注射LHRH-A对雌性石鲽血浆E_2含量的影响

采用放射免疫测定方法（RIA）测定石鲽（Kareius bicoloratus）生殖季节血浆雌二醇（estradiol）含量,观察注射外源激素促黄体激素释放激素类似物（LHRH-A）后血浆E2含量变动。结果表明,注射LHRH-A后6 h血浆E2水平显著升高,12 h显著下降,24 h略有下降,48 h回升但尚未达到处理前水平;对照组血浆E2含量在注射生理盐水（PS）后6 h显著下降,12 h、24 h持续下降,48 h略有回升但低于处理组。说明LHRH-A能有效促进血浆E2的产生和释放,但E2的产生和释放会受到环境胁迫和在实验过程中产生的操作胁迫作用的影响。     

渤海石鲽、星鲽、高眼鲽及焦氏舌鳎的食性

本文记载了对渤海石鲽(Platichthys bicoloratus)、星鲽(Verasper variegatus)、高眼鲽(Cleisthenes herzensteini)及焦氏舌鳎(Cynoglossus joyneri)四种经济比目鱼类食性的研究所得。石鲽及星鲽属底栖生物与游泳生物食性鱼类;高眼鲽属底栖生物食性鱼类;焦氏舌鳎属底栖与游泳生物食性鱼类。生活于同一生物群落中的比目鱼类以其营养生态位的部分交错,从而缓和了对食物的竞争。 材料与方法     

石鲽脑垂体组织生理学研究

石鲽(Kareius bicoloratus)脑垂体呈鸡心形,由神经垂体和腺垂体两部分组成。腺垂体又包括前外侧部(RPD)、中外侧部(PPD)和垂体中间部(PI)。神经纤维束延伸至腺垂体的各个部分。采用HE、Jafri、HA、Mallory和PAS染色法,结合免疫组织化学方法,对石鲽脑垂体的6种内分泌细胞进行鉴别和定位。RPD部位主要含有PRL和ACTH细胞,PI部位主要含有MSH细胞。PPD部位有4类细胞,分别为GH、Gt H、TSH和嫌色细胞。GH、Gt H和TSH细胞数量随鱼体生长发育而变化,Gt H在性腺成熟期达到高峰,GH细胞和TSH细胞在生长早期数量多。     

星斑川鲽、石鲽及其杂交一代(星斑川鲽♀×石鲽♂)的线粒体DNA序列比较分析

本研究以线粒体基因细胞色素b (Cytochrome b,Cytb)和细胞色素C氧化酶Ⅰ(Cytochrome oxidase subunitⅠ,COI)为研究对象,探究比较了星斑川鲽(Platichthys stellatus)、石鲽(Kareius bicolorarus)以及杂交F1代(星斑川鲽♀×石鲽♂)的种质遗传特性.结果显示,杂交子代与亲本的碱基(A+T)含量均高于(C+G)含量,且杂交F1代与母本星斑川鲽的(C+G)相同.基于mtDNA Cytb和COI序列结果显示,石鲽与星斑川鲽遗传距离分别为0.085和0.045;杂交F1代与石鲽遗传距离分别为0.076和0.045.基于mtDNA Cytb序列显示,杂交F1代与星斑川鲽遗传距离很小,仅0.009,而两者在COI基因序列上完全一致.基于Kimura 2-parameter模型的NJ分子系统树均显示,星斑川鲽和杂交F1代聚为一支,石鲽单独聚为一支.以上结果均可得出,杂交后代在线粒体DNA上呈现明显的母系遗传.杂交后代中出现左右眼的分化,且在COI的NJ系统树中,杂交F1代与母本星斑川鲽形成的一大支又分为两支:母本星斑川鲽与杂交F1代中外观显示左眼的聚为一支,杂交F1代中外观显示右眼的单独聚为一小支.表明线粒体基因COI与杂交F1代左右眼的分化有一定关系,为进一步研究星斑川鲽♀x石鲽♂提供了参考数据.     

