三种群银鲫的RAPD分析初报

利用２０个随机引物对产于方正、彭泽和淇河地区的三个银鲫种群进行了ＲＡＰＤ检测结果显示１４个引物的扩增效果良好,单一引物扩增的ＤＮＡ片段数在２￣１３条之间,片段长度在３００￣４０００ｂｐ之间。根据ＲＡＰＤ结果,进行了银鲫种群内、种群间的遗传差异分析。１４个引物中,引物ＯＰＶ－０７、ＯＰＶ－１４和ＯＰＶ－２０等对三种群银鲫扩增出的指纹图谱差异显著,可作为银鲫种群鉴定的分子标记。     

滁州鲫·方正银鲫和彭泽鲫分子遗传差异的分析

[目的]研究滁州鲫、方正银鲫及彭泽鲫间的分子遗传差异。[方法]滁州鲫、方正银鲫和彭泽鲫为我国3个不同地区的三倍体银鲫种群,用9对引物对它们进行了RAPD分析。[结果]9对引物中,仅引物P10扩增的产物没有差异外,其余8种引物（P1～P8）的扩增产物均有一定的差异。[结论]3个不同地区的银鲫种群在基因水平上存在一定差异,在遗传相似性方面,滁州鲫与方正银鲫的相似性较大,滁州鲫与彭泽鲫的相似性则较小。     

四种耐寒植物的RAPD分析

用RAPD分子标记对4种耐寒植物进行了基因组DNA遗传多样性分析,从35个随机引物中筛选出了扩增谱带清晰并呈现多态性的20个随机引物,每个引物能产生1-10条RAPD片段,多态性条带占67.61%.利用UPGMA聚类法对4种卫矛属植物的176条谱带进行聚类分析,结果表明,北海道黄杨和扶芳藤聚类成一组,大叶黄杨和金心黄杨聚类成另一组,可见,RAPD技术对卫矛属植物的分类鉴定和遗传多样性评价是有效可行的.     

我国近海中国对虾种群遗传差异的RAPD分析

应用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对取自我国近海烟台、长岛、青岛、宁波等4个地方的20只中国对虾进行了种群内和种群间遗传差异分析。在使用的50个随机引物中，有9引物扩增出条带清晰的多态性片段。烟台、长岛、青岛、宁波等4个地理种群内的遗传距离分别为0．0154、0．0370、0．0462、0．0550，种群之间的遗传距离分别为0．0793、0．1139、0．0988、0．1485、0．0880、0．1260。UPGMA和NJ法构建的种群间分子系统树基本一致，结果表明不同地理种群这间存在一定程度的遗传差异。     

我国近海中国对虾种群遗传差异的RAPD分析

应用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对取自我国近海烟台、长岛、青岛、宁波等4个地方的20只中国对虾进行了种群内和种群间遗传差异分析。在使用的50个随机引物中，有9引物扩增出条带清晰的多态性片段。烟台、长岛、青岛、宁波等4个地理种群内的遗传距离分别为0．0154、0．0370、0．0462、0．0550，种群之间的遗传距离分别为0．0793、0．1139、0．0988、0．1485、0．0880、0．1260。UPGMA和NJ法构建的种群间分子系统树基本一致，结果表明不同地理种群这间存在一定程度的遗传差异。     

4种卫矛属园林植物的RAPD分析

卫矛属(Celastraceae L.)植物为常绿灌木或稀小乔木,以其对寒、盐、有害气体等逆境的强抗性而为人们所关注。但是,林木品种真实性和纯度的鉴定已经成为困扰苗木质量管理最突出的问题之一。笔者用RAPD分子标记对4种卫矛属植物进行基因组DNA遗传多样性分析,从35个随机引物中筛选出扩增谱带清晰并呈现多态性的20个随机引物,每个引物产生1~10条RAPD片段,多态性条带占67.61%。利用UPGMA聚类法对4种卫矛属植物的176条谱带进行聚类分析。结果表明,北海道黄杨和扶芳藤聚类成一组,大叶黄杨和金心黄杨聚类成另一组。可见,RAPD技术对卫矛属植物的分类鉴定和遗传多样性评价有效可行。     

