松毛虫核型多角体病毒的粗提及染色方法的探讨

<正> 松毛虫核型多角体病毒的粗提,根据国内有关资料报道,一般采用离心沉淀方法;多角体的染色过去多采用什维佐娃和有贺久雄法。本试验对多角体病毒粗提物,设计4种提取方法,进行多次比较;同时对多角体病毒的染色方法进行摸索,着重探讨了溴酚兰染液对核型多角体病毒染色的可靠性,现将结果报告如下: 一、提取方法的比较从表1看出,镜检情况及显微摄影都可以     

松毛虫核型多角体病毒的粗提取和染色方法

松毛虫核型多角体病毒粗提取,根据国内有关资料报导,一般采用湖北省微生物所昆虫病毒组的方法;多角体的染色过去多分别采用什维佐娃和有贺久雄法。我们把近几年林间所采集的病毒标本,经过一年来的室内工作,对多角体病毒粗提取、设计几种处理方法,多次进行比较试验;同时对多角体病毒的染色方法,着重探讨了溴酚兰染色方法对核型多角体病毒染色的可靠性,现将结果报告如下:     

一种效果好的昆虫核多角体病毒染色方法

随着害虫的微生物防治工作的广泛开展,人们对昆虫病毒病的研究也逐步深入。昆虫病毒病中常见的有核型多角体病毒(NPV)、质型多角体病毒(CPV)和颗粒体病毒(GV),它们都具有一层蛋白质外壳包围,统称包含体病毒。三种包含体病毒中,又以核型多角体病毒最常见。截至目前为止,在我国发现的170余种昆虫病毒中,有100余种是属核型多角体病毒。昆虫核型多角体病的染色方法有数十种。笔者在教学和科研活动中选用过许多种,但效果都不够理想后来在前人工作的基层上进行了改进,得到了一种过程简单,效果较好的苦味酸—氨基黑染色法。现将此法介绍如下: 1.染色液的配制配制饱和苦味酸液:取温热的蒸馏水10毫升,慢慢加入苦味酸粉末至不能再溶解时为上即成。配制氨基黑10B液:称取氨基黑10B染料3克,溶于98％的甲醇50毫升、冰醋酸1毫升和蒸馏水40毫升的混合液中即成。     

马尾松毛虫质型多角体病毒对人体及哺乳动物细胞的安全性研究

本文从细胞水平及亚细胞水平观察研究了马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolim-us punctatus cytoplasmic polyhedrosisviruses,缩写为 DPCPV,下同)对人体及两种哺乳动物细胞的影响。结果表明:马尾松毛虫质型多角体病毒对人体及哺乳动物细胞不发生影响。为安全应用马尾松毛虫质型多角体病毒防治马尾松毛虫提供了科学依据。     

云南澄江蛾类病毒资源及其应用

1980年以来云南澄江从松毛虫等自然感病虫尸中分离出多种核型多角体病毒（NPV），质型多角体病毒（CPV）和颗粒型多角体病毒（GV）。于1980-2001年先后应用NPV、CPV防治云南松毛虫、思茅松毛虫、文山松毛虫、灰褐带蛾、毒蛾、蚕蛾；面积达7732.2hm^2，当年防效平均约为97%，1次防治，防治效果可持续10年以上。     

应用马尾松毛虫质型多角体病毒防治松毛虫的研究

马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus Walker)是我国南方松林的主要害虫。其发生世代多,面积大,为害严重,造成损失大。在70年代初,我们获得了马尾松毛虫质型多角体病毒(D. CPV)。多角体呈六边形的廿面体,大小为0. 5—6微米。病毒粒子廿面体,直径为42—56毫微米,在每个角上有一刺状物突起。经多年的研究,证实D. CPV致病力强,3～4龄幼虫半致死浓度(Lc50)为2.5×10~6PIB/毫升;已在林间试验四万余亩,杀虫率达70％以上,持效作用达5—6年。D. CPV可用松毛虫幼虫大量生产,成本低。对脊椎动物安全。应用D. CPV防治马尾松毛虫是一种有效而可行的生物防治方法。     

质型多角体病毒对松毛虫的防治实验

通过质型多角体病毒 (CytoplasmicPolyheddrosisVirus ,简称CPV)感染赤松毛虫的室内试验和林地试验 ,分析研究CPV对松毛虫幼虫、蛹、成虫、卵、子代幼虫的数量不同程度的影响 ,得出了松毛虫质型多角体防治林地松毛虫的可行性和良好的效果 ,为林区有效防治松毛虫提供参考     