星斑川鲽、黄盖鲽和石鲽线粒体基因Cytb和COⅠ片段序列的比较研究

星斑川鲽、钝吻黄盖鲽和石鲽是我国北方重要的经济海水鱼类。为探究这3种鲽科鱼类间的亲缘关系及遗传信息,本文采用了PCR扩增和直接测序的技术,对这3种鲽科鱼类各24尾个体的线粒体基因Cytb和COⅠ进行初步研究。测序得到的序列经人工处理校正后分析,其中Cytb基因片段可用长度为358bp,包含58个变异位点,20个转换位点,3个颠换位点;COⅠ基因片段可用长度为559bp,包含变异位点56个,转换位点18个,颠换位点3个;Cytb基因片段和COⅠ基因片段均表明黄盖鲽和石鲽具有较高的单倍型多样性与较低的核苷酸多样性,而星斑川鲽具有较低的单倍型多样性和较低的核苷酸多样性。基于Cytb和COⅠ序列的两种系统发育树(邻接法和不加权对群法)均表明3种鲽科鱼类中星斑川鲽与石鲽亲缘关系更近,与黄盖鲽相对较远。鲽科鱼类物种遗传多样性及遗传结构的分析可以为鱼类的保护和管理提供重要的理论依据,为保障我国鲽科鱼类养殖业的健康可持续发展提供理论指导和科学依据。     

石鲽人工育苗技术研究

根据石鳞的生物学特性，对其人工育苗中的亲鱼选择培育、采卵授精、人工孵化、仔稚鱼培育等关键技术进行了试验研究，并探讨了其与水温、光照等的关系。     

条斑星鲽精巢年周期发育规律和血液性类固醇激素含量变化

采用组织学方法和放射免疫法(RIA)等技术方法,研究了人工养殖条件下条斑星鲽雄性亲鱼精巢发育规律和性类固醇激素的年周期变化规律。实验结果表明,条斑星鲽精巢中可见5个时相的生殖细胞类型,精巢发育可分为5期。条斑星鲽雄鱼GSI值自10月开始升高,12月达峰值(P≤0.05),之后显著下降并保持较低值至下一次生殖周期开始。HSI值在11～12月保持较高表达值,其他各月份保持相对稳定水平。CF值在5～8月保持较高水平,其他月份保持平稳状态。雄鱼血浆中睾酮(T)水平自9月开始升高并在12月(Ⅴ期精巢)达到峰值,其后显著下降并在其后的月份保持较低水平,而雌二醇(E2)在2月出现峰值,其他月份保持相对稳定水平。     

石鲽仔、幼鱼性腺发育的组织学观察

利用组织学方法对人工培育的石鲽(Kareius bicoloratusBasiewsky)仔、幼鱼性腺发育进行研究。结果表明,性腺的发育与体长密切相关。刚孵化石鲽的原生殖细胞数目为2个,孵化3 d数目增至8个,之后经过迁移,至孵化9 d到达生殖嵴。在全长为7.2～8.5 mm(孵化9～11 d)的仔鱼中,性腺原基中的体细胞迅速增殖并包围原生殖细胞,后者在全长10～15 mm(孵化后10～35 d)的仔幼鱼中增殖成为生殖干细胞。原始性腺在全长15～30 mm(孵化40～60 d)的幼鱼中逐渐发育完善,呈细线状,位于腹腔后部中肾管下方紧贴体壁。雌性性腺最早在全长32.5 mm(孵化66 d)的个体中出现分化特征,至全长89～102 mm时雌性性腺特征完全分化。雄性性腺的分化较雌性性腺晚,最早在全长为91 mm的幼鱼中开始,至全长为114～118 mm时雄性性腺分化特征已经十分明显。     

星突江鲽和石鲽正反杂交种的形态变异分析

对星突江鲽(Platichthys stellatus)、石鲽(Kareius bicoloratus)及其正反杂交种的形态特征进行了测定与分析。结果显示,正交种(星突江鲽♀×石鲽♂)和反交种(石鲽♀×星突江鲽♂)左眼型比例分别为66.9%和57.3%,介于星突江鲽(84.7%)和石鲽(0%)之间;正反杂交种体表未见似石鲽的长骨板样结构,在此大致位置处仅分布有星突江鲽体表相似的鳞片;杂交种的背鳍、臀鳍及尾鳍上均有比星突江鲽偏小、颜色偏淡的条纹,但侧线均与母本相似,正交种在胸鳍末端处弯曲,而反交种近似直线形;两杂交种可数性状的杂种指数平均值分别为20.73和20.76,可量性状的杂种指数平均值分别为27.16和26.47。卡方检验和聚类分析结果表明两杂交种的性状总体上偏向于母本;利用判别分析构建了4种鱼的判别公式,综合判别准确率达到97.50%;主成分分析显示,提取的4个主成分对总变异的累积贡献率为82.562%,主成分1对主成分3的散点图显示两杂交种在形态差异上独立于星突江鲽和石鲽。研究表明:星突江鲽与石鲽的正反杂交种在眼睛位置、鳞片和鳍的形态特征上更倾向于星突江鲽,而侧线、可数、可量性状则更多地遗传了母本的形态特征。本研究旨为星突江鲽、石鲽及其正反杂交种的形态判别和亲缘关系鉴定以及杂交选育提供理论依据。     

