牛卵母细胞冷冻保存研究进展

通过随时随地提供具有发育能力的卵母细胞,卵母细胞冷冻保存赋予体外受精、核移植、转基因等胚胎工程技术的极大灵活性,还可为珍稀濒危野生动物的保种提供技术参考.综述了牛卵母细胞冷冻保存方法及冷冻保存对牛卵母细胞结构和发育能力的影响.     

牛体外成熟卵母细胞冷冻保存的研究

本实验探讨了用６各不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体受精后的发育潜力及其冷冻损伤，尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数（８６．１％）形态正常，但体外受精后的受精率（３０．０％）和卵裂率（７．４％）明显低于对照组（６９．０％和５２．９％）。卵裂后继续发育的能力严重受损，在６种冷冻方法中，１．６Ｍ丙二醇分步平衡、程序冷冻效果最好，受精率和卵裂率分别达３６．４％和１３．５％，冷冻后卵母细胞发育潜力下降     

家畜卵母细胞冷冻保存研究进展

通过随时随地提供具有发育能力的卵母细胞,卵母细胞冷冻保存将赋予体外受精、核移植、转基因等胚胎工程技术的极大灵活性。本文综述了冷冻保存对家畜卵母细胞发育能力的影响。     

未成熟牛卵母细胞与成熟牛卵母细胞冷冻保存的比较

试验以OPS玻璃化冷冻为方法,以成熟和未成熟牛卵母细胞为材料,研究冷冻保存效果与卵母细胞成熟度的关系.一组将牛卵母细胞从牛卵巢内取出后直接进行冷冻,另一组将牛卵母细胞从牛卵巢内取出后先置于TCM199 FSH的培养液中培养20～22 h,即进行体外成熟后再进行两步法冷冻,两步法解冻后检测卵母细胞的存活率.结果表明,牛体外成熟卵母细胞冷冻效果较未成熟卵母细胞冷冻效果好,卵母细胞的存活率为48.1%,未成熟牛卵母细胞冷冻效果较成熟卵母细胞冷冻效果差,卵母细胞的存活率为35.1%.     

牛卵母细胞玻璃化冷冻研究进展

探讨了玻璃化冷冻对牛卵母细胞的损伤以及目前常用的改善方法,以期降低牛卵母细胞玻璃化冷冻带来的损伤。     

绵羊卵母细胞冷冻保存方法的研究

实验探讨了两种绵羊卵母细胞冷冻保存方法效果的差异。解冻的绵羊卵母细胞，挑选出形态完好的进行体外受精，然后进一步培养，比较发育情况。实验结果表明，79.7％与94.3％的卵母细胞形态正常，受精率分别为21.06％与31.87％。玻璃化冷冻保存后形态正常率较高（P＜0.01）。     

牛羊卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

卵母细胞玻璃化冷冻保存对于胚胎生物技术的发展具有重要意义,因其简便、快速、廉价等优点而广泛应用于人类辅助生殖、体外胚胎生产、转基因、克隆等方面.由于受到低温和抗冻保护剂的影响,卵母细胞在冷冻过程中都会造成形态和功能上的损伤,并且存活率和发育能力随之降低.本文以牛、羊卵母细胞玻璃化冷冻保存为例,对卵母细胞玻璃化冷冻保存的...     