文山松毛虫肠道微生物区系及其致病后的变异

试验表明:应用松毛虫质形多角体病毒感染文山松毛虫,可使松毛虫体内正常的微生物区系组成遭致破坏,从而影响松毛虫正常的代谢机能,提高了CPV的致病效果。     

微生物农药烟雾载药技术初报

对白僵菌、苏云金杆菌和松毛虫质型多角体病毒3种林用杀虫微生物油烟剂的配制技术、助悬剂筛选进行了研究,对初步配制成的3种油烟剂成烟性能、成烟后孢子活力进行了观察和测定。以松毛虫和松茸毒蛾为试虫进行了林间套笼毒力测定和林间小区毒力试验。结果表明:3种油烟剂对松毛虫和松茸毒蛾有较好的致死和感染效果,松毛虫质型多角体病毒油烟剂和常量喷雾水剂所至松茸毒蛾4龄幼虫死亡规律基本一致。     

飞机喷洒多角体病毒防治赤松毛虫试验

利用昆虫病毒防治害虫,由于少公害、不伤害虫天敌、具有持续防效、较易人工复制等优点而日益引起人们的重视.国外已有不少应用成功的实例.日本自1956年开始进行赤松毛虫质型多角体病毒研究,现已商品化生产(商品名“松毛敏”),大面积用于防治赤松毛虫.用直升飞机喷洒多角体1000亿/公顷,可有效控制虫灾.我们自1977年从山东省沂南县引进赤松毛虫质型多角体病毒后, 通过室内外多次人工感染试验,证明对马尾松毛虫、赤松毛虫都有较强的感染力.林间人工喷洒多角体500—1000亿/亩,有较好的防治效果.为了摸索飞机喷洒多角体病毒的适宜浓度、用量和有关应用技术,在江苏省农林厅、江苏省民航局的重视和支持下,1982年春进     

用马尾松毛虫多角体病毒防治松毛虫

马尾松毛虫是南方松林的主要害虫之一。它不仅严重地危害松林,而且还危及人畜健康。为寻找新的有效的生物防治措施,我所从1973年开始,与中山大学生物系协作,对马尾松毛虫多角体病毒进行了研究,经过几年的努力,肯定了马尾松多角体病毒类型,进行了林地和室内杀虫试验,证明了用多角体病毒防治     

油松毛虫质型多角体病毒初报

油松毛虫(Dendrolimus tabulaeformusTsai etliu)在北方分布较广,是松林的主要害虫之一。我所在学习外省经验研究利用昆虫病毒防治松毛虫的过程中,最近在本地区发现了油松毛虫多角体。经中国科学院北京动物研究所鉴定,初步认为是油松毛虫质型多角体病毒。通过用于室内和林地防治试验,证明对油松毛虫有较高的杀虫效果,是一种很有前途的微生物杀虫剂。一、病原体的发现1977年8月,我们用从建平县富山公社鱼山子林地捉的2龄左右的油松毛虫幼虫,分放在用松毛虫死虫水、棉铃虫病毒和洗衣粉水等14种不同材料处理的松枝上,在室内进行观察。8～20天后,各种处理的试虫几乎全部死亡。根据显微镜检查,在每种处理的死虫中都发现了多角体,其中最多的占89%,最少的也有33%。分析结果,与试验处理无关。随后,     

应用松毛虫CPV病毒药剂防治松毛虫效果好

这是一项在国内具有领先水平的技术,请读者注意阅读应用松毛虫质型多角病毒(简称松毛虫CPV)防治松毛虫技术,是通过人工手段在松毛虫内繁殖松毛虫质型多角体病毒,俟病毒在体内富积时提取制剂,而后在受害林地内喷洒,使松毛虫普遍感染发病致死的一项实用技术。云南林科院在省经委、省科委、省林业厅的支持下开展了此项技术的试验和推广应用,1985年省科委对研究成果作了鉴定,同年获科技进步三等奖,1988年5月省经委和省林业厅对推广应用成果作了验收。我省采用现场围栏集虫,以天然饲料松叶养虫生产病毒的方法,技术可靠,方法简便。据统计资料仅1988年就集虫528160头,回收病虫448096头,粗提病毒液550公斤,含质型多角体1555482亿。松毛虫CPV防治松毛虫在试验和推广应用期间,效果显著:     

文摘

马尾松毛虫质多角体病毒生产方法的研究(广东省林科所森保室,广东林业科技通讯,1983,1:7—10) 近年来进行了室内和林地搭栅养虫、林间放卵块和放养幼虫以生产病毒的研究,表明在林间立木放养的幼虫上生产病毒的方法简便易行,成本低,产量高。因春季多雨,     

松毛虫质型多角体病毒的增殖与提取方法

<正> 近年来,应用松毛虫质型多角体病毒防治松毛虫已成为综合防治的重要手段之一,但要在生产中大面积应用,尚需解决病毒的增殖与提取方法问题。1986—1987年,我们在进行松毛虫质型多角体增殖与提取试验中,总结出塑料薄膜罩围式增殖CPV 和直接从病死虫尸中提取CPV 的新方法。一、试验材料与方法1.病毒:松毛中CPV 毒源系中山大学昆虫所和本所病毒与生防组提供。     

