亚牛磺酸对猪胚胎体外培养效果的影响

为了探讨亚牛磺酸的浓度对猪胚胎体外培养效果的影响,试验以孤雌激活胚胎为研究对象,将NCSU-23中的亚牛磺酸浓度从原来的5 mmol/L降低到2.5,1.0,0.5 mmol/L,检测猪卵母细胞激活后的分裂率和囊胚发育率.结果表明:各种浓度亚牛磺酸处理后的分裂率和囊胚发育率(30.7%、27.6%、22.8%、26.5%)差异不显著(P>0.05);但不使用亚牛磺酸则导致囊胚发育率极显著下降(30.7%vs1.4%,P<0.01).结果说明亚牛磺酸是猪胚胎培养液必不可少的重要成分,但其浓度可下调至0.5mmol/L.     

猪孤雌胚胎体外培养影响因素

对NCSU-23和PZM-3等2种培养基体外培养猪孤雌激活(PA)胚胎的效果进行了比较,结果显示,PZM-3组与NCSU-23组PA胚胎囊胚孵化率差异显著(32.6%vs 18.9%,P<0.05);NCSU-23中添加2%必需氨基酸(EAA)显著降低猪PA胚胎的囊胚发育率(20.1%vs 25.1%,P<0.05);添加1%非必需氨基酸(NEAA)显著提高猪PA胚胎的囊胚率(24.7%vs 19.7%,P<0.05),但是联合添加NEAA和EAA对猪PA胚胎体外发育无显著影响(P>0.05).     

山羊孤雌胚胎的体外培养

系统地研究了培养液微滴的大小、培养液体系及血清浓度对山羊孤雌胚胎早期体外发育的影响。结果表明，培养液微滴以较大体积(200～500μL)的培养效果较好；在3种培养液中，添加10％的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好，囊胚率分别可达62．79％(81／129)、53．52％(38／71)、13．64％(12／88)；mCRlaa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于SOFaa组和CRlaa组，SOFaa组优于CRlaa组，尽管SOFaa组和CRlaa组间无显著差异。在本试验条件下，以SOFaa培养液，山羊孤雌胚胎体外培养72h时加入10％的NGs，500μL微滴培养，其发育效果较好，囊胚率可达62．79％。     

猪早期胚胎体外培养和保存研究进展

早期胚胎的体外培养和保存不仅是研究胚胎生物学的基础,而且也是胚胎移殖推广和应用的先决条件。目前,家兔、牛、绵羊和山羊胚胎的体外培养与冷冻保存技术已基本成功,但猪这方面的研究却不足。本文就猪早期胚胎的体外培养     

猪胚胎的体外培养

猪胚胎4—细胞期之前培养的难度较大。这期间的体外发育障碍可以采用一些方法加以克服,而使其从1—细胞期发育至囊胚期。试验证实,小鼠输卵管可用以培养猪胚胎;猪胚胎和输卵管细胞一起培养或者培养液里补充猪输卵管液可以提高培养成功率。简化改进培养液后观察到:谷氨酰胺(glutamine)可以作为猪胚胎从结合子发育至囊胚过程中的能重来源;葡萄糖对猪胚胎体外发育没有抑制作用;培养液里补充牛磺酸(taurine)和亚牛磺酸(hypotaurine)可提高猪胚胎的发育程度。迄今已极道的猪胚胎培养液有多种,但是对猪胚胎体外发育障碍的原因还未见报道,现有的培养方法还有待改进。     

猪囊胚体外持续发育培养体系主要影响因素的研究

本研究旨在探索猪囊胚体外持续发育的关键影响因素,为构建支持猪胚胎体外发育至三胚层分化阶段的培养体系奠定基础。采用孤雌激活后6 d的猪囊胚进行体外持续培养,通过检测分析发育至8 d的猪孤雌囊胚的形态学特征和基因表达情况,系统评价PZM-3、Advanced DMEM/F12和KnockOutTMDMEM/F12基础培养体系,以及胎牛血清（Fetal Bovine Serum,FBS）、血清替代物（Knockout Serum Replacement,KSR）、L-谷氨酰胺（L-Glutamine）和胰岛素-转铁蛋白-硒-氨基乙醇（Insulin-Transferrin-Selenium-X,ITS-X）等成份对猪囊胚体外持续发育的作用,建立猪囊胚体外持续发育培养体系;通过TUNEL和免疫荧光方法检测该体系对猪囊胚的影响。结果表明：AKGI(Advanced DMEM/F12组合添加5%KSR、4 mmol/L L-Glutamine和1×ITS-X)为猪囊胚体外持续发育最适培养体系,可增加囊胚直径和囊胚细胞数（P<0.05）,降低凋亡细胞比例（P<0.01）,增加内细胞团（I...     