山羊卵母细胞冷冻保存及其对发育效果的影响

在程序冷冻条件下,冷冻保护剂种类对山羊卵母细胞发育效果有显著影响。对于山羊GV期卵母细胞,解冻后的形态正常率,PROH(83 1%)和DMSO(81 7%)均高于甘油(70 7%)(P<0 05);而体外成熟率则是PROH(20 3%)高于DMSO(14 2%)和甘油(9 8%),DMSO又高于甘油(P<0 05)。对于山羊IVM卵母细胞,解冻后的形态正常率,PROH(84 5%)和DMSO(86 4%)均高于甘油(74 2%)(P<0 05);而受精率则是PROH(23 2%)高于DMSO(17 5%)和甘油(13 1%),DMSO又高于甘油(P<0 05)。冷冻方法和卵母细胞发育阶段对冷冻效果有显著影响。从冷冻方法看,程序冷冻和OPS玻璃化冷冻,GV期卵母细胞的成熟率分别为19 7%、27 6%,受精率为3 3%、8 6%;培养9h卵母细胞的成熟率分别为20 6%、30 9%,受精率为4 4%、10 3%;IVM卵母细胞的受精率分别为20 9%、29 4%,2 细胞率为4 4%、8 8%,均是OPS玻璃化高于程序冷冻,差异显著(P<0 05);从卵母细胞发育阶段看,不论是程序冷冻还是OPS玻璃化冷冻,GV期和培养9h卵母细胞的成熟率、受精率差异均不显著(P>0 05),但受精率均显著低于IVM卵母细胞(P<0 05)。     

小鼠卵母细胞冷冻保存技术研究进展

卵母细胞的冷冻保存是动物繁殖技术领域生殖细胞冷冻的研究热点。在此介绍了小鼠卵母细胞冷冻保存的研究进展，阐述了小鼠卵母细胞冷冻保存的原理，探讨了冷冻保护剂的作用机理。最后，对小鼠卵母细胞的冷冻保存方法及其原理进行了概括。     

羊卵母细胞冷冻保存研究进展

卵母细胞的冷冻保存在动物科学、临床医学等领域具有重要作用,同时,也可以为核移植、转基因等现代生物技术研究提供丰富的试验材料,使卵母细胞的供给不受时间和空间的限制。本文综述了羊卵母细胞冷冻保存及其损伤机制的研究进展,并指出了其存在的问题和应用前景。     

牛卵泡卵母细胞的体外成熟和冷冻保存

在简化牛卵母细胞体外成熟的基础上,观察了保护剂、平衡温度、预平衡方法、解冻方法以及冷冻方法对牛卵泡卵母细胞冷冻的影响。结果表明:在体外成熟培养液中添加26.2 mmol/L的NaHCO3和对屠宰场卵巢进行选择更能促进牛卵母细胞的体外成熟;无论是程序冷冻还是玻璃化冷冻,乙二醇(EG)与甘油(GLY)相比更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻效果;在程序冷冻中,冷冻液中添加0.1 mol/L蔗糖比添加0.3mol/L的蔗糖更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻;在玻璃化冷冻中,37℃和25℃的平衡温度比4℃更适合牛卵泡卵母细胞的冷冻;在10%、5%、1%的预平衡浓度之间,5%的预平衡浓度即可达到预平衡的效果;在解冻时,多步脱除保护剂更能保护冷冻的卵母细胞;比较了几种最小样本量(minimum size sample,MSS)玻璃化冷冻方法,解冻成熟培养后的成熟率,拉细毛细玻璃管冷冻法为(41.67±3.19)%,极显著高于未拉细毛细玻璃管冷冻法(glassmicropipette,GMP)的(30.19±1.93)%和固体表面冷冻法(solid surface vitrification,SSV)的(28.33±2.89)%(P<0.01)。     

卵母细胞冷冻保存研究进展

1977年Whittingham首次成功报道冷冻一解冻小鼠MⅡ期卵母细胞产仔,自此许多学者对多种动物及人卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前小鼠、家兔、牛、马、山羊、绵羊及猪等动物卵母细胞的冷冻保存均有报道,而世界上已经有100多个冷冻卵母细胞的婴儿出生。卵母细胞的冷冻保存可为体外受精、核移植、转基因动物的研制提供更方便的材料来源;[第一段]     