昆虫学RAPD的应用现状

综述了RAPD在昆虫分类学、系统发育分析、种群遗传学、连锁图谱的构建、特殊基因的检测和定位、父系分析、精子竞争以及杂交带的确定等研究中的应用。目前,在昆虫学研究中,因RAPD的致命缺点使人们对其的兴趣有所降低,而把更多的注意力转向一些更可靠的如微卫星等共显性标记,但各种分子标记都有一定的缺陷,RAPD仍然会是一种重要的分子标记。在我国,RAPD被大量地应用于昆虫学的研究中,并取得了丰硕成果,但在样本量、扩增条件优化、数据分析、研究问题的深度及应用范围等方面还有待进一步发展。     

攀枝花芒果遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD分子标记技术对12个芒果品种进行遗传多样性研究。结果发现,6条RAPD引物共检测到36条清晰谱带,其中多态性条带占比为77.78%。芒果在物种水平上遗传多样性较高,而在居群水平上遗传多样性相对较低;居群间遗传变异较高,在居群水平上,金白花的遗传多样性最高,遗传分化程度最低;乳芒和马亚的遗传多样性最低,遗传分化程度最高。聚类分析结果表明,相似系数为0.72时,12种芒果品种可分为4个大类群,金白花和鹰嘴芒的遗传一致度最大,贵妃和鹰嘴芒遗传一致度最低。     

银鲫与普通鲫早期胚胎发育的比较研究

为了解黑龙江水系银鲫Carassius auratus gibelio和普通鲫C.auratus auratus的胚胎发育过程,对银鲫(3n♀×3n♂,SS)和普通鲫(2n♀×2n♂,DD)的胚胎发育过程进行了比较观察。结果表明:SS(DD)成熟的卵子呈浅黄色,卵膜透明,圆形,有黏性,卵径为1.3¹.7 mm(1.21.7 mm(1.2¹.6 mm);水温为(23±1)℃条件下,SS(DD)受精后1 h 08 min(1 h 03 min)进入卵裂期,受精后2 h 54 min(5 h 02 min)进入囊胚期,受精后8 h 06 min(6 h 49 min)进入原肠胚期,受精后10 h 25 min(10 h 51 min)进入神经胚期,受精后14 h 22 min(16 h 20 min)进入器官形成期,59 h 31 min(59 h 05 min)后出膜。研究表明,SS和DD均具有正常的早期胚胎发育过程,这为进一步了解SS和DD的遗传背景和生殖方式提供了生物学依据。     

普安银鲫mtDNA D-loop序列多态性分析

为从分子水平探讨普安银鲫遗传多样性,运用PCR扩增和DNA直接测序技术,对25尾鱼的线粒体DNA的D-loop区段序列进行分析。结果表明:80%的普安银鲫mtDNA D-loop区全序列长度为923 bp,少数个体由于碱基缺失及插入为920 bp和924 bp;其序列中A+T平均含量(53.36%)高于G+C含量(46.64%);共发现36个变异位点,定义了10种单倍型,单倍型间的平均遗传距离为0.017,单倍型多样度(Hd)为0.850,核苷酸多样性(Pi)为0.01376,平均核苷酸差异数(K)为12.660,普安银鲫存在丰富的遗传多样性。     