培养液及血清浓度对山羊孤雌胚胎体外培养的影响

试验比较了在SOFaa，CRlaa，mCRlaa3种培养液中添加不同浓度的成年山羊血清(NGS)对山羊孤雌胚胎进行体外培养的效果。结果表明：在3种培养液中，添加10％的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好，囊胚率分别可达62．79％(81／129)、53．52%(38／71)、13．64％(12／88)；mCRlaa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于SOFaa组和CRlaa组，SOFaa组优于CRlaa组．但SOFaa组和CRlaa组间无显著差异。在现有试验条件下，以在SOFaa培养液中．山羊孤雌胚胎的体外培养的第72小时时加入10％的NGS的发育效果较好，囊胚率可达62．79％。     

猪体外受精胚胎培养条件优化的研究

试验将卵母细胞经过体外成熟、体外受精后在不同条件的PZM-3液中培养,检测卵裂率、囊胚的发育率和质量,目的是进一步优化培养条件用于体外生产猪胚胎.     

氨基酸对胚胎体外发育的影响

1 前言 氨基酸是胚胎培养液的重要成分,在培养液中添加氨基酸可促进胚胎发育[1],提高囊胚率、孵化率和胚胎质量,使胚胎的细胞数增加[2].但不同氨基酸对胚胎发育的作用不同,不同添加方式其效果也不一样.Bavister和他的同事对小鼠的研究工作,第一次揭示了氨基酸在体外胚胎培养中的作用.     

猪体外胚胎生产关键技术的发展现状

猪体外胚胎生产的各个技术环节发展较为成熟,但多偏向于研究,少有推广应用。随着我国家畜资源保护与利用的开展,猪体外胚胎保种势在必行。为向相关工作者提供一个完整高效的生产应用体系,综合分析了包括体外成熟、体外受精和体外培养等方面的技术要点,并总结有关猪体外胚胎生产各关键技术环节的发展与应用现状,以期为进一步保障我国猪产业经济的发展,提供理论参考。     

动物胚胎体外培养研究进展

近年来动物胚胎体外培养取得了新进展.致密化前期胚胎利用葡萄糖作为能量底物的能力有限,但致密化后胚胎培养中葡萄糖的添加是必须的.自由氨基酸在早期胚胎的发育中是必需的,非必须氨基酸在致密化前发挥作用,致密化后期胚胎则需要所有氨基酸.血清对早期胚胎的发育有多重影响,BSA等一些生物大分子物质的配合添加可以取代血清的胚胎营养作用,并消除血清的负作用.在无血清培养液中,一些生长因子和细胞因子的加入是必须的.GSH等抗氧化物质添加进培养液可以对抗反应氧的作用,对胚胎发育起到保护作用.     

不同体外培养条件对家兔早期囊胚贴壁行为的影响

采集家兔自然交配后96h的早期囊胚，以低糖DMEM＋150mL／L胎牛血清＋0．1mmol／L非必需氨基酸＋100IU／mL青霉素＋100IU／mL链霉素为基础培养基，比较了不同胚胎处理方法、不同饲养层以及培养液中添加不同成分对兔早期囊胚贴壁和增殖的影响，以完善兔胚胎干细胞的建系方法。结果表明，以胚胎分割法和链霉蛋白酶-E（proteinaseE）处理掉黏蛋白及部分透明带的胚胎容易贴壁和增殖；在小鼠成纤维细胞饲养层和兔胎儿成纤维细胞饲养层上，胚胎的脱带率差别不大，但在小鼠成纤维细胞饲养层上贴壁率明显提高，且贴壁后内细胞团增殖较快；添加胰岛素、白血病抑制因子和伊巯基乙醇均利于抑制ES的分化和促进内细胞团的增殖。     

鹅胚胎体外培养的研究

以蛋重为 (12 4 .90± 0 .91) g(A组 )、(130 .30± 0 .99)g(B组 )、(134.5 6± 1.0 1) g(C组 )的豁鹅蛋壳作为代用蛋壳 ,将第 1次换壳后的鹅胚转移至其中进行孵化 ,记录孵化第 3～ 4 .5天和第 6 ,15 ,31天的活胚数 ,同时分析代用蛋壳大小对孵化效果的影响。结果表明 :在整个孵化过程中 ,C组代用蛋壳优于B组和A组 ,尤其在孵化中期 (第 6～ 15天 ) ,A组与C组对照差异显著 (P <0 .0 5 )。结果表明 ,在鹅胚体外操作中 ,第 2次换壳所用的代用蛋壳的大小以大于或等于(134.5 6± 1.0 1) g为宜。     