石鲽的人工繁殖和育苗Ⅰ：促熟,人工授精及孵化

本文报道了国内首次进行的石鲽鱼人工繁殖试验,于繁殖期捕获的成熟亲鱼可在池中自然产卵,并且其人工授精卵的受精率和孵化率也高于激素促熟亲鱼所产之卵。注射HCG和LRH—A对亲鱼的性腺发育有明显的促熟作用,而促熟效果的优劣主要取决于亲鱼的发育程度。石鲽鱼的精子离体10分钟后完全丧失了使卵子正常受精和孵化的能力,而卵子离体70分钟后仍可以有29.8%和38.2%的受精率和孵化率。     

杀鲑气单胞菌一新亚种的生物学特性及系统发育学分析

从石鲽（Kareius bicoloratus L．）细菌性败血感染症的病鱼（濒死及死亡不久）中分离到相应病原菌，进行形态特征、理化特性等较系统的表观分类学指征鉴定及代表菌株DNA中G＋Ct001％的测定。同时，选择代表菌株进行16S rRNA基因的分子鉴定，测定16S rRNA基因序列、分析相关细菌相应序列的同源性，构建系统发生树。结果表明，分离鉴定的60株菌为杀鲑气单胞菌的一个新亚种（subsp．nov．），定名为杀鲑气单胞菌杀鲽亚种（Aeromonas salmonicida subsp．flounderacia subsp．nov．）。代表菌株HQ010320-1及HQ010320-5的16S rRNA基因序列与GenBank数据库中的杀鲑气单胞菌的同源性在99％和100％。     

Suppression effect of LHRH-A and hCG on Piwi expression in testis of Nile tilapia Oreochromis niloticus

Piwi proteins as constituent factors of the piRNA pathway are required for germline maintenance,meiosisand gonad development.Previous study showed hCG could regulate the Piwi expression in ovary of teleosts.In this study,we revealed effects of LHRH-A and hCG on Piwi expression in testis of tilapia usingReal-time PCR and Western blot.Both in vivo and in vitro study suggest that LHRH-A and hCG significantlydown-regulated Piwil-1 and Piwil-2 in mRNA or protein levels compared with controls.Meanwhile,tissueand cell distribution showed that Piwi proteins were mainly expressed in spermatocytes rather thanmature sperms.These results indicated thatHPG suppressesPiwiswhich mayplayacrucialrolein testisdifferentiation and development.     

LHRH-A和5-HT拮抗剂的协同作用对草鱼鱼种生长激素分泌活动和生长的影响

促性腺激素释放激素(LHRH)能够促进鱼类生长激素(GH)的释放,而5-羟色胺(5-HT)抑制鱼类GH的释放。将促性腺激素释放激素类似物(D-Ala6-Pro9-NEt-LHRH,LHRH-A,5μg/g饵料)和5-HT的特异性拮抗剂盐酸米安色林(Mianserin hydrochloride MIS,0.5 mg/g饵料)拌在饵料中投喂草鱼(Ctenopharyngodon idellus)鱼种6周,可促使血清GH水平显著提高,并使食物转化率升高,生长速率加快,肥满度增加;且两者促生长的协同作用比单独使用LHRH-A或MIS好。对草鱼鱼种体质和主要生化组成的分析表明,LHRH-A和MIS的促生长作用既没有引起鱼体可食部分的蛋白质含量减少,也不会使脂肪、水分含量和内脏质量增加,因而其促进的是草鱼种苗均衡、正常的生长。由此说明在生产应用中,使用高活性的神经内分泌因子,通过拌饵方式投喂对于促进养殖鱼类苗种的生长、缩短养殖周期,是有效而且安全的。     

