罗氏沼虾谷氨酰胺合成酶基因的克隆与表达

谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS)是一种广泛分布在动植物体内的酶,并参与细胞多种代谢调控。在甲壳动物中,GS在能量代谢和渗透压调节过程中起着重要作用。实验克隆了罗氏沼虾GS基因。GS基因cDNA全长1 965 bp,开放读码框(ORF)为1 086 bp,编码361个氨基酸(aa),分子量大小为40.75 ku,等电点为5.81。进化树分析发现,罗氏沼虾GS基因与凡纳滨对虾、斑节对虾和中国明对虾GS聚为一支,氨基酸相似性达到95%。氨基酸多序列比对分析结果显示,罗氏沼虾GS属于无脊椎动物分支的GSⅡ群,有5个保守区域。实验对罗氏沼虾GS蛋白进行表达并制备了多克隆抗体。采用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和免疫印迹(Western blot)对罗氏沼虾蜕壳前后的不同组织GS表达进行检测。qRT-PCR结果显示,GS基因在所检测的8个组织中均有表达;蜕壳前,其相对表达量顺序为:肝胰脏肌肉胃肠鳃心脏脑血淋巴。蜕壳后和蜕壳前GS基因在组织中的差异表达比较结果显示,除了在肝胰脏表达下调外,其他7个组织都表达升高,其相对表达量的差异顺序为:脑鳃胃肠肌肉心脏血淋巴。Westernblot结果显示,蜕壳后GS蛋白在鳃和肌肉组织表达量上调,与其mRNA表达一致。此外,罗氏沼虾蜕壳后肝胰脏GS酶的活性和谷氨酰胺的含量下调,而其在鳃、肌肉和血淋巴中上调,结果与其基因表达一致。研究表明,GS基因在不同组织中表达的差异可能和罗氏沼虾的能量代谢、渗透压调节有关。     

饲料中添加法夫酵母对罗氏沼虾的体色及生长状况的影响

在饲料中添加富含虾青亲的法夫酵母,能显著提高罗氏沼虾的增重车和存活率．增重率提高14．48％,存活率提高21．66％．并能改善罗氏沼虾的体色,虾壳中类胡萝卜素含量提高40．40％．使其外观更健康。     

非离子氨氮对罗氏沼虾幼体的毒性研究

通过非离子氨氮对罗氏沼虾幼体的急性致毒试验表明：Ⅴ期幼体９６ｈ的半致死浓度（ＬＣ５０）值为１．１４ｍｇ／Ｌ,安全浓度（ＳＣ）值为０．１１ｍｇ／Ｌ;Ⅸ期幼体９６ｈ的ＬＣ５０值为１．４０ｍｇ／Ｌ,ＳＣ值为０．１４ｍｇ／Ｌ,建议在育苗期间加强水质管理,有效地控制水体中非离子氨氮的浓度。     

饲料中添加维生素C对翘嘴鲌鱼种生长及组织中抗坏血酸含量的影响

在翘嘴(Culter alburnus)鱼种基础饲料中添加相当于抗坏血酸含量为0 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、150 mg/kg、200 mg/kg和400 mg/kg的包膜维生素C(Vc),制成7种实验饲料,饲养初始体质量为(3.71±0.11)g的7组翘嘴鱼种8周,每个实验组包含3个重复。结果表明,摄食不添加Vc饲料的实验鱼成活率显著低于其他Vc添加组(P<0.05)。饲料中Vc添加量为0~50 mg/kg时,对鱼体增重有显著影响(P<0.05),鱼体增重随添加量的增加而上升。但添加量继续增大,对鱼体增重不再有显著影响(P>0.05)。饲料中维生素C添加量为0和25 mg/kg时,饲料效率和蛋白质效率低于其他各组(P<0.05)。试验饲料中Vc不同添加量对肝体指数和全鱼体成分无显著影响(P>0.05)。肌肉中抗坏血酸含量随饲料中Vc添加量加大而不断上升,二者呈正相关关系(P<0.05)。肝胰脏抗坏血酸含量在Vc添加量≤100 mg/kg时,随饲料中Vc添加量加大而不断上升(P<0.05),但高于此添加量时,则肝胰脏中抗坏血酸不再随添加量的上升而有显著变化(P>0.05)。分别以鱼体增质量和肝胰脏中抗坏血酸为指标,经折线模型(Brokenline model)回归分析求得翘嘴鱼种饲料中Vc的适宜添加量分别为53 mg/kg和97 mg/kg。[中国水产科学,2007,14(1):106-112]     