猪孤雌激活胚胎的体外培养

试验研究了不同培养体系对猪体外成熟卵母细胞电激活后的体外发育的影响。试验1比较了猪孤雌发育胚胎在NCSU 23、G 2.2添加氨基酸(G 2.2-aa)和G 2.2培养体系中的体外发育效率,结果表明,3个组卵裂率差异不显著(P>0.05),NCSU 23体系的囊胚率显著高于其他2组(14.37±3.77 vs.2.67±2.68和3.13±0.45,P<0.01),但3组间囊胚细胞数差异不显著(21.29±5.27 vs.19.33±2.54和20.27±4.72,P>0.05)。试验2探讨了胚胎培养72h后更换培养液对孤雌发育胚胎的影响,结果显示,培养液更换对卵裂率和囊胚细胞数的影响差异不显著(P>0.05),但更换组囊胚率显著下降(12.50±1.49 vs.5.56±1.89、6.25±1.13、4.64±1.56,P<0.05)。试验3研究了在G 2.2-aa添加胰岛素、亚牛磺酸和半胱氨酸对孤雌激活胚胎发育的影响,结果显示,以上添加剂对卵裂率和囊胚细胞数无显著影响(P>0.05);在G 2.2-aa添加胰岛素、亚牛磺酸和半胱氨酸能明显提高囊胚发育率(6.38±1.00、6.20±2.08、8.73±1.03 vs.2.99±2.21,P<0.05),但以上各组的囊胚率明显低于NCSU 23体系(P<0.05)。结论:NCSU 23是猪孤雌激活发育胚胎较为理想的培养液。     

猪卵母细胞体外成熟体系研究简述

随着胚胎生物技术的日臻完善并逐步应用于家畜的育种和繁殖领域,人们对动物胚胎工程的认识逐渐加深,一系列更深层次的胚胎生物技术越来越受到人们的重视。20世纪80年代以来,人们在家畜卵母细胞体外培养、体外受精、     

动物胚胎体外培养研究进展

近年来动物胚胎体培养取得了新进展，致密化前期胚胎利用葡萄糖作为能量底物的能力有限，但致密化后胚胎培养中葡萄糖的添加是必须的，由于氨基酸在早期胚胎的发育中是必需的，非必须氨基酸在致密化前发挥作用，致密化后期胚胎则需要所有氨基酸，血清对早期胚胎的发育有多重影响，BSA等一些生物大分子物质的配合添加可以取代血清的胚胎营养作用，并消除血清的负作用，在无血清培养液中，一些生长因子和细胞因子的加入是必须的，GSH等抗氧化物质添加进培养液可以对抗反应氧的作用，对胚胎发育起到保护作用。     

山羊早期胚胎体外培养试验

山羊早期胚胎体外培养试验邓世全（四川畜牧兽医学院荣昌６３２４６０）前言＊胚胎移植不但可提高优良母畜的繁殖潜力，扩大＊良种畜群，也是研究受精、胚胎发育和遗传工程的有力＊手段，还是体外受精、胚胎分割，核移植、嵌合体和基因＊导入技术的必要组成部分。我们在兔...     

Iloprost对猪早期胚胎体外发育的影响

本研究旨在探讨PGI2类似物iloprost对猪胚胎体外发育的影响。试验以IVF胚胎为研究对象,分别在不同时期(0、24、48、72h)将不同浓度(0、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μmol.L-1)iloprost加入到猪胚胎培养液中,于156h时记录囊胚发育率和囊胚细胞数,筛选获得最佳添加方案,检测胚胎脂肪代谢速度和代谢相关基因(cox2、creb、pparδ、pdk、cpt2)的表达水平,分析iloprost影响胚胎发育的机制。结果显示,最佳的添加方案为,在受精后48h加入2.0μmol.L-1 iloprost,胚胎囊胚发育率(28%)和囊胚细胞数(49.42)显著高于(P<0.05)对照组的囊胚发育率(16%)和囊胚细胞数(28.22);添加iloprost后,胚胎脂肪酸降解速度也显著加快(P<0.05),脂肪酸代谢相关基因cox2、creb、pparδ、cpt2的表达量上升,糖代谢相关基因pdk表达量无显著变化。结果表明,PGI2类似物iloprost可以促进胚胎降解脂肪酸,为胚胎发育提供能量,提高了胚胎体外发育能力。