赤松毛虫质型多角体病毒复制和提取技术的研究

<正> 由于病毒只能在寄主活细胞内增殖,因而解决大量复制的技术问题,是“以病毒治虫”的首要环节。我们自1979年起开始研究赤松毛虫质型多角体病毒复制的有关技术,现将初步结果报道于下。一、病毒复制 1.在有松毛虫发生的松林,采集距结茧1-2个龄期的老幼虫,室内饲养在33×33×54厘米铁纱笼内,每笼300-500头,也可饲养于塑料薄膜围成的高50厘米的空间,大小视幼虫数量而定。一平方米可养虫2,000头,四周培砂压紧,上部敞开。在饲料松枝上用0.5亿/毫升多角体悬液均匀喷湿,松枝插入砂缽保     

赤松毛虫质型多角体病毒粉剂试制及其在林间防治马尾松毛虫试验

<正> 赤松毛虫质型多角体病毒,自1977年从山东引进后,经多次试验,按多角体用量500-1,000亿/亩,地面喷雾防治马尾松毛虫、赤松毛虫都有较好的效果,但林区缺乏水源,大面积地面喷雾十分困难。1982年我们进行了少量的粉剂试制并作了林间杀虫试验。一、粉剂试制 1.先将采集并饲养的松毛虫幼虫,经人工感染后收集病死虫,用组织捣碎机将虫体捣烂,加无菌水稀释过滤、沉淀、分离,得多角     

松毛虫质型多角体病毒油剂超低容量林间作业技术

文章以3WF-3S背负式喷雾喷粉机为施药器械，用松毛虫质型多角体病毒油剂进行超低容量喷雾，对流量、雾滴大小及密度和有效喷幅进行了测定，初步介绍了松毛虫质型多角体病毒油剂林间超低容量喷洒技术。     

松毛虫质型多角体病毒RT—PCR检测技术的建立

为研究DsCPV在松毛虫种群中的垂直传递及对松毛灾害的持续控制作用,转录聚合酶链式反应（RT－PCR）建立了DsCPV的早期检测技术。依据家蚕质多角体病毒（BmCPV）质型多角体蛋白的核苷酸序列设计一对引物，从纯化的DsCPV、BmCPV和舞毒蛾质型多角体病毒（LdCPV)的基本组dsRNA可成功地扩增出长614bp的目的片段，从提取的健康松毛虫幼虫肠组织的DNA、舞毒蛾核型多角体病毒（LdNPV)基因组核酸、以及棉铃虫质型多角体病毒（HaCPV)基因组核酸，未能扩增出目的片段。DsCPV基因组dsRNA的增片段的序列与BmCPV相应基因序列具有87％的同源性，检测敏感度为1pg的DsCPV基因组dsRNA。由于松毛虫与家蚕、舞毒蛾相互之间食性不同，而且BmCPV和LdCPV对松毛虫无感染性，即在松毛虫体内不会有BmCPV病毒和LdCPV病毒的感染，因此该结果一方面从分子水平上证实了DsCPV与BmCPV、LdCPV存在基因同源性，同时也表明了依据BmCPV的基因序列设计引物对DsCPV基因组核酸建立的RT－PCR扩增体系，可以作为松毛虫种群中DsCPV的一种敏感、特异、早期、快速的检测手段。     

CPV-Bt对湖南马尾松毛虫的药效试验

以湖南马尾松毛虫发生地采集的马尾松毛虫为试验材料，选用CPV、Bt 2种微生物复配后对其进行室内药效试验，结果表明：Bt对越冬代松毛虫前12d死亡率的影响显著，死亡率与Bt浓度呈正比，Bt浓度为6&#215;10^7个芽孢／mL时，死亡率可达70．36％；Bt使用浓度为5&#215;10^6芽孢／mL时，第一代松毛虫（群体饲养）处理6d平均死亡率可达70．41％，Bt使用浓度为1&#215;10^7芽孢／mL时，平均死亡率可达75．09％；CPV对越冬代松毛虫处理12d后残留种群带毒率影响显著，带毒率与CPV浓度呈正比，当CPV浓度为2&#215;10^5个多角体／mL时，其带毒率可达53．68％；复配药荆按其对第一代松毛虫（单虫饲养）的药效（前6d死亡率）可分为5类，其平均药效（死亡率）最高达100％，最低的仅为43．12％；CPV-Bt复配药刺防治马尾松毛虫的越冬代和第一代，若只需达到70％杀虫率和50％残留种群带毒率水平，越冬代宜选用2&#215;10^5个多角体／mL＋6&#215;10^7个芽孢／mL，第一代宜选用5&#215;10^4个多角体／mL＋1&#215;10^7个芽孢／mL。