壳聚糖对异育银鲫生长和饲料消化率的影响

采用单因子试验设计方法,试验分成4组进行,对照组和3个试验组,每组3个重复.对照组投喂基础饲料,3个试验组分别投喂在基础饲料中添加0.25%壳聚糖、0.50%壳聚糖和1.00%壳聚糖的试验饲料,自然水温下饲养异育银鲫Carassius auratus gibelio 50尾/池[初始体质量为(78.31±2.15)g].64 d后,采用国标常规方法测定异育银鲫肌肉的营养成分,采用国标间接法(以Cr2O3为外源指示剂)测定饲料能量和营养成分消化率,并计算特定生长率、饲料系数、蛋白质效率、蛋白质沉积率、白肌RNA/DNA,旨在探讨壳聚糖对异育银鲫生长、饲料营养成分和能量消化率及利用率的影响.结果表明,饲料中添加0.50%以上的壳聚糖可以显著提高异育银鲫的特定生长率(P<0.05)、蛋白质消化率(P<0.05)和白肌RNA/DNA(P<0.05),显著降低异育银鲫对饲料脂肪的消化率(P<0.05).添加0.50%壳聚糖可以显著降低异育银鲫的饲料系数(P<0.05),显著提高蛋白质效率和肌肉中的蛋白质沉积率(P<0.05),显著提高异育银鲫对饲料能量的消化率(P<0.05).添加0.25%和0.50%壳聚糖可以显著提高鱼体肌肉中的灰分含量(P<0.05).由此看来,在饲料中添加0.50%壳聚糖可以提高蛋白质和能量的消化率和利用率,从而降低饲料系数、促进异育银鲫的生长.     

精子膜蛋白在异精雌核发育银鲫中的作用

通过对雄性银鲫的新鲜精液进行分级抽提得到精子的不同组份,包括精浆、精头的膜、鞭毛和脱膜精头等,在荷包红鲤和雌性银鲫杂交时加入其中的可溶性精头膜蛋白组分,研究精子膜蛋白在雌核发育银鲫异源受精中的作用。研究发现,加入同源精子膜蛋白后的雌核发育银鲫异源受精卵的孵化率比对照组低很多,并且在子代培育过程中,发现了生长速度快、表型和父本相似、基因型基本和父本基因型相同的特殊子代。在某种程度上表明：精子膜蛋白可能是雌核发育银鲫卵子进行雄核发育的关键因素。     

异育银鲫饲料中适宜脂肪需求量研究

研究异育银鲫（Carassius auratus gibelio）饲料中脂肪的适宜需要量,以鱼粉豆粕为蛋白源、鱼油作为添加的脂肪源,分别添加0、2％、4％、6％和8％的鱼油,配制成5组饲料。对平均体质量每尾（17．00&#177;0．15）g的异育银鲫进行为期45d的养殖试验。结果表明各试验组的饵料系数、蛋白质效率差异不显著（P〉0．05）,饲料中脂肪含量6．04％的试验组饵料系数最低（2．00）、蛋白质效率最高（1．19）、其增重率与饲料中脂肪水平为4．08％的比较差异不显著（P〉0．05）,但与其余各试验组的差异显著（P〈0．05）;饲料中主要营养物质的表观消化率以添加6．04％试验组最高,且粗脂肪、钠及饲料总消化率显著高于对照组（P〈0．05）,但与脂肪水平为4．08％的试验组差异不显著（P〉0．05）。试验表明异育银鲫饲料中脂肪的适宜需求量为4．08％-6．04％。     

精子膜蛋白在异精雌核发育银鲫中的作用

通过对雄性银鲫的新鲜精液进行分级抽提得到精子的不同组份，包括精浆、精头的膜、鞭毛和脱膜精头等，在荷包红鲤和雌性银鲫杂交时加入其中的可溶性精头膜蛋白组分，研究精子膜蛋白在雌核发育银鲫异源受精中的作用。研究发现，加入同源精子膜蛋白后的雌核发育银鲫异源受精卵的孵化率比对照组低很多，并且在子代培育过程中，发现了生长速度快、表型和父本相似、基因型基本和父本基因型相同的特殊子代。在某种程度上表明：精子膜蛋白可能是雌核发育银鲫卵子进行雄核发育的关键因素。     