饲料脂肪水平对克氏原螯虾亲虾生长性能、肌肉成分、繁殖性能以及血淋巴生化指标的影响

为研究克氏原螯虾亲虾对脂肪的需要量,本实验采用初始体质量为(15.46±0.20)g的克氏原螯虾亲虾324尾,分为6组(每组设置3个重复,每个重复18尾,雌雄比例为2:1),投喂粗蛋白质水平为30%,脂肪水平分别为1.98%(对照组)、4.12%、5.84%、7.89%、10.48%和11.89%的6组半精制饲料,饲养8周后,测定并分析亲虾的生长性能、肌肉成分、繁殖性能、肝胰腺消化酶活性以及血淋巴部分生化指标。结果发现:①随着饲料脂肪水平的升高,增重率和特定生长率先上升,在饲料脂肪水平达到7.89%后呈下降趋势;饲料系数和肝体比呈上升趋势,11.89%组最高。②饲料脂肪水平对亲虾肌肉水分和灰分含量无显著影响;随着饲料脂肪水平的升高,肌肉粗脂肪含量呈现先升高后降低最后趋于稳定的趋势,在饲料脂肪水平为5.84%时最高。③随着饲料脂肪水平的升高,性腺指数、抱卵率、抱卵量均呈现先上升后降低的变化规律,均在饲料脂肪水平为7.89%时达到最大。④血淋巴中总蛋白含量随饲料脂肪水平呈现先下降后上升趋势;谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性均随饲料脂肪水平升高而升高,均在11.89%组最高;血淋巴中葡萄糖含量各组间无显著性差异。⑤饲料脂肪水平对实验虾肝胰腺蛋白酶和脂肪酶活性有显著影响,对淀粉酶活性无显著性影响。利用增重率与饲料脂肪水平进行折线回归分析,克氏原螯虾亲虾获得最佳增重率时对饲料的脂肪需要量为7.60%。对实验虾生长性能、肌肉成分、繁殖性能、肝胰腺消化酶活性、血淋巴生化指标进行综合分析,显示本实验条件下克氏原螯虾亲虾对脂肪需要量为7.60%～7.89%。     

罗氏沼虾饲料中蛋白质的适宜含量及对豆粕作为饲料蛋白源的初步评价

试验采用以酪蛋白和鱼粉为蛋白源、有４个蛋白梯度的饲料以及以豆粕为唯一蛋白源的饲料，在流水孵化桶内饲养３．６克左右的罗氏沼虾，４９天后以增重率、饲料系数和蛋白质效率作饲料蛋白源的评价指标。结果表明：含５０％粗蛋白的饲料，其各项评价指标明显优于含４０％、３０％和２０／粗蛋白的饲料，组间差别十分显著（Ｐ＜０．０１）；４０％与２０％两组之间亦存在明显差异，但４０％与３０％以及３０％与２０％蛋白组的组间差别不明显。说明罗氏沼虾饲料中蛋白质的适宜含量与海水养殖虾类的相仿。以豆粕为蛋白源的两个组（粗蛋白含量均为３５％）也都取得理想的饲养效果，它们与５０％蛋白组无显著差异，表明豆粕可以用作罗氏沼虾饲料的蛋白源。考虑到实用性、经济效益和蛋白质利用率等诸种因素，将罗氏沼虾前中期饲料的蛋白含量定为４０％．后期饲料定为３５％是比较恰当的。     