牛卵泡卵母细胞冷冻保存后发育潜力的研究

对用３种不同方法（Ａ法：１．０ｍｏｌ／Ｌ甘油平衡，从２０℃开始以１℃／ｍｉｎ的速度降至－℃，植冰，１０ｍｉｎ后以０．３℃／ｍｉｎ降至－３０℃，再以０．１℃／ｍｉｎ降至－３３℃，投入液氮；Ｂ法：１．６ｍｏｌ／Ｌ丙二醇＋０．ｌｍｏ１／Ｌ蔗糖平衡，５℃冰箱中保存１５ｍｉｎ，从Ｏ℃开始按Ａ法中的程序降温；Ｃ法：即玻璃化法）冷冻保存的牛ＧＶ期卵母细胞的发育潜力进行了研究。解冻后，Ｃ组卵母细胞形态正常率显著高于Ａ、Ｂ两组。３种方法冷冻的卵母细胞成熟培养后，平均卵丘扩展率为６０％，其中Ｃ组最高（６９．９％）。卵丘扩展的卵母细胞中，７９．３％发生ＧＶＢＤ，但大多数没有达到ＭＩ期。３组冷冻卵母细胞的体外成熟率、体外受精率分别为１４．２％、８．３％、２０．０％和１０．０％、７．１％、１２．１％，其中Ａ组中有１枚卵裂。     

羊卵母细胞冷冻保存研究进展

近年来,绵羊、山羊胚胎工程技术的快速发展致使对卵母细胞的需求量越来越大。此外,作为家畜种质资源保护体系的组成部分,卵母细胞也是保存优秀雌性家畜遗传资源的重要方式之一。然而,作为胚胎生物技术的重要环节,由于其自身特殊的结构功能特点,卵母细胞对低温和冷冻极其敏感,其冷冻保存研究水平远低于胚胎。因此,如何提高冷冻保存卵母细胞质量是低温生物学和胚胎生物技术研究领域的热点和难点。针对目前绵羊、山羊卵母细胞冷冻保存的最新研究进展和存在问题进行综述,同时针对如何进一步提高绵羊、山羊卵母细胞冷冻保存质量提出建议,以期为之后的研究工作提供理论指导。     

卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

随着许多哺乳动物卵母细胞冷冻的成功,哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存技术取得了不断发展。作者列举比较了开口式拉长细管法、电镜铜网法、固体表面法和尼龙环法等多种卵母细胞的玻璃化冷冻保存方法,并对影响卵母细胞玻璃化冷冻保存的细胞骨架等因素进行了阐述。讨论后提出自己的建议。     

山羊卵母细胞冷冻保存技术的研究进展

阐述了卵母细胞冷冻的方法、机理、抗冻保护剂种类及发展过程.目前卵母细胞冷冻的研究中,玻璃化冷冻技术发展迅速,越来越受到科学工作者的青睐.山羊是畜牧业生产中的重要品种,因此山羊卵母细胞冷冻越来越受到科学研究者的重视,但是目前这方面的研究还处于初步阶段,研究报道很少,冷冻效果不尽人意.本文通过目前卵母细胞冷冻的发展情况作一综述,为山羊卵母细胞冷冻保存的研究提供一定的参考.     

猪卵母细胞超低温冷冻保存技术研究进展

猪卵母细胞有其特殊的生理构造,其冷冻效率一直很低,有关猪卵母细胞冷冻保存的研究尚处在探索阶段。猪卵母细胞冷冻保存方法,主要有快速冷冻和玻璃化冷冻两种,后者的冷冻效果似乎要优于前者,暗示着玻璃化冷冻在猪上的应用可能比程序化法更为优越。在玻璃化冷冻方面,包括OPS法、微滴法和电镜铜网法等,都是在冷冻载体上加以改进。此外,在冷冻保护剂、冷冻程序等方面,仍需要改进和优化,以期进一步提高猪卵母细胞的冷冻效率。     

不同冷冻方法对牛卵泡卵母细胞发育潜力的影响

本试验探讨了不同方法冷冻保存的牛卵泡卵母细胞体外受精后的发育潜力。尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞大多（79．1％）形态正常，但体外受精后的受精率（13．2％）和卵裂率（8．8％）均明显低于对照组（66．7％和46．0％），卵裂后继续发育的能力严重受损。在3种方法中，玻璃化冷冻效果最好，受精率分别达到15．0％和11．1％，是值得进一步研究的一种方法。     

山羊卵母细胞冷冻保存的研究进展

卵母细胞的冷冻保存在胚胎工程技术方面有重要意义。主要概述了山羊卵泡卵母细胞和腔前卵泡冷冻保存的研究进展,以期为后续研究工作提供参考。