到鸡胚Ⅹ期胚盘的上下胚层及胚盘下腔,鉴定标记物是否准确注入胚盘下腔中。结果表明利用本方法可以获取完整胚盘各个切面,准确检验胚盘显微注射效果,为改进显微注射方法和提高转基因禽类制备效率提供新的有利途径。     

猪腔前卵泡的分离及培养试验

试验建立了两种猪腔前卵泡的分离方法.方法Ⅰ采用将卵巢剪成碎块(约2 mm左右),通过孔径180 μm网筛挤压过滤,其滤液用孔径40 μm网筛过滤,检卵.方法Ⅱ是将剪碎的卵巢碎块用胶原酶消化1 h,然后用孔径180 μm网筛挤压过滤,滤液用孔径40 μm网筛过滤,检卵.通过对猪卵巢腔前卵泡的分离及培养,发现方法I分离的总体效果要优于方法II.另外,还发现猪龄越大,腔前卵泡的回收率越低.不同的胶原酶浓度,其分离的效果也不一样,浓度越高越不利于培养.     

家蚕卵石蜡切片中卵壳软化技术探讨

以KOH溶液作为卵壳软化液,设置浓度和软化时间梯度对家蚕蚕卵进行软化,以切片成功率为标准摸索卵壳最佳软化条件.结果表明以10%的KOH和5min的软化时间得到的切片成功率最高.     

快速石蜡切片技术在病理检验中的应用

在日常病理检验工作中,常常要求在较短的时间里做出准确的病理报告,但是目前兽医临床上使用的快速诊断方法存在诸多弊端,为满足诊断的需要,作者通过摸索和反复实践,利用超声波组织脱水机制作石蜡切片,可以快速制出与常规制片无明显差异的病理切片,该方法经济、安全,操作简单、适合于在基层兽医机构推广应用.     

猪腔前卵泡机械分离研究

本研究以分离到的卵泡数量、分离时间和卵泡在体外培养3 d后的存活率为指标比较了两种机械方法分离猪腔前卵泡的效果。结果表明:用针刮法分离猪腔前卵泡的数量(Φ<50μm:203600±59000;50μm≤Φ≤150μm:29.40±10.34;Φ>150μm:9.30±3.29)极显著(P<0.01)高于剪碎法(Φ<50μm:18900±12000;50μm≤Φ≤150μm:13.95±3.70;Φ>150μm:4.95±1.61),而且针刮法16.16±1.43 min分离时间比剪碎法(20.30±1.48)min短,(P<0.01)。体外培养3 d后,腔前卵泡存活率在两种方法之间没有明显差异。说明应用针刮法分离猪腔前卵泡能有效保护卵母细胞和颗粒细胞的正常形态以及基膜的完整性,从而使分离到的猪腔前卵泡维持正常的生理活性。     

分离方法及卵巢发育状况对猪次级卵泡分离和采集的影响

试验以直径在200～300 μm的次级卵泡为研究对象,研究了不同分离方法和卵巢不同发育状况对猪次级卵泡分离和采集的影响.结果表明,显微分离法每个卵巢可采集的卵泡数极显著高于剪碎过滤法,显微分离法分离每个卵泡所用的时间极显著低于剪碎过滤法;有黄体和无黄体的卵巢对卵泡采集的影响差异不显著,但有黄体的卵巢分离的卵泡数稍多于无黄体的卵巢.     

猪腔前卵泡的分离及培养试验

试验建立了两种猪腔前卵泡的分离方法。方法I采用将卵巢剪成碎块（约2mm左右），通过孔径180μm网筛挤压过滤，其滤液用孔径40μm网筛过滤，检卵。方法Ⅱ是将剪碎的卵巢碎块用胶原酶消化1h,然后用孔径180μm网筛挤压过滤，滤液用孔径40μm网筛过滤,检卵。通过对猪卵巢腔前卵泡的分离及培养，发现方法Ⅰ分离的总体效果要优于方法Ⅱ。另外，还发现猪龄越大，腔前卵泡的回收率越低。不同的胶原酶浓度，其分离的效果也不一样，浓度越高越不利于培养。     

猪卵泡液在猪体外受精中的应用

自 1 96 5年观察了猪卵泡液 (p FF)对小鼠卵母细胞减数分裂的作用 [1 ]以来 ,对p FF在猪卵母细胞体外成熟、体外受精和卵裂及体外胚胎发育中的作用已进行了深入研究。对 p FF组分的研究和应用 ,能促进卵泡液等重要生殖资源的充分利用 ,并有利于为生殖细胞的体外发育寻求新的培养基添加剂。