不同剂量的利血平,多巴胺与LHRH—A促进泥鳅排卵的比较研究

实验结果表明,ＬＨＲＨ－Ａ诱导泥鳅排卵的最佳剂量为０．１μｇ／ｇ体重;利血平４μｇ＋ＬＨＲＨ－Ａ０．１μＧ／Ｇ体重与多巴胺４μｇ＋ＬＨＲＨ－Ａ０．１μｇ／ｇ理为最佳剂量。     

LHRH-A缓释剂促进雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精巢发育与排精的研究

研究了促黄体生成素释放激素类似物(LHRHA)不同处理方式对雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精子生成及精子排放的影响。对照组在0、7d二次注射生理盐水(50μg·kg-1BW),注射组在0、7d二次注射LHRHA(50μg·kg-1BW),埋植组在0d埋植LHRHA缓释剂(100μg·kg-1BW)。结果表明,通过埋植LHRHA缓释剂,血清睾酮(T)和11-酮基睾酮(11-KT)水平快速增加,显示血清睾酮和11-酮基睾酮水平与赤点石斑鱼精子生成和精子排放有密切关系。组织学观察表明,在21d,对照组和注射组鱼精巢充满了精子细胞、精母细胞和精原细胞,而在同一时间,LHRHA埋植组鱼精巢含有大量精子,表明精子排放仍在进行。在40d期间采集精液总量为对照组<注射组<埋植组,差异显著。当注射组在处理14d后精液量逐渐回落到对照组水平时,埋植组仍然维持较高精液量水平。各组采集的精子的活力与采集的精液量呈正相关,而精子密度没有显著差异。数据显示,LHRHA缓释剂能显著增加赤点石斑鱼的精液量及延长精子排放时间而不改变精子的质量。     

Effects of exogenous neurohormone, gonadotropin (GtH) and dopaminergic drugs on the serum GtH content and ovulatory responsiveness of wild catfish, Silurus asotus (Linnaeus, 1758)

Wild female catfish Silurus asotus (Linnaeus, 1758) were injected with domperidone (DOM) alone, [d ‐Ala⁶, Pro⁹ Net]‐luteinizing hormone‐releasing hormone (LHRH‐A) alone once or twice, LHRH‐A plus DOM once or twice simultaneously at 6‐h intervals, LHRH‐A plus carp pituitary extract (CPE) twice simultaneously at 6‐h intervals and LHRH‐A plus human chorionic gonadotropin (HCG) twice simultaneously 6 h apart respectively. The results indicated that injection of LHRH‐A at a dosage of 0.01–0.02 μg g^?1 body weight (BWt) alone induced a low but significant increase in serum gonadotropin (GtH) (P<0.05) and resulted in a very low ovulation rate, while DOM at a dosage of 5 μg g^?1 BWt alone did not induce an increase in the serum GtH levels and ovulation; in contrast, LHRH‐A at a dosage of 0.01 μg g^?1 BWt plus DOM at a dosage of 5 μg g^?1 BWt (termed the Linpe technique) increased the serum GtH (P<0.05) significantly and induced an ovulatory rate of 100%, while LHRH‐A plus CPE or HCG resulted in an increase in the serum GtH (P<0.05) and high ovulatory rate, although the latency period was longer when fish were given LHRH‐A plus HCG or CPE.     

Predator–prey size relationship in siphon cropping between the juvenile stone flounder Platichthys bicoloratus and the bivalve Nuttallia olivacea

ABSTRACT:   The purpose of the present paper was to examine the size relationship between the juvenile stone flounder Platichthys bicoloratus and the bivalve Nuttallia olivacea , the siphon of which is important prey for the juvenile flounder. Juvenile stone flounder feed mainly on tips of the inhalant siphon of the bivalve. The maximum width of siphon tips in the stomach contents of age-0 fish could not reach that of age-1 fish, although the siphons in age-0 fish became larger as they grew. This size discrepancy indicated a limitation in the size of bivalves available to juveniles. The proportion of total cropping frequency for the siphon of the bivalve by juveniles was estimated according to the bivalve size class. Most bivalves that had cropped siphon tips ranged from 5 to 30 mm in shell length. The total cropping frequency per bivalve was particularly intense on bivalves of 10–25 mm shell length in spite of their small proportion of 24.9% of the total. This frequency intensity indicated that the size of bivalves with cropped siphons by juvenile stone flounder might depend on the ability of juveniles rather than the size composition of the bivalves.