罗氏沼虾GLUT1基因克隆及其在血糖稳态调节中的功能

为了探究葡萄糖转运蛋白 1 (glucose transporter type 1, GLUT1)在罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)糖代谢调控中的作用, 本研究采用 cDNA 末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)克隆获得罗氏沼虾 Mr-GLUT1 基因全长 cDNA 序列, 该基因全长 1929 bp, 开放阅读框(open reading frame, ORF) 1446 bp, 编码 481 个氨基酸, 分子量为 52035.73, 等电点为 6.76。多序列比对及系统进化树分析结果显示, 十足目 GLUT1 基因具有较高同源性, 均存在 12 个跨膜结构域, 罗氏沼虾 GLUT1 与对虾首先聚为一支, 表明亲缘关系最近。实时荧光定量 PCR 结果显示, Mr-GLUT1 在罗氏沼虾各组织均有表达, 肠道表达量最高。葡萄糖注射后, 罗氏沼虾血淋巴葡萄糖水平、肝糖原和肌糖原含量迅速升高, 肠道、肝胰腺和肌肉组织 Mr-GLUT1 基因表达显著上调, 但 Mr-GLUT1 基因表达变化时间延迟于葡萄糖含量的变化。RNA 干扰沉默罗氏沼虾体内 Mr-GLUT1 基因表达后, 血淋巴中葡萄糖和海藻糖含量显著上升。研究表明, Mr-GLUT1 基因可能参与罗氏沼虾血糖稳态调节, 在葡萄糖和海藻糖转运过程中发挥重要作用。     

不同剂型维生素C对罗非鱼生长的影响

研究了不同剂型Ｖｃ对奥尼罗非鱼的饲喂效果。结果表明，添加Ｖｃ的５个试验组的增重率、饲料转化率均优于对照组，而稳定型Ｖｃ组又优于结晶Ｖｃ组，各稳定型Ｖｃ组以Ｖｃ磷酸脂镁和Ｖｃ硫酸脂钾效果更好     

藕池养殖罗氏沼虾试验

为探讨罗氏沼虾在藕池中养殖的可行性,１９９８年泗水县水产站进行了藕池养殖罗氏沼虾试验,经验收,亩产藕１９８０ｋｇ,虾６２ｋｇ,鱼７０ｋｇ,亩纯盈利５０３５元。现将试验情况报告如下：１材料与方法１．１藕池条件本试验选在中册镇故县村原养鱼池塘中进行。参试池塘１．２亩,水源充足,水质清新,排注方便。养殖期间,池水溶解氧≥５ ｍｇ／Ｌ,ｐＨ值 ７～７．６。池底为沙壤土,池埂坚实,保水性好。池塘可注水深１．５ ｍ。１．２藕池改造 ３月中旬池塘清淤后,翻池松土 ３５ｃｍ深,平整池底。池内按“目”字形开挖虾沟,沟…     

VC聚磷酸酯对罗氏沼虾生长的影响

随着动物营养和饲料科学的研究进展，ＶＣ在水产养殖中的作用逾来逾受到人们的关注和重视。水产动物机体本身不能合成ＶＣ，必需由饵料供给，当ＶＣ缺乏时，水产动物则表现出厌食，抗病力差，生长迟缓等症状。由于ＶＣ在空气中、高温下极不稳定，容易被氧化而失去活性，因此目前国内外都在研究稳定型ＶＣ，其中ＶＣ聚磷酸酯的研究及应用较为广泛。为了考察饲料中添加ＶＣ聚磷酸酯对罗氏沼虾生长的影响，我们于１９９８年７月进行了如下试验。１　材料与方法１－１　试验饲料试验饲料基础配方如表１，各组饲料除复合维生素中ＶＣ含量不同外，…