左旋咪唑对异育银鲫免疫促进作用的初步研究

对异育银鲫注射左旋咪唑（ＬＭＳ）、福尔马林灭活的嗜水气单胞菌（ＦＫＣ）和添加ＬＭＳ的ＦＫＣ（ＬＭＳ＋ＦＫＣ）后,通过测定鱼体血液中白细胞的吞噬活性和血清中凝集抗体效价,观察了ＬＭＳ对异育银鲫免疫应答的增强作用。结果表明：无论单独注射ＬＭＳ还是与ＦＫＣ结合注射,ＬＭＳ均能明显地促进供试鱼血液中白细胞的吞噬活性;而且ＦＫＣ＋ＬＭＳ免疫组的血清凝集抗体效价高于ＦＫＣ免疫组。     

大蒜渣对异育银鲫生长·消化酶活性及免疫功能的影响

[目的]为大蒜渣的合理利用和异育银鲫的健康养殖提供科学指导。[方法]用大蒜渣粉含量分别为0%、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%、4.0%和5.0%的浮性膨化颗粒饲料饲喂异育银鲫,研究饲料中添加不同比例大蒜渣对异育银鲫生长性能、主要消化酶活性和非特异性免疫功能的影响。[结果]饲料中添加适量的大蒜渣可显著促进异育银鲫生长、降低饲料系数,提高蛋白酶、淀粉酶、溶菌酶和过氧化氢酶活性,降低丙二醛含量。[结论]饲料中大蒜渣的适宜添加量为0.5%～2.0%。     

额尔齐斯河银鲫寄生虫区系调查研究

[目的]对额尔齐斯河(中国段)银鲫(Carassius auratus gibelio Bloch)寄生虫种类及感染情况进行调查研究.[方法]采用鱼类寄生虫学调查方法.[结果]共剖检银鲫175尾,发现寄生虫9种,分别为坏鳃指环虫(Dactylogyrus vastator)、旋形指环虫(Dactylogyrus falciformis)、伸展指环虫(Dactylogyrus extensus)、复口吸虫幼虫(Diplostomum larva sp)、复殖吸虫幼虫(Trematoda larva sp)、绦虫幼虫(Cestodearvasp)、对盲囊线虫幼虫(Contracaecum Railliet larva sp)、泡吻棘头虫(Pomphorhynchus laevissp)、短指三指鳋(Paraergasilus brividigitus),隶属于4门、6纲、7目、7科、7属.[结论]根据S2/X的判别原则,9种寄生虫在银鲫种群中的分布均为聚集分布;复口吸虫、泡吻棘头虫、对盲囊线虫的感染率大于10;,为该区系的核心种;复口吸虫为优势种.     

加拿大一枝黄花提取物对异育银鲫车轮虫的杀灭活性

采用常温水提法、乙醇提取法及正已烷微波萃取法等3种方法分别从加拿大一枝黄花的根、茎、叶中提取分离出活性物质粗制品.将得到的各粗制品分别配成浓度为5 mg·L-1的处理液,进行抑制和杀灭异育银鲫鱼种体表车轮虫试验.结果显示,加拿大一枝黄花各器官的活性物质对车轮虫均有一定的抑制和杀灭效果.杀虫效果和鱼的成活率综合结果表明,加拿大一枝黄花叶的微波萃取液对车轮虫等寄生虫病的防治效果十分显著.     

不同方法灭活的哈维氏弧菌菌苗对异育银鲫的免疫原性比较

将哈维氏弧菌（Vibrio harveyi)制备成福马尔林灭活菌苗（formalin killed V.harveyi,F-VH)，苯酚灭活菌苗（phenol killed V.harveyi,P-VH)和热灭活菌苗（heat killed V.harveyi,H-VH)，以注射法接种异育银鲫（Carassius auratus gibelio)后，通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价，头肾及血液中吞噬细胞的吞噬活性和杀菌活性，对用不同方法制备的3种灭活菌苗的免疫原性进行了比较。结果表明，3种不同方法制备的V.harveyi菌苗对异育银鲫均显示出较强的免疫原性，其中以F－VH的免疫原性最强，P－VH其次，而H－VH的免疫原性较弱。说明用福尔马林灭活V.Harveyi较用苯酚和热灭活方法更有利于保护V.harveyi菌体的有效抗原。